CIK細(xì)胞聯(lián)用樹突狀細(xì)胞治療惡性腫瘤的進(jìn)展

祁秋干 紀(jì) 娜 王遠(yuǎn)東

?綜述?

CIK細(xì)胞聯(lián)用樹突狀細(xì)胞治療惡性腫瘤的進(jìn)展

祁秋干 紀(jì) 娜 王遠(yuǎn)東

放化療是繼手術(shù)之后臨床治療惡性腫瘤的常用方法, 而近年來對于腫瘤輔助治療的細(xì)胞介導(dǎo)過繼性免疫療法是目前臨床研究熱點。采用免疫療法能夠有效改善患者免疫功能, 并對消除殘余病灶、骨髓凈化具有顯著療效。近年來通過對淋巴因子的深入研究證實細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞(CIK)是一種新型具有廣譜殺瘤特性的非主要組織相容性復(fù)合體(MHC)限制性免疫效應(yīng)細(xì)胞, 其應(yīng)用效果在腫瘤的免疫治療中具有重要的應(yīng)用價值, 而樹突狀細(xì)胞(DC)作為機(jī)體內(nèi)主要的抗原呈遞細(xì)胞, 可參與并誘導(dǎo)抗原特異性細(xì)胞毒(CTL)反應(yīng), 并可通過對胰島B細(xì)胞的作用參與體液免疫應(yīng)答。近年來對于CIK細(xì)胞聯(lián)用DC細(xì)胞治療惡性腫瘤的臨床療效被臨床所認(rèn)可, 能夠有效解除惡性腫瘤患者T細(xì)胞無能現(xiàn)象,具有較好的輔助協(xié)同抗腫瘤作用。

細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞；樹突狀細(xì)胞；惡性腫瘤；研究進(jìn)展

隨著近年來生物醫(yī)學(xué)技術(shù)的不斷研究與發(fā)展, 惡性腫瘤的治療模式呈現(xiàn)出多樣化的趨勢, 過繼免疫療法目前是腫瘤輔助治療的研究熱點, 并且過繼免疫療法部分研究成果已經(jīng)進(jìn)入臨床推廣階段并取得了較為理想的治療效果［1］。人機(jī)體內(nèi)的免疫系統(tǒng)中主要由T細(xì)胞、NK細(xì)胞、NKT細(xì)胞等免疫細(xì)胞組成, 其中CIK細(xì)胞是人體外周血或臍帶血中單個核細(xì)胞在體外用多種細(xì)胞因子誘導(dǎo)而獲得的異質(zhì)細(xì)胞, 目前對于CIK的研究主要是利用其廣譜殺瘤特性進(jìn)行腫瘤輔助治療,采用具有高效殺傷活性的CIK細(xì)胞聯(lián)合具有強(qiáng)效抗腫瘤能力的DC細(xì)胞治療惡性腫瘤, 已取得一定的臨床療效［2］。本文結(jié)合近年來對CIK聯(lián)合DC的抗腫瘤治療進(jìn)展展開綜述如下。

1 CIK的生物免疫活性特點

1.1 人體CIK細(xì)胞的來源及表型 CIK細(xì)胞是人體外周血或臍帶血中單個核細(xì)胞在體外用多種細(xì)胞因子誘導(dǎo)而獲得的一種異質(zhì)細(xì)胞, 主要有白細(xì)胞介素(IL-2)、干擾素(IFN-γ)等細(xì)胞因子誘導(dǎo)產(chǎn)生［3］。體內(nèi)CIK主要分布于肝臟內(nèi)與外周血中, 對于CIK的細(xì)胞表面標(biāo)志物研究發(fā)現(xiàn)CIK細(xì)胞是一種CD3與CD56雙陽性細(xì)胞群, 主要來源于CD3+與CD56-的T淋巴細(xì)胞, 并且CIK細(xì)胞作用可誘導(dǎo)分化形成CD8T細(xì)胞,其基因表達(dá)的最終結(jié)果為多克隆T細(xì)胞受體, 并且以CD56、NKG2D及大顆粒淋巴細(xì)胞為主要形態(tài)學(xué)特征的改變［4］。1.2 CIK細(xì)胞的抗腫瘤作用機(jī)制 通過CIK細(xì)胞來源及表型分析可知CIK是一種以CD3與CD56雙陽性T細(xì)胞為主的特異質(zhì)細(xì)胞群, 同時臨床實驗證實CIK細(xì)胞是一種具有較高殺瘤活性及增殖速度的免疫活性細(xì)胞, 并且與LAK細(xì)胞、CD3AKCIK細(xì)胞比較具有更高的殺瘤活性, 同時腫瘤細(xì)胞的多重耐藥性對CIK細(xì)胞的抗凋亡及殺瘤效應(yīng)無影響；目前臨床廣泛認(rèn)可LFA-1的識別結(jié)構(gòu)與CD3受體結(jié)合后可激活CIK 細(xì)胞, 導(dǎo)致胞漿毒性顆粒釋放而殺傷腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生殺瘤效應(yīng)； 另外CIK細(xì)胞表面可分泌內(nèi)源性IL-2產(chǎn)生大量炎性細(xì)胞因子、活化腫瘤細(xì)胞凋亡因子, 有效維持體內(nèi)殺瘤細(xì)胞毒性, 但同樣CIK細(xì)胞的殺瘤活性對正常骨髓造血功能的毒性影響較小, 能夠保護(hù)多數(shù)CFUGM集落不受破壞, 顯著彌補(bǔ)了放化療對患者骨髓抑制的不良反應(yīng)［5,6］。并且臨床治療用CIK細(xì)胞主要來源以患者的自體培養(yǎng), 避免了免疫療法產(chǎn)生異體細(xì)胞免疫排斥, 提高臨床治療的安全性。并且由于CIK細(xì)胞兼具NK細(xì)胞的肺MHC限制性殺瘤抑瘤特點, 導(dǎo)致CIK細(xì)胞具有廣譜殺瘤效應(yīng)在腫瘤生物免疫治療中具有廣泛的應(yīng)用前景, 通過深入研究可逐步替代LAK、TIL等免疫效應(yīng)細(xì)胞。有學(xué)者采用CIK細(xì)胞過繼免疫療法治療不同分期的腫瘤患者療效顯示CIK細(xì)胞對不同分期的惡性腫瘤據(jù)具有高效的殺瘤效應(yīng), 表明其較傳統(tǒng)LAK免疫療法具有更好的殺瘤優(yōu)勢［7］。

2 DC的生物免疫活性特點

DC細(xì)胞主要是由CD34+或CD14+細(xì)胞誘導(dǎo)分化的免疫活性細(xì)胞, 其前體細(xì)胞經(jīng)骨髓進(jìn)入外周血后播散至全身各處, DC細(xì)胞主要存在于臍血中［8,9］, 其分布特點與CIK細(xì)胞分布特點不同。傳統(tǒng)DC細(xì)胞的主要來源是利用體外培養(yǎng)CD+34細(xì)胞獲取, 但體外培養(yǎng)CD34+細(xì)胞培養(yǎng)效率一般較低而不能夠滿足臨床需求, 最新研究顯示采用多重肝細(xì)胞聯(lián)合細(xì)胞因子進(jìn)行體外擴(kuò)增培養(yǎng)具有較高的培養(yǎng)效率, 可快速獲取大量的DC細(xì)胞, 是目前臨床常用的DC細(xì)胞采集手段［10］。DC細(xì)胞的典型特征為樹突狀形態(tài), 并且DC細(xì)胞膜表面高表達(dá)MHC-2類分子及共刺激分子等, 而經(jīng)誘導(dǎo)活化的共刺激分子能夠誘導(dǎo)雛形T淋巴細(xì)胞的增殖與活化, 能夠誘導(dǎo)產(chǎn)生并參與機(jī)體特異性CTL免疫應(yīng)答反應(yīng)［11,12］。而DC 作為體內(nèi)功能強(qiáng)大的專職抗原遞呈細(xì)胞, 在細(xì)胞毒性細(xì)胞的活化過程中發(fā)揮著重要的作用。因此, 將CIK 細(xì)胞和DC 聯(lián)合應(yīng)用治療惡性腫瘤, 有助于解除腫瘤患者T 細(xì)胞的免疫無能, 起到抗腫瘤的作用。

3 CIK聯(lián)合DC的抗腫瘤特性

臨床研究發(fā)現(xiàn)共同培養(yǎng)DC細(xì)胞與CIK細(xì)胞可顯著刺激DC細(xì)胞與CIK細(xì)胞的分化成熟［13］。CIK細(xì)胞是細(xì)胞因子誘導(dǎo)的非特異性殺傷細(xì)胞, 其細(xì)胞表面分子表形能夠分泌多種細(xì)胞因子, 造成了CIK細(xì)胞具有更高的非特異性殺傷能力［14］。而DC 作為體內(nèi)功能強(qiáng)大的專職抗原遞呈細(xì)胞, 在細(xì)胞毒性細(xì)胞的活化過程中發(fā)揮著重要的作用。因此, 將CIK細(xì)胞和DC 聯(lián)合應(yīng)用于治療惡性腫瘤, 有助于解除腫瘤患者T細(xì)胞的免疫無能, 起到抗腫瘤的作用。在臨床實驗中已經(jīng)證實在進(jìn)行腫瘤的過繼免疫療法時, 單純采用CIK免疫效應(yīng)細(xì)胞時臨床療效并非如理論分析那樣理想, 通過回顧分析其可能與患者體內(nèi)腫瘤細(xì)胞對非特異性殺傷細(xì)胞等免疫效應(yīng)細(xì)胞產(chǎn)生抵抗作用導(dǎo)致殺瘤活性不明顯, 并且多數(shù)學(xué)者認(rèn)為造成這一現(xiàn)象可能與惡性腫瘤患者體內(nèi)功能性DC細(xì)胞匱乏密切相關(guān), 由于DC細(xì)胞是人體內(nèi)主要的功能性抗原呈遞細(xì)胞,對于細(xì)胞毒性T細(xì)胞活化具有重要的抗原呈遞作用, 而由于惡性腫瘤患者體內(nèi)DC細(xì)胞的缺乏導(dǎo)致殺傷細(xì)胞的呈遞作用減弱, 進(jìn)而造成CIK的殺傷活性較低的效果［15,16］。因此采用CIK細(xì)胞聯(lián)合DC細(xì)胞免疫過繼療法治療惡性腫瘤能夠有效緩解患者T細(xì)胞免疫功能低下的特點, 進(jìn)而達(dá)到抗腫瘤的協(xié)同效應(yīng)。

郭偉偉等［17］對CIK與DC過繼免疫治療研究顯示, DC聯(lián)合CIK細(xì)胞培養(yǎng)較單純CIK細(xì)胞培養(yǎng)通具有更高的細(xì)胞增殖速度與能力, 并且聯(lián)合組CIK殺傷細(xì)胞的有效成分雙陽性率要高于對照組, 并且細(xì)胞表面分泌IL-2、INF-γ的水平要明顯高于對照組, 并且聯(lián)合培養(yǎng)與對照組免疫細(xì)胞活性與靶點效應(yīng)的存在差異性, 對于白血病細(xì)胞的殺傷能力聯(lián)合培養(yǎng)組明顯高于對照組, 可準(zhǔn)確顯示靶點效應(yīng)與免疫細(xì)胞殺傷活性之間的關(guān)系。羅善超等［18］通過動物實驗觀察接種了人膽管癌的SCID 小鼠進(jìn)行CIK 細(xì)胞與DC 聯(lián)合治療, 對小鼠體內(nèi)細(xì)胞毒素、腫瘤大小和免疫組織化學(xué)的觀察, 發(fā)現(xiàn)聯(lián)合治療顯示了最佳的腫瘤抑制效果。小鼠體內(nèi)細(xì)胞毒素、腫瘤大小及免疫組化可知, 采用隨機(jī)對照試驗發(fā)現(xiàn)CIK聯(lián)合DC細(xì)胞的治療效果較單純藥物治療具有更好的腫瘤抑制效果。并且目前通過實驗及假設(shè)猜想認(rèn)為DC細(xì)胞可影響CIK細(xì)胞的生物學(xué)特性的機(jī)制, 由于DC 細(xì)胞表面有很多種類的有助于抗原提呈的分子, 可分泌不同種類的大量細(xì)胞因子,并且有學(xué)者實驗研究證實IL-2與IL-12對CIK細(xì)胞具有不同程度的增殖作用, 可顯著提高CIK細(xì)胞的殺瘤活性, 二者共同培養(yǎng)可提高CIK的增殖活性與細(xì)胞毒作用, 而IL-12攝取阻斷則會減弱CIK細(xì)胞的細(xì)胞毒性, 降低不良反應(yīng)的發(fā)生率, 提高臨床治療效果及改善預(yù)后［19,20］。

4 小結(jié)

采用CIK聯(lián)合DC治療惡性腫瘤具有較好的臨床應(yīng)用前景, 其腫瘤殺傷及抗腫瘤作用效果理想, 可作為腫瘤過繼治療中免疫療法的首選方案, 但對于CIK聯(lián)合DC具體針對不同類型、不同部位的腫瘤殺傷作用與確切療效需進(jìn)一步的實驗研究與評價, 使DC-CIK 細(xì)胞聯(lián)合免疫治療在體內(nèi)更好地發(fā)揮抗腫瘤的作用有待于進(jìn)一步深入研究。進(jìn)一步探討DC-CIK細(xì)胞免疫治療聯(lián)合放療、化療、手術(shù)及中草藥治療,將有助于減少惡性腫瘤的轉(zhuǎn)移與復(fù)發(fā), 提高臨床療效, 改善腫瘤患者的生活質(zhì)量。

［1］ 張亮, 張斌, 麥海星, 等.腫瘤浸潤未成熟樹突狀細(xì)胞誘導(dǎo)血管生成的研究進(jìn)展.中華臨床醫(yī)師雜志(電子版), 2013, 7(13): 160-161.

［2］ Jakel CE, Schmidt-Wolf IG.An update on new adoptiveimmunotherapy strategies for solid tumors with cytokine-induced killer cells.Expert Opin Biol Ther, 2014, 14(7):905-916.

［3］ 宋東, 楊曉玲, 馮慧晶, 等.DC-CIK 聯(lián)合化療治療消化道腫瘤臨床療效分析.中國腫瘤臨床, 2012, 39(9)：497-501.

［4］ 劉光藝, 李洋, 陳振海, 等.DC-CIK 細(xì)胞聯(lián)合全身靜脈化療治療晚期結(jié)直腸癌伴彌漫性肝轉(zhuǎn)移臨床療效分析.重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報, 2014, 39(3):368-373.

［5］ 葉真龍, 金華君, 錢其軍.CIK 細(xì)胞聯(lián)合治療惡性腫瘤的最新研究進(jìn)展.解放軍醫(yī)藥雜志, 2015, 27(1):25-30.

［6］ Hontscha C, Borck Y, Zhou H, et al.Clinical trials on CIK cells: first report of the international registry on CIK cells (IRCC).J Cancer Res Clin Oncol, 2011, 137(2):305-310.

［7］ Su X, Zhang L, Jin L, et al.Immunotherapy with cytokineinducedkiller cells in metastatic renal cell carcinoma.Cancer Biother Radiopharai, 2010, 25(4): 465-470.

［8］ 彭大為, 李建旺, 元建華, 等.自體DC-CIK細(xì)胞聯(lián)合培美曲塞治療老年非小細(xì)胞肺癌的療效與安全性.中國免疫學(xué)雜志, 2012, 28(7):648-651.

［9］ 于丹丹, 魏于全.惡性腫瘤的生物化療研究及進(jìn)展.中華臨床醫(yī)師雜志(電子版), 2011, 5(16):4828-4830.

［10］ Olioso P, Giancola R, DiRiti M, et al.Immunotherapy with cytokine induced killer cells in solid and hematopoietic tumours: a pilot clinical trial.Hematol Oncol, 2009, 27(3):130-139.

［11］ Ma Y, Zhang Z, Tang L, et al.Cytokine-induced killer cells in the treatment of patients with solid carcinomas: a systematic review and pooled analysis.Cytotherapy, 2012, 14(4):483-493.

［12］ 董毅, 朱太崗, 李月紅, 等.CIK細(xì)胞與DC-CIK細(xì)胞抗腫瘤效應(yīng)的對照研究.中華全科醫(yī)學(xué), 2011, 9(12):1844-1845.

［13］ Tao L, Huang G, Shi S, et al.Bevacizumab improvesthe antitumor efficacy of adoptive cytokine-induced killercells therapy in nonsmall cell lung cancer models.Med Oncol, 2014, 31(1):777.

［14］ Liu L, Zhang W, Qi X, et al.Randomized study of autologous cytokine-induced killer cell immunotherapy in metastatic renal carcinoma.Clinical Cancer Research, 2012, 18(6):1751-1759.

［15］ Ma Y, Aymeric L, Locher C, et al.The dendritic cell-tumor crosstalk in cancer.Current opinion immunology, 2011, 23(1):146-152.

［16］ DeVita VT, Rosenberg SA.Two hundred years of cancer research.New England Journal of Medicine, 2012, 366(23):2207-2214.

［17］ 郭偉偉, 劉莉, 吳德華.DC-CIK細(xì)胞免疫治療聯(lián)合TACE術(shù)治療原發(fā)性肝癌.南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報, 2014, 34(5):674-678.

［18］ 羅善超, 劉劍勇, 趙蔭農(nóng), 等.轉(zhuǎn)染腫瘤細(xì)胞總RNA的樹突狀細(xì)胞聯(lián)合CIK細(xì)胞抗小鼠肝癌作用的實驗研究.廣西醫(yī)學(xué), 2012, 34(4):403-406.

［19］ 卞晉榮.結(jié)直腸癌術(shù)后化療聯(lián)合DC-CIK細(xì)胞治療的效果評價.中國腫瘤外科雜志, 2013, 5(5):306-309.

［20］ Ma Y, Xu YC, Tang L, et al.Cytokine-induced killer(CIK) cell therapy for patients with hepatocellular carcinoma: efficacy and safety.Experimental hematology & oncology 2012, 1(1):11.

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2015.12.180

2015-02-27］

510315 南方醫(yī)科大學(xué)中西醫(yī)結(jié)合腫瘤中心胸外科(祁秋干 王遠(yuǎn)東), 婦瘤科(紀(jì)娜)