黃柏的藥理作用及其活性成分提取

陳陽峰，鐘曉紅

（湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝園林學(xué)院，長沙410128）

黃柏的藥理作用及其活性成分提取

陳陽峰，鐘曉紅

（湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝園林學(xué)院，長沙410128）

黃柏為蕓香科植物黃皮樹或黃檗的干燥樹皮，其性味苦寒，有清熱燥濕，瀉火除蒸，解毒療瘡之功效。黃柏具有廣泛的藥理活性，如抗菌、抗病毒、鎮(zhèn)咳、降壓以及增強免疫等。黃柏的主要活性成分為生物堿，其中小檗堿是含量最高的生物堿，可達(dá)1.4%～5.8%，另外藥根堿、黃柏堿、掌葉防己堿以及黃柏內(nèi)酯、黃柏酮等活性成分也占有一定比重。綜述了黃柏的藥理作用及其生物堿提取工藝研究進(jìn)展。

黃柏；小檗堿；藥理作用；提取工藝

黃柏，為蕓香科黃檗屬植物黃皮樹（Phellodendron chinense Schneid.）或黃檗（Phellodendron amurense Rupr.）的干燥樹皮，前者習(xí)稱“川黃柏”，后者習(xí)稱“關(guān)黃柏”［1］。以上兩者的主要區(qū)別在于來源植物不同。1963～2000年版《中國藥典》中均以“黃柏”收載，規(guī)定來源于黃皮樹的為川黃柏，來源于黃檗的為關(guān)黃柏。在2005版《中國藥典》中，將兩者分開，分別以“川黃柏”、“關(guān)黃柏”單列。黃柏常生長于河邊、溪邊、深山中，在我國分布廣泛，東北三省、河北、內(nèi)蒙古、四川、云南、貴州、湖北、湖南、廣西、山東、甘肅、浙江均有產(chǎn)出。我國黃檗屬植物有2種2變種，即黃皮樹、黃檗、禿葉黃皮樹和美姑黃皮樹［2］。

1　黃柏的主要化學(xué)成分

現(xiàn)代科學(xué)研究表明:黃柏中含有大量生物活性成分，如生物堿、甾醇、內(nèi)酯及黏液質(zhì)等。生物堿是黃柏中最重要的活性物質(zhì)，目前發(fā)現(xiàn)的成分有小檗堿（Berberine）、黃柏堿（Phello dendrine）、藥根堿（Jatrorrhizine）、蝙蝠葛堿（Menisperine）、掌葉防己堿（巴馬亭，Palmatine）、木蘭花堿（Magnoflorine）、N-甲基大麥芽堿（Candicine）等。此外黃柏中還含有一些其他的活性物質(zhì)，如黃柏內(nèi)酯（Obaculactone）、黃柏酮（Obacunone）、7-脫氫豆甾醇（7-Dehydrostigmasterol）、菜油甾醇（Campesterol）、青螢光酸（Lumicaeruleic acid）、β-谷甾醇（β-Sitosterol）、黃柏酮酸（Obacunonic acid）及白鮮交酯（Dictamnolide）等［3］。

黃柏中主要功能成分小檗堿的含量為1.4%～5.8%，關(guān)黃柏中小檗堿的含量為0.6%～2.5%，因此，二者的藥用效果相差較大。

1.1關(guān)黃柏（P.amurense Rupr.）的化學(xué)成分

從黃檗皮中分得Kihadanin A，B［4］，諾米林（nomilin）［5］，酚類化合物:（±-5，5-二甲氧基落葉松樹脂醇-4-O-葡萄糖苷［（±）-5，5-dimethoxylariciresinol-4-O-glucoside］，2-（對羥基苯基）-乙-1-O-β-D-呋喃芹糖（1→6）-β-D-吡喃葡萄糖苷［2-（P-hydroxy-pHenyl）-ethanol -1-O-1-β-D-apiofuranosyl（1→6）-β-D-glucopyranoside］，1-（對-羥基芐基）-6，7-二羥基-N-甲基四氫異喹啉7-P-β-D-吡喃葡萄糖苷［7-O-P-β-D-gluco-pyranoside of 1-（p-hydroxybenzyl）-6，7-di-hydroxy-N-methyltetrahy droisoquinoline］，丁香苷（syringin）；松柏苷（coniferin）；（+）-南燭木樹脂酚［（±）-lyoniresinol］，丁香樹脂醇二-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（syringa-resinol di-O-β-D-glucopyranoside），芥子醛4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（Sinapic aldehyde 4-O-β-D-slucopyra noside），Vanilloloside，5-O-阿魏酰-奎尼酸甲酯（methyl 5-O-fernloyl -quinate），3-O-阿魏?？崴幔?-ofernloylquini acid）及其甲酯［6］。從其根中分得鐵屎米酮-6（canthin-6-one），同時發(fā)現(xiàn)莖皮中也有微量存在［7］。

1.2川黃柏（P.chinense Schneid.）的化學(xué)成分

從川黃柏根皮中得到鐵屎米酮-6［8］。從其葉中分得數(shù)種黃酮類化合物:槲皮素-3-O-β-D-半乳糖苷（quercetin-3-O-β-D-galactoside），雙氫山柰酚（dihydrokaempferol），黃柏新苷（phellochinin A）［9］。果實中含酰胺類化合物:反，反-2，4 -N-異丁基十四碳二烯酰胺［（2E，4E）-N-isobuty ltetradeca dienamide］，反，反，順-2，4，8-N異丁基十四碳三烯酰胺［（2E，4E，8Z）-N-isobutyltetradecatrienamide］和反，反-2，4-N-異丁基十五碳二烯酰胺［（2E，4E）-N-isobu-tylpenladecadienamide］［10］。還含揮發(fā)油，主要成分為檸檬烯（limonene），順-檸檬烯氧化物，β-欖香烯（βelemene）及（+）-香芹酮［（+）-carvone］［11］。

2　黃柏的藥理作用

2.1抗菌作用

陳錦英等采用平皿打孔法測定黃柏對臨床分離的致腎盂腎炎大腸桿菌132和136的抗菌活性，結(jié)果均為耐藥。取不同濃度的黃柏液處理上述菌株，利用血凝試驗檢測藥物對致腎盂腎炎大腸桿菌粘附特性的抑制作用，結(jié)果黃柏對其有抑制作用，并提示中草藥抗菌作用的機制可能與其抑制粘附有關(guān)［12］。田健等采用瓊脂稀釋法進(jìn)行最低抑菌濃度（MIC）的測定，結(jié)果黃柏、地榆、紫草對金黃色葡萄球菌和表皮葡萄球菌均有很好的抑菌作用，而且3種藥物以一定比例混合后同樣有很好的抑菌效果［13］。黃柏對幽門螺桿菌的抑制作用不亞于氨芐青霉素［14］，對痤瘡丙酸桿菌脂酶的活性也有抑制作用［15］，還顯示抗數(shù)種厭氧菌活性如脆弱桿菌、產(chǎn)黑色素類桿菌、多型類桿菌和消化鏈球菌等［16］。

2.2免疫抑制作用

黃柏具有抑制細(xì)胞免疫反應(yīng)的作用，其活性物質(zhì)為黃柏堿和木蘭花堿，它們均可抑制小鼠的局部移植組織的宿主反應(yīng)（GvH），也抑制苦基氯（picrylchloride）誘導(dǎo)的遲發(fā)型超敏反應(yīng)（DTH）小鼠的誘導(dǎo)期，但不抑制其反應(yīng)期［17］。

陳韓英等［18］采用ELISA法測定了醇提黃柏生物堿對熱應(yīng)激后小鼠脾淋巴細(xì)胞IFN-γI、L-4分泌水平的動態(tài)影響。結(jié)果表明，黃柏生物堿均能促進(jìn)小鼠脾淋巴細(xì)胞的增殖，其中黃柏醇提生物堿對淋巴細(xì)胞增殖能力的促進(jìn)作用最強；熱應(yīng)激使IFN -γ的分泌水平上升、IL-4的分泌水平下降；黃柏生物堿下調(diào)IFN-γ的分泌量、上調(diào)IL-4的分泌量，使二者的含量均恢復(fù)到正常水平。實驗證明，黃柏生物堿可顯著調(diào)節(jié)熱應(yīng)激所致的IFN-γ、IL-4分泌水平的紊亂。

2.3 抗腫瘤作用

廖靜等研究表明，黃柏加藥照光組對BGC823人胃癌細(xì)胞生長、癌細(xì)胞噻唑藍(lán)代謝活力均有光敏抑制效應(yīng)，其光敏作用重點靶位是生物膜［19］。

張少梅對川黃柏提取物進(jìn)行了抗癌藥理活性的篩選，實驗結(jié)果表明從川黃柏中所分離出來的小檗堿、β-谷甾醇、豆甾醇對胃癌、宮頸癌有較好抑制率，川黃柏具有抗癌活性，很有可能與其所含F(xiàn)e元素有關(guān)［20］。

2.4抗?jié)冏饔?/p>

據(jù)日本人內(nèi)山務(wù)研究［21］，黃柏提取物對乙醇性潰瘍形成有抑制傾向，抑制率21.9%～63.3%；對幽門結(jié)扎性潰瘍形成有明顯抑制作用，抑制率達(dá)56.3%；并可明顯地抑制阿斯匹林潰瘍形成，抑制率在40.0%左右；另外，對約束水浸應(yīng)激潰瘍、胃液量、總酸度、總胃蛋白酶活性均有明顯的抑制作用。由此表明，黃柏的這種提取物有著較強的抗?jié)児π?，并提示這是通過增強防卸功能和抑制致病因素協(xié)同完成的。

2.5對關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞的影響

劉建用以鹽黃柏為主要成分的四妙丸對實驗性兔進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)其可以抑制膝骨關(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞的凋亡，改善軟骨病變，對軟骨細(xì)胞增殖無明顯影響。認(rèn)為其作用途徑可能與抑制滑膜炎癥、減少IL -1β釋放、上調(diào)bcl-2基因、下調(diào)bax基因表達(dá)有關(guān)［22］。

2.6小檗堿的藥理作用

黃柏的生物活性成分中，目前研究較多的是小檗堿。小檗堿的藥理作用主要有以下幾點:（1）抗病源微生物作用［23］。小檗堿具有廣譜的抗菌作用，對多種革蘭陰性菌和革蘭陽性菌有很好的抑制作用。在濃度較高時，還具有殺菌作用。目前臨床上主要用于細(xì)菌性痢疾、腸胃炎等的治療，且療效較為明顯。（2）對心血管疾病的作用［24］。小檗堿的心血管藥理作用主要包括抗心力衰竭、抗心律失常、調(diào)節(jié)脂代謝和抗動脈粥樣硬化、擴張血管和降低血壓、抗腦缺血以及保護(hù)血管內(nèi)皮、抗血小板聚集和抗血栓、抑制腫瘤新生血管形成和抗血管炎癥等作用。（3）抗癌作用［25］。近期研究發(fā)現(xiàn)，小檗堿在體外實驗中對結(jié)腸癌、鼻咽癌、肝癌、白血病等多種癌細(xì)胞均有不同程度的抑制作用。

3　黃柏中活性成分的提取方法

傳統(tǒng)的黃柏活性物質(zhì)提取方法主要有:酸提法、醇提法、堿提法和酸醇提法。

采用黃柏細(xì)絲2～3mm，用藥材10倍量75%乙醇回流提取3次，每次提取1.5 h，該工藝穩(wěn)定，質(zhì)量可控，可用于工業(yè)化生產(chǎn)［26］。采用紫外分光光度法測定黃柏提取物中總生物堿含量，堿水提取法、乙醇提取法與酸水提取法得到的黃柏總生物堿含量分別為0.93%、12.47%與0.34%，實驗結(jié)果表明，乙醇提取法黃柏總生物堿提取率最高［27］。李定芬等研究表明，以乙腈-0.1%磷酸（十二烷基磺酸鈉）進(jìn)行的超聲提取工藝簡單、快速且提取效率高，但用1%甲醇鹽酸連續(xù)回流提取法，在考慮經(jīng)濟節(jié)約的條件下，也是不錯的選擇［28］。俞丹等以酸性染料比色法測定總生物堿含量，考察乙醇濃度、物料比、提取時間、提取次數(shù)4個因素對黃柏總生物堿提取率的影響。結(jié)果表明，最佳工藝為16倍量的70%乙醇，提取3次，每次60 min［29］。

范家佑等以黃柏為原料，分別以水、乙醇為提取劑，提取黃柏生物堿。結(jié)果表明以水為提取劑的最佳工藝條件組合是:100℃水浴下提取次數(shù)為4次，提取時間為2.5 h，料液比1∶16，提取的鹽酸小檗堿含量是46.55 mg／g。乙醇為提取劑的最佳工藝條件組合是:70℃水浴下乙醇濃度為70%，料液比1∶12，提取時間為80 min，提取次數(shù)為3次，提取的鹽酸小檗堿含量是68.49 mg／g［30］。楊麗嘉等以黃柏中小檗堿提出率為指標(biāo)，考察了Ca（OH）2溶液濃度、鹽析量、溫度等因素對小檗堿提取工藝的影響。最佳工藝是:1%Ca（OH）2溶液浸泡、20%NaCl溶液鹽析、低溫（10℃）放置。認(rèn)為該工藝提取效率高，穩(wěn)定性好，成本低，適合工業(yè)化生產(chǎn)［31］。王振華等認(rèn)為黃柏藥材切成長5 cm的絲，提取20 min，加水8倍量提取 4次的方法提取效率較高［32］。程弘夏等采用正交設(shè)計法對黃柏藥材提取時所用乙醇濃度、乙醇用量、滲漉速度、藥材粒度進(jìn)行考察，通過多指標(biāo)綜合加權(quán)評分優(yōu)選黃柏的提取工藝。認(rèn)為黃柏總生物堿提取的最佳工藝是:乙醇濃度65%，乙醇用量為生藥的12倍，滲漉速度為1 m L／min，藥材粒度為10～20目［33］。王興華等研究表明，黃柏中小檗堿的最佳提取條件為:在40℃下，用pH 4.0的70%乙醇溶液提取2次。認(rèn)為該提取工藝黃柏中小檗堿產(chǎn)率高，且操作簡單可行［34］。

張玲等采用響應(yīng)曲面法優(yōu)化超聲提取黃柏中鹽酸小檗堿的工藝條件，結(jié)果表明，最優(yōu)提取工藝為超聲波頻率43 kHz、超聲時間29 min、液料比31∶1，小檗堿得率達(dá)到6.343%［35］。銀永忠等研究表明，采用超聲輔助乙醇-硫酸銨雙水相體系提取黃柏中的總黃酮的最佳工藝條件是:提取時間77 min，料液比1∶26，醇水比0.71［36］。

4　黃柏的炮制與傳統(tǒng)應(yīng)用

傳統(tǒng)的黃柏炮制方法有三種:（1）黃柏絲:除去雜質(zhì)，噴淋清水，潤透，切絲，干燥；（2）黃柏炭:取黃柏絲，照炒炭法炒至表面焦黑色；（3）鹽黃柏:取黃柏絲，照鹽水炙法炒干［37］。這些制法沒有一個明確的標(biāo)準(zhǔn)，隨意性很強，不利于黃柏內(nèi)有效成分的保留及其藥效的充分發(fā)揮。

古方中有黃柏膏:主要用來治療眼暴赤澀痛、眼翳［38］；蠶沙黃柏湯:主要用來清利下焦?jié)駸幔髦芜z精白濁，有濕熱者；蒼術(shù)黃柏丸:主要用來治療腳氣，濕熱食積，痰流注；黃柏丸:主要用來消中。另外還有黃柏散、黃柏蜜、黃柏飲、黃柏煎、黃柏酒、黃柏飲子、黃柏湯、黃柏竹瀝膏、黃柏漿、刺黃柏、黃柏滋腎丸、神驗黃柏散、黃柏黑散、細(xì)辛黃柏散、梔子黃柏湯、黃柏蒼術(shù)湯、洗眼黃柏湯、定痛黃柏散等等復(fù)方。由此可見，黃柏作為一種重要的中藥材，歷來都是醫(yī)生手中的一味重要素材。

5　以黃柏中活性成分開發(fā)的產(chǎn)品

黃柏因其獨特的藥理活性，已被廣泛用于抗菌［39］、抗病毒［40］、鎮(zhèn)咳［41］、降壓［42］和增強免疫［43］等方面，已被廣泛用于中成藥的制作，如腸康片［44］、鹽酸小檗堿片［45］、婦炎康片［46］、足寧顆粒［47］、復(fù)方茯苓湯［48］、麻夷鼻炎噴霧劑［49］等。

用黃柏中提取的生物活性物質(zhì)開發(fā)的產(chǎn)品復(fù)方木香小檗堿片，是臨床上腸炎、腹瀉的常用藥物。常見的以黃柏中有效成分開發(fā)的藥品還有黃柏膠囊，具有清熱燥濕，瀉火除蒸，解毒療瘡的功效，用于濕熱瀉痢，瘡瘍腫毒，濕疹瘙癢等癥狀，療效甚佳［50］。除了以小檗堿的功效為主開發(fā)的產(chǎn)品外，還有利用黃柏中所含的巴馬汀、藥根堿的功效制成的中藥方劑清胃散［38］，具有抑菌、免疫、抗炎等作用，主治胃有積熱，上下牙痛，牽引頭腦，滿面發(fā)熱，或牙齦潰爛，牙宣出血，唇口頰腮腫痛。

黃柏因其顯著的藥理價值，已經(jīng)被廣泛用于開

發(fā)中成藥及保健品，尤其以小檗堿為主要成分開發(fā)了很多醫(yī)藥產(chǎn)品，目前已在醫(yī)藥市場大量流通，為各大藥廠帶來了豐厚的利潤。但是黃柏的種植周期長，往往需要種植20年左右才能達(dá)到采收的要求，不能達(dá)到為農(nóng)民盡快增收的目的，也就影響了廣大藥農(nóng)的種植積極性，造成市面上藥材資源緊缺，藥材價格不斷攀升，給企業(yè)生產(chǎn)帶來了壓力。解決源藥材資源短缺和市場需求的矛盾，已成當(dāng)務(wù)之急。

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Pharmacological Effects of Cortex phellodendri and Its Active Ingredient Extraction

CHEN Yang-feng，ZHONG Xiao-hong
（College of Horticulture and Landscape，Hunan Agricultural University，Changsha，Hunan 410128，China）

Cortex phellodendri is the dry bark of rutaceae plants Phellodendron chinense Schneid or Cortex phellodendri，which has characters of bitter and cold and effects of clearing heat，drying dampness，removing firelight and excepting steam，curing poison and sore.Cortex phellodendri has extensive pharmacological activities，such as antibacterial，antiviral，relieving cough，depressurization and enhance immunity，etc.Alkaloids are the main active ingredients in Cortex phellodendri，in which content of berberine is highest，which reaches to 1.4%～5.8%.In addition，jateorrhizine，phellodendrine，palmatine，obaculactone and obacunone also occupy certain proportion.This article summarized the research progress on pharmacological effects of Cortex phellodendri and the extraction processes of its alkaloids.

Cortex phellodendri；berberine；pharmacological effect；extraction process

R285

A

1001-5280（2015）05-0564-05

10.3969／j.issn.1001-5280.2015.05.24

2015-02-12

陳陽峰（1985-），男，湖南長沙人，碩士，Email:279144181＠qq.com。