單味中藥對(duì)免疫性肝損傷保護(hù)作用實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展

趙晨翔，張雅敏，劉宏勝

綜述

單味中藥對(duì)免疫性肝損傷保護(hù)作用實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展

趙晨翔1，張雅敏2，劉宏勝3

機(jī)體的免疫應(yīng)答反應(yīng)所介導(dǎo)的肝組織及細(xì)胞損傷已成為當(dāng)前眾多肝臟疾病發(fā)病的重要原因之一，單味中藥及其提取物對(duì)免疫性肝損傷有一定的保護(hù)作用。文章就近5年來單味中藥及其提取物對(duì)免疫性肝損傷保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)行了綜述。

中藥；提取物；免疫性肝損傷

免疫性肝損傷的重要特征是肝組織內(nèi)有大量的炎癥細(xì)胞浸潤,產(chǎn)生免疫炎癥應(yīng)答,從而導(dǎo)致免疫反應(yīng)為基礎(chǔ)的肝臟損傷。已有研究表明，在許多肝臟疾病的病理過程中，均存在不同程度的肝臟免疫應(yīng)答介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)及其引起的肝實(shí)質(zhì)損傷。而且免疫性肝損傷是肝纖維化、肝硬化乃至肝臟腫瘤等終末病變發(fā)生發(fā)展的重要因素以及重要步驟,它決定了疾病的轉(zhuǎn)歸和發(fā)生發(fā)展[1-2]。中醫(yī)藥是我國巨大的寶藏，近年來通過實(shí)驗(yàn)研究，發(fā)現(xiàn)了大量對(duì)免疫性肝損傷具有保護(hù)作用的單味中藥及其提取物，本文就近5年中藥治療免疫性肝損傷的實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展綜述如下。

1　黃芪

用于研究和治療免疫性肝損傷疾病的黃芪，主要活性成分是黃芪多糖（Astragalus pdysaccharides,APS），張晨等[3]研究發(fā)現(xiàn)黃芪多糖具有一定的保護(hù)肝臟和抗肝纖維化的作用。王忠利等[4]報(bào)道，利用不同劑量的APS對(duì)卡介苗（bacillus calmette-guerin,BCG)加脂多糖(lipopolysaccharides,LPS）誘導(dǎo)的大鼠肝損模型進(jìn)行連續(xù)灌胃，發(fā)現(xiàn)APS各組在降低小鼠血清中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）水平的同時(shí)，可抑制模型大鼠肝臟指數(shù)、脾臟指數(shù)的增加,使腫瘤壞死因子（tumour necrosis factor-α，TNF-α）、白細(xì)胞介素6（interleukin-6，IL-6）水平降低而抑制性卡巴蛋白表達(dá)增高。APS對(duì)肝損傷的這種保護(hù)作用具有一定的劑量依賴性，其機(jī)制可能是APS降低炎癥因子水平，抑制NF-κB通路，進(jìn)而抑制炎癥反應(yīng)的發(fā)生而實(shí)現(xiàn)。鐘振東等[5]利用LPS聯(lián)合D-半乳糖(α-D-galactopyranose，D-GlaN)建立小鼠免疫性肝損傷模型，用黃芪多糖進(jìn)行灌胃，與模型組比較，給藥組小鼠肝組織誘導(dǎo)型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase，iNOS）、一氧化氮（nitric oxide，NO）、和細(xì)胞間黏附分子-1（intercelluar adhesion molecule-1，ICAM-1）含量均發(fā)生極顯著減少,顯微鏡下肝臟細(xì)胞嗜酸性變性、壞死、出血等病變顯著降低,肝臟組織P56蛋白熒光OD值極顯著減少。說明黃芪多糖可能通過其保肝降酶、抗炎以及抑制小鼠肝臟細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)中NF-κB家族P56蛋白的表達(dá)，進(jìn)而減少INOS、ICAM-1和NO的生成從而對(duì)LPS聯(lián)合D-GlaN誘導(dǎo)的小鼠免疫性肝損傷產(chǎn)生保護(hù)作用。

2　陳皮

研究證明，陳皮含有的橙皮苷（hesperidin,HDN）具有抗脂質(zhì)過氧化、抗炎、免疫調(diào)節(jié)等藥理作用[6]。陳茂劍等[7]研究橙皮苷預(yù)處理減輕刀豆蛋白A(concanavalin A，ConA)所致小鼠急性免疫性肝損傷，發(fā)現(xiàn)橙皮苷預(yù)處理能降低模型小鼠肝和脾指數(shù)，降低血清中ALT和AST水平及MDA含量，提高SOD活性；明顯抑制肝細(xì)胞凋亡，上調(diào)B淋巴細(xì)胞瘤-2基因（B-cell lymphoma-2，Bcl-2）表達(dá)，下調(diào)Bax。實(shí)驗(yàn)證明，HDN預(yù)處理能保護(hù)ConA所致小鼠急性免疫性肝損傷，其機(jī)制可能與橙皮苷增強(qiáng)機(jī)體抗氧化和清除自由基的能力，調(diào)控Bcl-2和Bax的表達(dá)進(jìn)而抑制肝細(xì)胞凋亡有關(guān)。

3　重樓

現(xiàn)代藥理研究表明，重樓具有抑菌、止血、鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛、祛痰、抗早孕殺滅精子和抗細(xì)胞毒等作用。洪燕等[8]觀察重樓醇提物對(duì)ConA介導(dǎo)的急性免疫性肝損傷小鼠的保護(hù)作用，采用不同劑量的鐘樓醇提取物對(duì)小鼠進(jìn)行灌胃。結(jié)果顯示，各劑量組均能顯著降低肝損傷小鼠血清AST、ALT水平，顯著提高超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）水平和谷胱甘肽過氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH-Px）活性，從而增強(qiáng)機(jī)體抗氧化能力。又可降低丙二醛（Malondialdehyde，MDA）從而降低免疫性肝損傷的脂質(zhì)過氧化物含量，同時(shí)可明顯減輕肝臟炎癥細(xì)胞浸潤和壞死程度。實(shí)驗(yàn)說明，重樓醇提物通過加速氧自由基的清除，提高小鼠機(jī)體抗脂質(zhì)過氧化能力以及提高過氧化物分解酶的含量，進(jìn)而對(duì)ConA所致免疫性肝損傷小鼠起到保護(hù)作用。

4　野菊花

李國棟等[9]研究野菊花中萜類和黃酮類化合物對(duì)ConA所致小鼠免疫性肝損傷的保護(hù)作用，利用野菊花各提取部位高、中、低劑量組分別對(duì)小鼠進(jìn)行灌胃。結(jié)果顯示，與模型組比較，野菊花各部位對(duì)免疫性肝損傷大鼠血清中AST、ALT、TNF-α、細(xì)胞因子γ干擾素（interferon-γ，IFN-γ）水平的升高具有不同程度的抑制作用，病理組織學(xué)觀察可見其對(duì)免疫性肝損傷病變均有改善作用。說明野菊花中萜類和黃酮類化合物對(duì)ConA致小鼠免疫性肝損傷均具有一定的保肝作用。

5　五味子

李麗波等[10]探討五味子乙素(γ-Schizandrin B，Sch B)對(duì)刀豆蛋白誘導(dǎo)小鼠肝損傷的保護(hù)作用與熱休克蛋白27 (HSP-27)和熱休克蛋白70(HSP-70)的關(guān)系,采用Sch B和熱休克蛋白抑制劑槲皮素灌胃給藥。結(jié)果，Sch B能使小鼠肝臟HSP27和HSP70在蛋白水平和mRNA水平的表達(dá)均顯著增加，同時(shí)肝細(xì)胞壞死程度明顯減輕、小鼠血清轉(zhuǎn)氨酶水平顯著降低。說明Sch B可以保護(hù)ConA所致的小鼠免疫性肝損傷，其中的一條重要機(jī)制是誘導(dǎo)HSP27和HSP70的表達(dá)。

6　紅背葉根

沈海容等[11]對(duì)紅背葉根4種提取物水提物、石油醚提取物、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物對(duì)ConA誘導(dǎo)的小鼠急性肝損傷的保護(hù)作用進(jìn)行研究。用以上不同提取物的高、中、低劑量對(duì)小鼠進(jìn)行灌胃，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，紅背葉根4種不同提取物不僅可顯著降低血清中ALT、AST，還可以改善肝臟的組織形態(tài)。說明紅背葉根4種不同提取物對(duì)ConA誘導(dǎo)的免疫性肝損傷具有一定的保護(hù)作用。

7　天麻

主要有效成分是天麻素、對(duì)羥基苯甲醇、對(duì)羥基苯甲醛、多糖、維生素A類物質(zhì)等成分。李峰等[12]研究天麻多糖對(duì)BCG聯(lián)合LPS所致小鼠免疫性肝損傷的保護(hù)作用，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，天麻多糖能顯著降低小鼠血清中ALT、AST、NO活性及TNF-ɑ與IL-1的含量，抑制肝臟中的MDA水平和提高SOD的活性，顯著提升脾T、B淋巴細(xì)胞增殖能力，且提高了小鼠的脾臟、胸腺指數(shù)，降低了肝臟指數(shù)。說明天麻多糖通過調(diào)節(jié)機(jī)體內(nèi)的免疫功能、產(chǎn)生了平衡細(xì)胞因子，減少了TNF-ɑ、IL-1和NO的產(chǎn)生從而達(dá)到對(duì)BCG聯(lián)合LPS所致小鼠免疫性肝損傷的保護(hù)作用。

8　睡蓮花

睡蓮花維醫(yī)稱“內(nèi)魯帕爾”，屬多年生水生草本植物雪白睡蓮Nymphaea candidaC.Presl的干燥花蕾,具有清熱解毒、鎮(zhèn)靜安神的功效。王雪等[13]觀察維藥睡蓮花提取物對(duì)BCG聯(lián)合LPS所致小鼠免疫性肝損傷模型的保護(hù)作用，發(fā)現(xiàn)睡蓮花提取物可顯著降低模型小鼠血清ALT、AST水平，顯著降低肝損傷小鼠的肝臟系數(shù)，使肝組織SOD、GSH-Px活性顯著升高,MDA與NO含量顯著降低。睡蓮花提取物對(duì)BCG聯(lián)合LPS誘導(dǎo)的免疫性肝損傷模型均具有明顯的保護(hù)作用,其機(jī)制可能與其提高抗氧化物酶的活性和降低脂質(zhì)過氧化物水平,減少炎性介質(zhì)NO的產(chǎn)生等有關(guān)。

9　三七

三七總皂苷（panax notoginsenosides，PNS）是三七的主要有效活性成分，研究表明，其具有調(diào)節(jié)免疫、抗炎、抗氧化、抗纖維化等藥理作用。韋維等[14]研究三七有效成分三七總皂苷、總黃酮及多糖對(duì)BCG、LPS所致小鼠免疫性肝損傷的保護(hù)作用，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，三七總皂苷組（C組）、三七總黃酮組（D組）、三七多糖組（E組）小鼠肝、脾、胸腺指數(shù)、血清ALT水平明顯降低，IL-4、總超氧化物歧化酶（total superoxide dismutase，T-SOD）顯著升高。病理學(xué)示C、D、E組肝臟炎癥細(xì)胞浸潤、水腫和點(diǎn)狀、片狀壞死程度均比模型組組明顯減輕。三七總皂苷、三七總黃酮和三七多糖對(duì)免疫性肝損傷的保護(hù)作用可能是通過抑制炎性介質(zhì)的分泌、增強(qiáng)機(jī)體抗氧化能力，加速自由基的清除。

10　波棱瓜子

陳璐等[15-16]采用BCG聯(lián)合LPS建立小鼠免疫性肝損傷模型，分別觀察波棱瓜子乙酸乙酯提取物和波棱瓜子脂肪油對(duì)其的保護(hù)作用。給予小鼠不同濃度的波棱瓜子乙酸乙酯提取物，觀察發(fā)現(xiàn)，各劑量組均可顯著降低肝損傷小鼠的肝臟指數(shù)及脾臟指數(shù)，改善肝臟組織病理學(xué)變化，降低肝損傷小鼠血清中ALT、AST水平，升高肝勻漿中SOD活性，降低MDA含量，但對(duì)血清中的NO含量無顯著影響。證明波棱瓜子乙酸乙酯提取物對(duì)BCG聯(lián)合LPS所致小鼠免疫性肝損傷具有明顯的保護(hù)作用。樊利娜研究藏藥波棱瓜子總木脂素對(duì)ConA所致小鼠免疫性肝損傷保護(hù)作用及其可能機(jī)制。按照不同劑量灌胃給藥，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，各個(gè)劑量的波棱瓜子總木脂素均能降低肝損傷小鼠血清中的AST、ALT、ALP活力，以及小鼠血清NO、MDA含量和一氧化氮合酶(nitric oxide synthase，NOS)、過氧化物酶（myeloperoxidase，MPO）活性，升高SOD、GHS-Px的活性。此外，波棱瓜子總木脂素各個(gè)劑量組能提高肝損傷小鼠肝組織中IL-10的表達(dá)水平，能使小鼠肝組織中IFN-γ、TNF-α、NF-κB表達(dá)水平明顯降低。病理檢查，波棱瓜子總木脂素各劑量組與模型組比較，損傷程度較輕，炎性細(xì)胞浸潤也減少。提示波棱瓜子總木脂素對(duì)ConA致免疫性肝損傷作用可能與抗脂質(zhì)過氧化，清除自由基和調(diào)節(jié)Th1/Th2平衡，抑制炎性因子，促進(jìn)抗炎性因子表達(dá)，減少炎性細(xì)胞在炎癥和組織損傷區(qū)域的聚集有關(guān)。

11　丹參

宋雨鴻等[17]研究丹參多糖對(duì)BCG聯(lián)合LPS所致小鼠急性肝損傷的保護(hù)作用。采用丹參多糖高、中、低劑量組，結(jié)果丹參多糖能顯著改善免疫性肝損傷小鼠的胸腺、肝臟、脾臟系數(shù)，降低血清中ALT、AST、NO的活性以及肝組織勻漿中TNF-α、白介素1β（interleukin-1β，IL-1β）的含量，使肝細(xì)胞腫脹、壞死及炎性細(xì)胞浸潤現(xiàn)象明顯好轉(zhuǎn)。說明丹參多糖對(duì)BCG聯(lián)合LPS所致小鼠免疫性肝損傷具有顯著的保護(hù)作用，機(jī)制可能與抑制TNF-α、IL-1β和NO的產(chǎn)生有一定關(guān)系。

12　木犀草

張琦[18]研究發(fā)現(xiàn)，木犀草素預(yù)處理能顯著降低ConA所致急性免疫性肝損傷小鼠血清中ALT和AST水平，減輕肝臟炎癥細(xì)胞浸潤及減少肝細(xì)胞的凋亡。此外，木犀草素能顯著抑制關(guān)鍵致病性細(xì)胞因子TNF-α和IFN-γ的表達(dá)。說明其保護(hù)ConA誘導(dǎo)肝損傷的機(jī)制，可能與其抑制了肝內(nèi)炎癥介質(zhì)對(duì)肝臟的攻擊作用有關(guān)。

13　人參

其主要活性成分為人參皂苷，人參皂苷Rg1是人參皂苷的主要有效成分之一。楊逸等[19]探討人參皂苷Rg1對(duì)小鼠免疫性肝損傷的保護(hù)作用及機(jī)制。實(shí)驗(yàn)采用Rg1高、中、低劑量對(duì)小鼠進(jìn)行灌胃，實(shí)驗(yàn)?zāi)┎捎肅onA制備免疫性肝損傷小鼠模型，取材檢測發(fā)現(xiàn)，與模型組比較，Rg1高、中、低劑量組小鼠血清中AST、ALT含量明顯降低，中、高劑量Rg1組小鼠血清中TNF-α、IFN-γ水平明顯下降。組織學(xué)觀察顯示，Rg1各劑量組小鼠肝損傷程度明顯輕于模型組。實(shí)驗(yàn)說明Rg1對(duì)小鼠免疫性肝損傷具有一定保護(hù)作用，其機(jī)制可能與降低炎性細(xì)胞因子、減輕T淋巴細(xì)胞毒性作用有關(guān)。

14　美洲大蠊

張鵬等[20]研究美洲大蠊及其不同提取物對(duì)ConA致小鼠急性免疫性肝損傷時(shí)肝臟功能的保護(hù)作用。分別采用美洲大蠊的蟲粉混懸物、醇提取物、水提取物、醇水雙提取物對(duì)小鼠進(jìn)行灌胃，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與模型組比較，給藥組均有降低ConA致小鼠急性免疫性肝損傷肝脾指數(shù)，降低血清中ALT、AST活性和肝臟組織中MDA的活性，升高肝臟組織中的SOD、GSH的活性，減輕小鼠肝臟病理損傷。美洲大蠊及其提取物存在藥效差別，蟲粉混懸組及水提取組作用優(yōu)于其醇提取組和醇水雙提取組。說明美洲大蠊及其提取物對(duì)ConA引起的小鼠急性免疫性肝損傷具有一定保護(hù)作用。

15　金花茶

鄒登峰等[21]研究金花茶多糖(camellia chrysantha polysaccharide，CNP)對(duì)卡介苗聯(lián)合脂多糖誘導(dǎo)的免疫性肝損傷小鼠的保護(hù)作用。與模型組比較，CNP顯著降低肝臟和脾臟指數(shù)，并增加胸腺指數(shù)，同時(shí)降低肝組織中TNF-α、IL-6和NO的含量，并減輕了肝損傷病變。說明金花茶多糖能夠減輕卡介苗聯(lián)合脂多糖所致的小鼠免疫性肝損傷，CNP可能是通過抑制肝內(nèi)的炎癥反應(yīng)和細(xì)胞毒性作用來介導(dǎo)保肝作用。

16　貫葉連翹

程啟閏等[22]觀察貫葉連翹提取物(hypericum perforatum. L，HPL)對(duì)ConA誘導(dǎo)的小鼠急性免疫性肝損傷的保護(hù)作用，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與模型組比較，HPL可顯著降低小鼠肝脾指數(shù)、血清ALT、AST、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶（γ-GT）、球蛋白及膽紅素的升高水平，降低肝組織中MDA含量和Toll樣受體4(Toll-like receptors 4，TLR4)的表達(dá)，提高SOD活性，提示HPL反應(yīng)發(fā)揮肝臟保護(hù)作用。病理結(jié)果同樣顯示，HPL組小鼠肝組織損傷程度明顯減輕。提示HPL可能通過抗氧化應(yīng)激，抑制肝組織中TLR4表達(dá)，減少肝臟炎癥反應(yīng)，從而減輕肝臟損傷程度。

單味中藥及其提取物能改善動(dòng)物模型的肝功能，減輕肝組織的壞死程度，減少致炎和凋亡相關(guān)介質(zhì)的產(chǎn)生，反映出中藥及其提取物對(duì)于ILI的治療潛力巨大。初步研究表明，中藥及其提取物對(duì)ILI的保護(hù)作用是多靶點(diǎn)，多作用，多層次，多途徑，主要與抗脂質(zhì)過氧化，調(diào)節(jié)免疫功能，減少炎性介質(zhì)的產(chǎn)生有關(guān)。但是現(xiàn)階段的研究存在一些不足，今后的研究應(yīng)對(duì)以下兩個(gè)方面加以重視：⑴由于ILI機(jī)制的復(fù)雜性以及人和動(dòng)物間的種屬差別，當(dāng)前單一的動(dòng)物模型尚未能完全模擬人的ILI過程，故用單一動(dòng)物模型來驗(yàn)證藥物的療效有一定的局限性，應(yīng)建立符合疾病發(fā)展整體過程的復(fù)合動(dòng)物模型，貼近臨床實(shí)際。⑵單味中藥有效成分的提取分離以及中藥本身的不良反應(yīng)應(yīng)加以重視。研究者往往著眼于研究藥物的效果但卻忽視了對(duì)其毒理性的研究，如何判斷在對(duì)ILI具有治療作用的前題下，確定其毒理性的大小，從而能夠更好地為將來應(yīng)用于臨床提供更科學(xué)的理論依據(jù)。因而對(duì)不同種單味中藥或提取物進(jìn)行橫向比較，甄選出效果最佳，毒副作用最小的藥物，從而對(duì)進(jìn)一步研究乃至臨床開發(fā)具有更重要的應(yīng)用價(jià)值。

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（收稿：2015-06-26修回：2015-08-02）

（責(zé)任編輯張靜喆屈振亮）

R657.3

A

1007-6948(2015)05-0522-04

10.3969/j.issn.1007-6948.2015.05.027

國家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目（81370576）；天津市應(yīng)用基礎(chǔ)與前沿技術(shù)研究計(jì)劃（14JCYBJC24800）

1.天津中醫(yī)藥大學(xué)研究生院（天津 300193）

2.天津市第一中心醫(yī)院肝膽外科（天津 300192）

3.天津市第一中心醫(yī)院衛(wèi)生部危重病急救醫(yī)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室（天津 300192）

張雅敏，E-mail：zhangyamin@medmail.com.cn