九龍蟲對老年大鼠心肝自由基的影響

楊家林+潘朝旺

【摘 要】 目的：觀察九龍蟲對自然衰老大鼠心臟和肝臟自由基的影響。方法：18月齡Wistar大鼠隨機(jī)分為老年對照組、九龍蟲高、中、低劑量組，4月齡大鼠為青年對照組。給藥42天后，生化方法檢測各組大鼠心臟和肝臟組織SOD、GSH-PX活力及MDA含量。結(jié)果：與青年組比較，老年對照組大鼠心臟和肝臟MDA含量顯著升高，SOD、GSH-PX活力明顯下降，九龍蟲各劑量組均能提高大鼠心臟和肝臟SOD、GSH-PX活力，降低MDA含量。結(jié)論：九龍蟲抗衰老作用可能與提高心臟和肝臟抗氧化能力有關(guān)。

【關(guān)鍵詞】 九龍蟲；衰老；心臟；肝臟；自由基

【中圖分類號】R285.5 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A 【文章編號】1007-8517（2014）06-0023-02

衰老作為一種自然現(xiàn)象，與體內(nèi)氧自由基的含量密切相關(guān)。九龍蟲，別名“洋蟲”，在《本草綱目拾遺》和《中藥大辭典》均有記載，對多種疾病有良效。在民間，九龍蟲被廣泛用著抗衰老保健食品，本實驗旨在研究九龍蟲對自然衰老大鼠心臟和肝臟中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-PX）和丙二醛（MDA）的影響，為九龍蟲應(yīng)用于抗衰老提供理論依據(jù)。

1 材料與儀器

1.1 動物 Wistar大鼠，清潔級，18月齡40只，體重500±50g，3月齡10只，體重280±20g，雌雄各半，由三峽大學(xué)實驗動物中心提供，合格證號：SCXK（鄂）2011-0012。

1.2 藥品與試劑 九龍蟲散（自制），用前配成混懸液；丙二醛（MDA）試劑盒（20130328）；超氧化物歧化酶（SOD）試劑盒（20130617）；考馬斯亮藍(lán)試劑盒（20130408）；谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-PX）試劑盒（20130524），南京建成生物工程研究所。

1.3 儀器 高速離心機(jī)，上海安亭科學(xué)儀器公司；UV754紫外可見分光光度計，上海佑科儀器儀表有限公司。

2 方法

2.1 動物分組及給藥 將18月齡大鼠隨機(jī)分為4組，每組10只，即老年對照組、九龍蟲高劑量組、九龍蟲中劑量、九龍蟲低劑量；3月齡大鼠為青年對照組。給藥，九龍蟲高、中、低劑量組灌胃給予九龍蟲混懸液0.028、0.014、0.007g/kg·d，老年對照組和青年對照組給予生理鹽水15ml/kg·d，連續(xù)42天。末次給藥24h后，各組動物均給予10%水合氯醛（0.35ml/100g）腹腔注射麻醉，迅速打開胸腔取出心臟、打開腹腔取出肝臟，進(jìn)行相應(yīng)指標(biāo)檢測。

2.2 大鼠心臟SOD、GSH-PX活力及MDA含量 取心臟左心室，稱重，加9倍重量生理鹽水制備勻漿，按試劑盒說明進(jìn)行SOD、GSH-PX活力和MDA含量的測定。

2.3 大鼠肝臟SOD、GSH-PX活力及MDA含量 取肝臟右側(cè)葉，稱重，加9倍重量生理鹽水制備勻漿，檢測方法同心臟。

2.4 統(tǒng)計學(xué)處理 數(shù)據(jù)用spss17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計處理，各實驗組數(shù)據(jù)均采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，用t檢驗進(jìn)行顯著性檢驗。

3 結(jié)果

3.1 對衰老大鼠心臟SOD、GSH-PX活力和MDA含量的影響 與青年對照組比較，老年對照組心臟SOD、GSH-PX活力降低，而MDA含量升高，差異顯著；與老年對照組比較，九龍蟲各劑量組SOD、GSH-PX活力升高，MDA含量降低，差異顯著。見表1。

3.1 對衰老大鼠肝臟SOD、GSH-PX活力和MDA含量的影響 與青年對照組比較，老年對照組肝臟SOD、GSH-PX活力降低，而MDA含量升高，差異顯著；與老年對照組比較，九龍蟲各劑量組SOD、GSH-PX活力升高，MDA含量降低，差異有顯著性意義。見表2。

4 討論

自由基學(xué)說是目前公認(rèn)的衰老機(jī)制之一，而機(jī)體自由基產(chǎn)生的途徑有內(nèi)內(nèi)源性和外源性兩個方面，另一方面，機(jī)體內(nèi)又具有清除自由基的系統(tǒng)，使自由基在體內(nèi)維持正常水平。研究表明，隨年齡的增長，機(jī)體清除自由基的能力下降，導(dǎo)致自由基蓄積[1]。過量自由基不但可以氧化細(xì)胞膜，還可以氧化酶類、蛋白質(zhì)、核酸等生物大分子，使細(xì)胞膜上脂質(zhì)發(fā)生過氧化反應(yīng)，生物酶活力下降，蛋白質(zhì)和核酸分子交聯(lián)，導(dǎo)致細(xì)胞形態(tài)改變、功能發(fā)生障礙，最終導(dǎo)致機(jī)體衰老、死亡[2]。

抗氧化劑和抗氧化酶類組成機(jī)體抗氧化系統(tǒng)。體內(nèi)抗氧化酶類的主要成分是SOD和GSH-PX。SOD是目前發(fā)現(xiàn)唯一以自由基為底物的酶，在各種生物體內(nèi)廣泛分布，是機(jī)體內(nèi)對抗自由基的第一道防線[3]，它與GSH-PX協(xié)同作用減少脂質(zhì)過氧化，減輕其代謝產(chǎn)物對機(jī)體的損害；。研究表明，衰老動物體內(nèi)SOD活力明顯低于青年動物[4-5]。GSH-PX是一種含硒的水溶性四聚體蛋白酶，對由羥自由基和活性氧誘發(fā)的過氧化脂質(zhì)及過氧化氫有極強(qiáng)的清除能力，從而減輕自由基對機(jī)體細(xì)胞的損害。研究表明，隨年齡的增加，體內(nèi)自由基也會隨之增多，而GSH-PX的活性逐漸降低，因此可作為機(jī)體衰老的又一個重要評價指標(biāo)[6]。MDA是自由基損傷生物膜過氧化分解產(chǎn)物，間接地反映了自由基攻擊機(jī)體細(xì)胞的嚴(yán)重程度，因此是老化的重要指標(biāo)。

本實驗結(jié)果顯示，九龍蟲可以提高自然衰老大鼠心臟和肝臟組織SOD、GSH-PX活力，降低MDA含量，是其可能的抗衰老機(jī)制之一。

參考文獻(xiàn)

[1] Finkel T，Holbrook N J.Oxidants，oxidative stress and the biology of aging[J].Nature，2000，408（6809）：239.

[2] 王迪潯，金惠銘.人體病理生理學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2008：11.

[3] 劉奇，劉雪平.抗衰老學(xué)[M].北京：軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)出版社，2006：16.

[4]李應(yīng)東，王博雯，周倩倩，等.當(dāng)歸紅芪超濾物對自然衰老大鼠抗氧化作用機(jī)制的研究[J].時珍國醫(yī)國藥，2012，23（6）：1439-1441.

[5]段亞平，李媛，李姝臻.鐵筷子總黃酮對D-半乳糖致衰小鼠的抗衰老作用研究[J].華西藥學(xué)雜志，2013，28（5）：458-460.

[6] Sairam RK，Singh DV，Srivaatava GC.Changes in activities of antioxidant enzymes in sunflower leaves of different age[J].Biol Plant，2003，47（1）：61.

【摘 要】 目的：觀察九龍蟲對自然衰老大鼠心臟和肝臟自由基的影響。方法：18月齡Wistar大鼠隨機(jī)分為老年對照組、九龍蟲高、中、低劑量組，4月齡大鼠為青年對照組。給藥42天后，生化方法檢測各組大鼠心臟和肝臟組織SOD、GSH-PX活力及MDA含量。結(jié)果：與青年組比較，老年對照組大鼠心臟和肝臟MDA含量顯著升高，SOD、GSH-PX活力明顯下降，九龍蟲各劑量組均能提高大鼠心臟和肝臟SOD、GSH-PX活力，降低MDA含量。結(jié)論：九龍蟲抗衰老作用可能與提高心臟和肝臟抗氧化能力有關(guān)。

【關(guān)鍵詞】 九龍蟲；衰老；心臟；肝臟；自由基

【中圖分類號】R285.5 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A 【文章編號】1007-8517（2014）06-0023-02

衰老作為一種自然現(xiàn)象，與體內(nèi)氧自由基的含量密切相關(guān)。九龍蟲，別名“洋蟲”，在《本草綱目拾遺》和《中藥大辭典》均有記載，對多種疾病有良效。在民間，九龍蟲被廣泛用著抗衰老保健食品，本實驗旨在研究九龍蟲對自然衰老大鼠心臟和肝臟中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-PX）和丙二醛（MDA）的影響，為九龍蟲應(yīng)用于抗衰老提供理論依據(jù)。

1 材料與儀器

1.1 動物 Wistar大鼠，清潔級，18月齡40只，體重500±50g，3月齡10只，體重280±20g，雌雄各半，由三峽大學(xué)實驗動物中心提供，合格證號：SCXK（鄂）2011-0012。

1.2 藥品與試劑 九龍蟲散（自制），用前配成混懸液；丙二醛（MDA）試劑盒（20130328）；超氧化物歧化酶（SOD）試劑盒（20130617）；考馬斯亮藍(lán)試劑盒（20130408）；谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-PX）試劑盒（20130524），南京建成生物工程研究所。

1.3 儀器 高速離心機(jī)，上海安亭科學(xué)儀器公司；UV754紫外可見分光光度計，上海佑科儀器儀表有限公司。

2 方法

2.1 動物分組及給藥 將18月齡大鼠隨機(jī)分為4組，每組10只，即老年對照組、九龍蟲高劑量組、九龍蟲中劑量、九龍蟲低劑量；3月齡大鼠為青年對照組。給藥，九龍蟲高、中、低劑量組灌胃給予九龍蟲混懸液0.028、0.014、0.007g/kg·d，老年對照組和青年對照組給予生理鹽水15ml/kg·d，連續(xù)42天。末次給藥24h后，各組動物均給予10%水合氯醛（0.35ml/100g）腹腔注射麻醉，迅速打開胸腔取出心臟、打開腹腔取出肝臟，進(jìn)行相應(yīng)指標(biāo)檢測。

2.2 大鼠心臟SOD、GSH-PX活力及MDA含量 取心臟左心室，稱重，加9倍重量生理鹽水制備勻漿，按試劑盒說明進(jìn)行SOD、GSH-PX活力和MDA含量的測定。

2.3 大鼠肝臟SOD、GSH-PX活力及MDA含量 取肝臟右側(cè)葉，稱重，加9倍重量生理鹽水制備勻漿，檢測方法同心臟。

2.4 統(tǒng)計學(xué)處理 數(shù)據(jù)用spss17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計處理，各實驗組數(shù)據(jù)均采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，用t檢驗進(jìn)行顯著性檢驗。

3 結(jié)果

3.1 對衰老大鼠心臟SOD、GSH-PX活力和MDA含量的影響 與青年對照組比較，老年對照組心臟SOD、GSH-PX活力降低，而MDA含量升高，差異顯著；與老年對照組比較，九龍蟲各劑量組SOD、GSH-PX活力升高，MDA含量降低，差異顯著。見表1。

3.1 對衰老大鼠肝臟SOD、GSH-PX活力和MDA含量的影響 與青年對照組比較，老年對照組肝臟SOD、GSH-PX活力降低，而MDA含量升高，差異顯著；與老年對照組比較，九龍蟲各劑量組SOD、GSH-PX活力升高，MDA含量降低，差異有顯著性意義。見表2。

4 討論

自由基學(xué)說是目前公認(rèn)的衰老機(jī)制之一，而機(jī)體自由基產(chǎn)生的途徑有內(nèi)內(nèi)源性和外源性兩個方面，另一方面，機(jī)體內(nèi)又具有清除自由基的系統(tǒng)，使自由基在體內(nèi)維持正常水平。研究表明，隨年齡的增長，機(jī)體清除自由基的能力下降，導(dǎo)致自由基蓄積[1]。過量自由基不但可以氧化細(xì)胞膜，還可以氧化酶類、蛋白質(zhì)、核酸等生物大分子，使細(xì)胞膜上脂質(zhì)發(fā)生過氧化反應(yīng)，生物酶活力下降，蛋白質(zhì)和核酸分子交聯(lián)，導(dǎo)致細(xì)胞形態(tài)改變、功能發(fā)生障礙，最終導(dǎo)致機(jī)體衰老、死亡[2]。

抗氧化劑和抗氧化酶類組成機(jī)體抗氧化系統(tǒng)。體內(nèi)抗氧化酶類的主要成分是SOD和GSH-PX。SOD是目前發(fā)現(xiàn)唯一以自由基為底物的酶，在各種生物體內(nèi)廣泛分布，是機(jī)體內(nèi)對抗自由基的第一道防線[3]，它與GSH-PX協(xié)同作用減少脂質(zhì)過氧化，減輕其代謝產(chǎn)物對機(jī)體的損害；。研究表明，衰老動物體內(nèi)SOD活力明顯低于青年動物[4-5]。GSH-PX是一種含硒的水溶性四聚體蛋白酶，對由羥自由基和活性氧誘發(fā)的過氧化脂質(zhì)及過氧化氫有極強(qiáng)的清除能力，從而減輕自由基對機(jī)體細(xì)胞的損害。研究表明，隨年齡的增加，體內(nèi)自由基也會隨之增多，而GSH-PX的活性逐漸降低，因此可作為機(jī)體衰老的又一個重要評價指標(biāo)[6]。MDA是自由基損傷生物膜過氧化分解產(chǎn)物，間接地反映了自由基攻擊機(jī)體細(xì)胞的嚴(yán)重程度，因此是老化的重要指標(biāo)。

本實驗結(jié)果顯示，九龍蟲可以提高自然衰老大鼠心臟和肝臟組織SOD、GSH-PX活力，降低MDA含量，是其可能的抗衰老機(jī)制之一。

參考文獻(xiàn)

[1] Finkel T，Holbrook N J.Oxidants，oxidative stress and the biology of aging[J].Nature，2000，408（6809）：239.

[2] 王迪潯，金惠銘.人體病理生理學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2008：11.

[3] 劉奇，劉雪平.抗衰老學(xué)[M].北京：軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)出版社，2006：16.

[4]李應(yīng)東，王博雯，周倩倩，等.當(dāng)歸紅芪超濾物對自然衰老大鼠抗氧化作用機(jī)制的研究[J].時珍國醫(yī)國藥，2012，23（6）：1439-1441.

[5]段亞平，李媛，李姝臻.鐵筷子總黃酮對D-半乳糖致衰小鼠的抗衰老作用研究[J].華西藥學(xué)雜志，2013，28（5）：458-460.

[6] Sairam RK，Singh DV，Srivaatava GC.Changes in activities of antioxidant enzymes in sunflower leaves of different age[J].Biol Plant，2003，47（1）：61.

【摘 要】 目的：觀察九龍蟲對自然衰老大鼠心臟和肝臟自由基的影響。方法：18月齡Wistar大鼠隨機(jī)分為老年對照組、九龍蟲高、中、低劑量組，4月齡大鼠為青年對照組。給藥42天后，生化方法檢測各組大鼠心臟和肝臟組織SOD、GSH-PX活力及MDA含量。結(jié)果：與青年組比較，老年對照組大鼠心臟和肝臟MDA含量顯著升高，SOD、GSH-PX活力明顯下降，九龍蟲各劑量組均能提高大鼠心臟和肝臟SOD、GSH-PX活力，降低MDA含量。結(jié)論：九龍蟲抗衰老作用可能與提高心臟和肝臟抗氧化能力有關(guān)。

【關(guān)鍵詞】 九龍蟲；衰老；心臟；肝臟；自由基

【中圖分類號】R285.5 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A 【文章編號】1007-8517（2014）06-0023-02

衰老作為一種自然現(xiàn)象，與體內(nèi)氧自由基的含量密切相關(guān)。九龍蟲，別名“洋蟲”，在《本草綱目拾遺》和《中藥大辭典》均有記載，對多種疾病有良效。在民間，九龍蟲被廣泛用著抗衰老保健食品，本實驗旨在研究九龍蟲對自然衰老大鼠心臟和肝臟中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-PX）和丙二醛（MDA）的影響，為九龍蟲應(yīng)用于抗衰老提供理論依據(jù)。

1 材料與儀器

1.1 動物 Wistar大鼠，清潔級，18月齡40只，體重500±50g，3月齡10只，體重280±20g，雌雄各半，由三峽大學(xué)實驗動物中心提供，合格證號：SCXK（鄂）2011-0012。

1.2 藥品與試劑 九龍蟲散（自制），用前配成混懸液；丙二醛（MDA）試劑盒（20130328）；超氧化物歧化酶（SOD）試劑盒（20130617）；考馬斯亮藍(lán)試劑盒（20130408）；谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-PX）試劑盒（20130524），南京建成生物工程研究所。

1.3 儀器 高速離心機(jī)，上海安亭科學(xué)儀器公司；UV754紫外可見分光光度計，上海佑科儀器儀表有限公司。

2 方法

2.1 動物分組及給藥 將18月齡大鼠隨機(jī)分為4組，每組10只，即老年對照組、九龍蟲高劑量組、九龍蟲中劑量、九龍蟲低劑量；3月齡大鼠為青年對照組。給藥，九龍蟲高、中、低劑量組灌胃給予九龍蟲混懸液0.028、0.014、0.007g/kg·d，老年對照組和青年對照組給予生理鹽水15ml/kg·d，連續(xù)42天。末次給藥24h后，各組動物均給予10%水合氯醛（0.35ml/100g）腹腔注射麻醉，迅速打開胸腔取出心臟、打開腹腔取出肝臟，進(jìn)行相應(yīng)指標(biāo)檢測。

2.2 大鼠心臟SOD、GSH-PX活力及MDA含量 取心臟左心室，稱重，加9倍重量生理鹽水制備勻漿，按試劑盒說明進(jìn)行SOD、GSH-PX活力和MDA含量的測定。

2.3 大鼠肝臟SOD、GSH-PX活力及MDA含量 取肝臟右側(cè)葉，稱重，加9倍重量生理鹽水制備勻漿，檢測方法同心臟。

2.4 統(tǒng)計學(xué)處理 數(shù)據(jù)用spss17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計處理，各實驗組數(shù)據(jù)均采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，用t檢驗進(jìn)行顯著性檢驗。

3 結(jié)果

3.1 對衰老大鼠心臟SOD、GSH-PX活力和MDA含量的影響 與青年對照組比較，老年對照組心臟SOD、GSH-PX活力降低，而MDA含量升高，差異顯著；與老年對照組比較，九龍蟲各劑量組SOD、GSH-PX活力升高，MDA含量降低，差異顯著。見表1。

3.1 對衰老大鼠肝臟SOD、GSH-PX活力和MDA含量的影響 與青年對照組比較，老年對照組肝臟SOD、GSH-PX活力降低，而MDA含量升高，差異顯著；與老年對照組比較，九龍蟲各劑量組SOD、GSH-PX活力升高，MDA含量降低，差異有顯著性意義。見表2。

4 討論

自由基學(xué)說是目前公認(rèn)的衰老機(jī)制之一，而機(jī)體自由基產(chǎn)生的途徑有內(nèi)內(nèi)源性和外源性兩個方面，另一方面，機(jī)體內(nèi)又具有清除自由基的系統(tǒng)，使自由基在體內(nèi)維持正常水平。研究表明，隨年齡的增長，機(jī)體清除自由基的能力下降，導(dǎo)致自由基蓄積[1]。過量自由基不但可以氧化細(xì)胞膜，還可以氧化酶類、蛋白質(zhì)、核酸等生物大分子，使細(xì)胞膜上脂質(zhì)發(fā)生過氧化反應(yīng)，生物酶活力下降，蛋白質(zhì)和核酸分子交聯(lián)，導(dǎo)致細(xì)胞形態(tài)改變、功能發(fā)生障礙，最終導(dǎo)致機(jī)體衰老、死亡[2]。

抗氧化劑和抗氧化酶類組成機(jī)體抗氧化系統(tǒng)。體內(nèi)抗氧化酶類的主要成分是SOD和GSH-PX。SOD是目前發(fā)現(xiàn)唯一以自由基為底物的酶，在各種生物體內(nèi)廣泛分布，是機(jī)體內(nèi)對抗自由基的第一道防線[3]，它與GSH-PX協(xié)同作用減少脂質(zhì)過氧化，減輕其代謝產(chǎn)物對機(jī)體的損害；。研究表明，衰老動物體內(nèi)SOD活力明顯低于青年動物[4-5]。GSH-PX是一種含硒的水溶性四聚體蛋白酶，對由羥自由基和活性氧誘發(fā)的過氧化脂質(zhì)及過氧化氫有極強(qiáng)的清除能力，從而減輕自由基對機(jī)體細(xì)胞的損害。研究表明，隨年齡的增加，體內(nèi)自由基也會隨之增多，而GSH-PX的活性逐漸降低，因此可作為機(jī)體衰老的又一個重要評價指標(biāo)[6]。MDA是自由基損傷生物膜過氧化分解產(chǎn)物，間接地反映了自由基攻擊機(jī)體細(xì)胞的嚴(yán)重程度，因此是老化的重要指標(biāo)。

本實驗結(jié)果顯示，九龍蟲可以提高自然衰老大鼠心臟和肝臟組織SOD、GSH-PX活力，降低MDA含量，是其可能的抗衰老機(jī)制之一。

參考文獻(xiàn)

[1] Finkel T，Holbrook N J.Oxidants，oxidative stress and the biology of aging[J].Nature，2000，408（6809）：239.

[2] 王迪潯，金惠銘.人體病理生理學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2008：11.

[3] 劉奇，劉雪平.抗衰老學(xué)[M].北京：軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)出版社，2006：16.

[4]李應(yīng)東，王博雯，周倩倩，等.當(dāng)歸紅芪超濾物對自然衰老大鼠抗氧化作用機(jī)制的研究[J].時珍國醫(yī)國藥，2012，23（6）：1439-1441.

[5]段亞平，李媛，李姝臻.鐵筷子總黃酮對D-半乳糖致衰小鼠的抗衰老作用研究[J].華西藥學(xué)雜志，2013，28（5）：458-460.

[6] Sairam RK，Singh DV，Srivaatava GC.Changes in activities of antioxidant enzymes in sunflower leaves of different age[J].Biol Plant，2003，47（1）：61.