燒傷創(chuàng)面內(nèi)表皮生長(zhǎng)因子與表皮生長(zhǎng)因子受體蛋白變化的臨床研究

孫傳英

燒傷創(chuàng)面內(nèi)表皮生長(zhǎng)因子與表皮生長(zhǎng)因子受體蛋白變化的臨床研究

孫傳英

北京朝陽(yáng)急診搶救中心 燒傷整形科 北京 100122

目的 觀察表皮生長(zhǎng)因子受體( EGFr ) 與燒傷創(chuàng)面內(nèi)表皮生長(zhǎng)因子（EGF）的變化，探討創(chuàng)傷部分的內(nèi)表皮生長(zhǎng)因子和表皮的生長(zhǎng)因子受體蛋白的變化。方法 對(duì)35 位病人不同的創(chuàng)面燒傷部位的EGFr 蛋白和EGF 蛋白的表達(dá)強(qiáng)弱以及蛋白分布情況進(jìn)行觀察。結(jié)果 在燒傷創(chuàng)面內(nèi)，EGF 蛋白和EGFr 蛋白表達(dá)的很一致，表現(xiàn)最強(qiáng)的部分是創(chuàng)面上皮愈合邊緣，其次是創(chuàng)面中心的肉芽部位。在傷口已經(jīng)愈合的部分兩種蛋白表達(dá)相對(duì)減弱，并且在正常沒(méi)有燒傷的皮膚上，這兩種蛋白沒(méi)有明顯的表達(dá)。結(jié)論 受體蛋白在燒傷創(chuàng)面內(nèi)表皮生長(zhǎng)因子與表皮生長(zhǎng)因子的變化情況和創(chuàng)傷的部位有關(guān)，不同的部位蛋白表達(dá)的強(qiáng)度以及分布的情況不同。并且通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)EGF、EGFr 這兩種蛋白的表達(dá)能夠促進(jìn)傷口的愈合，在傷口愈合當(dāng)中這兩種蛋白的表達(dá)也很明顯。

EGFr 蛋白和EGF 蛋白；表皮生長(zhǎng)因子；表皮生長(zhǎng)因子受體

1 資 料 和 方 法

1.1 一般資料

本組燒傷病人30 例，女10 例，男20例。平均年齡35歲。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

經(jīng)過(guò)了病人的允許后，對(duì)創(chuàng)面的每個(gè)部分都進(jìn)行的提取作為實(shí)驗(yàn)的標(biāo)本和參照。標(biāo)本大小在1cm3左右，放在4%的多聚甲醛液固定待用。通過(guò)免疫組織化學(xué)染色觀測(cè)組織中EGF、EGFr 蛋白的含量和分布。所有的標(biāo)準(zhǔn)均在光鏡下放大相同的倍數(shù)，這樣有利于觀察和統(tǒng)計(jì)。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中要控制變量，進(jìn)行準(zhǔn)確的觀察和統(tǒng)計(jì)[1]。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

統(tǒng)計(jì)的時(shí)候，不同部位的標(biāo)本統(tǒng)計(jì)的時(shí)候避免偶然性，都會(huì)操作多次然后選取平均數(shù)，而且要通過(guò)相應(yīng)的嚴(yán)格的計(jì)算來(lái)保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和可用性。

2 結(jié) 果

2.1 組織學(xué)變化

觀察創(chuàng)面的每個(gè)部分的動(dòng)態(tài)變化，通過(guò)對(duì)標(biāo)本的愈合的動(dòng)態(tài)過(guò)程進(jìn)行觀察，觀察到的內(nèi)容簡(jiǎn)述如下：有著豐富的毛細(xì)血管和成纖維細(xì)胞的創(chuàng)面中心部分是肉芽組織，明顯增厚，毛細(xì)血管擴(kuò)張，組織間隙滲出水腫。在創(chuàng)面邊緣的細(xì)胞出現(xiàn)了增生的現(xiàn)象，而且表皮的細(xì)胞向中間進(jìn)行伸展和延伸，通過(guò)從邊緣向中間移動(dòng)的方式實(shí)現(xiàn)傷口的愈合，有的甚至延伸到脫離了創(chuàng)面邊緣的表皮。在整個(gè)的愈合過(guò)程中毛細(xì)血管相對(duì)較少，新生的細(xì)胞很多，緊密的排列在一起，而且與表皮相對(duì)平行。

2.2 EGF 蛋白和EGFr 蛋白變化

EGF 蛋白和EGFr 蛋白明顯一致地表達(dá)在燒傷創(chuàng)面內(nèi)，表現(xiàn)最強(qiáng)的部分是創(chuàng)面上皮愈合邊緣。強(qiáng)度在++～+++ 之間，每視野內(nèi)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量 EGF 達(dá)到（36.1±5.6）mg/L；其次是創(chuàng)面中心的肉芽部位，表達(dá)強(qiáng)度在 ++ 時(shí)，每視野內(nèi)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量 EGF 達(dá)到（22.1±5.2）mg/L，EGFr 達(dá)到（24.31±4.5）mg/L。在傷口已經(jīng)愈合的部分兩種蛋白表達(dá)相對(duì)減弱，表達(dá)強(qiáng)度為+，每視野陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量分別在（12.1±3.8）mg/L和（10.3±4.5）mg/L，并且在正常沒(méi)有燒傷的皮膚上，這兩種蛋白沒(méi)有明顯的表達(dá)。通過(guò)計(jì)算和統(tǒng)計(jì)來(lái)滿足數(shù)據(jù)的可用性和科學(xué)性。

3 討 論

創(chuàng)傷的修復(fù)過(guò)程是很漫長(zhǎng)很復(fù)雜的過(guò)程，中間通常是一系列的化學(xué)反應(yīng)[2]。在整個(gè)的修復(fù)過(guò)程中，都是整個(gè)機(jī)體和組織之間相互協(xié)調(diào)和作用的過(guò)程，在修復(fù)的過(guò)程中，表達(dá)和不表達(dá)之間相互抑制，在促進(jìn)增殖方面是通過(guò)細(xì)胞分裂等方式進(jìn)行傷口的愈合，但是也會(huì)達(dá)到接觸性抑制，完成細(xì)胞的增殖分裂；另一方面在抑制增殖的時(shí)候，有些細(xì)胞因子也會(huì)參與作用，促進(jìn)細(xì)胞的凋亡來(lái)抑制修復(fù)過(guò)程[3]。EGF是可以加快細(xì)胞分裂的，可以促進(jìn)增殖，可以增加細(xì)胞的遷移以及改變細(xì)胞的某些特性，對(duì)于傷口修復(fù)來(lái)說(shuō)是起到積極影響的。在各種肌膚損害當(dāng)中，這種物質(zhì)對(duì)于肌膚愈合有明顯的效果。

以遠(yuǎn)離創(chuàng)面的正常皮膚為對(duì)照，以三度燒傷創(chuàng)面的每個(gè)部分為標(biāo)準(zhǔn)，觀察在修復(fù)過(guò)程中蛋白的變化，來(lái)探討傷口愈合的機(jī)制，希望為治療提供幫助和依據(jù)。其中蛋白的表達(dá)都有著自己的記錄，對(duì)于以后臨床的研究也是十分有意義的。

本研究的組織學(xué)觀察證實(shí)：創(chuàng)傷面的邊緣部分是創(chuàng)面修復(fù)最重要的部位。因?yàn)檫@一部分蛋白的表達(dá)很活躍，而且通過(guò)從邊緣向中心修復(fù)的方法來(lái)實(shí)現(xiàn)創(chuàng)面的修復(fù)。這種修復(fù)方法很有效率，所以說(shuō)這一部分的組織對(duì)于創(chuàng)面的修復(fù)來(lái)說(shuō)十分重要，希望通過(guò)我們的研究對(duì)以后治療的研究有一定的引導(dǎo)作用，也為臨床的研究提供相關(guān)的依據(jù)。

在整個(gè)創(chuàng)面的修復(fù)過(guò)程中，EGF、EGF兩種物質(zhì)的的動(dòng)態(tài)變化表明：在創(chuàng)面肉芽組織的邊緣部位 EGF 和EGFr 表達(dá)最強(qiáng)，也就是說(shuō)這一個(gè)部分對(duì)于創(chuàng)傷的修復(fù)是十分重要的。起到了很關(guān)鍵的作用。是對(duì)創(chuàng)面的修復(fù)起到促進(jìn)作用的地方。其他的地方蛋白的表達(dá)減弱，尤其是在已經(jīng)愈合的創(chuàng)面上，這種蛋白的表達(dá)幾乎沒(méi)有，這也正好說(shuō)明了這兩種物質(zhì)的表達(dá)對(duì)于創(chuàng)傷的修復(fù)有促進(jìn)作用，甚至可以說(shuō)整個(gè)修復(fù)作用都要靠這兩種蛋白的表達(dá)得以實(shí)現(xiàn)。這兩種蛋白的表達(dá)有助于生長(zhǎng)因子發(fā)揮作用，能讓創(chuàng)緣上皮細(xì)胞向創(chuàng)面遷移，完成創(chuàng)面的愈合[4]。這兩種蛋白表達(dá)較弱的意義可以說(shuō)是創(chuàng)面完成愈合的時(shí)候細(xì)胞快速分裂，達(dá)到一定程度的時(shí)候細(xì)胞分裂減緩了，出現(xiàn)了接觸抑制的現(xiàn)象。

任何物質(zhì)在發(fā)揮作用的時(shí)候，尤其是蛋白質(zhì)，就一定要先結(jié)合細(xì)胞膜上的特異性受體，然后才能把促進(jìn)增值或者是促進(jìn)其他的信號(hào)傳入到細(xì)胞里面，完成了這些之后才能引起一系列的信息傳遞，達(dá)到增殖的目的，EGF也如此。就像我們這次的研究一樣，EGF、EGF兩種物質(zhì)的同期高表達(dá)，是愈合過(guò)程中的機(jī)體反應(yīng)，這兩種物質(zhì)的發(fā)揮有利于機(jī)體的修復(fù)。在其他的地方，比如說(shuō)傷口已經(jīng)愈合的地方，這兩種物質(zhì)也有輕微的表達(dá)，作用就是能過(guò)在創(chuàng)面完成修復(fù)的時(shí)候讓機(jī)體產(chǎn)生抑制的作用，不再進(jìn)行細(xì)胞的分裂和增殖。通過(guò)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，這種抑制也是對(duì)創(chuàng)傷恢復(fù)是有利的，可以防止疤痕的產(chǎn)生。如果這種抑制現(xiàn)象不明顯的話或發(fā)生的有問(wèn)題就會(huì)出現(xiàn)各種皮膚恢復(fù)問(wèn)題，如長(zhǎng)期潰瘍等[5]。所以說(shuō)，這兩種物質(zhì)的分泌有很多醫(yī)療的效果，對(duì)創(chuàng)傷的愈合也是一個(gè)長(zhǎng)久的話題，我們?cè)谶@方面的研究任重而道遠(yuǎn)。通過(guò)研究可以發(fā)現(xiàn)：通過(guò)轉(zhuǎn)入EGF基因的方法能夠使基因表達(dá)，產(chǎn)生蛋白質(zhì)，這樣對(duì)于傷口愈合有著很明顯的恢復(fù)效果，這對(duì)于許多需要恢復(fù)的創(chuàng)傷來(lái)說(shuō)提供了一個(gè)很好的治療方法，避免了很多問(wèn)題，縮短了恢復(fù)的時(shí)間，也能一定程度上解決產(chǎn)生傷疤的問(wèn)題。至于更深入的研究，是今后需要解決的問(wèn)題。

[1]谷廷敏,牛星燾,陳東明,等.創(chuàng)面愈合過(guò)程中EGF、EGFr 變化的臨床研究[J].中華燒傷外科雜志,2001,17(1):3-5.

[2]谷廷敏,牛星燾,陳東明.等.創(chuàng)面愈合過(guò)程中EGF基因表達(dá)變化的研究[J].中國(guó)修復(fù)重建外科雜志,1996,(03):133-135.

[3]徐榮祥,蕭摩.燒傷皮膚再生療法與創(chuàng)面愈合的機(jī)制[J].中國(guó)燒傷創(chuàng)瘍雜志,2003,15(04):253-271.

[4]王配合.表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子和堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子促進(jìn)燒傷創(chuàng)面愈合的療效比較[J].臨床軍醫(yī)雜志,2004,32(02):35-37.

[5]張憲發(fā),梁自乾.應(yīng)用表皮生長(zhǎng)因子治療深Ⅱ度燒傷創(chuàng)面療效的Meta分析[J].中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù)，2011,15(41):7779-7782.

孫傳英(1974-)，女，主治醫(yī)師。主要從事：燒傷危重治療，創(chuàng)面修復(fù)基礎(chǔ)研究，畸形矯正工作。