新型藥用輔料預(yù)膠化羥丙基淀粉中丙二醇的測定

帥放文，章家偉，王向峰，張婷，周瀟宇，周宏灝

新型藥用輔料預(yù)膠化羥丙基淀粉中丙二醇的測定

帥放文1，2，3，章家偉2，3，王向峰2，3，張婷2，3，周瀟宇2，3，周宏灝1

(1.中南大學(xué)臨床藥理研究所，長沙 410078；2.湖南爾康制藥股份有限公司，長沙 410331；3.湖南省藥用輔料工程技術(shù)研究中心，長沙 410331)

目的 建立預(yù)膠化羥丙基淀粉中丙二醇含量的氣相色譜測定方法。方法 采用氣相色譜法，色譜柱為DB-624柱(30 m×0.32 mm，1.80 μm)，柱溫為110 ℃；進(jìn)樣口溫度為180 ℃；FID檢測器溫度為250 ℃。結(jié)果 丙二醇含量在12～28 μg·mL-1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，(r=0.999 5)；低、中、高濃度丙二醇平均回收率分別為101.5%，100.2%，99.1%；RSD分別為0.6%，1.0%，0.3%。3批樣品中有關(guān)物質(zhì)丙二醇的含量均<0.1%。結(jié)論 該方法靈敏度、精密度均達(dá)到有機(jī)溶劑殘留量的檢測要求，可用于預(yù)膠化羥丙基淀粉中丙二醇含量的檢測。

丙二醇；羥丙基淀粉，預(yù)膠化；色譜法，氣相

藥用膠囊是一種藥品輔料，主要是供藥廠用于生產(chǎn)各種膠囊類藥品[1]?！般t膠囊事件”和“皮革廢料熬制明膠事件”一次又一次挑戰(zhàn)人們的底線。值得注意的是，“毒膠囊”經(jīng)檢測重金屬鉻超標(biāo)，而皮革廢料熬制明膠中藥用明膠、食用明膠，不僅從產(chǎn)品外觀上很難發(fā)現(xiàn)問題，而且依照現(xiàn)行國家標(biāo)準(zhǔn)檢測，竟然都屬于合格產(chǎn)品[2-3]。如何防止毒明膠事件的再次發(fā)生，成為當(dāng)今醫(yī)藥領(lǐng)域的重中之重。

預(yù)膠化羥丙基淀粉是以羥丙基淀粉為原料，在加熱或不加熱狀態(tài)下經(jīng)物理方法破壞部分或全部淀粉粒后制備而得，是制作植物性膠囊的優(yōu)質(zhì)材料。以其制備得到的淀粉膠囊與明膠膠囊相比，具有不易變質(zhì)、無交聯(lián)反應(yīng)、穩(wěn)定性好、無需添加防腐劑、不被吸收、安全性高等多重優(yōu)點(diǎn)，因而在醫(yī)藥和其他領(lǐng)域具有顯著的替代傳統(tǒng)明膠膠囊的前景[4]。

羥丙基淀粉在高溫、強(qiáng)酸、強(qiáng)堿等劇烈條件下，醚鍵可能斷裂，導(dǎo)致羥丙基從淀粉上脫落生成1，2-丙二醇，從而降低羥丙基含量，影響產(chǎn)品質(zhì)量，根據(jù)《中華人民共和國藥典》2010年版二部附錄XIX F藥用雜質(zhì)分析指導(dǎo)原則，對在合成中實(shí)際存在的雜質(zhì)和潛在的雜質(zhì)，應(yīng)采取有效的分離分析方法進(jìn)行檢測[5]。

《美國藥典》質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中[6]收載了丙二醇檢查項(xiàng)目，以1，3-丙二醇為內(nèi)標(biāo)物，無水吡啶為溶劑，通過水浴回流提取，氣相檢測的方式測定1，2-丙二醇的含量，限度為0.1%。吡啶為有毒試劑，有強(qiáng)烈刺激性；能麻醉中樞神經(jīng)系統(tǒng)，長期吸入出現(xiàn)頭暈、頭痛、失眠、步態(tài)不穩(wěn)及消化功能紊亂?？紤]到1，2-丙二醇屬于有機(jī)醇類，與乙醇互溶，筆者以乙醇為溶劑，采用氣相色譜法測定預(yù)膠化羥丙基淀粉中丙二醇含量，報道如下。

1 儀器與試劑

1.1 儀器 島津2010型氣相色譜儀；火焰離子檢測器(FID檢測器)；Mettler XS205型電子天平(感量0.01 mg)。

1.2 試劑 1，2丙二醇對照品(中國食品藥品檢定研究院，批號：190001-201202，含量為99.8%)；乙醇為分析純(天津大茂化學(xué)試劑廠)；預(yù)膠化羥丙基淀粉樣品為中山市凱博思淀粉材料科技有限公司試制產(chǎn)品，批號分別為20140201，20140202，20140203。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件 色譜柱：DB-624(6%氰丙基苯+94%甲基聚硅氧)毛細(xì)管柱(30 m×0.32 mm，1.80 μm)；柱溫為110 ℃；進(jìn)樣口溫度為180 ℃；FID檢測器，檢測器溫度為250 ℃；分流比10：1。載氣：氮?dú)?N2)，流速1.1 mL·min-1。

2.2 溶液的制備

2.2.1 供試品溶液 取批號為20140201樣品約2.0 g，精密稱定，置100 mL量瓶中，加乙醇適量，超聲處理10 min，用乙醇稀釋至刻度，搖勻，3 000 r·min-1(r=13.5 cm)離心10 min，取上清液，濾過，作為供試品溶液。

2.2.2 丙二醇對照品溶液 取丙二醇對照品適量，精密稱定，用乙醇稀釋并制成每毫升約含20 μg的溶液，作為對照品溶液。

2.3 系統(tǒng)適用性評價 取乙醇、對照品溶液、供試品溶液按“2.1”項(xiàng)下色譜條件分別進(jìn)樣，結(jié)果表明，丙二醇峰的理論板數(shù)為45 268.514；分離度為22.325；空白溶劑對丙二醇含量的測定無干擾(圖1)。擬定的色譜條件能夠用于預(yù)膠化羥丙基淀粉中丙二醇有關(guān)物質(zhì)的檢測。

A.空白溶液；B對照品溶液；C供試品溶液；1.乙醇；2.丙二醇

2.4 線性關(guān)系考察 取丙二醇對照品適量，精密稱定，用乙醇稀釋并制成每毫升含約200 μg的溶液，作為對照品貯備液，并精密移取1.5，2.0，2.5，3.0，3.5 mL，分別置25 mL量瓶中，加乙醇稀釋并定容至刻度，搖勻，即得丙二醇系列線性濃度的溶液。取上述丙二醇線性溶液按上述色譜條件分別進(jìn)樣。以峰面積(A)對濃度(C)作線性回歸，得回歸方程為：A=678.75C-809.74，r=0.999 5。結(jié)果表明，在12～28 μg·mL-1范圍內(nèi)，丙二醇呈良好的線性關(guān)系。

2.5 檢測限和定量限 取丙二醇最低濃度線性溶液，加乙醇逐級稀釋成一定濃度的溶液，分別作為丙二醇的定量限溶液與檢測限溶液。取丙二醇定量限溶液進(jìn)樣，S/N為9.6，連續(xù)進(jìn)樣10次，以確定丙二醇的定量限，RSD為3.5%(n=10)。丙二醇的定量限為152.4 ng，檢測限度為48.3 ng。

2.6 精密度實(shí)驗(yàn) 取對照品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次，其含量的RSD為1.4%，精密度好。

2.7 重復(fù)性實(shí)驗(yàn) 取批號20140201樣品6份，分別按供試品溶液的制備方法制備并測定，其含量的RSD為2.3%，重復(fù)性良好。

2.8 回收率實(shí)驗(yàn) 精密稱取批號20140201樣品約500 mg，共10份，分別置50 mL量瓶中，其中1號溶液不加丙二醇貯備液，另外9份分成3份一組，分別精密加入“2.4”項(xiàng)制備的丙二醇貯備液4.0，5.0，6.0 mL，再分別加乙醇適量，超聲10 min，用乙醇稀釋至刻度，搖勻，3 000 r·min-1(r=13.5 cm)離心10 min，取上清液，濾過，制成供試品溶液1份和低、中、高濃度的回收率溶液各3份，搖勻。

精密量取上述10份溶液各1 μL注入氣相色譜儀，測定，記錄色譜圖，按“2.4”項(xiàng)中的線性公式計算測得量。1號溶液稱樣量為0.512 3 g，測得樣品溶液中丙二醇濃度為1.765 6 μg·mL-1，即丙二醇含量為0.02%。

精密量取上述溶液各1 μL注入氣相色譜儀，測定，記錄色譜圖，按上述線性關(guān)系考察中的線性公式計算測得量，并計算回收率。結(jié)果見表1。

表1 丙二醇回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.9 溶液穩(wěn)定性 取“2.2.1”項(xiàng)制備的供試品溶液1 μL，在上述的氣相色譜條件下，于0，2，4，6，8，12 h分別進(jìn)樣，其峰面積的RSD為1.6%，說明被測溶液的穩(wěn)定性較好。

2.10 樣品的測定 按“2.2.1”項(xiàng)方法處理3批樣品，按上述色譜條件操作，用外標(biāo)法計算樣品中丙二醇的含量，分別為0.02%，0.04%，0.03%。

3 討論

筆者采用氣相色譜法，選用中等極性的DB-624毛細(xì)管色譜柱，以乙醇為溶劑，經(jīng)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室評價、精密度實(shí)驗(yàn)、檢測限和定量限實(shí)驗(yàn)證實(shí)該檢測方法操作簡便，靈敏度高，適用于預(yù)膠化羥丙基淀粉中丙二醇的檢測。結(jié)果表明，3批樣品中均含有微量丙二醇，但丙二醇的含量均<0.1%。因此，為了確保預(yù)膠化羥丙基淀粉的質(zhì)量，在生產(chǎn)中必須嚴(yán)格控制預(yù)膠化羥丙基淀粉中的丙二醇，這對于控制以預(yù)膠化羥丙基淀粉為原料的藥用膠囊的質(zhì)量穩(wěn)定和用藥安全也具有極其重要的實(shí)用價值與意義。

[1] 李承獻(xiàn).明膠在膠囊中的應(yīng)用(一)[J].明膠科學(xué)與技術(shù)，2012，32(1)：40-46.

[2] 謝蘭桂，王健，趙霞，等.波長色散X射線熒光法快速篩查鉻超標(biāo)明膠膠囊[J].藥物分析雜志，2013，33(2)：286-291.

[3] 賴弈堅，黃伙水，鄒亞娟，等.空心明膠膠囊中鉻含量的快速測定[J].光譜實(shí)驗(yàn)室，2013，30(4)：1777-1780.

[4] 黃祖強(qiáng)，黃科林，胡華宇，等.一種復(fù)合改性預(yù)膠化淀粉及其制備方法：中國，CN102952199A[P].2013-03-06.

[5] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(二部)[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：附錄204-206.

[6] 美國藥典委員會.美國藥典[M].35版.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2012：5896-5898.

2014-04-28

2014-08-20

帥放文(1966-)，男，湖南益陽人，教授，博士，從事新藥研發(fā)工作。電話：0731-84659105，E-mail：317236941@qq.com。

周宏灝(1939-)，男，教授，湖南長沙人，中國工程院院士，從事遺傳藥理學(xué)、臨床藥理學(xué)研究工作。電話：0731-84659105，E-mail：731766534@qq.com。

R943；R927.2

B

1004-0781(2015)09-1207-03

10.3870/j.issn.1004-0781.2015.09.025