鉤藤總堿對(duì)高血壓動(dòng)脈壓力感受反射和對(duì)高血壓靶器官的作用*

劉葉玲，王中師，張?jiān)S

·心血管系統(tǒng)用藥專欄·

鉤藤總堿對(duì)高血壓動(dòng)脈壓力感受反射和對(duì)高血壓靶器官的作用*

劉葉玲1，王中師2，張?jiān)S3

(1.山東省泰安市中心醫(yī)院藥品采購(gòu)辦公室，泰安 271000；2.山東省威海市立醫(yī)院藥劑科，威海 264200；3.泰山醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院藥劑科，泰安 271000)

目的 觀察鉤藤總堿對(duì)高血壓靶器官的作用。方法 自發(fā)性高血壓模型大鼠40只，隨機(jī)分為4組，正常對(duì)照組、天麻鉤藤飲組、鉤藤總堿小劑量組和鉤藤總堿大劑量組，每組10只，分別口服普通飼料、天麻鉤藤飲顆粒(750 mg·d-1)、鉤藤總堿2.5，15.0 mg·d-1。采用改良的Smyth方法測(cè)定各組大鼠的動(dòng)脈壓力感受反射功能，20周后，取大鼠心、腦、腎，進(jìn)行組織學(xué)觀察。結(jié)果 正常對(duì)照組、天麻鉤藤飲組、鉤藤總堿小劑量組和鉤藤總堿大劑量組第16周動(dòng)脈壓力感受反射敏感性分別為(0.27±0.05)，(0.31±0.06)，(0.35±0.08)，(0.34±0.08) ms·mmHg-1。 正常對(duì)照組大鼠動(dòng)脈壓力感受反射功能降低，而其他各用藥組沒(méi)有降低；給藥組大鼠可見(jiàn)心肌結(jié)構(gòu)顯著優(yōu)于正常對(duì)照組，腦組織和腎小球結(jié)構(gòu)未見(jiàn)顯著改善。結(jié)論 鉤藤總堿對(duì)高血壓靶器官心臟有保護(hù)作用。

鉤藤總堿；高血壓；損傷，靶器官；動(dòng)脈壓力感受反射

中藥成方天麻鉤藤飲常用于治療“肝陽(yáng)上亢”，其君藥鉤藤的主要部位是生物堿。研究表明，鉤藤總堿有明確的抗高血壓作用[1]。但是，鉤藤總堿對(duì)高血壓靶器官的作用并不明確。而改善動(dòng)脈壓力感受反射功能有利于保護(hù)高血壓靶器官[2]。為此，筆者觀察了鉤藤總堿對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠動(dòng)脈壓力感受反射的作用和對(duì)高血壓靶器官的作用。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物 自發(fā)性高血壓大鼠[清潔級(jí)，第二軍醫(yī)大學(xué)藥理學(xué)教研室惠贈(zèng)，動(dòng)物合格證：1256093，使用許可證號(hào)：SYXK(軍)2012-0045]，20周齡，雄性，體質(zhì)量220～280 g。無(wú)創(chuàng)尾動(dòng)脈測(cè)壓，收縮壓不低于150 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)，40只。飼養(yǎng)環(huán)境室溫25 ℃，濕度40%～70%，光照、黑暗12 h交替，自由飲水。

1.2 試劑與儀器 天麻鉤藤飲顆粒(成都九芝堂金鼎藥業(yè)有限公司，批號(hào)：090418)，鉤藤購(gòu)自廣西壯族自治區(qū)，經(jīng)泰山醫(yī)學(xué)院趙雪梅教授鑒定為鉤藤[Uncariaerhynchophylla(Miq)Jacks]。提取鉤藤總堿[3]，總生物堿含量約為95.0%，其中鉤藤堿的含量11.9%，異鉤藤堿含量6.9%。清醒自由活動(dòng)大鼠動(dòng)態(tài)血壓監(jiān)測(cè)裝置[由單通道轉(zhuǎn)動(dòng)裝置(美國(guó)Spalding Medical Products)，灌注三通管(法國(guó)Plastimed Co.)，PT14M2壓力換能器(復(fù)旦大學(xué)電子工程系)，ADS-1A12位A/D轉(zhuǎn)換板(中國(guó)科學(xué)院聲學(xué)研究所)，MPA-2000信號(hào)放大和分析系統(tǒng)(第二軍醫(yī)大學(xué))組成]由泰山醫(yī)學(xué)院藥理學(xué)教研室提供。

1.3 動(dòng)物分組 將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物采用隨機(jī)數(shù)字表隨機(jī)分為4組，分別是正常對(duì)照組、天麻鉤藤飲組、鉤藤總堿小劑量組和大劑量組，每組10只。按照每千克飼料含鉤藤總堿0.1，0.6 g或含天麻鉤藤飲顆粒31.2 g，將藥物摻入標(biāo)準(zhǔn)飼料的料粉中，混勻機(jī)混勻，壓制3種藥物飼料。在不限制飲水的情況下，鉤藤總堿組和天麻鉤藤飲組每籠2或3只大鼠每天給予藥物飼料60或90 g，如有耗盡，及時(shí)補(bǔ)充標(biāo)準(zhǔn)飼料。照此計(jì)算，鉤藤總堿小劑量組口服鉤藤總堿2.5 mg·d-1，鉤藤總堿大劑量組口服鉤藤總堿15.0 mg·d-1，天麻鉤藤飲組口服天麻鉤藤飲顆粒750 mg·d-1(按鉤藤總堿含量1%～2%計(jì)，含鉤藤總堿7.5～15.0 mg·d-1)。正常對(duì)照組大鼠灌服標(biāo)準(zhǔn)飼料。

1.4 測(cè)定指標(biāo) 飼養(yǎng)期間注意觀察毛色變化，每4周稱質(zhì)量。按改良的Smyth方法[4]用清醒自由活動(dòng)大鼠動(dòng)態(tài)血壓監(jiān)測(cè)裝置測(cè)定各組大鼠的動(dòng)脈壓力感受反射功能。脫機(jī)后繼續(xù)飼養(yǎng)，20周后(或20周內(nèi)死亡)大鼠立刻腹腔注射10%水合氯醛(2 mL·kg-1)麻醉，取心、腦、右側(cè)腎臟，0.9%氯化鈉溶液洗凈，10%甲醛溶液固定，不同濃度乙醇脫水，二甲苯浸泡，石蠟包埋，切片，蘇木精-伊紅染色，中性樹(shù)膠封片。光學(xué)顯微鏡下觀察組織形態(tài)變化。

2 結(jié)果

2.1 鉤藤總堿對(duì)大鼠BRS的作用 正常對(duì)照組大鼠動(dòng)脈壓力感受反射功能呈降低趨勢(shì)，其他各組無(wú)明顯改變(天麻鉤藤飲組和鉤藤總堿大劑量組分別死亡2，4只)。與正常對(duì)照組比較，第16周以后，用藥組的BRS均上升。見(jiàn)表1。

2.2 鉤藤總堿對(duì)高血壓靶器官的作用 鏡下觀察正常對(duì)照組大鼠心臟小血管擴(kuò)張充血、心肌纖維偶有斷裂；腎小球結(jié)構(gòu)清晰，腎小動(dòng)脈充血，有上皮空泡樣變；腦組織正常，膠質(zhì)細(xì)胞沒(méi)有明顯改變，但有小血管擴(kuò)張充血。鉤藤總堿大劑量組大鼠鏡下可見(jiàn)心臟血管和心肌結(jié)構(gòu)正常；腎小球結(jié)構(gòu)正常；腦組織結(jié)構(gòu)正常，但膠質(zhì)細(xì)胞明顯增多(圖1，表2)。

3 討論

在2～200 mg·kg-1范圍內(nèi)，單劑量鉤藤總堿有明確的抗高血壓作用[1]，體外還有保護(hù)海馬神經(jīng)元對(duì)抗急性缺氧損傷的作用[5]，可誘導(dǎo)胸主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞凋亡[6]，提示鉤藤總堿對(duì)高血壓靶器官有保護(hù)作用。本研究通過(guò)對(duì)長(zhǎng)期口服鉤藤總堿自發(fā)性高血壓大鼠的動(dòng)脈壓力感受功能和心、腦、腎等靶器官的組織形態(tài)考察，為闡明鉤藤總堿對(duì)高血壓靶器官的作用提供直接證據(jù)。

BRS是反映動(dòng)脈壓力感受反射功能的指標(biāo)，也是獨(dú)立于血壓之外反映高血壓靶器官損傷的指標(biāo)，BRS降低與高血壓導(dǎo)致的靶器官損傷呈正相關(guān)[7]。一些改善動(dòng)脈壓力感受反射功能的藥物，如天麻素[7]，即使不產(chǎn)生降壓作用，仍然對(duì)高血壓靶器官有保護(hù)作用。理想的抗高血壓藥不僅能降低血壓，而且能改善動(dòng)脈壓力感受反射功能。本研究結(jié)果表明，自發(fā)性高血壓大鼠口服鉤藤總堿16周以后與同樣條件下沒(méi)有用藥者比較，BRS有明顯的改善，說(shuō)明鉤藤總堿對(duì)高血壓靶器官有保護(hù)作用。

表1 4組大鼠動(dòng)脈壓力感受反射性比較

與正常對(duì)照組比較，F(xiàn)=1.67～2.31，*1P<0.05Compared with normol control group，F(xiàn)=1.67-2.31，*1P<0.05

圖1 2組大鼠心、腦、腎組織病理學(xué)圖(×100)

表2 4組大鼠高血壓靶器官的評(píng)分比較

Tab.2 Comparison of scores on hypertensive target organs among four groups of rats 分

組織形態(tài)考察結(jié)果表明，與不用藥的自發(fā)性高血壓大鼠比較，用藥后心肌形態(tài)有改善，但對(duì)腎臟和腦的保護(hù)作用不明顯。此前有報(bào)道認(rèn)為鉤藤總堿對(duì)海馬神經(jīng)元有保護(hù)作用[5]，但有肝毒性[8]?？梢?jiàn)，鉤藤總堿對(duì)不同器官的影響并不一致。

(志謝：感謝第二軍醫(yī)大學(xué)藥理學(xué)教研室惠贈(zèng)自發(fā)性高血壓大鼠。)

[1] 劉衛(wèi)，王中師，宋書偉，等.鉤藤總堿與天麻素聯(lián)用對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠血壓和血壓變異性的影響[J].中華高血壓雜志，2012，20(6)：570-574.

[2] 單琤琤，戴生明，蘇定馮.動(dòng)脈壓力感受性反射功能受損與高血壓靶器官損傷[J].第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)，2002，23(2)：189-192.

[3] 劉衛(wèi)，王盟，楊雪萍，等.鉤藤總堿緩釋滴丸的制備、含量測(cè)定和釋放度考察[J].中國(guó)藥房，2011，22(31)：2905-2907.

[4] SU D F，CHEN L，KONG X B，et al.Determination of arterial baroreflex-blood pressure control in conscious rats[J].Acta Pharmacologica Sinica，2002，23(2)：103-109.

[5] 劉衛(wèi)，張兆芹，趙曉民，等.鉤藤總堿預(yù)處理對(duì)海馬神經(jīng)元急性缺氧的保護(hù)作用[J].中國(guó)中藥雜志，2006，31(9)：763-765.

[6] 孫敬昌，齊冬梅，周洪雷，等.鉤藤生物堿對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠胸主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞凋亡和增殖的影響[J].中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)，2011，27(7)：925-929.

[7] LIU W，SU B L，WANG Z S，et al.Gastrodin improved baro-reflex sensitivity and increased gamma-amino butyric acid content in brains without decreasing blood pressure in spontaneously hypertensive rats[J].CNS Neurosci Ther，2012，18(10)：873-875.

[8] 劉衛(wèi)，王中師，張輝，等.口服鉤藤總堿對(duì)高血壓大鼠的肝毒性[J].中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)，2014，30(6)：883-884.

Effects of Total Alkaloids of Rhynchophylline on Baroreflex and Hypertensive Target Organs in Spontaneous Hypertensive Rats

LIU Yeling1，WANG Zhongshi2，ZHANG Xu3

(1.DrugProcurementOffice，TaianCentralHospital，ShandongProvince,Taian271000，China; 2.DepartmentofPharmacy，ShandongProvince,WeihaiMunicipalHospital，Weihai264200，China；3.DepartmentofPharmacy，AffiliatedHospitaltoTaishanMedicalUniversity，Taian271000，China)

Objective To investigate the effect of total alkaloids fromRhynchophyllineon hypertensive target organs. Methods 40 spontaneous hypertensive rats (SHRs) were divided into 4 groups as follows： normal control group，positive control withTianmaGoutengyingranule at 750 mg·d-1，total alkaloids fromRhynchophyllineat 2.5 mg·day-1as low dosage，and at 15.0 mg·d-1as high dosage.All the rats were fed up for 20 weeks，and baroreflex sensitivity (BRS，in ms·mmHg-1)was determined by revised Smyth’s method.Heart，brain and kidney of the rats were sectioned for histological analysis at the end of 20th week. Results In sixteenth weeks，BRS of normal control，TianmaGoutengyingranule group，total alkaloids at low dosage and high dosage were(0.27±0.05)，(0.31±0.06)，(0.35±0.08)，(0.34±0.08) ms·mmHg-1，respectively.BRS in SHR was not decreased except in the normal control group.The treatment groups were superior to the normal control group in structure of heart，but not in the brain and kidney of the rats. Conclusion Total alkaloids fromRhynchophyllinecould protect heart from hypertensive injury.

Total alkaloids fromRhynchophylline；Hypertension; Injury ，target organs; Baroreflex

2014-06-18

2014-09-07

*山東省科技發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目(2008GG2-NS02006)

劉葉玲(1970-)，女，山東萊蕪人，副主任藥師，碩士，從事藥材管理工作。電話：(0)13375388323，E-mail：tazxlyl@126.com。

王中師(1982-)，女，山東棗莊人，藥師，碩士，從事藥品調(diào)劑工作。電話：(0)13953855816，E-mail：wzs2218@qq.com。

R282.71；R285.5

A

1004-0781(2015)09-1155-03

10.3870/j.issn.1004-0781.2015.09.008