新生兒遺傳代謝病的篩查診斷研究進(jìn)展

摘要：新生兒遺傳代謝病臨床表現(xiàn)復(fù)雜多樣，人體內(nèi)任何一個(gè)器官系統(tǒng)均可受累，常造成新生兒早期夭折或者終身殘疾，因而做好疾病篩查診斷對(duì)于確保新生兒健康安全具有重要意義。本文從實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)、新生兒篩查以及產(chǎn)前診斷三個(gè)方面對(duì)于新生兒遺傳代謝病的篩查診斷研究進(jìn)展進(jìn)行了綜述，以供參考。

關(guān)鍵詞：新生兒；遺傳代謝?。缓Y查診斷遺傳性代謝病是臨床上一種疾病種類(lèi)繁多，單一病種患病率相對(duì)較低的兒科臨床病癥，但是從整體上來(lái)看，其總發(fā)病率較高，且危害較為嚴(yán)重[1，2]。在臨床上經(jīng)常表現(xiàn)為喂養(yǎng)困難、食欲差、呼吸急促、嘔吐或者嗜睡、驚厥等，部分患兒還可能出現(xiàn)昏迷、肌張力異常等。嚴(yán)重威脅著新生兒的健康安全。本文結(jié)合國(guó)內(nèi)外研究文獻(xiàn)，對(duì)新生兒遺傳代謝病的篩查診斷研究工作綜述如下。

1實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)

當(dāng)遺傳性代謝病急性發(fā)作威脅生命時(shí)，通過(guò)常規(guī)生化檢測(cè)能夠?yàn)榕R床診斷提供重要線索[3]?，F(xiàn)階段，實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)一般是代謝性酸中毒、低血糖或者高氨血癥。其中常規(guī)評(píng)估主要由全血計(jì)數(shù)用以評(píng)估新生兒血細(xì)胞情況；利用血清電解質(zhì)、碳酸氫鹽以及血?dú)獾戎笜?biāo)用于評(píng)估電解質(zhì)平衡、陰離子間隙情況以及酸堿平衡情況；通過(guò)血尿素氮以及肌酐用于評(píng)估腎功能情況；通過(guò)膽紅素、轉(zhuǎn)氨酶以及凝血酶元時(shí)間聯(lián)合部分凝血酶時(shí)間用于評(píng)估新生兒的肝功能情況；同時(shí)還包括血氨、血糖以及尿常規(guī)測(cè)定等各項(xiàng)[4]。如果需要做進(jìn)一步的確診試驗(yàn)則應(yīng)當(dāng)參照新生兒可特殊的臨床表現(xiàn)以及常規(guī)提示是否出現(xiàn)異常來(lái)完成，一般主要有新生兒細(xì)胞、皮膚成纖維細(xì)胞情況以及器官組織細(xì)胞需要進(jìn)行的特異酶檢測(cè)，其他還包括血和尿氨基酸、尿有機(jī)酸分析、血漿脂肪酸以及血漿?；鈮A等情況的檢測(cè)分析，也可以直接采取DNA分析[5]。

2新生兒篩查

是指在新生兒早期根據(jù)臨床實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)對(duì)某些可能導(dǎo)致新生兒危害的先天性遺傳代謝疾病所開(kāi)展的群體普查[6]。早在1934年，挪威學(xué)者Folling就發(fā)現(xiàn)了PKU的檢測(cè)方法，之后迅速得到推廣應(yīng)用。學(xué)者們研究出的檢測(cè)方法包括兩個(gè)途徑，一是英國(guó)學(xué)者為代表而研制出的尿液樣本，一是以美國(guó)學(xué)者Guthrie為代表研制出的血液樣本方。Guthrie利用細(xì)菌抑制法開(kāi)始發(fā)現(xiàn)了血中苯丙氨酸的檢測(cè)價(jià)值，同時(shí)還研制推出了干血濾紙片血樣采集法，從而讓PKU的新生兒篩查方法真正得到實(shí)現(xiàn)。之后，Irie與Naruse通過(guò)這種干血濾紙片法對(duì)于CH進(jìn)行了篩查，效果較為理想[7，8]。上世紀(jì)90年代，臨床上開(kāi)始使用液相串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)對(duì)于新生生兒遺傳代謝病進(jìn)行篩查，大量的研究結(jié)果均表明其具有高靈敏性、高特異性以及高選擇性、快速檢測(cè)等優(yōu)勢(shì)，能夠在短短2min內(nèi)完成1個(gè)標(biāo)本多達(dá)數(shù)十種小分子物質(zhì)的檢測(cè)工作，換句話說(shuō)能夠同時(shí)實(shí)現(xiàn)對(duì)于新生兒多種氨基酸、有機(jī)酸代謝紊亂以及脂肪酸氧化等缺陷病的檢測(cè)工作[9]。上海兒科醫(yī)學(xué)研究選擇104例高?；純簽檠芯繉?duì)象，通過(guò)串聯(lián)質(zhì)譜法對(duì)血濾紙片進(jìn)行了檢查，發(fā)現(xiàn)陽(yáng)性患者10例，共存在遺傳代謝病8種，患兒的總診斷陽(yáng)性率達(dá)到了9.6%[10]。

現(xiàn)階段，美國(guó)已開(kāi)始嘗試應(yīng)用DNA芯片技術(shù)，主要是提取新生兒晾干血跡中的DNA，利用多聚酶鏈反應(yīng)進(jìn)行擴(kuò)增后，在和存在數(shù)量超過(guò)25000個(gè)基因的芯片來(lái)實(shí)施雜交，通過(guò)這種方法可以檢測(cè)基因的突變情況，完成后再根據(jù)現(xiàn)階段采取的其它方法來(lái)完成疾病的確定工作。它的優(yōu)勢(shì)在于能夠?qū)σ恍┢渌椒y以檢測(cè)的疾病，如神經(jīng)退行性病變、免疫缺陷病以及肌肉營(yíng)養(yǎng)失調(diào)等利用一次DNA芯片技術(shù)實(shí)驗(yàn)來(lái)完成，同時(shí)其高敏感、高特異以及高通量的特征也必然會(huì)對(duì)于新生兒群體篩查起到一次革命性意義。

3產(chǎn)前診斷

3.1代謝產(chǎn)物測(cè)定利用羊水上清液，通過(guò)氣相色譜、高效液相色譜以及氣相色譜/質(zhì)譜聯(lián)合等手段，能夠?qū)τ谛律鷥嚎赡艹霈F(xiàn)的瓜氨酸血癥、精氨酰琥珀酸尿癥以及輔酶鉬缺乏癥做出診斷，其他還包括異戊酸血癥和半乳糖血癥等。[11]除此之外，通過(guò)羊水上清液聯(lián)合孕婦尿，還可以對(duì)于新手而的丙酸血癥、甲基丙二酸血癥、以及戊二酸血癥iv等做出診斷。

3.2酶活性測(cè)定這是一種當(dāng)前應(yīng)用較廣且準(zhǔn)確率較高的一種檢測(cè)方式。標(biāo)本可以采用羊水細(xì)胞和羊水培養(yǎng)細(xì)胞，也可以采用絨毛組織和絨毛培養(yǎng)細(xì)胞來(lái)完成?？紤]到新生兒每一種病癥都存在和其對(duì)應(yīng)的酶缺陷，所以可以利用的活性測(cè)定底物和方也存在一定的差異。通常來(lái)說(shuō)，患兒的酶活性只占據(jù)到健康人的0%~5%。據(jù)學(xué)者報(bào)道，超過(guò)100種疾病能夠通過(guò)酶測(cè)定來(lái)完成產(chǎn)前診斷[12]。現(xiàn)階段，我國(guó)已經(jīng)通過(guò)羊水培養(yǎng)細(xì)胞和絨毛開(kāi)始完成尼曼-匹克氏病以及高雪氏病、甘露糖貯積癥等多種疾病的酶測(cè)定。

3.3基因診斷對(duì)于部分無(wú)法利用羊水代謝產(chǎn)物測(cè)定或者酶學(xué)測(cè)定來(lái)完成的產(chǎn)前診斷，一般建議采用絨毛或者羊水的DNA處理[13]。如PKU，考慮到PKU的苯丙氨酸羥化酶僅僅能夠在肝細(xì)胞表達(dá)，而無(wú)法在絨毛以及羊水細(xì)胞表達(dá)，因而也無(wú)法利用絨毛或者羊水的酶學(xué)活性來(lái)對(duì)于胎兒異常來(lái)完成診斷。除此之外，如果羊水中并未發(fā)現(xiàn)異常代謝產(chǎn)物，也需要考慮利用羊水或者絨毛中的DNA來(lái)完成產(chǎn)前診斷。

綜上所述，經(jīng)過(guò)70多年的不斷研究探索，新生兒疾病篩查工作已取得巨大成就，實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)、新生兒篩查以及產(chǎn)前診斷三種方法均具有較高的應(yīng)用價(jià)值，應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況科學(xué)選擇利用，以促進(jìn)出生人口素質(zhì)的不斷提高[14，15]。

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編輯/王海靜