心血管疾病標(biāo)志物的新秀:循環(huán)microRNA

心血管疾病是西方國(guó)家患病率和病死率第一位的疾病。現(xiàn)在已有證據(jù)證實(shí)microRNAs（miRNA）是調(diào)節(jié)包括心血管疾病在內(nèi)的許多疾病的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子。最近發(fā)現(xiàn)，通過(guò)不同的載體，miRNA可以傳輸至細(xì)胞外，這一發(fā)現(xiàn)再次激起了國(guó)內(nèi)外學(xué)者的研究熱情，通過(guò)檢測(cè)循環(huán)中的miRNA可以提供疾病診斷及治療的信息。與傳統(tǒng)的生物標(biāo)志物相比，循環(huán)miRNA有顯著的優(yōu)越性，這種存在于細(xì)胞外的miRNA已被證明能在循環(huán)血液中穩(wěn)定存在，因此檢測(cè)循環(huán)血液中的miRNA成為可能。盡管部分miRNA精確的細(xì)胞來(lái)源還不十分確定，但前期的研究已經(jīng)證明了miRNA能作用于受體細(xì)胞，并調(diào)節(jié)靶基因的轉(zhuǎn)錄并影響蛋白的合成。許多miRNA的表達(dá)是細(xì)胞或組織特異性的，而它們的表達(dá)水平也與相應(yīng)組織或細(xì)胞的病理或生理過(guò)程有關(guān)，異常的表達(dá)反應(yīng)了機(jī)體的病理狀態(tài)。因此循環(huán)miRNA作為一種新的疾病標(biāo)志物得到了越來(lái)越多的重視。在正常人和腫瘤等疾病患者體內(nèi)循環(huán)miRNA的表達(dá)譜存在明顯的差異，因次，循環(huán)miRNA很可能成為診斷疾病的非侵入的、準(zhǔn)確的新型生物標(biāo)志物，有廣闊的前景。本綜述將首先討論循環(huán)miRNA，作為存在于細(xì)胞外的核酸，在循環(huán)血液中是如何穩(wěn)定存在并發(fā)揮調(diào)節(jié)作用的。其次總結(jié)循環(huán)miRNA作為新型標(biāo)志物在心血管及相關(guān)領(lǐng)域的最新進(jìn)展，包括：心肌梗死[1]，心力衰竭[2]，動(dòng)脈粥樣硬化[3]和高血壓[4]等。

1miRNA的發(fā)現(xiàn)

1972年首次在血漿中發(fā)現(xiàn)了穩(wěn)定存在的細(xì)胞外完整的RNA，這種RNA不被RNA酶降解。這種細(xì)胞外的RNA，包括miRNA一定有種保護(hù)機(jī)制能對(duì)抗降解。這是miRNA首次被發(fā)現(xiàn)，但當(dāng)時(shí)并未意識(shí)到這種miRNA的重要作用。

大約10年前，在哺乳動(dòng)物體內(nèi)發(fā)現(xiàn)了一組非編碼的小RNA[5]，在進(jìn)化上相對(duì)保守。miRNAs作用于mRNA的3'非編碼區(qū)在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)節(jié)基因表達(dá)。通過(guò)影響蛋白質(zhì)的翻譯，miRNAs在生物合成過(guò)程中起重要的調(diào)節(jié)作用。循環(huán)miRNA的意外發(fā)現(xiàn)開(kāi)啟了研究領(lǐng)域的新篇章，使得我們有機(jī)會(huì)深入了解這一極為活躍的生物標(biāo)志物，miRNA及時(shí)將細(xì)胞內(nèi)的信息傳遞給我們。意識(shí)到miRNA重要的調(diào)節(jié)作用后，很快掀起了miRNA的研究熱潮，在心血管領(lǐng)域的研究也是持續(xù)升溫。miRNA作為心血管疾病的標(biāo)志物和治療手段成為研究的熱點(diǎn)[6]。

2循環(huán)MiRNA的穩(wěn)定性

2008年，miRNA的研究取得重大突破，Lawrie等[7]于2008年首次在淋巴瘤患者的血清中發(fā)現(xiàn)了細(xì)胞外的miRNA。同年，Mitchell 等[8]在前列腺癌患者的血清及血漿中都發(fā)現(xiàn)了這種生物標(biāo)志物。隨后，多項(xiàng)研究證實(shí)了miRNA可以由細(xì)胞輸出至胞外，在體液中穩(wěn)定存在，包括血漿、血清、唾液、尿液、淚液甚至乳汁[9-11]。通過(guò)血漿、紅細(xì)胞、血小板、及有核細(xì)胞的檢測(cè)發(fā)現(xiàn)血漿miRNA能穩(wěn)定存在，即使在各種嚴(yán)苛的條件下：高溫至沸騰，強(qiáng)酸強(qiáng)堿，室溫下長(zhǎng)期儲(chǔ)存和反復(fù)凍融等[7，8，12]。已知細(xì)胞外裸露的RNA極易被RNA酶降解，而miRNA卻出奇的穩(wěn)定，這說(shuō)明內(nèi)生的miRNA必然受到某種機(jī)制的保護(hù)而不被降解。研究證實(shí)miRNAs在血漿中被有膜微顆粒包裹如胞外體、微囊泡和凋亡小體[13，14]或與RNA結(jié)合蛋白結(jié)合（如Argonaute2，Ago2蛋白)[15]或者結(jié)合于載脂蛋白復(fù)合體（如high-density lipoprotein ，HDL)[16]通過(guò)這些方式的結(jié)合阻止降解。

3循環(huán)miRNA的來(lái)源

El-Hefnawy等[17]首次提出血漿RNA通過(guò)包裹于蛋白或脂質(zhì)囊泡中而逃過(guò)RNA酶的降解。根據(jù)他們的體積及從細(xì)胞中釋放的方式，這些顆粒被分別命名為胞外體，微囊泡或凋亡小體。胞外體直徑50~100nm，前體又稱胞內(nèi)體，胞內(nèi)體內(nèi)含有由細(xì)胞核釋放的miRNA， 多個(gè)胞內(nèi)體在胞漿中形成多囊復(fù)合體，但各自有獨(dú)立的包膜包裹，當(dāng)多囊復(fù)合體的膜與細(xì)胞膜融合時(shí)，這些小泡釋放至胞外形成了胞外體。微囊泡或脫落的微囊泡是另一種形式的帶膜微粒[18]，是細(xì)胞質(zhì)膜脫落的產(chǎn)物，和胞外體一樣，微囊泡也可以來(lái)源于不同的細(xì)胞 [19]，直徑0.1~1μm，大于胞外體。兩種帶膜微粒的產(chǎn)生機(jī)制也不相同[20，21]。胞外體的形成是細(xì)胞的內(nèi)吞作用，并將內(nèi)吞的囊泡融合成多囊泡（MVBs），而微囊泡的形成是細(xì)胞自身的出牙過(guò)程[22]。Hunter 等于2008年首次在微囊泡中發(fā)現(xiàn)了miRNA[23]，攜帶有miRNA的微囊泡同樣能作用于受體細(xì)胞起到信息傳遞的作用。含有miRNA的微囊泡在細(xì)胞凋亡時(shí)即可形成凋亡小體，細(xì)胞壞死或凋亡時(shí)這種有膜結(jié)構(gòu)的囊泡攜帶miRNA進(jìn)入血循環(huán)[22]。 機(jī)體內(nèi)富含各種形狀，大?。?~5μm）的微粒[24]。

除了細(xì)胞起源的囊泡包裹有miRNA，還有很大一部分細(xì)胞外的miRNA并不是存在有膜結(jié)構(gòu)中，而是與蛋白結(jié)合，其中包括核仁磷酸蛋白（nucleophosmin，NPM1）[25]， Ago蛋白家族的Ago2，還有Ago1， Ago3 ，Ago4。最近有報(bào)道細(xì)胞外的miRNA還可以通過(guò)高密度脂蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)[26，27]，可見(jiàn)細(xì)胞內(nèi)miRNA的載體非常豐富，通過(guò)結(jié)合載體miRNA能在血漿微粒中穩(wěn)定存在，越來(lái)越多的證據(jù)顯示這種血漿中的miRNA并不單純是被動(dòng)的釋放，而是在細(xì)胞與細(xì)胞之間發(fā)揮重要的信息傳遞的功能，miRNA微粒通過(guò)血液循環(huán)作用于遠(yuǎn)處的靶細(xì)胞，并實(shí)現(xiàn)對(duì)靶細(xì)胞基因表達(dá)的調(diào)節(jié)[28，29]。見(jiàn)圖1。

圖1循環(huán)miRNA的釋放及細(xì)胞間的傳遞

圖1在細(xì)胞核內(nèi)，在RNA聚合酶Ⅱ（polymeraseⅡ，PolⅡ）的作用下生成具有莖環(huán)結(jié)構(gòu)的miRNA的前體（primary miRNA，Pri-miRNA）。Pri-miRNA輸出至胞漿中，被Dicer核酸酶切割成雙鏈miRNA。miRNA雙鏈解離形成成熟的miRNA，其中一條鏈與Ago蛋白結(jié)合形成RNA介導(dǎo)的沉默復(fù)合體（RNA-induced silencing complex RISC），另一條降解。RISC可在胞漿內(nèi)結(jié)合靶mRNA，抑制靶基因的翻譯或誘導(dǎo)降解。另外，miRNA可以輸出至細(xì)胞外，輸出的載體包括胞外體、微囊泡、RNA結(jié)合蛋白（miRNA-binding protein complexes，RBP）或高密度脂蛋白（high density lipoproteins，HDL）。輸出至胞外的miRNA可以作用于受體細(xì)胞調(diào)節(jié)受體細(xì)胞基因的表達(dá)。實(shí)現(xiàn)細(xì)胞之間信息的傳遞及調(diào)控。

4循環(huán)miRNA作為標(biāo)志物

一直以來(lái)，人類理想的生物標(biāo)志物應(yīng)符合以下條件：①可以通過(guò)非侵入性操作獲得，②具有高度的敏感性及特異性，③在疾病的早期階段即能診斷。④隨著疾病的轉(zhuǎn)歸，呈現(xiàn)相應(yīng)的指標(biāo)改變。⑤在樣本中的半衰期長(zhǎng)，⑥檢測(cè)方法簡(jiǎn)便，便于快速檢測(cè)[30]。循環(huán)miRNA在血漿中存在的穩(wěn)定性及可以定量檢測(cè)的的特性引起了科研工作者的極大興趣。由于循環(huán)miRNA滿足了人類對(duì)循環(huán)標(biāo)志物的全部幻想，應(yīng)用前景十分廣闊，自2009年開(kāi)始相繼有10多項(xiàng)研究先后報(bào)道了循環(huán)miRNA作為心血管系統(tǒng)的血漿標(biāo)志物，用于診斷及預(yù)后評(píng)價(jià)。其中包括心肌梗死、心力衰竭、動(dòng)脈粥樣硬化和高血壓等。盡管以上的結(jié)果還需要大規(guī)模多中心的研究進(jìn)一步驗(yàn)證，但以上的研究至少證實(shí)了部分血漿miRNA的心血管特異性。不但能用于心血管疾病的診斷及療效觀察，而且為臨床研究提出了新的治療終點(diǎn)。關(guān)于心血管疾病中的miRNA標(biāo)志物的研究匯總見(jiàn)表1。

5急性心肌梗死與循環(huán)miRNA

曾經(jīng)設(shè)想存在一種心肌細(xì)胞特異性的miRNA，在心肌損傷時(shí)快速釋放入循環(huán)血液中，可以通過(guò)這種特異的miRNA準(zhǔn)確的診斷心肌損傷。這一設(shè)想正在逐步實(shí)現(xiàn)。目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)在急性心肌梗死時(shí)有4種miRNA特異性升高。分別是miR-208a， miR-499， miR-1， 和 miR-133[1，31-38]。 其中miRNA-208a編碼α-MHC基因內(nèi)含子，是目前發(fā)現(xiàn)的最為特異性的心肌來(lái)源的miRNA[39]，在心肌以外的組織沒(méi)有發(fā)現(xiàn)。而其他3種miRNA(miR-499，miR-1，miR-133)除了存在于心肌細(xì)胞，在骨骼肌中也發(fā)現(xiàn)一定水平的表達(dá)[40，41]。

一項(xiàng)研究[1]納入了66例胸痛患者，均進(jìn)行了心肌酶、心電圖檢查，并進(jìn)行了冠脈造影，同時(shí)納入了30例健康對(duì)照。66例胸痛患者均完成了上述檢查確診心肌梗死患者為33例，另外33例為非心梗的胸痛患者。時(shí)時(shí)熒光定量 PCR顯示miR-1，miR-133a和miR-499血漿水平在心梗組顯著升高，對(duì)比非心梗胸痛組和健康對(duì)照組均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。miR-208a目前發(fā)現(xiàn)的唯一的心臟特異性的miRNA，在非心肌組織中未發(fā)現(xiàn)表達(dá)，因此是診斷急性心肌梗死最為理想的生物標(biāo)志物。另有幾項(xiàng)研究顯示miR-499在急性心肌梗死中的診斷價(jià)值[1，31，33，36]。與miR-208a相比，miR-499的優(yōu)勢(shì)在于檢測(cè)的穩(wěn)定性，miR-499的釋放晚于miR-208a和cTnI，因此在診斷晚期心梗更有價(jià)值。miR-1和miR-133a由于在骨骼肌高表達(dá)，血漿水平受到骨骼肌和其他組織病理變化的影響，作為心肌梗死血漿標(biāo)志物仍有爭(zhēng)議[1，33，37，38]。綜合以上研究結(jié)果，聯(lián)合應(yīng)用miR-208a和miR-499水平診斷急性心肌梗死是非?？尚械?，miR-208a可用于早期的診斷，而miR-499用于追蹤晚期的心梗。

6心力衰竭和循環(huán)miRNA

有幾項(xiàng)研究進(jìn)行了心力衰竭中相關(guān)的的循環(huán)miRNA標(biāo)志物的探索，其中一項(xiàng)研究納入了12例心衰患者和12例健康對(duì)照進(jìn)行了基因芯片的研究[2]。排除近期的心肌缺血和心梗，為的是結(jié)果不受心肌細(xì)胞壞死的影響，確實(shí)在研究中未發(fā)現(xiàn)梗死相關(guān)的miR-1， miR-208a， miR-208b 或miR-499的升高。通過(guò)基因芯片初步鎖定了16個(gè)候選基因，為了進(jìn)一步的確認(rèn)繼續(xù)進(jìn)行了下面的實(shí)驗(yàn)，納入50例主訴為呼吸困難的患者，其中30例確診為心力衰竭，另外20例非心源性呼吸困難作為對(duì)照組。7種miRNA被證實(shí)與心衰相關(guān)包括miR-423-5p， miR-18b*， miR-129-5p， miR-1254， miR-675， HS_202.1， 和miR-622。其中 miR-423-5p與心力衰竭診斷的相關(guān)性最好，ROC曲線分析顯AUC為 0.91 (95%CI 0.84~ 0.98)。本研究的對(duì)照組不是選擇健康對(duì)照組是選擇非心源性呼吸困難的患者，篩選出來(lái)的miRNA在呼吸困難的鑒別診斷方面非常有意義。例如miR-675，與健康對(duì)照組相比在心衰患者中顯著升高，相關(guān)性良好，但在本研究中發(fā)現(xiàn)miR-675在非心源性呼吸困難的患者中也出現(xiàn)升高，因此以miR-675作為心衰的標(biāo)志物并不是特異性的。研究顯示還有一部分miRNA與疾病的嚴(yán)重程度相關(guān)，如循環(huán)miR-423-5p 和 miR-18b*與射血分?jǐn)?shù)和紐約心功能分級(jí)呈負(fù)相關(guān)?；谶@一特性，作為心衰的標(biāo)志物循環(huán)miR-423-5p 和 miR-18b*是非常有吸引力的，但還有一些重要的問(wèn)題尚未解決。首先，還不清楚哪種細(xì)胞釋放miR-423-5p。有報(bào)道指出在心衰患者的頓抑心肌miR-423-5p呈高表達(dá)，提示循環(huán)中的miR-423-5p來(lái)源于頓抑心肌細(xì)胞的釋放[2]。

Fukushima等[43]納入10例心衰患者和17例無(wú)癥狀的對(duì)照組，共分析了3種miRNA， 發(fā)現(xiàn)內(nèi)皮細(xì)胞來(lái)源的miR-126與年齡(相關(guān)系數(shù)0.52，P=0.0006)、腦鈉肽(相關(guān)系數(shù)0.25，P=0.0003)、紐約心功能分級(jí)呈負(fù)相關(guān)，提示miRNA作為心衰標(biāo)志物的可能性。在冠心病患者[3]和2型糖尿病患者[46]中也發(fā)現(xiàn)了miRNA-126的低表達(dá)。更多的關(guān)于心衰的循環(huán)miRNA還有待進(jìn)一步的研究。

7冠狀動(dòng)脈粥樣硬化相關(guān)與miRNA

動(dòng)脈粥樣硬化是心血管疾病的主要病因，被認(rèn)為是血管壁的慢性炎癥改變，目前的影像學(xué)檢查技術(shù)僅能辨認(rèn)較晚期的不穩(wěn)定斑塊。因此臨床迫切需要有更可靠地血漿標(biāo)志物能對(duì)早期的不穩(wěn)定斑塊做出診斷，并對(duì)預(yù)后提供指導(dǎo)。為此，科研工作者進(jìn)行了大量的研究，以下將介紹幾個(gè)相關(guān)的研究。

Fichtlscherer[3]首先對(duì)穩(wěn)定性心絞痛患者相關(guān)的miRNA進(jìn)行了研究。該研究納入了經(jīng)冠脈造影確診的冠心病患者，通過(guò)對(duì)8例冠心病和8例健康對(duì)照的基因芯片研究顯示其中46種miRNA下調(diào)，20種miRNA上調(diào)。在接下來(lái)的實(shí)驗(yàn)中納入36例冠脈造影確診的冠心病患者和17例對(duì)照，通過(guò)Real-time PCR對(duì)所有差異表達(dá)的miRNA進(jìn)行定量。發(fā)現(xiàn)大多數(shù)表達(dá)下調(diào)的miRNA均來(lái)自血管壁，特別是內(nèi)皮細(xì)胞。包括已知的內(nèi)皮細(xì)胞來(lái)源的miR-126，miR-92a， 和miR-17。另外血管平滑肌來(lái)源的miR-145和 炎癥細(xì)胞相關(guān)的miR-155在冠心病患者中表達(dá)也出現(xiàn)下調(diào)。

對(duì)穩(wěn)定性冠心病患者的研究中發(fā)現(xiàn)內(nèi)皮細(xì)胞相關(guān)的miRNA表達(dá)減低絕對(duì)是驚人的發(fā)現(xiàn)，因?yàn)閯?dòng)脈粥樣硬化病變時(shí)內(nèi)皮細(xì)胞會(huì)激活，激活的內(nèi)皮細(xì)胞會(huì)誘導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)含miRNA的顆粒的釋放，但研究的結(jié)果卻顯示內(nèi)皮細(xì)胞相關(guān)的miRNA在穩(wěn)定性冠心病患者中表達(dá)減低[47]。分析原因之一是這種內(nèi)皮細(xì)胞miRNA的減少間接反應(yīng)了冠心病患者循環(huán)內(nèi)皮祖細(xì)胞的減少[48]。另一個(gè)解釋是miR-126是與年齡呈負(fù)相關(guān)的miRNA[43]，而該研究?jī)山M人群未進(jìn)行年齡的匹配，冠心病組年齡大，且年齡差差在30歲左右，也是造成冠心病組miR-126低表達(dá)的原因。miRNA-126在高齡組表達(dá)減低的另一原因是冠心病患者灌注的衰退及缺少新的內(nèi)皮細(xì)胞的補(bǔ)充，另外細(xì)胞老化也造成miRNA的釋放減少[43]。

miR-155在冠心病組表達(dá)下調(diào)也是沒(méi)有預(yù)料到的，已知miR-155是炎癥相關(guān)的miRNA，主要來(lái)源于炎癥細(xì)胞[3]，而動(dòng)脈粥樣硬化這種管壁的炎癥改變卻未見(jiàn)到miR-155的升高，反而出現(xiàn)表達(dá)下調(diào)?？赡艿慕忉尠挲g及性別因素，miR-155表達(dá)水平與年齡呈負(fù)相關(guān)，而且在男性表達(dá)低于女性[3]。

Taurino 等[44]進(jìn)行了一項(xiàng)全血的基因芯片研究，對(duì)其中納入的10例冠心病患者進(jìn)行了冠狀動(dòng)脈旁路移植手術(shù)，并進(jìn)行了康復(fù)治療。miR-92在心臟康復(fù)治療后表達(dá)呈現(xiàn)上調(diào)。這一結(jié)論與Fichtlscherer[3]的研究相吻合，該研究曾報(bào)道在冠心病組miR-92血漿水平下調(diào)。

Hoekstra等[45]也進(jìn)行了冠心病患者miRNA的研究，不同的是該研究應(yīng)用的是外周血管單核細(xì)胞(PBMC)。顯示在2個(gè)冠心病組miR-135a增加5倍，miR-147增加4倍。其中miR-147曾被報(bào)道與免疫細(xì)胞向炎細(xì)胞轉(zhuǎn)型并發(fā)揮發(fā)揮抗炎作用有關(guān)，能促進(jìn)腫瘤壞死因子α和白介素-6的釋放[49]。這項(xiàng)研究提示外周血單核細(xì)胞miRNA在動(dòng)脈粥樣硬化時(shí)會(huì)傾向于轉(zhuǎn)換為炎癥表型。不穩(wěn)定心絞痛和穩(wěn)定性心絞痛患者的miRNA也發(fā)現(xiàn)存在差異表達(dá)，有3種循環(huán)miRNA (miR-134， miR-198和 miR-370)在不穩(wěn)定心絞痛患者中表達(dá)升高，這種升高是否揭示了斑塊存的不穩(wěn)定[50]。還有待進(jìn)一步驗(yàn)證。

總之，以上的研究結(jié)果提示循環(huán)miRNA作為生物標(biāo)志物有望對(duì)冠心病的診斷及預(yù)測(cè)提供幫助，但所報(bào)道的研究均是人群的小樣本研究，研究的結(jié)論仍需要大規(guī)模的臨床研究進(jìn)一步證實(shí)。

8循環(huán)miRNA與高血壓

在對(duì)高血壓患者miRNA譜的研究中同樣發(fā)現(xiàn)存在特異的高血壓相關(guān)的miRNA[4]。其中，最有意義的發(fā)現(xiàn)是編碼人類巨細(xì)胞病毒的miRNA hcmv-miR-UL112特異性的升高。提示原發(fā)性高血壓可能與巨細(xì)胞病毒感染有關(guān)。該研究[4]顯示高血壓患者HCMV病毒滴度高于對(duì)照組（1870 : 54）。而且在高血壓患者中發(fā)現(xiàn)HCMV病毒滴度與人巨細(xì)胞病毒-miR-UL112水平相關(guān)。（p=0.003）這一結(jié)論在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中得到了進(jìn)一步的驗(yàn)證[51]，研究發(fā)現(xiàn)鼠巨細(xì)胞病毒感染小鼠后會(huì)導(dǎo)致小鼠的高血壓。這一研究結(jié)果為原發(fā)性高血壓的病因提供了新的理論研究，也為治療提供了新的靶點(diǎn)。但由于hcmv-miR-UL112在人群中變異較大，尚不能用于高血壓診斷及預(yù)測(cè)的生物標(biāo)志物。

9循環(huán)MiRNA作為生物標(biāo)志物的前景展望

目前，心血管疾病循環(huán)生物標(biāo)志物局限于特異的蛋白，如肌鈣蛋白，B型尿鈉肽等。發(fā)展新的蛋白標(biāo)志物已經(jīng)遭遇瓶頸，原因是蛋白在血循環(huán)中多以復(fù)合物形式存在，成分復(fù)雜，不易分離，而且蛋白合成后要經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)錄后加工，這種加工造成了蛋白的多樣性，檢測(cè)易出現(xiàn)誤差。再者，在血漿中豐度低，也很難開(kāi)發(fā)相應(yīng)的檢測(cè)試劑盒，不能滿足臨床快速檢驗(yàn)的需求[30]。而循環(huán)miRNA擁有優(yōu)秀的生物標(biāo)志物的特性。如：穩(wěn)定性，因?yàn)镽NA序列在進(jìn)化上相對(duì)保守；具有組織細(xì)胞特性性，而且在病理狀態(tài)呈差異表達(dá)；可以通過(guò)real-time PCR定量檢測(cè)，有高度的敏感性和特異性。然而，循環(huán)miRNA作為生物標(biāo)志物同樣存在挑戰(zhàn):首先，血液中總RNA含量低，不能直接從循環(huán)中檢測(cè)miRNA的含量。因此，不同實(shí)驗(yàn)室不同的檢測(cè)方法造成的結(jié)果不同，缺乏橫向的可比性，因此檢測(cè)需要標(biāo)準(zhǔn)化。目前還在研究當(dāng)中，相信隨著miRNA 更多的生物學(xué)功能的揭示，結(jié)合基因組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、代謝組學(xué)和系統(tǒng)生物學(xué)研究的結(jié)果，多種疾病產(chǎn)生和發(fā)展的機(jī)制將會(huì)被闡明，疾病檢測(cè)、預(yù)測(cè)的準(zhǔn)確性及靈敏度將會(huì)大大提高，疾病治療的手段將會(huì)更加豐富和有效。

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編輯/哈濤