五種微量元素在全血\\細(xì)紅胞\\血漿中的分布探討

摘要：目的通過原子吸收光譜法檢測全血、血漿和紅細(xì)胞中的鈣、鎂、銅、鐵、鋅五種微量元素，了解用該方法檢測的微量元素在3種樣本內(nèi)的含量分布狀況。方法用原子吸收光譜法分別檢測5個人的全血、血漿和紅細(xì)胞中的微量元素，并對其結(jié)果進行統(tǒng)計分析。結(jié)果鈣主要存在于血漿中，鋅、鐵和鎂主要存在于紅細(xì)胞中，銅在3者間分布無顯著性差異，全血的鋅、銅和鎂約為全血和血漿之和的1/2。結(jié)論3種樣本中因紅細(xì)胞鈣和血漿鐵不能用該方法直接檢測，故不便于確定參考范圍而用全血檢測結(jié)果都有較好的臨床指導(dǎo)意義，適宜作為微量元素檢測分析的樣本。

關(guān)鍵詞：原子吸收光譜；微量元素；全血；細(xì)紅胞；血漿1資料與方法

1．1一般資料 隨機抽取5人的血液3～4 mL，注入肝素鈉抗凝管中混勻。

1．2儀器和試劑 北京博暉創(chuàng)新光電技術(shù)股份有限公司生產(chǎn)的BH5100型原子吸收光譜儀。試劑為該公司生產(chǎn)的BH5100型原子吸收光譜儀隨機附帶試劑BH5100稀釋液和標(biāo)準(zhǔn)液及質(zhì)控品。嚴(yán)格按廠家操作說明書進行測樣。

1．3方法 將5份肝素鈉抗凝血充分混勻，從每管全血中取40 L加入BH5100稀釋液1．2 mL中，立即振蕩混勻備檢。為保證結(jié)果準(zhǔn)確，每份全血稀釋2管取均值作為最終檢測結(jié)果。然后將5份全血以3 000 r/min離心10 rain，分別分離出各自的紅細(xì)胞和血漿，為保證紅細(xì)胞中不含有血漿中的微量元素，將分離出血漿后的紅細(xì)胞用生理鹽水離心洗滌5次，最后棄去洗滌液。將分離出的紅細(xì)胞和血漿進行與全血相同的預(yù)稀釋備檢。備檢樣本用BH5100型原子吸收光譜儀檢測鈣、鋅、銅、鎂、鐵5種微量元素，嚴(yán)格按規(guī)程操作，檢測時首先用標(biāo)準(zhǔn)液上機制訂標(biāo)準(zhǔn)曲線，要求曲線I>10．99方可；然后以樣本在儀器上的吸光度與曲線上標(biāo)準(zhǔn)液吸光度對比，可得出微量元素含量。

1．4評價標(biāo)準(zhǔn) 樣本測量時均同定值質(zhì)控物一起測量，質(zhì)控結(jié)果在±2SD范圍內(nèi)，證明結(jié)果可靠性較好。

1．5統(tǒng)計學(xué)處理 組間比較采用t檢驗；顯著性水準(zhǔn)?。害?0．05。

2結(jié)果

鐵、鋅和鎂主要存在于紅細(xì)胞中，全血中的鋅、鎂和銅微量元素含量約為血漿和紅細(xì)胞兩者之和的1/2。鈣在紅細(xì)胞中含量甚微，基本上用該方法檢測不出(P<0．01)，因為鈣全部在血漿中，紅細(xì)胞中檢測不出，全血鈣含量約占血漿鈣的70％。全血鐵則占紅細(xì)胞內(nèi)鐵的50％左，鐵在血漿中含量也檢測不出，鐵全部在紅細(xì)胞中。

3討論

原子吸收光譜法的優(yōu)點是穩(wěn)定性好、準(zhǔn)確度和靈敏度都較高。分析結(jié)果幾乎不受火焰溫度變化的影響，因為這種方法測量的是火焰中的基態(tài)原子而不是激發(fā)態(tài)原子，由于大多數(shù)元素的最強共振線都<6000。原子吸收法中一般火焰溫度<3000 K。較低激發(fā)態(tài)的原子數(shù)與基態(tài)原子數(shù)的比值都很小，火焰中激發(fā)的原子數(shù)很少超過原子總數(shù)的1%，因此，當(dāng)激發(fā)溫度改變時，假如激發(fā)原子數(shù)從1%變到1.1%，與此相對應(yīng)的基態(tài)原子數(shù)由99%變到98.9%，對吸收強度的測量是可以忽略的。同樣，由于擇品組成的不同所引起激發(fā)溫度的改變，在一定程度上對分析結(jié)果的影響也不大。原子吸收光譜分析較穩(wěn)定，準(zhǔn)確度較高，靈敏度也高精密度通?？蛇_(dá)1%左右。選擇性高，由于采用了空心陰極燈作為光源，發(fā)射出來的是各元素特有的共振線，且元素吸收線又是特征的，很少有兩個元素吸收同一波長的譜線，因此，很少受其他元素的干。操作簡單、快速、常常不需分離即可進行測定[3]。但對樣本的采集處理、檢測環(huán)境和操作人員能力的要求較高，故不論何種檢測方法只能針對特定的樣本而言其結(jié)果才具有較好的臨床參考價值[4]。

本組實驗結(jié)果表明，用該方法檢測血液3種樣本內(nèi)的5種微量元素，各樣本間元素含量有較大差異，其中鐵全部在紅細(xì)胞的血紅蛋白中，因此全血鐵大大高于血漿鐵，而遠(yuǎn)小于紅細(xì)胞鐵。另在血漿中用該方法檢測不出的原因是全血稀釋液對鐵其有影響，須用專門的血漿稀釋液進行稀釋[5]，文獻(xiàn)記載人體血漿中的鐵波動很大（＞20%），說明血漿鐵不適用于估計人體鐵的含量。

血漿中的鈣其含量和另兩組結(jié)果相比具有顯著性差異。因為血液中的鈣主要存在于血漿中，因此從理論上分析全血鈣的濃度約為血漿鈣的1/2左右，但其相關(guān)性較差。血漿鈣與其他兩組有較大差異的原因，應(yīng)與血細(xì)胞壓積高低有一定作用，另外是否應(yīng)用特殊方式處理紅細(xì)胞樣本對結(jié)果有更大的影響，目前尚不清楚。

銅在3者中的含量則較為均衡，3者間的結(jié)果比較無顯著性差異。血液中的銅主要存在于血漿中與銅蘭蛋白結(jié)合，因此評價人本銅含量應(yīng)首選血漿標(biāo)本，全血銅與血漿銅有很好的相關(guān)性，在一定場合可以替代血漿銅的測定。鋅是人體必需微元素具有重要的生理功能和臨床診療意義，紅細(xì)胞中的鋅含量比血漿鋅高5~10倍，全血鋅比血漿鋅高3~5倍，究竟哪種標(biāo)本最適合反應(yīng)鋅的體內(nèi)含量尚未完全明確。

鎂50%存在于人體骨骼，40%存在于細(xì)胞內(nèi)液中，細(xì)胞外液只占5%因此全血鎂的含量比血漿鎂高，本實驗分析數(shù)據(jù)表明，全血鎂與血漿鎂的相關(guān)性最好。但細(xì)胞內(nèi)鎂與細(xì)胞外鎂的生理功能并不相同，因此臨床應(yīng)根據(jù)需要選擇不同的標(biāo)本進行。

全血中的鋅、鎂和銅微量元素結(jié)果約為血漿和紅細(xì)胞兩者之和的1/2，原因是血液是由細(xì)胞和血漿組成的混懸液，其中細(xì)胞成分占45％左右，血漿占55％左右[6]。

綜上所述，用原子吸收光譜法直接檢測這3種樣本的微量元素時，血漿和紅細(xì)胞鐵、鈣元素不能用該法直接測出，而全血樣本則具有5種元素分布較為均衡，能較好地反映人體內(nèi)的微量元素含量，也有利于建立臨床使用參考體系。所以在工作中，要選用更準(zhǔn)更好的方法，對具有較高臨床指導(dǎo)意義的樣本進行檢測，以做出最準(zhǔn)確最有意義的結(jié)果，從而有力保障臨床患者的治療和公眾的健康。

參考文獻(xiàn)：

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[6]熊立凡.臨床檢驗基礎(chǔ)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社，2005:11.編輯/張燕