大豬屎豆化學(xué)成分系統(tǒng)預(yù)試及TCL測(cè)定研究

摘要：目的對(duì)大豬屎豆進(jìn)行化學(xué)成分初步分析與TCL測(cè)定。方法采用化學(xué)成分系統(tǒng)預(yù)試法和薄層色譜法。結(jié)果大豬屎豆化學(xué)成分預(yù)實(shí)驗(yàn)表明，其含有生物堿、鞣質(zhì)、有機(jī)酸、黃酮類、酚類、香豆素類、內(nèi)酯、強(qiáng)心苷、甾體類、三萜類和油脂等化學(xué)成分。TLC測(cè)定研究表明大豬屎豆莖、葉中均含β-谷甾醇。結(jié)論該研究可為了解大豬屎豆的化學(xué)成分及對(duì)其進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用提供參考。

關(guān)鍵詞：大豬屎豆；化學(xué)成分；薄層色譜大豬屎豆Crotalaria assamica Benth.為豆科植物，全株均可入藥，夏秋季采收，去凈鮮用或者曬干用。其莖葉藥材名為\"自消容\"，根藥材名為\"自消容根\"，莖葉及根味淡、性微涼[1]?！端幱弥参镛o典》中記載大豬屎豆產(chǎn)于中國(guó)華南、西南地區(qū)及安徽、臺(tái)灣等地。莖、葉、根、種子均具有清熱解毒，止血消腫，涼血降壓，利水的作用?？捎糜邳S疸型肝炎、 咳嗽吐血、腫脹、牙痛、小兒頭瘡、疳積、高血壓、白血病、惡性腫瘤、跌打損傷、風(fēng)濕骨痛、外傷出血、刀傷、小便不利、腎結(jié)石、腎炎、腎虛耳鳴等疾病的治療。文獻(xiàn)研究表明，目前尚未見(jiàn)有對(duì)大豬屎豆的化學(xué)成分系統(tǒng)預(yù)試與TLC測(cè)定的相關(guān)研究報(bào)道。因此，我們對(duì)其進(jìn)行化學(xué)成分系統(tǒng)預(yù)試與TLC測(cè)定的進(jìn)行研究，具體如下。

1資料與方法

1.1一般資料 DHG-9241型電熱恒溫干燥箱（上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司）；ZF-2型三用紫外儀（上海市安亭電子儀器廠）；UPK-Ⅰ型優(yōu)普超純水機(jī)（成都超純科技有限公司）；電子分析天平（上海方瑞儀器有限公司）；電熱恒溫水浴鍋（上海申賢恒溫水浴鍋有限公司）。939型自動(dòng)鋪板器（重慶南岸貝爾德儀器技術(shù)廠）。對(duì)照品為β-谷甾醇（中國(guó)藥品生物制品檢定所，供鑒別用，批號(hào)：0851-9601），試劑均為分析純。

大豬屎豆的3批樣品均采自廣西藥用植物園，經(jīng)廣西中醫(yī)藥大學(xué)郭敏副教授鑒定為豆科植物豬屎豆屬大豬屎豆Crotalaria assamica Benth.的全株，標(biāo)本存于廣西中醫(yī)藥大學(xué)藥用植物教研室。

1.2方法與結(jié)果

1.2.1化學(xué)成分預(yù)實(shí)驗(yàn)

1.2.1.1水提取液的制備 分別稱取粗粉10.0 g，分別置入200 mL的三角燒瓶中，加入蒸餾水100 mL，室溫浸泡過(guò)夜。濾過(guò)，取濾液約20 mL，每試管1~2 mL供檢查氨基酸、多膚、蛋白質(zhì)用。剩余藥渣加水適量，在60℃左右水浴上加熱30 min，濾過(guò)，濾液取每試管1~2 mL作氨基酸、多膚、蛋白質(zhì)、糖、多糖、皂苷、苷類、鞭質(zhì)、有機(jī)酸等成分定性檢測(cè)。3批樣品的實(shí)驗(yàn)測(cè)定結(jié)果一致，見(jiàn)表1。

1.2.1.2乙醇提取液的制備 分別稱取3批樣品粗粉10.0 g，分別置入250 mL圓底燒瓶中，加入95%乙醇100 mL于水浴上加熱回流1 h，稍冷后加人蒸餾水使其含醇量為70%，冷至室溫，過(guò)濾，濾液轉(zhuǎn)移至分液漏斗中；用100 mL石油醚(60℃~90℃)分2次萃取，每次用石油醚50 mL，以除去葉綠素等，分出下層乙醇提取液，濃縮至40~50 mL，加95%乙醇50 mL溶解后過(guò)濾，濾液取每試管1~2mL供檢查黃酮、蒽醌、香豆素、萜類、甾體化合物、有機(jī)酸、酚類、鞣質(zhì)等成分用。3批樣品的實(shí)驗(yàn)測(cè)定結(jié)果一致，見(jiàn)表2。

1.2.1.3石油醚提取液的制備 分別稱取樣品粗粉1.0 g，分別置入50 mL的燒杯中，加入石油醚(60℃~90℃)10 mL，密閉浸泡2 h，過(guò)濾，濾液供檢查揮發(fā)油、甾體化合物等成分用。3批樣品的實(shí)驗(yàn)測(cè)定結(jié)果一致，見(jiàn)表3。

1.2.2 TLC測(cè)定

1.2.2.1供試品溶液的制備 分別稱取3個(gè)批大豬屎豆莖、葉粉末20 g，分別置入250 mL塞錐形瓶中，加入250 mL 95%乙醇于水浴回流2 h，濾過(guò)，濾渣再加250 mL 95%乙醇水浴回流2 h，提取3次，合并乙醇提取液，水浴濃縮，得到供試品溶液。

1.2.2.2對(duì)照品溶液的制備 取β-谷甾醇對(duì)照品少量，加無(wú)水乙醇適量，溶解，制成對(duì)照品溶液。

1.2.2.3展開(kāi)與檢識(shí) 用毛細(xì)管吸取上述供試品溶液10 μL，對(duì)照品溶液5 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G板上，以石油醚：丙酮4∶1（V/V）為展開(kāi)劑展開(kāi)，取出，晾干，噴以磷鉬酸試液顯色，晾干，至斑點(diǎn)出現(xiàn)。結(jié)果表明：大豬屎豆莖和葉與β-谷甾醇對(duì)照品在黃色背景的相應(yīng)位置上均出現(xiàn)相同的藍(lán)色斑點(diǎn)，提示其莖、葉中均含有β-谷甾醇；不同月份的莖、葉中均能檢測(cè)出β-谷甾醇，見(jiàn)圖1。

圖1 大豬屎豆TLC測(cè)定實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖

注：1、5、9為β-谷甾醇對(duì)照品；2、3、4為①、②、③批莖；6、7、8為①、②、③批葉；比移值Rf=0.42。

2討論

大豬屎豆始載于清代的《生草藥性備要》，該本草中稱其為\"自消容\"，具有散結(jié)、清濕熱、利濕解毒之功效。近代對(duì)大豬屎豆研究表明，其對(duì)小鼠肉瘤S-180、S-37及淋巴肉瘤1號(hào)腹水型的生長(zhǎng)，有顯著的抑制作用[3]。此外，它還可用作綠肥植物[4]。該實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明：大豬屎豆中含有生物堿、鞣質(zhì)、有機(jī)酸、黃酮類、酚類、香豆素、內(nèi)酯、強(qiáng)心苷、植物甾醇、三萜類和油脂等化學(xué)成分。TLC結(jié)果表明：其莖、葉中均含有β-谷甾醇。該研究結(jié)果可為大豬屎豆生物活性成分的提取、分離、純化研究提供參考，并為大豬屎豆的深入研究與開(kāi)發(fā)、利用提供一定的研究基礎(chǔ)與數(shù)據(jù)支持。

參考文獻(xiàn)：

[1]國(guó)家中醫(yī)藥管理局中華本草編委會(huì).中華本草 第四冊(cè)[M].上海:上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1999:421-423.

[2]連文琰.豬屎豆屬藥用植物的調(diào)查[J].中藥材，1986，29(3):6-9.

[3]劉忠輝，劉國(guó)道，黃必志.云南豬屎豆屬遺傳多樣性的ISSR分析[J].草業(yè)學(xué)報(bào)，2009，10(5):7-9.編輯/肖慧