復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)與免疫因素和遺傳性凝血缺陷關(guān)系的研究

摘要：目的 關(guān)于復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)與免疫因素及遺傳性凝血缺陷之間關(guān)聯(lián)性的研究。方法 通過對60例有復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)史的女性進(jìn)行相關(guān)免疫因素中抗體檢測及PAI-1基因啟動(dòng)子4G/5G基因多態(tài)性檢測，正常妊娠人群做為對照組，結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果 復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)組的抗心磷脂抗體（ACA）陽性率及抗β-糖蛋白-1抗體（β2GP1-IgG/IgM）陽性率均明顯高于正常對照組（P<0.01，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義）。復(fù)發(fā)自然流產(chǎn)組的PAI-1 4G/4G基因型分布明顯高于對照組。結(jié)論 復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)病因與免疫因素及遺傳性凝血缺陷有很大關(guān)聯(lián)，對臨床診治有重要指導(dǎo)意義。

關(guān)鍵詞：復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)；遺傳性凝血缺陷；免疫因素

Study of Recurrent Spontaneous Abortion and Immune Factors and Hereditary Coagulation Defect Relations

LI Yan

(The First Hospital of Traditional Chinese Medicine in Changde City，Changde 415000，Hunan，China)

Abstract：ObjectiveAbout recurrent spontaneous abortion and immune factors and genetic study of correlation between blood coagulation defects. MethodsThrough the 60 cases with a history of recurrent spontaneous abortion women related immune factors in antibody detection and PAI - 1 gene promoter 4 g / 5 g gene polymorphism， normal pregnancy group as control group， the results were statistically analyzed. ResultsThe recurrent spontaneous abortion group， anti cardiolipin antibody (ACA) antibody positive rate and resistance to beta glycoprotein - 1 (beta 2 gp1 - IgG/IgM) positive rate were significantly higher than that of normal control group (P < 0.01， statistically significant). Recurrent spontaneous abortion group of PAI - 1 4 g / 4 g genotype distribution was obviously higher than the control group. Conclusion recurrent spontaneous abortion etiology and immune factors and hereditary coagulation defects are highly correlated， has important guiding significance to the clinical diagnosis and treatment.

Key words：Recurrent spontaneous abortion;Hereditary coagulation defects; Immune factors復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)（recurrent spontaneous aboryion，RSA）是指連續(xù)2次或2次以上在妊娠期少于28w或胎兒體重不足1000g情況下終止妊娠。引起RSA的病因很復(fù)雜，發(fā)病機(jī)理尚不明確。在不明原因的自然流產(chǎn)婦女中，免疫因素和遺傳性凝血缺陷占很大比重。其中抗心磷脂抗體（ACA）及血清抗β-糖蛋白-1抗體（β2GP1-IgG/IgM）在自身免疫檢查中特異性強(qiáng)，被選擇做為觀察指標(biāo)。遺傳性基因突變?nèi)鏟AI-1表達(dá)失活與反復(fù)流產(chǎn)有關(guān)[1]。通過對2010年5月～2013年5月在我院診治的復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)60例患者的臨床資料觀察，與正常妊娠人群對比分析RSA與免疫因素和遺傳性凝血缺陷之間的關(guān)聯(lián)性，具體內(nèi)容如下。

1資料與方法

1.1一般資料復(fù)發(fā)性流產(chǎn)組：選取本院2010年5月～2013年5月符合復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)診斷標(biāo)準(zhǔn)[2]的女性60例，年齡20～39歲，平均年齡27歲。夫妻雙方染色體核型檢查正常，男方未有精子畸形。正常對照組：選擇正常妊娠婦女30例，無死胎或流產(chǎn)史，年齡22～33歲，平均年齡24歲。

1.2方法

1.2.1血清抗心磷脂抗體檢測選擇美國INOVA公司的試劑盒，使用酶聯(lián)免疫法定性檢測，按說明書操作，以試劑盒標(biāo)示的臨界值作為陽性判斷標(biāo)準(zhǔn)。

1.2.2抗β-糖蛋白-1抗體檢測使用德國EUROIMMUN公司β2GP1-IgG/IgM試劑盒，酶聯(lián)免疫法（ELISA）檢測，根據(jù)試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)濃度判斷陽性。

1.2.3 PAI-1基因啟動(dòng)子4G/5G基因多肽性檢測抽取患者空腹時(shí)靜脈血，離心收集上清液。采用聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片段長度多態(tài)性（PCR-RFLP）技術(shù)，檢測其中一種基因型4G/4G的分布頻率。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 13.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為統(tǒng)計(jì)學(xué)有意義。

2結(jié)果

2.1復(fù)發(fā)性流產(chǎn)組及對照組抗心磷脂抗體及抗β-糖蛋白-1抗體分別陽性表達(dá)情況，見表1。

2.2復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)組及對照組中PAI-1基因4G/4G基因型頻率分布情況，見表2。復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)組患者PAI-1基因4G/4G基因型頻率明顯高于正常對照組（χ2=12.4，P<0.01）。

3討論

據(jù)統(tǒng)計(jì)，自然流產(chǎn)發(fā)生率約為15%～40%，復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)的發(fā)生率約占生育婦女的5%。其發(fā)病因素復(fù)雜，可來自染色體異常、內(nèi)分泌因素、感染因素、免疫紊亂、血栓前狀態(tài)[2]等。近幾年免疫因素和遺傳性凝血異常與RSA關(guān)系研究較為深入，側(cè)重點(diǎn)也不同，取得了一定進(jìn)展。抗心磷脂抗體可損壞血管內(nèi)皮細(xì)胞，阻止血管內(nèi)皮細(xì)胞釋放花生四烯酸（AA），減少前列環(huán)素的合成，使血小板黏附、聚集，在血管中形成血栓。ACA還可增加血小板活化因子（PAF）合成，抑制蛋白C的活性，促進(jìn)血小板凝集，加速血栓形成。血栓的形成會(huì)引起胎盤病理性變化，從而損傷胎盤功能，使胚胎和胎兒缺血、缺氧，抑制胎兒發(fā)育，引起流產(chǎn)。根據(jù)研究結(jié)果表明抗心磷脂抗體在復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)患者中陽性率明顯高于正常妊娠者[3]。本文中復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)組的抗心磷脂抗體（ACA）陽性率及抗β-糖蛋白-1抗體（β2GP1-IgG/IgM）陽性率均明顯高于正常對照組（P<0.01）。在大量復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)女性中發(fā)現(xiàn)有血栓前狀態(tài)，這種狀態(tài)可引起凝血功能異常增高、纖溶功能降低，形成高凝狀態(tài)，于底蛻膜、胎盤絨毛和臍帶血管內(nèi)均可形成血栓，最終致胚胎死亡，發(fā)生自然流產(chǎn)。國內(nèi)外研究顯示β2GP1及其抗體在復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)的病理機(jī)制中有一定作用，血清中抗β-糖蛋白-1抗體水平與ACA水平成正相關(guān)，其相關(guān)性比ACA更為敏感，在APS患者中更具有特異性。遺傳性凝血缺陷如凝血因子Ⅴ（FⅤ）位于1692位堿基發(fā)生錯(cuò)義突變，導(dǎo)致谷氨酰胺（Gln）替代了氨基酸序列506位的精氨酸（Arg），該突變可致FⅤa不易裂解失活，表現(xiàn)為高凝狀態(tài)[4]。血漿纖溶酶原激活物抑制物-1（PAI-1）是纖溶系統(tǒng)中主要生理抑制劑，它水平升高可導(dǎo)致纖溶活性降低，增強(qiáng)凝血過程，易形成血栓。Dawson等發(fā)現(xiàn)PAI-1啟動(dòng)子區(qū)-675處4G/5G單核苷酸插入/缺失多肽性影響基因表達(dá)，活性與PAI-1水平有關(guān)。在自然流產(chǎn)婦女中PAI-1 4G/4G純合子發(fā)生率明顯高于正常妊娠婦女[5]，PAI-1基因4G/4G基因型是復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的易感基因型，關(guān)系密切。本文研究結(jié)果顯示復(fù)發(fā)自然流產(chǎn)組的PAI-1 4G/4G基因型分布明顯高于對照組（P<0.01）。對于原因不明的流產(chǎn)病因中，免疫因素和遺傳性凝血缺陷因素占有重要位置[6]。通過近年來對免疫因素、遺傳性凝血異常與復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)間關(guān)系研究的深入，對及早預(yù)防、及早發(fā)現(xiàn)及診斷和治療方面具有重要指導(dǎo)意義。目前臨床上可通過規(guī)范化的抗凝治療，在自身免疫和凝血缺陷導(dǎo)致的復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者身上取得了顯著療效，妊娠成功率得以提高。

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編輯/哈濤