參麥注射液關(guān)節(jié)腔注射對(duì)膝骨性關(guān)節(jié)炎患者關(guān)節(jié)液中IL-1和TNF-α水平的影響

摘要：目的研究參麥注射液關(guān)節(jié)腔注射對(duì)膝骨性關(guān)節(jié)炎治療作用的可能機(jī)理。方法對(duì)臨床63例膝骨性關(guān)節(jié)炎患者（73膝）采用膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射參麥注射液的療法，檢測(cè)參麥注射液對(duì)關(guān)節(jié)液中IL-1和TNF-α水平的影響，并分別于治療前后評(píng)估膝關(guān)節(jié)的功能指數(shù)。結(jié)果參麥注射液可有效降低關(guān)節(jié)液中IL-1和TNF-α的水平，從而改善患者膝關(guān)節(jié)功能。結(jié)論參麥注射液通過(guò)降低關(guān)節(jié)液中IL-1和TNF-α的水平改善膝關(guān)節(jié)功能。

關(guān)鍵詞：參麥注射液，膝骨性關(guān)節(jié)炎，IL-1，TNF-α膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎是以關(guān)節(jié)軟骨丟失，并伴有關(guān)節(jié)周圍新骨形成及骨反應(yīng)為特點(diǎn)的一種滑膜關(guān)節(jié)病。是中老年的多發(fā)病，屬于中醫(yī)\"骨痹\"的范疇。該病呈慢性、進(jìn)行性發(fā)展，早期以關(guān)節(jié)疼痛、晨僵為主，晚期則出現(xiàn)持續(xù)性疼痛，關(guān)節(jié)腫脹、畸形，活動(dòng)受限等，給患者的生活與工作帶來(lái)了諸多不便。前期研究表明[1-2]，參麥注射液關(guān)節(jié)腔注射可有效改善膝骨性關(guān)節(jié)炎患者的近期以及遠(yuǎn)期臨床療效。但目前有關(guān)參麥注射液對(duì)膝骨性關(guān)節(jié)炎治療作用的機(jī)制研究相對(duì)較少。本文則對(duì)63例膝骨性關(guān)節(jié)炎患者采用膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射參麥注射液的療法，分析了其對(duì)患者關(guān)節(jié)液中IL-1和TNF-α水平的影響，以期進(jìn)一步明確參麥注射液對(duì)膝骨性關(guān)節(jié)炎治療作用的可能機(jī)制。

1資料與方法

1.1一般資料 63例膝骨性關(guān)節(jié)炎患者（共73膝）均來(lái)自于我院骨科門診及住院部。其中男35例（雙側(cè)7例），女28例（雙側(cè)3例）；年齡51~80歲，平均65.3歲；病程2~15年，平均6.8年。所有患者均符合美國(guó)風(fēng)濕病協(xié)會(huì)推薦的膝骨性關(guān)節(jié)炎診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]和中華風(fēng)濕病學(xué)分會(huì)的骨關(guān)節(jié)炎診治指南(草案)[4]。

1.2方法 所有入組患者均予以參麥注射液(由杭州正大青春寶藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批準(zhǔn)文號(hào)：國(guó)藥準(zhǔn)字Z33020021) 10 mL關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射。膝關(guān)節(jié)穿刺進(jìn)針點(diǎn)選擇在髕韌帶內(nèi)側(cè)或外側(cè)，膝關(guān)節(jié)腔間隙。注射部位常規(guī)消毒、鋪巾，2%利多卡因局部麻醉后，緩慢注入藥物，并屈伸活動(dòng)膝關(guān)節(jié)，使藥物均勻地分布于關(guān)節(jié)腔內(nèi)。注射1次/w，4次為1個(gè)療程，2個(gè)療程后作療效評(píng)價(jià)。

1.3療效判定及觀察指標(biāo)

1.3.1膝骨性關(guān)節(jié)炎嚴(yán)重性指數(shù)及近期療效評(píng)定 參照Lequesne骨關(guān)節(jié)炎嚴(yán)重性和活動(dòng)性指數(shù)評(píng)價(jià)法[5]，制定膝關(guān)節(jié)觀察表。關(guān)節(jié)炎癥表現(xiàn)為消失、減輕、不變或加重三等，關(guān)節(jié)活動(dòng)性指數(shù)按觀察表記分分為0分、1~4分、5~7分、8~10分、11~13分和>14分6個(gè)等級(jí)。治療后炎癥表現(xiàn)消失，關(guān)節(jié)指數(shù)達(dá)0分即為臨床緩解；關(guān)節(jié)指數(shù)進(jìn)步超過(guò)3個(gè)等級(jí)為顯效；炎癥表現(xiàn)減輕，關(guān)節(jié)指數(shù)進(jìn)步1~2個(gè)等級(jí)為有效；炎癥表現(xiàn)不變或加重，關(guān)節(jié)指數(shù)進(jìn)步<1個(gè)等級(jí)為無(wú)效。

1.3.2關(guān)節(jié)液IL-1和TNF-α水平的測(cè)定 治療前后分別在無(wú)菌條件下抽取患側(cè)關(guān)節(jié)液，離心后取上清，-70℃低溫冷凍冰箱中保存?zhèn)錅y(cè)。關(guān)節(jié)液抽取方法同常規(guī)膝關(guān)節(jié)穿刺灌洗術(shù)：常規(guī)消毒鋪巾，穿刺成功后注入生理鹽水10 mL，反復(fù)回抽3遍后，將液體抽出，重復(fù)離心后取上清。并采用雙抗ELISA法檢查上述關(guān)節(jié)液中IL-1和TNF-α的水平 (試劑盒均購(gòu)于深圳晶美生物技術(shù)有限公司)。

2結(jié)果

2.1臨床近期療效分析 所有患者均完成2個(gè)療程共8次治療，臨床近期療效見表1。參麥注射液關(guān)節(jié)腔注射治療膝骨性關(guān)節(jié)炎的臨床近期總有效率可達(dá)90.4%，與前期文獻(xiàn)報(bào)道的相一致[1-2]；同時(shí)與目前臨床常用的透明質(zhì)酸鈉關(guān)節(jié)腔注射療法的療效亦基本相同[6]。

2.2膝關(guān)節(jié)功能指數(shù)及關(guān)節(jié)液中IL-1和TNF-α水平變化 參麥注射液治療后關(guān)節(jié)功能指數(shù)評(píng)分與關(guān)節(jié)液IL-1和TNF-α水平均較治療前明顯降低，統(tǒng)計(jì)分析有顯著性意義(P<0.01)，見表2。

3討論

關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射療法可使藥物直接作用于病灶而發(fā)揮治療作用，這是目前骨性關(guān)節(jié)炎治療中見效較快的一種治療方式，具有操作簡(jiǎn)單、局部藥物濃度高、療效周期長(zhǎng)等優(yōu)點(diǎn)，因而適于在臨床推廣應(yīng)用。1974年，Peyron首次用透明質(zhì)酸治療骨性關(guān)節(jié)炎患者，目前廣泛使用，收到了較好的臨床效果[6]。而近年來(lái)，隨著中藥提取技術(shù)的發(fā)展，應(yīng)用中藥提取液制劑治療骨性關(guān)節(jié)炎的報(bào)道也日漸增多。晏雪生[7]等發(fā)現(xiàn)川芎嗪的有效成分可促進(jìn)軟骨細(xì)胞分泌合成代謝因子，刺激細(xì)胞增殖與蛋白質(zhì)合成。而郭玉海[1]等則發(fā)現(xiàn)參麥注射液關(guān)節(jié)腔注射對(duì)膝骨性關(guān)節(jié)炎具有較好的臨床療效，但對(duì)于其作用機(jī)制目前尚未明確。

目前普遍認(rèn)為骨性關(guān)節(jié)炎發(fā)生的確切病因可能與相關(guān)細(xì)胞因子的改變密切相關(guān)[8]。細(xì)胞因子主要通過(guò)對(duì)關(guān)節(jié)軟骨的內(nèi)壓作用而使其壞死，壞死的骨小梁在吸收重建過(guò)程中使軟骨下骨的硬化梯度增加，吸收振蕩的能力下降，從而使軟骨受力不均，局部的壓力變大，這導(dǎo)致或加重了軟骨的損傷，進(jìn)而出現(xiàn)骨性關(guān)節(jié)炎。IL-1和TNF-α作為兩個(gè)重要的炎性介質(zhì)細(xì)胞因子，與骨性關(guān)節(jié)炎的發(fā)生密切相關(guān)。研究表明[9]，骨性關(guān)節(jié)炎患者的關(guān)節(jié)液中IL-1含量明顯升高，其可進(jìn)一步促進(jìn)MMP(金屬蛋白酶)的產(chǎn)生和分泌，引起軟骨中基質(zhì)的降解，并可抑制軟骨細(xì)胞合成具有透明軟骨特性的蛋白聚糖和Ⅱ型膠原，促進(jìn)生成有纖維母細(xì)胞特性的Ⅰ型膠原，從而使軟骨細(xì)胞變性，引起軟骨缺損和軟骨的生物力學(xué)改變。IL-1還可促使軟骨細(xì)胞產(chǎn)生PGE2(前列腺素E2)，加重關(guān)節(jié)的炎癥反應(yīng)，增加破骨細(xì)胞活性，促進(jìn)骨質(zhì)吸收。而TNF-α是軟骨基質(zhì)降解的重要介質(zhì)，并且在滑膜炎中起重要作用。TNF-α可以通過(guò)增加MMP活性來(lái)抑制基質(zhì)中糖蛋白和膠原的合成，加速軟骨基質(zhì)的分解代謝，刺激細(xì)胞合成DNA、PGE2和Ⅰ型膠原纖維。因此本文通過(guò)對(duì)關(guān)節(jié)液中IL-1和TNF-α水平的分析，嘗試進(jìn)一步探討參麥注射液對(duì)膝骨性關(guān)節(jié)炎治療作用的可能機(jī)制。

參麥注射液是由中藥人參、麥冬中提取的有效物質(zhì)組成的靜脈注射劑。其具有益氣養(yǎng)陰、生津止渴、斂陰固脫的作用；兩藥相合能生津益氣、活血解毒。前期研究表明，參麥注射液還具有廣泛的免疫藥理活性，有調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能的作用[10]，它能通過(guò)抑制巨噬細(xì)胞釋放TNF-α和一氧化氮(NO)等炎癥介質(zhì)而達(dá)到減輕機(jī)體組織損傷的作用。同時(shí)，它還是一種有效的自由基清除劑，具有抗脂質(zhì)過(guò)氧化作用，可直接減少氧自由基，并提高細(xì)胞的抗氧化酶活性[11]。潘海樂[12]等發(fā)現(xiàn)參麥注射液可明顯降低骨關(guān)節(jié)炎動(dòng)物模型血液中IL-1的水平，通過(guò)抑制血液中IL-1的異常升高發(fā)揮對(duì)骨關(guān)節(jié)炎的防治作用。而在本文中，我們亦發(fā)現(xiàn)參麥注射液關(guān)節(jié)腔注射對(duì)膝骨性關(guān)節(jié)炎臨床近期總有效率可達(dá)90.4%，而其作用機(jī)制可能與其能顯著降低患者關(guān)節(jié)液中IL-1和TNF-α的水平有關(guān)。盡管目前參麥注射液的關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射療法作為一種新型治療方法，在小范圍患者試用過(guò)程中取得了較好的臨床效果，但還需要在更大范圍內(nèi)推廣使用，以證實(shí)其在膝骨性關(guān)節(jié)炎治療中的臨床價(jià)值。而本研究結(jié)果將為參麥注射液關(guān)節(jié)腔注射治療膝骨性關(guān)節(jié)炎的使用和推廣提供一定的理論依據(jù)。

參考文獻(xiàn)：

[1]郭玉海，朱建林，林定坤，等.參麥注射液關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射對(duì)癥狀性膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎的近期臨床療效觀察[J].中醫(yī)正骨，2006，18(10):745-746.

[2]溫振杰，陳亮.參麥注射液關(guān)節(jié)腔注射治療膝骨性關(guān)節(jié)炎療效觀察[J]，陜西中醫(yī)，2010，31(8):992-994.

[3]Altman R，Asch E，Bloch D，et al.Development of criteria for the classification and reporting of osteoarthritis.Classification of osteoarthritis of the knee.Diagnostic and Therapeutic Criteria Committee of the American Rheumatism Association [J].Arthritis Rheum，1986，29(8):1039-1049.

[4]中華風(fēng)濕病學(xué)分會(huì).骨關(guān)節(jié)炎診治指南(草案)[J].中華醫(yī)學(xué)信息導(dǎo)報(bào)，2002，24:15-16.

[5]Lequesne M.Indices of severity and disease activity for osteoarthritis [J].Semin Arthritis Rheum，1991，20(2):48-54

[6]何仲佳，周雪明，朱文雄.透明質(zhì)酸鈉治療老年性膝骨關(guān)節(jié)炎療效觀察[J].廣東醫(yī)學(xué)，2004，25(9):1091-1092

[7]晏雪生，彭亞琴，明安萍.川芎嗪注射液對(duì)體外培養(yǎng)軟骨細(xì)胞影響的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國(guó)中醫(yī)骨傷科雜志，2002，10(1):15-17.

[8]任紅革，崔逢德.細(xì)胞因子在骨性關(guān)節(jié)炎中的表達(dá)與應(yīng)用[J].中國(guó)組織工程研究，2012，15（52）:9828-9835.

[9]Irie k，Uchiyama E，Iwaso H.Intraarticular inflammatory cytokines in acute anterior cruciate ligament injured knee [J].Knee，2003，10(1):93-96.

[10]尹麗慧，沃興德.參麥注射液的藥理和臨床研究進(jìn)展[J].浙江中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2011，25（6）:65-67.

[11]馮培芳，王真.參麥注射液對(duì)晚期癌腫患者免疫功能調(diào)節(jié)的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國(guó)中藥雜志.1995，20 (11): 696-697.

[12]潘海樂，曲波，王耶.參麥注射液對(duì)骨關(guān)節(jié)炎模型動(dòng)物關(guān)節(jié)液中白細(xì)胞介素-1水平的影響[J].中華風(fēng)濕病學(xué)雜志，2000，4(2):106-108.

編輯/肖慧