離子色譜法結(jié)合紅外光譜法檢驗氯化琥珀膽堿

喬文濤，黃彬晏，黃克建，劉曉鋒，楊寧，易葉平

(1.廣西壯族自治區(qū)公安廳物證鑒定中心，南寧 530012；2.廣西河池食品藥品檢驗所，廣西河池 547000)

氯化琥珀膽堿(Succinylcholine chloride)，又名氯化琥珀酰膽堿或司可林，它屬于除極化型骨骼肌松弛藥，主要用途是作為獸藥或人類外科手術(shù)的麻醉誘導(dǎo)劑［1］，但臨床使用中發(fā)現(xiàn)該藥不良反應(yīng)多、副作用大。目前臨床主要用于氣管插管和術(shù)中維持肌肉松弛，而大劑量注射該液可致心率減慢，也可出現(xiàn)如期前收縮等心律失常，甚至出現(xiàn)支氣管痙攣或過敏性休克等［2］。氯化琥珀膽堿曾被國家列為B級有機劇毒物。該藥物有時被不法分子裝填在自制飛鏢中，并通過弓弩等工具發(fā)射，用于獵殺動物等違法活動，并經(jīng)常有射殺家畜時不慎誤傷自己而致死的案例發(fā)生。

目前文獻中關(guān)于氯化琥珀膽堿的檢測方法主要有酶電極法［3］、氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法(GC–MS)［4］、離子色譜法［5］和高效液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法(HPLC–MS)［6］等，未見采用離子色譜法結(jié)合紅外光譜法檢測氯化琥珀膽堿的方法報道。筆者結(jié)合一起案例中飛鏢及死者肌肉組織中氯化琥珀膽堿的檢測，建立了離子色譜法結(jié)合紅外光譜法檢測氯化琥珀膽堿的方法，該法可推廣于日常辦案中，滿足檢測要求。

1 實驗部分

1.1 主要儀器與試劑

離子色譜儀：ICS–1100型，配有Chromeleon 6.8數(shù)據(jù)工作站，美國Thermo Fisher公司；

傅里葉顯微紅外光譜儀：Nicolet iN–10型和iZ–10型，美國Nicolet公司；

OMNIC數(shù)據(jù)工作站：美國Thermo Fisher公司；

超純水制備儀：Master-s.UV型，上海和泰公司；

電子分析天平：XS205DU型，感量為0.01 mg，瑞士梅特勒公司；

超 聲 波 清 洗 器：SB3200–HT型，上 海BRANSON公司；

水性微孔濾膜：0.22 μm；

氯化琥珀膽堿：分析純，美國Sigma公司；

溴化鉀：分析純；

實驗用水為電阻率18.2 MΩ·cm的去離子水。

1.2 離子色譜法分析條件及方法

1.2.1 離子色譜條件

分析柱：IonPac CS12A陽離子交換柱(250 mm×4 mm)；保護柱：IonPac CG12A柱(50 mm×4 mm)；柱溫：30℃；CSRS–4自動再生抑制器；AS–DV自動進樣器；電導(dǎo)檢測器溫度：35℃；流動相：20 mmol／L甲基磺酸溶液，以l mL／min等度淋洗；檢測方式：電導(dǎo)檢測，電流為60 mA；進樣方式：自動進樣；進樣體積：25μL。

1.2.2 標準對照液配制

稱取氯化琥珀膽堿標準品適量，配制成質(zhì)量濃度為20 μg／mL的氯化琥珀膽堿水溶液。

1.2.3 檢材樣品制備

稱取死者大腿針眼周圍的肌肉組織約3 g，剪碎置于燒杯中，加入去離子水10 mL，然后超聲約30 min，過濾，取濾液于50 mL容量瓶中，加入去離子水稀釋至標線，作為待測溶液。

另取現(xiàn)場尸體大腿上飛鏢內(nèi)液體0.05 mL，稀釋100倍體積后過0.22 μm微孔濾膜，作為待測溶液。

1.3 紅外光譜法分析條件及方法

1.3.1 分析條件

掃描范圍：400～4 000 cm–1；分辨率：4 cm–1。

1.3.2 標準樣品制備

取氯化琥珀膽堿標準0.1 mg，與適量溴化鉀磨勻后壓片，用紅外光譜儀檢測。

1.3.3 檢材樣品制備

取飛鏢內(nèi)液體0.1 mL于蒸發(fā)皿中揮干，和適量溴化鉀磨勻壓片，用紅外光譜儀檢測。

2 結(jié)果與討論

2.1 離子色譜法分析結(jié)果

在1.2.1離子色譜條件下，對氯化琥珀膽堿標準溶液和檢材樣品溶液進行分析，離子色譜圖見圖1～圖3。

圖1 氯化琥珀膽堿標準溶液陽離子色譜圖

圖2 死者大腿針眼周圍肌肉組織水溶液陽離子色譜圖

圖3 死者大腿上飛鏢內(nèi)液體水溶液陽離子色譜圖

由圖1～圖3可見，在實驗條件下各樣品中陽離子水溶液經(jīng)離子色譜分析可得到有效分離，滿足定性定量分析要求。

2.2 紅外光譜法分析結(jié)果

氯化琥珀膽堿標準和飛鏢內(nèi)液體紅外光譜圖見圖4和圖5。

圖4 氯化琥珀膽堿標準紅外譜圖

圖5 死者大腿上飛鏢內(nèi)液體紅外譜圖

由圖4、圖5可知，在實驗條件下樣品能得到準確分析，檢索結(jié)果相似度達到96%以上，滿足準確定性分析的要求。

2.3 方法特點

由上述分析可知，離子色譜法可以將生物檢材和非生物檢材中的主要無機陽離子得到很好的分離，每個樣品分析時間在15 min內(nèi)完成，能夠快速準確分析，達到定性、定量分析的目的。

因飛鏢內(nèi)液體純度較高，可用紅外光譜法檢驗。將飛鏢內(nèi)液體揮干成白色粉末，與溴化鉀壓片后用紅外光譜儀檢驗，譜庫檢索氯化琥珀膽堿相似度達96%以上，準確定性效果較好，可輔助離子色譜法用于日常辦案定性分析。因此在日常辦案中，此類案件可采用離子色譜法結(jié)合紅外光譜法對送檢檢材進行檢驗，能達到快速準確分析的效果。

3 應(yīng)用案例

2013年，有群眾在某地一養(yǎng)狗場房子內(nèi)發(fā)現(xiàn)一具男尸，在其右大腿上插有一根飛鏢，并在其旁邊一個白色編織袋內(nèi)發(fā)現(xiàn)飛鏢若干。辦案人員對現(xiàn)場飛鏢和尸體右大腿毒鏢針眼周圍肌肉取樣送檢，經(jīng)離子色譜法結(jié)合紅外光譜法檢測，從中檢出氯化琥珀膽堿成分。

4 結(jié)語

建立了離子色譜法結(jié)合紅外光譜法檢驗氯化琥珀膽堿的檢測方法，該方法操作簡單，檢測靈敏、準確，可用于刑事案件中檢材的快速檢驗。

［1］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典［M］.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005: 764.

［2］王世全，王明山.麻醉意外［M］.2版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2010: 59–60，65–66.

［3］孫士青，王寧，葛淑蘭.酶電極法測定氯化琥珀膽堿注射液氯化膽堿及氯化琥珀膽堿含量［J］.中國藥學(xué)雜志，1997，32(10): 609–611.

［4］姜波，徐海華.“飛鏢”案件中氯化琥珀膽堿的檢驗與分析［C］.第四屆全國“公共安全領(lǐng)域中的化學(xué)問題”學(xué)術(shù)研討會論文集，中國會議公共安全中的化學(xué)問題研究進展(第三卷)，2013: 659–661.

［5］陳祥國，王淑真，呂紀忠，等.離子色譜法分析生物檢材中的氯化琥珀膽堿［J］.刑事技術(shù)，2010(6): 17–18.

［6］張云峰，趙森，王炯，等.超高效液相色譜–質(zhì)譜法分析人全血中的氯化琥珀膽堿［J］.中國法醫(yī)學(xué)雜志，2013(6): 475–477.