• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    血清SHBG與SAA4聯(lián)合檢測對涂陰肺結(jié)核輔助診斷的價值

    2020-01-10 06:48:02黃琪淋葉紹燕萬逢潔
    中國感染控制雜志 2019年12期
    關(guān)鍵詞:結(jié)核結(jié)核病肺結(jié)核

    黃琪淋,溫 莎,葉紹燕,萬逢潔,何 敏,

    (1. 廣西壯族自治區(qū)龍?zhí)夺t(yī)院急診醫(yī)學(xué)科,廣西 柳州 545005; 2. 廣西醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心,廣西 南寧 530021; 3. 柳州市疾病預(yù)防控制中心環(huán)境與學(xué)校衛(wèi)生防治所,廣西 柳州 545007; 4. 廣西醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院勞動衛(wèi)生與環(huán)境衛(wèi)生學(xué)教研室,廣西 南寧 530021)

    肺結(jié)核是由結(jié)核分枝桿菌感染肺部形成的一種慢性傳染病,其中涂陰肺結(jié)核約占肺結(jié)核患者總數(shù)的一半[1]。涂陰肺結(jié)核患者早期不易被及時發(fā)現(xiàn),易漏診、誤診。然而,結(jié)核病的延遲診斷可能會增加疾病的嚴重程度和病死率,并加大傳播風(fēng)險。在一項橫斷面調(diào)查[2]中發(fā)現(xiàn),涂陰肺結(jié)核導(dǎo)致結(jié)核患者延遲治療風(fēng)險比為2.3倍。在撒哈拉以南非洲地區(qū)的一項研究[3]中,涂陰肺結(jié)核患者對該地區(qū)的結(jié)核病控制項目構(gòu)成了巨大的負擔(dān),其中三分之一的涂片陰性結(jié)核病患者在初診后一年內(nèi)死亡,三分之一患者可能發(fā)生復(fù)發(fā)性肺結(jié)核。因此,尋求一種靈敏度高、特異度強的涂陰肺結(jié)核血清標志物是結(jié)核病研究關(guān)注的熱點。近年來,血清蛋白組學(xué)技術(shù)為結(jié)核病的輔助診斷提供了契機[4]。本課題組前期血清蛋白組學(xué)的研究中發(fā)現(xiàn)性激素結(jié)合球蛋白(sex hormone-binding globulin,SHBG)及血清淀粉樣蛋白4(serum amyloid A4,SAA4)在血清中的差異表達,并且目前在國內(nèi)外研究中除本課題組外尚未見有關(guān)血清SHBG及SAA4輔助診斷涂陰肺結(jié)核的相關(guān)報道,因此,本研究通過檢測涂陰肺結(jié)核血清潛在標志物,即SHBG及SAA4在血清中的表達水平,并應(yīng)用受試者工作特征(ROC)曲線進一步評估兩項指標的輔助診斷效能,為涂陰肺結(jié)核的輔助診斷提供依據(jù)。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料 采集2017年3—5月廣西柳州市龍?zhí)夺t(yī)院收治的88例涂陰肺結(jié)核患者的血清標本,參照中華醫(yī)學(xué)會制定的《臨床診療指南結(jié)核病分冊》[5]進行涂陰肺結(jié)核患者的診斷,排除合并腫瘤、嚴重器質(zhì)性病變、免疫功能低下的肺結(jié)核患者。同一時期采集56例廣西柳州市本地區(qū)的健康體檢人員的血清標本作為健康對照組,排除結(jié)核、肺炎、塵肺、腫瘤及其他嚴重肺部疾病患者。

    1.2 血清SHBG、SAA4蛋白含量檢測 采集研究對象空腹時外周靜脈血3 mL,4℃靜置2 h,3 000 r/min離心5 min,取上層血清:(1)血清稀釋100倍后,采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)法(試劑盒購于R&D Systems公司)檢測兩組血清SHBG蛋白含量;(2)血清稀釋10倍后,采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)法(試劑盒購于LifeSpan BioSciences公司)檢測兩組血清SAA4蛋白含量。檢測過程均嚴格參照試劑盒說明書進行操作。

    1.3 近三年涂(菌)陰肺結(jié)核的結(jié)核感染T細胞斑點試驗(T-SPOT.TB)檢測方法分析

    1.3.1 檢索策略 檢索三大中文數(shù)據(jù)庫:萬方數(shù)據(jù)庫、中國知識基礎(chǔ)設(shè)施工程(中國知網(wǎng)數(shù)據(jù)庫)、維普數(shù)據(jù)庫于2016年1月1日至今發(fā)表的中文文獻,按照下述條件進行檢索:(涂陰肺結(jié)核 OR 菌陰肺結(jié)核)AND(靈敏度 OR 敏感度 OR 特異度)AND(T-SPOT OR ELISPOT OR 酶聯(lián)免疫斑點技術(shù) OR γ-干擾素釋放試驗)。

    1.3.2 文獻納入與排除標準 納入標準:(1)患者明確診斷為涂陰肺結(jié)核或菌陰肺結(jié)核;(2)應(yīng)用T-SPOT.TB檢測方法;(3)數(shù)據(jù)能直接提取四格表數(shù)據(jù)或經(jīng)計算得出四格表數(shù)據(jù);(4)病例及對照樣本數(shù)均>40例;(5)文獻為中文期刊發(fā)表論文。排除標準:(1)無法提取四格表數(shù)據(jù);(2)綜述或Meta類文獻;(3)數(shù)據(jù)有限的摘要文獻;(4)重復(fù)文獻。

    1.4 涂陰肺結(jié)核血清學(xué)指標診斷效能評價標準 根據(jù)比較靈敏度、特異度、曲線下面積(area under curve,AUC)、約登指數(shù)指標來評估各項研究中T-SPOT.TB檢測方法的涂陰肺結(jié)核診斷效能。

    1.5 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 20.0進行數(shù)據(jù)分析,定量資料采用中位數(shù)(四分位數(shù)間距)[M(P25~P75)]表示,組間比較采用Mann-Whitney U非參數(shù)檢驗。繪制ROC曲線,并計算曲線下面積、靈敏度、特異度、約登指數(shù)。應(yīng)用MedCalc 16.2軟件進行Z檢驗,比較ROC曲線AUC的差異,進而評價單一與聯(lián)合指標診斷涂陰肺結(jié)核的診斷效能。采用卡方檢驗分別進行涂陰肺結(jié)核SHBG與SAA4兩者聯(lián)合診斷試驗與近三年涂(菌)陰肺結(jié)核的T-SPOT.TB檢測方法的靈敏度和特異度比較。以P≤0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 基本情況 88例涂陰肺結(jié)核患者中男性51例,女性37例,平均年齡(49.49±16.13)歲;56例健康體檢人員中男性36例,女性20例,平均年齡(46.80±9.88)歲。兩組間年齡、性別比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(均P>0.05),資料具有可比性。

    2.2 血清SHBG與SAA4蛋白表達水平 ELISA法檢測結(jié)果顯示:涂陰肺結(jié)核組血清SHBG與SAA4蛋白濃度分別為52.32(24.58~81.19)nmol/L、56.71(41.87~77.57)ng/mL,健康對照組SHBG與SAA4蛋白濃度分別為25.97(16.60~36.45)nmol/L、35.79(29.81~41.07)ng/mL。涂陰肺結(jié)核組血清SHBG與SAA4蛋白表達水平高于健康對照組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.001)。見圖1。

    圖1 血清SHBG、SAA4蛋白的表達水平

    2.3 SHBG、SAA4單一及聯(lián)合診斷涂陰肺結(jié)核的ROC曲線 對88例涂陰肺結(jié)核患者及56例健康對照組血清SHBG、SAA4蛋白的檢測結(jié)果繪制ROC曲線,結(jié)果表明兩指標聯(lián)合診斷時曲線下面積AUC為0.906(95%CI:0.857~0.955)(P<0.001)。見表1、圖2。應(yīng)用Z檢驗比較ROC曲線的結(jié)果如下:SHBG、SAA4兩者聯(lián)合診斷涂陰肺結(jié)核的效能明顯優(yōu)于單一指標的診斷效能(P<0.001),而比較SHBG、SAA4單項診斷涂陰肺結(jié)核時,兩蛋白指標的單獨診斷效能差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(均P>0.05)。

    表1 SHBG與SAA4聯(lián)合診斷涂陰肺結(jié)核的診斷效能

    圖2 SHBG、SAA4單一及聯(lián)合診斷涂陰肺結(jié)核的ROC曲線

    Figure2ROC curves of single and combined detection of SHBG, SAA4 for SNPT

    2.4 近三年涂(菌)陰肺結(jié)核的T-SPOT.TB檢測方法分析 共檢索到102篇相關(guān)文獻,其中萬方數(shù)據(jù)庫79篇、中國知網(wǎng)數(shù)據(jù)庫20篇、維普數(shù)據(jù)庫3篇,按照納入及排除標準,最終納入12篇中文文獻,排除90例,其中64篇無法提取四格表數(shù)據(jù),11篇樣本例數(shù)少于40,3篇為綜述或Meta類文獻,10篇為重復(fù)文獻,2篇為非T-SPOT.TB檢測方法。從近三年已報道涂(菌)陰肺結(jié)核的T-SPOT.TB檢測方法的診斷效能來看,表2顯示各研究中的T-SPOT檢測技術(shù)在診斷肺結(jié)核時其診斷效能結(jié)果不一致,本研究的聯(lián)合診斷特異度不比T-SPOT.TB檢測方法差,在靈敏度上T-SPOT.TB檢測技術(shù)除兩項研究比本研究的聯(lián)合診斷靈敏度高外,其他均無統(tǒng)計學(xué)意義(均P>0.05),且本研究聯(lián)合診斷的約登指數(shù)為0.752,與這12項研究相比具備較好的準確性,可見SHBG與SAA4兩者聯(lián)合診斷涂陰肺結(jié)核具有比較優(yōu)勢。

    3 討論

    在結(jié)核病的流行過程中,相對于涂陽肺結(jié)核患者,涂陰肺結(jié)核患者的結(jié)核傳播率約為22%[18],且肺結(jié)核病例中約有一半的涂片呈陰性[1],意味著結(jié)核病的整體負擔(dān)嚴重,將加大結(jié)核病的防控難度。因此,快速準確地診斷涂陰肺結(jié)核病對于促進疾病早期治療的開始,改善患者的預(yù)后和減少結(jié)核病傳播至關(guān)重要。近年來血清學(xué)檢測技術(shù)被廣泛應(yīng)用于臨床疾病工作中,有研究[19]表明該項技術(shù)有助于結(jié)核病的輔助診斷,且血清學(xué)檢測對于痰量達不到標準的患者(如兒童、HIV/AIDS患者)和肺外結(jié)核患者具有一定的優(yōu)勢。因此,迫切需要尋找一種應(yīng)用多項血清學(xué)指標聯(lián)合診斷結(jié)核病的方法。

    表2納入12篇文獻中近三年涂(菌)陰肺結(jié)核的T-SPOT檢測技術(shù)比較

    Table2Comparison of T-SPOT detection technique of SNPT in 12 literatures in recent three years

    第一作者病例組(例)對照組(例)靈敏度特異度約登指數(shù)李振生[6]170640.971* 0.652# 0.623郝興亮[7]66400.864 0.900 0.764何 莉[8]1947440.866 0.808 0.674任甜甜[9]168810.792 0.630# 0.421嚴松盛[10]1021000.794 0.640# 0.434楊映暉[11]491150.714 0.826 0.540彭 寧[12]135790.822 0.924 0.746周前選[13]185640.778 0.688# 0.466李愛英[14]1561440.955* 0.896 0.851蔡向敬[15]1142030.856 0.714# 0.570何梅芳[16]93400.849 0.900 0.749王甲甲[17]77890.8960.764#0.660

    *:與SHBG+SAA4聯(lián)合診斷靈敏度相比,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);#:與SHBG+SAA4聯(lián)合診斷特異度相比,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)

    本課題組在前期研究中利用血清蛋白組學(xué)技術(shù)篩選出了肺結(jié)核患者血清差異表達蛋白SHBG與SAA4,在此基礎(chǔ)上,本研究進一步鑒定了SHBG、SAA4蛋白在涂陰肺結(jié)核患者血清中均高表達,預(yù)示著該蛋白可能作為涂陰肺結(jié)核患者診斷血清學(xué)候選標志物。因此,本研究運用ROC曲線進一步評價這兩種蛋白對涂陰肺結(jié)核的輔助診斷價值。在評估SHBG與SAA4蛋白單獨及聯(lián)合診斷涂陰肺結(jié)核時,發(fā)現(xiàn)聯(lián)合診斷效能明顯高于單個蛋白指標的診斷效能,其中聯(lián)合診斷的ROC曲線下面積可達0.906(95%CI:0.857~0.955),且靈敏度為84.1%,特異度可達91.1%。近年來,新的檢測技術(shù)γ-干擾素釋放試驗已經(jīng)被引入到肺結(jié)核臨床診斷中且表現(xiàn)出較高的診斷價值,我國主要使用結(jié)核感染T-SPOT.TB試劑盒,該試驗主要通過測定由結(jié)核分枝桿菌特異性抗原刺激效應(yīng)T細胞產(chǎn)生的γ-干擾素來判斷被檢者有無結(jié)核病或是否存在結(jié)核感染。與近三年的涂(菌)陰肺結(jié)核的T-SPOT.TB檢測方法比較,本研究的聯(lián)合診斷的特異度不比T-SPOT.TB檢測技術(shù)差,在靈敏度上T-SPOT.TB檢測技術(shù)除兩項研究比本研究的聯(lián)合診斷靈敏度高外,其他均無統(tǒng)計學(xué)意義,且本研究的約登指數(shù)0.752與納入的這12項研究的約登指數(shù)相比,具備較好的準確性,表明該聯(lián)合診斷試驗的真實性好,能較好地發(fā)現(xiàn)真正的涂陰肺結(jié)核患者,可見SHBG與SAA4兩者聯(lián)合診斷涂陰肺結(jié)核具有比較優(yōu)勢。因此,本研究發(fā)現(xiàn)的聯(lián)合檢測SHBG、SAA4蛋白為涂陰肺結(jié)核患者提供了良好的輔助診斷價值。同時還發(fā)現(xiàn)雖然本研究與周穎等[20]研究中應(yīng)用的SHBG蛋白檢測試劑盒均來自R&D公司,但兩項研究中SHBG單一指標診斷涂陰肺結(jié)核的診斷效能存在差異,除了樣本的差異外,可能還與兩項研究購買的科研試劑盒由于批次不同而存在檢測結(jié)果不穩(wěn)定的因素有關(guān),可見,檢測試劑盒向臨床應(yīng)用推廣需實行標準化生產(chǎn)管理,以達到臨床指標穩(wěn)定檢測的效果。

    目前對于兩種蛋白引起肺結(jié)核患者體內(nèi)差異表達的作用機制尚不清楚。結(jié)核病被稱為消瘦性疾病,結(jié)核患者脂聯(lián)素水平增高[21],脂聯(lián)素可以通過肝脂質(zhì)含量的變化水平上調(diào)肝細胞核因子-4A,最終促進肺結(jié)核患者體內(nèi)SHBG的表達增加[22]。SAA4是一種組成型蛋白,屬于SAA蛋白家族,可作為對損傷或炎癥本身的反應(yīng)產(chǎn)物,SAA4蛋白被發(fā)現(xiàn)在結(jié)腸癌及卵巢癌中表達增加[23-24],影響癌癥的發(fā)生發(fā)展;同時De等[4]通過SOMAscan蛋白質(zhì)組學(xué)平臺對來自于7個結(jié)核病流行國家的血清標本進行了深入分析,篩選出了結(jié)核患者722種差異表達蛋白,其中SAA蛋白在結(jié)核患者中表達增加,且與非結(jié)核患者相比,該蛋白的中位數(shù)倍數(shù)變化最大,達7.99倍。在感染結(jié)核分枝桿菌期間,結(jié)核病患者響應(yīng)炎癥刺激引起機體血液高凝狀態(tài)[25],有研究[26-27]表明,SAA的升高可能與這些患者慢性感染分枝桿菌引起機體凝血途徑活化與抗凝血受損相關(guān)。相比于De的研究,本研究準確突出SAA蛋白家族里的SAA4蛋白在涂陰肺結(jié)核患者中的高表達和結(jié)核診斷價值。

    鑒于本研究SHBG與SAA4蛋白聯(lián)合診斷涂陰肺結(jié)核顯示出較高的靈敏度及特異度,下一步本課題組將繼續(xù)擴大樣本量進行兩種蛋白對涂陰肺結(jié)核聯(lián)合診斷效能的多中心評價試驗,為探討提高涂陰肺結(jié)核患者的診斷率以及輔助診斷提供經(jīng)濟、高效、實用的新方法。

    猜你喜歡
    結(jié)核結(jié)核病肺結(jié)核
    世界防治結(jié)核病日
    警惕卷土重來的結(jié)核病
    一度浪漫的結(jié)核
    特別健康(2018年4期)2018-07-03 00:38:26
    愛情是一場肺結(jié)核,熱戀則是一場感冒
    海峽姐妹(2018年4期)2018-05-19 02:13:00
    層次分析模型在結(jié)核疾病預(yù)防控制系統(tǒng)中的應(yīng)用
    蒙西醫(yī)結(jié)合治療肺結(jié)核進展
    疣狀皮膚結(jié)核合并繼發(fā)型肺結(jié)核1例
    算好結(jié)核病防治經(jīng)濟賬
    中樞神經(jīng)系統(tǒng)結(jié)核感染的中醫(yī)辨治思路
    IL-17在結(jié)核病免疫應(yīng)答中的作用
    国产精品福利在线免费观看| 熟女av电影| 久久99热6这里只有精品| 偷拍熟女少妇极品色| 中文欧美无线码| 蜜桃在线观看..| 精品久久久噜噜| 免费黄网站久久成人精品| 精品久久久噜噜| 久久精品国产亚洲av涩爱| 99精国产麻豆久久婷婷| 少妇人妻一区二区三区视频| 少妇的逼好多水| 深爱激情五月婷婷| 简卡轻食公司| 久久久久久久国产电影| 免费看不卡的av| 亚洲成色77777| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 男女免费视频国产| 美女国产视频在线观看| 亚洲国产精品一区三区| 人妻少妇偷人精品九色| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 18+在线观看网站| av福利片在线观看| 黄片wwwwww| 大码成人一级视频| 91在线精品国自产拍蜜月| 老司机影院成人| av女优亚洲男人天堂| 国产欧美日韩一区二区三区在线 | 男女边吃奶边做爰视频| 国产精品久久久久成人av| 韩国高清视频一区二区三区| 亚洲第一av免费看| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 日韩一本色道免费dvd| 男女下面进入的视频免费午夜| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 丝袜脚勾引网站| 国产91av在线免费观看| 国产日韩欧美亚洲二区| 看十八女毛片水多多多| 少妇人妻一区二区三区视频| 亚洲精品国产成人久久av| 一个人看的www免费观看视频| 久久精品人妻少妇| 国产亚洲91精品色在线| 性色avwww在线观看| a级毛色黄片| 黄色欧美视频在线观看| 国产精品一区二区在线观看99| 婷婷色麻豆天堂久久| 国产成人91sexporn| 超碰av人人做人人爽久久| 五月天丁香电影| 欧美 日韩 精品 国产| 久久久精品免费免费高清| 亚洲经典国产精华液单| 国产精品偷伦视频观看了| 亚洲精品色激情综合| 校园人妻丝袜中文字幕| 欧美xxxx性猛交bbbb| 精品亚洲成国产av| 亚洲成人av在线免费| av播播在线观看一区| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 能在线免费看毛片的网站| 纯流量卡能插随身wifi吗| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 精品酒店卫生间| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 五月玫瑰六月丁香| 日本一二三区视频观看| 亚洲av在线观看美女高潮| 色5月婷婷丁香| 男的添女的下面高潮视频| 国产成人91sexporn| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 人妻少妇偷人精品九色| 日韩电影二区| 久久国产精品大桥未久av | 纵有疾风起免费观看全集完整版| 视频区图区小说| 偷拍熟女少妇极品色| 黄色视频在线播放观看不卡| 中文字幕制服av| h视频一区二区三区| 日本-黄色视频高清免费观看| 视频区图区小说| 天堂8中文在线网| 国产精品嫩草影院av在线观看| 午夜精品国产一区二区电影| 国产又色又爽无遮挡免| 精品人妻偷拍中文字幕| 777米奇影视久久| videossex国产| 国产精品伦人一区二区| 99国产精品免费福利视频| 日韩av在线免费看完整版不卡| 成人国产av品久久久| 我要看黄色一级片免费的| 香蕉精品网在线| 联通29元200g的流量卡| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 有码 亚洲区| 成人无遮挡网站| 91精品国产九色| 亚洲人成网站在线观看播放| 午夜福利网站1000一区二区三区| 一级a做视频免费观看| 午夜福利影视在线免费观看| 高清毛片免费看| 国产成人freesex在线| 两个人的视频大全免费| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91 | 成人美女网站在线观看视频| 欧美区成人在线视频| 亚洲欧洲国产日韩| 丰满迷人的少妇在线观看| 日韩 亚洲 欧美在线| 中文字幕久久专区| 国产熟女欧美一区二区| 亚州av有码| 午夜免费鲁丝| 韩国av在线不卡| 99热这里只有是精品50| 国产av码专区亚洲av| 欧美日韩视频精品一区| 国产精品女同一区二区软件| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 国产成人freesex在线| 日韩av在线免费看完整版不卡| 大片电影免费在线观看免费| 精品一区二区三区视频在线| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 亚洲av欧美aⅴ国产| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91 | 一区二区三区免费毛片| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 亚洲国产日韩一区二区| 国产一区二区三区av在线| 久久影院123| 少妇熟女欧美另类| 久久精品国产亚洲av涩爱| 免费人妻精品一区二区三区视频| 丰满乱子伦码专区| 久久99热6这里只有精品| 青春草视频在线免费观看| 日本免费在线观看一区| 国产精品av视频在线免费观看| 国内揄拍国产精品人妻在线| av在线播放精品| 最后的刺客免费高清国语| 91精品国产九色| 国产精品99久久久久久久久| 欧美日韩精品成人综合77777| 国产精品爽爽va在线观看网站| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 国产伦精品一区二区三区四那| 人妻夜夜爽99麻豆av| 久久久久久伊人网av| 国产精品一区www在线观看| 麻豆成人av视频| 国产伦精品一区二区三区视频9| 午夜福利影视在线免费观看| 国产探花极品一区二区| 久久久国产一区二区| 婷婷色av中文字幕| 九九在线视频观看精品| 免费av中文字幕在线| 嘟嘟电影网在线观看| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 亚洲精品国产av成人精品| 国产成人aa在线观看| 午夜视频国产福利| av在线蜜桃| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 中文字幕精品免费在线观看视频 | 伦精品一区二区三区| 亚洲精品,欧美精品| 偷拍熟女少妇极品色| 亚洲av免费高清在线观看| 91精品国产九色| 亚洲欧美日韩东京热| 国产一区二区在线观看日韩| 日韩免费高清中文字幕av| 成人美女网站在线观看视频| freevideosex欧美| 舔av片在线| 一级av片app| 久久精品国产亚洲av涩爱| 成人黄色视频免费在线看| 国产精品女同一区二区软件| 国产人妻一区二区三区在| 国产精品国产三级国产专区5o| 国产又色又爽无遮挡免| 五月伊人婷婷丁香| 男男h啪啪无遮挡| 国产爽快片一区二区三区| 成人免费观看视频高清| 日韩大片免费观看网站| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 涩涩av久久男人的天堂| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 亚洲国产av新网站| 99久久精品国产国产毛片| 极品少妇高潮喷水抽搐| 精品国产露脸久久av麻豆| 国产一区亚洲一区在线观看| 久久久久精品性色| 国产成人freesex在线| 男女下面进入的视频免费午夜| 亚洲成人手机| 国产精品蜜桃在线观看| 大香蕉久久网| 99久久中文字幕三级久久日本| 一本一本综合久久| 久久av网站| 久久国产乱子免费精品| 日日摸夜夜添夜夜爱| 亚洲不卡免费看| 国产高清不卡午夜福利| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| av在线老鸭窝| 亚洲一区二区三区欧美精品| 亚洲图色成人| 在线 av 中文字幕| 中文资源天堂在线| 精品国产乱码久久久久久小说| 嫩草影院入口| 一级爰片在线观看| 国产黄色免费在线视频| 天堂8中文在线网| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 永久网站在线| 国国产精品蜜臀av免费| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 亚洲在久久综合| 国内揄拍国产精品人妻在线| 日本一二三区视频观看| av在线app专区| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 91久久精品电影网| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 在线 av 中文字幕| 欧美高清成人免费视频www| 午夜福利在线在线| 亚洲精品久久午夜乱码| 久久久久久久久久久丰满| 精品国产一区二区三区久久久樱花 | 国产精品蜜桃在线观看| 寂寞人妻少妇视频99o| 欧美另类一区| 国产乱来视频区| 久久久久久久久久成人| 亚洲av男天堂| a 毛片基地| 高清在线视频一区二区三区| 日韩欧美 国产精品| 97在线视频观看| 97精品久久久久久久久久精品| 97超碰精品成人国产| 免费大片黄手机在线观看| 日韩中字成人| 在线 av 中文字幕| www.av在线官网国产| 久久久久久伊人网av| 亚洲国产色片| 伊人久久精品亚洲午夜| 最近最新中文字幕免费大全7| 在线 av 中文字幕| www.av在线官网国产| 丰满人妻一区二区三区视频av| 欧美日韩国产mv在线观看视频 | 国产乱人视频| 免费观看性生交大片5| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 1000部很黄的大片| 国精品久久久久久国模美| av黄色大香蕉| 人妻夜夜爽99麻豆av| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图 | 美女福利国产在线 | 国产国拍精品亚洲av在线观看| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 亚洲精品国产av蜜桃| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 我的老师免费观看完整版| 欧美成人一区二区免费高清观看| 黄色日韩在线| 久久韩国三级中文字幕| 少妇高潮的动态图| 色视频在线一区二区三区| 人人妻人人看人人澡| av又黄又爽大尺度在线免费看| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 欧美精品一区二区免费开放| 久久久久国产精品人妻一区二区| 精品人妻偷拍中文字幕| 国产成人aa在线观看| 国产成人精品久久久久久| 亚洲高清免费不卡视频| 国产精品.久久久| 一级二级三级毛片免费看| 精品一品国产午夜福利视频| 一级a做视频免费观看| 在线观看一区二区三区激情| 日韩中文字幕视频在线看片 | 欧美少妇被猛烈插入视频| 国产成人精品一,二区| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 精品人妻熟女av久视频| av视频免费观看在线观看| 中国美白少妇内射xxxbb| 最近的中文字幕免费完整| 特大巨黑吊av在线直播| 99热全是精品| 干丝袜人妻中文字幕| 黄色配什么色好看| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 在线 av 中文字幕| 麻豆成人av视频| 精品久久久久久电影网| 精品人妻熟女av久视频| 国产欧美亚洲国产| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 国产精品国产三级国产专区5o| 黄色日韩在线| 国国产精品蜜臀av免费| 欧美高清性xxxxhd video| 人妻夜夜爽99麻豆av| 亚洲精品久久午夜乱码| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 在线观看免费日韩欧美大片 | 人妻夜夜爽99麻豆av| 国产黄片视频在线免费观看| 99热这里只有是精品50| 深夜a级毛片| 2021少妇久久久久久久久久久| 91精品一卡2卡3卡4卡| 99久久中文字幕三级久久日本| 国产亚洲一区二区精品| 国产av码专区亚洲av| 国产综合精华液| 高清毛片免费看| 99热国产这里只有精品6| 91精品国产九色| 久久国产乱子免费精品| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 亚洲成人中文字幕在线播放| 成年av动漫网址| 男女下面进入的视频免费午夜| 亚洲国产成人一精品久久久| 一区二区av电影网| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 涩涩av久久男人的天堂| 爱豆传媒免费全集在线观看| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 亚州av有码| 日本欧美视频一区| 一边亲一边摸免费视频| 少妇的逼水好多| 多毛熟女@视频| 午夜免费观看性视频| 少妇的逼好多水| 夜夜爽夜夜爽视频| 国国产精品蜜臀av免费| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 国产黄片视频在线免费观看| h日本视频在线播放| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 国产精品99久久久久久久久| 亚洲,一卡二卡三卡| 色综合色国产| 亚洲综合精品二区| 三级国产精品欧美在线观看| 国产黄色视频一区二区在线观看| av网站免费在线观看视频| 免费观看无遮挡的男女| 日韩国内少妇激情av| 日韩成人av中文字幕在线观看| 青春草视频在线免费观看| 成人国产麻豆网| 丝瓜视频免费看黄片| 色婷婷av一区二区三区视频| 在线观看一区二区三区激情| 欧美另类一区| 在线精品无人区一区二区三 | 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 久久久久精品性色| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 亚洲欧美日韩另类电影网站 | 性色avwww在线观看| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 国产成人aa在线观看| freevideosex欧美| 国产精品蜜桃在线观看| 久久久久久久久大av| 老女人水多毛片| 亚洲国产欧美在线一区| 成人一区二区视频在线观看| 亚洲精品国产色婷婷电影| 麻豆成人av视频| 欧美zozozo另类| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 国产淫片久久久久久久久| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 欧美3d第一页| 精品久久久久久电影网| 精品一区二区三卡| 久久影院123| 亚洲最大成人中文| videossex国产| 国产成人精品久久久久久| 国产成人aa在线观看| 亚洲精品,欧美精品| 晚上一个人看的免费电影| 成人国产麻豆网| 国产 一区 欧美 日韩| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 国产精品国产av在线观看| 综合色丁香网| 色综合色国产| 国产在视频线精品| 国产永久视频网站| 久久精品久久久久久久性| 日韩伦理黄色片| av黄色大香蕉| 男女边吃奶边做爰视频| 日韩国内少妇激情av| 天天躁日日操中文字幕| 两个人的视频大全免费| 妹子高潮喷水视频| www.色视频.com| 国产一区有黄有色的免费视频| 一边亲一边摸免费视频| 欧美激情国产日韩精品一区| 久久韩国三级中文字幕| 亚洲欧美精品自产自拍| 国产视频内射| 国内揄拍国产精品人妻在线| 成人综合一区亚洲| 青春草亚洲视频在线观看| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 97热精品久久久久久| 欧美xxⅹ黑人| 少妇人妻精品综合一区二区| 国产男女超爽视频在线观看| 国产片特级美女逼逼视频| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 午夜精品国产一区二区电影| 亚洲国产欧美在线一区| 91狼人影院| 国内精品宾馆在线| 午夜福利网站1000一区二区三区| 久久精品国产亚洲网站| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 一个人免费看片子| 亚洲精品国产色婷婷电影| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 丰满少妇做爰视频| 午夜福利高清视频| 亚洲精品中文字幕在线视频 | 草草在线视频免费看| 国产高清三级在线| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 久久久久国产网址| 国内精品宾馆在线| 中文欧美无线码| 伊人久久国产一区二区| 夫妻午夜视频| 精品酒店卫生间| 久久久色成人| 深夜a级毛片| 在线观看人妻少妇| 中国国产av一级| 国产精品一区二区在线观看99| 国产片特级美女逼逼视频| 亚洲欧美精品专区久久| 精品亚洲成国产av| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 中国美白少妇内射xxxbb| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 我的老师免费观看完整版| 欧美3d第一页| 丰满人妻一区二区三区视频av| 人人妻人人看人人澡| 久久韩国三级中文字幕| 男的添女的下面高潮视频| 国产v大片淫在线免费观看| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 免费看不卡的av| 欧美成人a在线观看| 亚洲av欧美aⅴ国产| 极品教师在线视频| 亚洲自偷自拍三级| 99国产精品免费福利视频| 亚洲va在线va天堂va国产| 久久久午夜欧美精品| 老熟女久久久| 91久久精品国产一区二区三区| 国产精品.久久久| av女优亚洲男人天堂| 精华霜和精华液先用哪个| 99热这里只有是精品50| 天美传媒精品一区二区| 国产免费福利视频在线观看| 91精品国产九色| xxx大片免费视频| 内射极品少妇av片p| 日韩免费高清中文字幕av| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 国产乱人偷精品视频| 亚洲精品国产成人久久av| .国产精品久久| 97精品久久久久久久久久精品| 亚洲av成人精品一二三区| 人妻 亚洲 视频| 男男h啪啪无遮挡| 日韩av不卡免费在线播放| 国产爽快片一区二区三区| 精品久久久久久久久av| 三级经典国产精品| 少妇人妻精品综合一区二区| 国产成人91sexporn| 在线播放无遮挡| 亚洲va在线va天堂va国产| 日本与韩国留学比较| 久久久a久久爽久久v久久| 丰满迷人的少妇在线观看| 大陆偷拍与自拍| 国产视频内射| 日韩中文字幕视频在线看片 | 亚洲欧美清纯卡通| 欧美日韩在线观看h| 亚洲第一av免费看| 国精品久久久久久国模美| av网站免费在线观看视频| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 久久久精品94久久精品| av福利片在线观看| 天堂俺去俺来也www色官网| 亚洲精品乱久久久久久| 日本黄色日本黄色录像| 黄色视频在线播放观看不卡| 成人国产麻豆网| 亚洲人成网站在线观看播放| 午夜老司机福利剧场| 街头女战士在线观看网站| 久久久久久人妻| 日韩强制内射视频| 熟女电影av网| 国产v大片淫在线免费观看| 亚洲内射少妇av| 亚洲色图av天堂| 欧美xxxx性猛交bbbb| 26uuu在线亚洲综合色| 久久久精品免费免费高清| 欧美日韩国产mv在线观看视频 | 精品人妻一区二区三区麻豆| 激情 狠狠 欧美| 日本-黄色视频高清免费观看| 晚上一个人看的免费电影| 一级a做视频免费观看| av福利片在线观看| 妹子高潮喷水视频| 高清av免费在线| .国产精品久久| 久久精品久久久久久久性| 777米奇影视久久| 性高湖久久久久久久久免费观看| 在线免费观看不下载黄p国产| 日韩大片免费观看网站| 看免费成人av毛片| 水蜜桃什么品种好| 色吧在线观看| 亚洲最大成人中文| 97精品久久久久久久久久精品| 99久久中文字幕三级久久日本| 国产成人freesex在线| 亚洲人与动物交配视频| 丰满人妻一区二区三区视频av| 日本黄色日本黄色录像| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 国产成人免费观看mmmm| 国产精品99久久久久久久久| a 毛片基地| 一级毛片 在线播放| 亚洲,欧美,日韩| 精品人妻熟女av久视频| 国产精品一及| 十八禁网站网址无遮挡 | 欧美变态另类bdsm刘玥| 日本一二三区视频观看| 男女下面进入的视频免费午夜| 熟女av电影| 在线免费十八禁| 国产成人91sexporn| 国产一区二区三区综合在线观看 | 少妇人妻 视频| 亚洲性久久影院| 国产精品99久久99久久久不卡 | 久久久久久伊人网av| 亚洲最大成人中文| 久久人人爽人人片av|