LX-8000全自動(dòng)尿液分析儀在尿液有形成分檢測中的性能評價(jià)

陳曼鈮，陳 波，康嘉樂，李雪燕，周 強(qiáng)（廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣州 510260）

尿液常規(guī)檢查是臨床檢驗(yàn)的重要內(nèi)容之一，其中尿液有形成分的檢測在臨床診斷泌尿生殖系統(tǒng)疾病及全身相關(guān)疾病方面具有極其重要的作用。1983年以前，有關(guān)尿液有形成分檢查一直停留在人工顯微鏡水平上［1］。隨著科學(xué)技術(shù)的日益發(fā)展，近年各種尿液分析儀應(yīng)運(yùn)而生，其儀器性能及配套試劑質(zhì)量是實(shí)驗(yàn)室檢測結(jié)果的可靠保證。因此，如何選擇、評價(jià)儀器性能對實(shí)驗(yàn)室尤為重要［2-5］。作者參照中華人民共和國醫(yī)藥行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)（工作組討論稿）、國家食品藥品監(jiān)督管理局發(fā)布的《尿液有形成分分析儀標(biāo)準(zhǔn)》（以下簡稱標(biāo)準(zhǔn)），對本科室新引進(jìn)的龍鑫LX-8000全自動(dòng)尿液分析儀（一體機(jī)）尿液有形成分的檢測性能進(jìn)行測試評價(jià)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源2013年8月本院門診及住院患者的隨機(jī)尿液樣品，根據(jù)不同檢測指標(biāo)選取對應(yīng)的標(biāo)本，檢測均在2h內(nèi)完成。

1.2 儀器與試劑杭州龍鑫科技有限公司生產(chǎn)的LX-8000全自動(dòng)尿液分析儀（一體機(jī)，儀器編號HW130301），上海伊華科技有形公司生產(chǎn)的尿液質(zhì)控（批號20120522），隨機(jī)配套的尿11項(xiàng)試帶及稀釋液、清洗液和清潔液；Neubauer計(jì)數(shù)板；Olympus公司CX-21FS1型顯微鏡。

1.3 方法

1.3.1 Neubauer計(jì)數(shù)板法 參照《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》尿沉渣定量法操作［6］。

1.3.2 儀器評價(jià)方法

1.3.2.1 檢出限（敏感性） 儀器分別對紅細(xì)胞（RBC）濃度20、10、5個(gè)／微升的標(biāo)本各檢測20次。

1.3.2.2 重復(fù)性（精密度） 用pH6.5的新鮮尿液配制高、中、低值尿標(biāo)本各5份：RBC 1 000、200、50個(gè)／微升和白細(xì)胞（WBC）1 950、220、60個(gè)／微升，倒入燒杯中用玻璃棒混勻后分裝5支尿管，每份標(biāo)本測定4次，共收集20份數(shù)據(jù)。

1.3.2.3 識別率（準(zhǔn)確度） 標(biāo)本要求：對150份臨床尿液標(biāo)本（至少90份為RBC病理標(biāo)本）、150份臨床尿液標(biāo)本［至少90份為WBC病理標(biāo)本］、150份臨床尿液標(biāo)本（至少30份為管型（CAST）病理標(biāo)本）進(jìn)行檢測，分別計(jì)算符合率。單項(xiàng)結(jié)果與鏡檢結(jié)果符合率=（t1+t2／t總）×100%。t1為鏡檢陽性結(jié)果同時(shí)儀器測試陽性結(jié)果的標(biāo)本數(shù)量，t2為鏡檢陰性同時(shí)儀器檢測陰性結(jié)果的標(biāo)本數(shù)量，t總為總標(biāo)本數(shù)量。多項(xiàng)標(biāo)本檢測的判斷標(biāo)準(zhǔn)：假陰性率=t1+t2+t3／t總×100%，t1為RBC鏡檢陽性、儀器檢測陰性的標(biāo)本數(shù)量；t2為WBC鏡檢陽性、儀器檢測陰性的標(biāo)本數(shù)量；t3為CAST鏡檢陽性、儀器檢測陰性的標(biāo)本數(shù)量。

1.3.2.4 穩(wěn)定性 要求開機(jī)預(yù)熱后及開機(jī)4、8h，分別對紅細(xì)胞濃度200個(gè)／微升的標(biāo)本進(jìn)行重復(fù)測試10次。

1.3.2.5 攜帶污染率 連續(xù)3次檢測RBC濃度大于5 000個(gè)／微升的尿液標(biāo)本，檢測結(jié)果為H1、H2、H3，再連續(xù)3次檢測生理鹽水，結(jié)果為L1、L2、L3。WBC檢測同上。

1.3.2.6 線性分析 取pH6.5新鮮無異常尿液標(biāo)本上清液加入全血，配制濃度為RBC 1 000個(gè)／微升的尿液標(biāo)本，充分混勻后儀器連續(xù)檢測3次，計(jì)算平均值為理論值，然后將標(biāo)本作5%、10%、25%、50%、75%的稀釋；取WBC濃度3 900個(gè)／微升的標(biāo)本，儀器連續(xù)檢測3次，計(jì)算平均值為理論值，然后將標(biāo)本作1∶2、1∶4、1∶16、1∶32、1∶64倍稀釋，同上操作。每個(gè)稀釋度各測3次，計(jì)算平均值為檢測值，將檢測值與理論值作比較，進(jìn)行線性回歸分析。

1.3.2.7 可報(bào)告線性范圍 配制RBC高值濃度為10 000、12 000、15 000、16 000個(gè)／微升，低值為5、4、2個(gè)／微升的標(biāo)本，各測定10次，計(jì)算變異系數(shù)（CV）。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理Excel 2007進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。

2 結(jié) 果

2.1 檢出限RBC 3個(gè)低值濃度（20、10、5個(gè)／微升）各測定20次，檢出率分別為100%、90%、90%。判斷標(biāo)準(zhǔn)：儀器對RBC 5個(gè)／微升的檢出率大于或等于90%。

2.2 重復(fù)性RBC、WBC高、中、低值各測定20次，分別計(jì)算平均值、標(biāo)準(zhǔn)差和CV。判斷標(biāo)準(zhǔn)：檢測RBC濃度200個(gè)／微升的CV≤15%；檢測50個(gè)／微升的CV≤25%。見表1。

表1 精密度測試

2.3 識別率單項(xiàng)結(jié)果與鏡檢結(jié)果符合率判斷標(biāo)準(zhǔn)：RBC符合率大于70%、WBC符合率大于80%、CAST符合率大于50%。多項(xiàng)標(biāo)本檢測的符合率判斷標(biāo)準(zhǔn)：假陰性率小于或等于3%。鏡檢陽性標(biāo)準(zhǔn)：RBC大于2個(gè)／微升，WBC大于3個(gè)／微升，CAST大于1個(gè)／微升。見表2。

2.4穩(wěn)定性計(jì)算RBC濃度200個(gè)／微升（開機(jī)預(yù)熱后及開機(jī)4、8h）3次檢測結(jié)果（n=10）的變異系數(shù)CV，分別為10.2%、14.3%、12.5%，判斷標(biāo)準(zhǔn)CV≤15%。

2.5 攜帶污染率攜帶污染率=（L1-L3／H3-L3）×100%，RBC、WBC攜帶污染率為0.015%、0.026%，判斷標(biāo)準(zhǔn)小于0.05%。

2.6 線性分析公式：Y=bX+a。RBC的回歸方程為Y=1.020 4 X+2.259 5，r2=0.998 8。WBC的回歸方程為Y=1.021 7 X+25.473 7，r2=0.998 9。判斷標(biāo)準(zhǔn)b值在（1.00±0.05）范圍內(nèi)，r2≥0.95，線性良好。

2.7 RBC可報(bào)告線性范圍見表3。

表2 儀器與顯微鏡法對比分析

表3 RBC可報(bào)告線性范圍（n=10）

3 討 論

龍鑫LX-8000全自動(dòng)尿液分析儀（一體機(jī)）是使用顯微鏡技術(shù)和專業(yè)識別系統(tǒng)相結(jié)合的全自動(dòng)尿液有形成分分析儀器，采用國際領(lǐng)先的醫(yī)學(xué)圖像信息掃描技術(shù)與智能分析系統(tǒng)結(jié)合自動(dòng)識別分類計(jì)數(shù)，應(yīng)用于尿液有形成分檢測。其檢測原理為：由計(jì)算機(jī)控制可調(diào)吸樣器、電腦刻劃標(biāo)準(zhǔn)流動(dòng)計(jì)數(shù)池及自動(dòng)進(jìn)樣系統(tǒng)組合而成，根據(jù)動(dòng)力管道產(chǎn)生吸力的原理，通過蠕動(dòng)泵的工作，自動(dòng)將尿沉渣懸浮并自吸管中吸取200μL注入流動(dòng)計(jì)數(shù)池中。其特點(diǎn)是以經(jīng)典的顯微鏡鏡檢為基礎(chǔ)，使用了高清晰的數(shù)碼顯微成像系統(tǒng)［7］；其中的相差裝置使顯微鏡視野中明暗反差大，可觀察到尿液標(biāo)本中有形成分的最佳形態(tài)。視野計(jì)數(shù)量為5μL，沉渣厚度為0.127mm，每一小格容積為0.01μL，報(bào)告方式以個(gè)／微升。每次充池都是定量的，有形成分的分布較為均勻，具有背景清晰，準(zhǔn)確性好、精密度高的優(yōu)點(diǎn)，計(jì)數(shù)完畢可自動(dòng)沖洗。

從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，儀器的檢出率大于或等于90%，符合標(biāo)準(zhǔn)；精密度（RBC濃度）200個(gè)／微升檢測的CV＜15%、50個(gè)／微升檢測的CV＜25%，亦符合標(biāo)準(zhǔn)，可見儀器對RBC、WBC等主要參數(shù)的敏感性、重復(fù)性較好，CV較小。RBC、WBC識別率分別為82.4%和80.0%，合符70.0%和80.0%的標(biāo)準(zhǔn)，但CAST的識別率較低，僅為10.5%，低于50.0%的標(biāo)準(zhǔn)，以上三者同時(shí)存在漏診率和誤診率，與流式尿沉渣分析儀不盡相同，需要人工復(fù)核校準(zhǔn)［8］。儀器的假陰性率4.0%，稍高于要求的3%。

儀器的穩(wěn)定性好，開機(jī)預(yù)熱后及4h和8h的檢測結(jié)果其CV值均小于15%，達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)；RBC、WBC攜帶污染率分別為0.015%和0.026%，均小于0.05%的標(biāo)準(zhǔn)，但在細(xì)菌檢測方面本儀器不敏感，要注意此類標(biāo)本，需人工去校準(zhǔn)。

儀器具有良好的線性關(guān)系：RBC、WBC的相關(guān)系數(shù)（r2）分別為0.998 8、0.998 9，符合大于或等于0.95的行業(yè)規(guī)定要求；本儀器可報(bào)告線性范圍（表3）為2～15 000個(gè)／微升，故遇到嚴(yán)重血尿標(biāo)本時(shí)，最好先稀釋標(biāo)本再進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。

儀器介紹書稱這類分析儀進(jìn)行沉渣分析時(shí)，具有無需離心，檢測速度快，病理成分檢測敏感性及重復(fù)性好，每份尿液標(biāo)本檢測步驟模式一致，利于質(zhì)量控制和標(biāo)準(zhǔn)化。事實(shí)上由于尿液中有形成分多達(dá)45種以上，且大小、成分、形態(tài)會因疾病的種類、程度不同而不同，還因保存條件和不同因素的影響而出現(xiàn)較多的改變，因此在識別上帶來不少困難［9］。幾乎所有的尿沉渣分析儀都具有假陽性率和假陰性率過高的缺陷［7］。最好的解決方法是與干化學(xué)試帶聯(lián)合應(yīng)用，通過計(jì)算機(jī)處理觀察二者間的符合程度，對可疑標(biāo)本再進(jìn)行人工顯微鏡檢測，而這需要有經(jīng)驗(yàn)的檢驗(yàn)技術(shù)人員來校準(zhǔn)結(jié)果［8］。

儀器的不足之處：不能檢測出細(xì)菌、滴蟲、脂肪滴及一些藥物結(jié)晶，不能識別管型及各種管型分類。尿液標(biāo)本中的精子、結(jié)晶、真菌等物質(zhì)會影響結(jié)果的準(zhǔn)確性。另儀器雖有自動(dòng)沖洗功能，但對一些蛋白質(zhì)多、黏性大及白細(xì)胞多、糖量高的標(biāo)本則需多次沖洗，真菌多亦不易洗去，應(yīng)注意其攜帶污染的發(fā)生［10］。必要時(shí)可用10g／L次氯酸鈉溶液浸泡。故住院部的尿液標(biāo)本應(yīng)在2h內(nèi)檢測，標(biāo)本放置過長會因細(xì)胞形態(tài)改變而影響細(xì)胞計(jì)數(shù)。

綜上所述，LX-8000尿液尿沉渣分析儀具有自動(dòng)化、標(biāo)準(zhǔn)化、速度快、操作簡單等優(yōu)點(diǎn)，由自動(dòng)識別功能對陰性、陽性標(biāo)本進(jìn)行快速過篩，對陰性標(biāo)本快速檢測，對陽性標(biāo)本進(jìn)行識別與人工輔助判別相結(jié)合，可縮短審核報(bào)告的時(shí)間。本儀器可應(yīng)用于臨床上尿液有形成分的檢測。

值得一提的是，針對不同原理和不同儀器建立恰當(dāng)?shù)哪虺猎鼜?fù)檢規(guī)則，需要專業(yè)技術(shù)人員在實(shí)踐中不斷去建立和完善［11-12］。至于本儀器是否經(jīng)得起長期大批量標(biāo)本的沖擊，有待以后使用觀察。亦期待不斷有更完善的尿液分析儀出現(xiàn)，從而實(shí)現(xiàn)尿液形態(tài)學(xué)分析真正的自動(dòng)化和標(biāo)準(zhǔn)化。

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