金銀花葛花和蜂蜜復(fù)合口服液對(duì)小白鼠解酒作用的研究

周建華，馮娜，高敏

（山東師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，山東濟(jì)南250014）

金銀花為忍冬科多年生半常綠纏繞植物忍冬的花蕾，味甘、性寒，金銀花提取物的主要化學(xué)成分之一綠原酸能夠促進(jìn)膽汁分泌，金銀花提取物中的三萜皂苷對(duì)小鼠肝損傷有顯著保護(hù)作用，忍冬總皂苷能夠抑制肝中毒后血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶的升高[1]，具有清熱解毒、保肝利膽[2]，清除自由基等多種功效，是我國(guó)的傳統(tǒng)用藥，金銀花在食用之初即被認(rèn)為是一種“藥食同源”的綠色天然植物[3]。

葛花為豆科蝶形花亞科植物野葛的干燥花蕾?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，葛花中的異黃酮能通過(guò)調(diào)節(jié)代謝和內(nèi)分泌系統(tǒng)來(lái)改善酒精引起的異常癥狀[4]，能改善急性酒精中毒癥狀，減少酒精依賴性動(dòng)物的自發(fā)性酒精攝入量，對(duì)酒精和四氯化碳致肝損傷均具有一定的保護(hù)作用[5]，是傳統(tǒng)的解酒中藥。

蜂蜜是昆蟲蜜蜂從開花植物的花中采得的花蜜在蜂巢中釀制的蜜。蜂蜜的糖類包括葡萄糖（24.73%～46.40%）、果糖（24.35%～48.16%）、蔗糖（0～11.00%）和麥芽糖（0～6.00%）等，總含量為75%～80%；灰分0.03%～0.09%左右；還有微量的維生素、氨基酸類、酶類、酵母、花粉粒和蠟質(zhì)等物質(zhì)。傳統(tǒng)中醫(yī)認(rèn)為蜂蜜有很好的解酒功效。

論文根據(jù)中藥金銀花、葛花及蜂蜜的藥理性質(zhì)[4-9]，研制出復(fù)合口服液，通過(guò)對(duì)小白鼠進(jìn)行“翻正反射實(shí)驗(yàn)”觀察金銀花、葛花和蜂蜜復(fù)合口服液對(duì)小白鼠的解酒作用。

1 材料與方法

1.1 材料與設(shè)備

1.1.1 原料

金銀花：選用市售藥用一級(jí)品金銀花；葛花：選用市售藥用一級(jí)品葛花；洋槐蜂蜜：上海冠生園蜂制品有限公司；實(shí)驗(yàn)用酒56°二鍋頭：北京紅星股份有限公司。

1.1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組

健康兩月齡SPF級(jí)昆明種雄性小鼠50只，體重23 g～26 g，隨機(jī)分為5個(gè)實(shí)驗(yàn)小組，即模型對(duì)照組、口服液1組、口服液2組、口服液3組、口服液4組。每組10只，所需實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均由山東大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。

1.1.3 儀器

電子天平：北京賽多利斯天平有限公司；JYL-390九陽(yáng)料理機(jī)：九陽(yáng)股份有限公司；DK-450B型電熱恒溫?zé)崴?、DGG-9070B型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱：上海森信實(shí)驗(yàn)儀器有限公司；SHB-III循環(huán)水式多用真空泵：鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司；RE-2000旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器：上海榮亞生化儀器廠。

1.2 方法

1.2.1 金銀花提取液的制備

選用質(zhì)地優(yōu)良的金銀花→洗凈→60℃烘3 h→粉碎40目過(guò)篩→加12倍去離子水，75℃恒溫浸提1 h，將浸出液過(guò)濾出，重復(fù)浸提三次→80℃下減壓濃縮至原浸提液體積的1/2→封口備用。

1.2.2 葛花提取液的制備

選擇質(zhì)地優(yōu)良的葛花→洗凈→60℃烘3 h→粉碎40目過(guò)篩→加14倍量的40%乙醇溶液浸提1.5 h→過(guò)濾出浸提液→加12倍體積量的40%乙醇溶液浸提1 h→過(guò)濾出浸提液→75℃下減壓濃縮至無(wú)乙醇味→封口備用。

1.2.3 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)溶液的配置

A液：生理鹽水；

B 液：金銀花提取液∶葛花提取液∶蜂蜜=5∶5∶0.15；

C 液：金銀花提取液∶葛花提取液∶蜂蜜=3∶7∶0.15；

D 液：金銀花提取液∶葛花提取液∶蜂蜜=1∶9∶0.15；

E 液：去離子水∶葛花提取液∶蜂蜜=3∶7∶0.15。

1.2.4 模型設(shè)計(jì)

小白鼠進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室后，飼養(yǎng)3 d禁食12 h后開始進(jìn)行醉酒實(shí)驗(yàn)。先對(duì)各組小白鼠分別灌胃A液、B液、C液、D液、E液0.25 mL/10 g體重，30 min后每10克體重灌胃0.15 mL 56°二鍋頭酒，每1 min觀察一次，統(tǒng)計(jì)各組實(shí)驗(yàn)小白鼠的醉酒拖尾時(shí)間、潛伏時(shí)間和醒酒時(shí)間。

1.2.5 小白鼠醉酒醒酒的判斷

利用“翻正反射”動(dòng)物實(shí)驗(yàn)來(lái)判斷醉酒、醒酒狀態(tài)[10-11]：給小白鼠灌酒后，將其背向下放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，若此姿勢(shì)保持30 s以上則認(rèn)為翻正反射消失，即為醉酒，否則為未醉。拖尾現(xiàn)象為小白鼠給酒后過(guò)段時(shí)間會(huì)出現(xiàn)走路不穩(wěn)，尾巴拖地現(xiàn)象。醉酒潛伏時(shí)間為酒后動(dòng)物出現(xiàn)翻正反射消失的時(shí)間，醒酒時(shí)間為灌酒后翻正反射消失到恢復(fù)的時(shí)間。

1.2.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，用SPSS11.0軟件來(lái)進(jìn)行單因素方差分析處理，采用t檢驗(yàn)比較各實(shí)驗(yàn)組之間的差異性。

2 結(jié)果與分析

2.1 對(duì)小白鼠醉酒率的影響

對(duì)小白鼠灌胃后，通過(guò)“翻正反射實(shí)驗(yàn)”來(lái)判斷小白鼠的醉酒與醒酒狀態(tài)，每1 min觀察一次，連續(xù)觀察30 min，記錄每組小白鼠的醉酒只數(shù)，研究各組溶液對(duì)小白鼠醉酒率的影響。結(jié)果見(jiàn)表1。

結(jié)果顯示，口服液實(shí)驗(yàn)2組（即金銀花提取液：葛花提取液：蜂蜜的比例為3∶7∶0.1）防醉效果明顯，而口服液1組、口服液3組的小白鼠醉酒率與對(duì)照組相比沒(méi)有顯著差異?？诜?組的小白鼠醉酒率與口服液1組、口服液3組及對(duì)照組的小白鼠醉酒率相比較沒(méi)有顯著差異，說(shuō)明在口服液2組中金銀花提取液在小白鼠防醉作用中起到了很重要的作用。

表1 各處理對(duì)小白鼠醉酒率的影響Table 1 Effects of each treatment on drunken rate of mice

2.2 對(duì)小白鼠醉酒潛伏時(shí)間、醒酒時(shí)間的影響

對(duì)小白鼠灌酒后，立刻進(jìn)行“翻正反射實(shí)驗(yàn)”，來(lái)判斷醉酒與醒酒狀態(tài)，每1分鐘觀察一次，統(tǒng)計(jì)各組實(shí)驗(yàn)小白鼠的醉酒潛伏時(shí)間和醒酒時(shí)間。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 各處理對(duì)小白鼠醉酒潛伏時(shí)間、醒酒時(shí)間的影響Table 2 Effects of each treatment on drunken latent time and sober up time of mice

結(jié)果顯示，口服液2組的小白鼠在給酒后均出現(xiàn)拖尾現(xiàn)象，出現(xiàn)拖尾的時(shí)間與對(duì)照組相比達(dá)到顯著性差異。口服液1組、3組、4組的小白鼠與對(duì)照組的相比醉酒潛伏時(shí)間與對(duì)照組的相比雖有延長(zhǎng)，但沒(méi)有顯著性差異；醒酒時(shí)間也有縮短，但沒(méi)有達(dá)到顯著性差異。

3 小結(jié)

1）金銀花葛花和蜂蜜復(fù)合口服液起到醒酒防醉效果的最佳配比為3∶7∶0.1，該復(fù)合口服液能有效延長(zhǎng)小白鼠的醉酒潛伏時(shí)間，縮短小白鼠醉酒后的醒酒時(shí)間，增加小白鼠對(duì)酒精的耐受力，有效降低小白鼠的醉酒率，對(duì)小白鼠的醉酒具有顯著的解酒作用。

2）過(guò)度飲酒會(huì)造成人體機(jī)能下降，嚴(yán)重者會(huì)造成脂肪肝、酒精性肝炎等，更嚴(yán)重者會(huì)造成休克、腦死亡等。臨床實(shí)驗(yàn)已證實(shí)，葛花可以用于茶飲，達(dá)到緩解酒后嘔吐等癥狀，用于解酒護(hù)肝等[12]。蜂蜜中含有一種多數(shù)水果所不含的果糖，可以促進(jìn)酒精的分解吸收，有利于縮短醒酒時(shí)間。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明金銀花提取液在降低小白鼠醉酒率的過(guò)程中與葛花、蜂蜜可起到協(xié)同增效作用。

3）考慮到給小白鼠灌胃服白酒醉酒后影響給藥的問(wèn)題，實(shí)驗(yàn)采用先給藥后給酒的灌胃方式，實(shí)驗(yàn)結(jié)果除了體現(xiàn)所研制口服液的解酒效果外，很大程度上還體現(xiàn)了其防醉效果，因此金銀花葛花和蜂蜜復(fù)合口服液的研制具有一定的社會(huì)適用價(jià)值。

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