HBXIP與血管異常增生性皮膚病進(jìn)展

唐嫕文，張理濤

（1.天津中醫(yī)藥大學(xué)，天津300193；2.天津市中醫(yī)藥研究院附屬醫(yī)院，天津300120）

乙型肝炎X相互作用蛋白（HepatitisBX－interacting protein，HBXIP），是一種保守的細(xì)胞組成型蛋白，最初于1997年由Melegari等[1]采用酵母雙雜交技術(shù)從肝癌細(xì)胞株HepG2中發(fā)現(xiàn)。其在所有的脊椎動(dòng)物物種中都發(fā)現(xiàn)有密切的同源基因，并且在心、肝、腎、胰腺和骨骼肌等組織中廣泛表達(dá)。

結(jié)構(gòu)與功能：Garcia-Saez等[2]發(fā)現(xiàn)HBXIP是一個(gè)二聚體，由兩個(gè)亞基和10個(gè)反向平行鏈組成。HBXIP由91個(gè)氨基酸編碼，分子質(zhì)量為9.6 ku，通過(guò)與乙型肝炎X蛋白（Hepatitis B X protein，HBx）C末端結(jié)合，來(lái)負(fù)調(diào)控HBX蛋白的活性，并改變乙型肝炎病毒（Hepatitis B virus，HBV）的病毒復(fù)制周期[3-4]。HBXIP還能夠與人ATP依賴(lài)的RNA/DNA解旋酶hSuv3p結(jié)合，而HBXIP的結(jié)合部位對(duì)于該酶線(xiàn)粒體的導(dǎo)入與結(jié)構(gòu)穩(wěn)定是非常重要的[5]。

1 HBXIP在細(xì)胞周期中的作用

HBXIP在細(xì)胞周期中能夠促進(jìn)細(xì)胞增殖，而其過(guò)表達(dá)又可造成細(xì)胞變異。

1.1 HBXIP促進(jìn)細(xì)胞增殖 經(jīng)學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)[6-9]HBXIP促進(jìn)細(xì)胞的增殖主要表現(xiàn)在以下4個(gè)環(huán)節(jié)：（1）HBXIP是 survivin的輔助因子，HBXIP與survivin形成survivin-HBXIP復(fù)合體，此復(fù)合體與pro-caspase-9連接，抑制pro-caspase-9的激活，并且防止其與Apaf1結(jié)合，從而通過(guò)線(xiàn)粒體/細(xì)胞色素c途徑選擇性抑制細(xì)胞凋亡；（2）survivin-HBXIP復(fù)合體有助于有絲分裂檢驗(yàn)點(diǎn)蛋白BubR1著絲，從而促進(jìn)有絲分裂；（3）端粒能維持染色體末端穩(wěn)定性，防止其降解、融合、重排和DNA丟失。端粒隨DNA復(fù)制進(jìn)行性短縮而最終細(xì)胞死亡，然而端粒酶活性升高可以維持端粒長(zhǎng)度，使細(xì)胞具有永生性。端粒酶的水平由端粒酶催化亞基和端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶在轉(zhuǎn)錄和轉(zhuǎn)錄后調(diào)節(jié)。HBXIP顯著刺激人類(lèi)端粒酶催化亞單位基因（Human telomerase catalytic subunit gene，hTERT； 又 叫 做 Human telomerase reverse transcriptionase）和端粒酶活性的增加，由此維持端粒長(zhǎng)度，促進(jìn)細(xì)胞增殖；（4）HBXIP可增加細(xì)胞核內(nèi)p65/NF-κB蛋白水平，進(jìn)而發(fā)揮核因子κB（Nuclear factor-kappa B，NF-KB）促轉(zhuǎn)錄調(diào)控的作用從而促進(jìn)細(xì)胞增殖。

1.2 HBXIP過(guò)表達(dá)可造成細(xì)胞變異 HBXIP在有絲分裂和細(xì)胞分裂中起著關(guān)鍵作用。HBXIP和HBX定位于有絲分裂細(xì)胞中的微管，部分定位于中心體，并且能直接作用于中心體裂解。研究人員推測(cè)HBXIP是一種肌動(dòng)蛋白調(diào)節(jié)器，使中心體沿著微管軌道運(yùn)動(dòng)[10]。在細(xì)胞分裂的早中期，HBXIP的表達(dá)使細(xì)胞表現(xiàn)為單極主軸，在末期中心體復(fù)制以及形成雙極紡錘體時(shí)，HBXIP過(guò)表達(dá)則促進(jìn)了三極和多極主軸的形成。HBx蛋白異常調(diào)節(jié)HBXIP的功能，造成中心體的過(guò)度復(fù)制和有絲分裂紡錘體的多極化，導(dǎo)致染色體分離缺陷，從而產(chǎn)生遺傳不穩(wěn)定—惡性腫瘤的標(biāo)志[11]。HBXIP過(guò)表達(dá)時(shí)可上調(diào)細(xì)胞周期蛋白D1、細(xì)胞周期蛋白E的表達(dá)，并且下調(diào)p21、p27的表達(dá)，從而促進(jìn)細(xì)胞由G1期進(jìn)入S期[12]。

研究證明HBXIP在肝癌、乳腺癌、腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞和非小細(xì)胞肺癌這些惡性腫瘤中表達(dá)為陽(yáng)性[13]。在肝癌中，HBXIP通過(guò)激活磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B（Phosphoinositide 3-kinases/protein kinase B，PI3K/Akt）信號(hào)通路來(lái)促進(jìn)肝癌細(xì)胞的增殖。HBXIP通過(guò)其過(guò)表達(dá)來(lái)上調(diào)細(xì)胞周期素D1的表達(dá)并參與促進(jìn)肝癌細(xì)胞G0/G1期向S期的轉(zhuǎn)換[14]。在乳腺癌中，HBXIP可以通過(guò)磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶 1/2（Phosphorylation-extracellular regulated kinase 1/2，p-ERK1/2） 或 NF-κB 信號(hào)來(lái)上調(diào) CD46，CD55和CD59以保護(hù)乳腺癌細(xì)胞免受補(bǔ)體依賴(lài)性細(xì)胞毒性（Complement-dependentcytotoxcity，CDC）的殺傷[15]，并且能夠通過(guò)刺激 NF-κB介導(dǎo)的白細(xì)胞介素8（Interleukins-8，IL-8）的表達(dá)來(lái)促進(jìn)乳腺癌遷移[16]，還可以通過(guò)在乳腺癌細(xì)胞中與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子4抗體（Signal transducer and activator of transcription，STAT4）交互激活重組人S100鈣結(jié)合蛋白 A4（S100 calcium-binding protein A4，S100A4）啟動(dòng)子，導(dǎo)致S100A4升高；通過(guò)誘導(dǎo)染色體缺失的磷酸酶和張力蛋白同源物基因（Phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten，PTEN，即Mutated in multiple advanced cancers 1，MMAC1）的DNA甲基化，激活了PTEN/PI3K/AKT的信號(hào)，隨后帶動(dòng)了S100A4的表達(dá)，從而促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞的生長(zhǎng)和遷移[17]。

2 HBXIP與血管異常增生的關(guān)系

2.1 與血管異常增生有關(guān)的細(xì)胞因子 許多細(xì)胞因子能刺激或抑制血管增生，與血管增生有關(guān)的細(xì)胞因子見(jiàn)表1。

表1 血管生成的刺激性和抑制性調(diào)節(jié)因子

2.2 HBXIP與血管異常增生 在一項(xiàng)以人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（Human umbilical vein endothelial cells，HUVEC）為模型的研究中，研究人員發(fā)現(xiàn)HBXIP的過(guò)度表達(dá)促進(jìn)了HepG2細(xì)胞誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞遷移、增殖、血管生成，這可能與臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的內(nèi)皮型一氧化氮合成酶磷酸化增加有關(guān)[18]。

3 與血管異常增生相關(guān)的皮膚病

3.1 銀屑病 有關(guān)銀屑病的病因及發(fā)病機(jī)制目前尚不清楚，普遍認(rèn)為其是一種發(fā)生在多基因遺傳基礎(chǔ)上的炎癥增生性皮膚病。最新研究表明真皮血管系統(tǒng)尤其是真皮乳頭微血管的異常增生是銀屑病最早發(fā)生的病理過(guò)程，對(duì)于銀屑病的發(fā)生發(fā)展有著重要的影響[19-20]。真皮表淺微細(xì)血管擴(kuò)張是銀屑病組織病理的特征之一,淺部毛細(xì)血管進(jìn)入真皮乳頭,在乳頭頂尖可見(jiàn)許多血管的片斷,活體毛細(xì)血管鏡證實(shí)這是毛細(xì)血管襻頂部的過(guò)度扭曲和盤(pán)繞。微血管組化染色的定量圖像分析證實(shí)銀屑病皮損的淺部微細(xì)血管內(nèi)皮比非皮損部位增加4倍[21]。研究證明微血管的改變發(fā)生在皮損發(fā)展的早期,臨床上表皮尚未見(jiàn)明顯異常，但電鏡下已可見(jiàn)到真皮乳頭毛細(xì)血管擴(kuò)張和走向異常。激光多普勒流量?jī)x顯示進(jìn)展的銀屑病斑塊邊緣皮膚血流增加[22]。內(nèi)皮細(xì)胞增殖加上新生血管形成等事實(shí)均表明銀屑病毛細(xì)血管的異常性依賴(lài)于血管生成。研究人員已從銀屑病表皮鑒定出若干血管生成因子,包括缺氧誘導(dǎo)因子（Hypoxia-inducible factors）、血管生成素和促血管生成因子（Angiopoietins and pro-angiogenic cytokines），如 IL－17，IL－ 8、腫瘤壞死因子－α（tumor necrosis factor-α，TNF-α)、 轉(zhuǎn) 化 生 長(zhǎng) 因 子（Transforming growth factor-α，TGF-α）、胸腺嘧啶磷酸酶和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（Vascular endothelial growth factor,VEGF）[23]。TGF-α由T淋巴細(xì)胞和角質(zhì)形成細(xì)胞產(chǎn)生,能刺激角質(zhì)形成細(xì)胞產(chǎn)生過(guò)多的VEGF而導(dǎo)致血管生成。TNF-α作用于內(nèi)皮時(shí)，也促進(jìn)VEGF增加，從而加速血管生成[24]。近年來(lái)，一些治療銀屑病的生物制劑如英夫利西單抗（infliximab，抗TNF-α單克隆抗體）亦顯示出抗血管生成活性。英夫利西單抗不僅能更強(qiáng)結(jié)合TNF-α，而且通過(guò)激活補(bǔ)體和抗體依賴(lài)性的細(xì)胞毒性作用，特異性溶解產(chǎn)生TNF-α的活性細(xì)胞，如單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和T細(xì)胞。在Canete等[25]的研究中，9例活動(dòng)性關(guān)節(jié)炎性銀屑病患者僅給予大劑量英利西單抗（5 mg/kg）靜脈滴注，初始及8周后分別取皮損和滑膜組織作切片檢查，結(jié)果發(fā)現(xiàn):滑膜 CD31、VEGF、VEGFR-2 均顯著減少，由此可反推出血管異常增生是銀屑病中很重要的發(fā)病因素。在銀屑病中，血管異常增生的機(jī)制有以下5個(gè)方面：（1）促血管生成因子表達(dá)增加；（2）抗血管生成因子表達(dá)下降；（3）血管生成素協(xié)同誘導(dǎo)血管生成；（4）基底膜和細(xì)胞外基質(zhì)降解；（5）內(nèi)皮細(xì)胞黏附[26]。

關(guān)于VEGF在銀屑病中表達(dá)的報(bào)道表明由角質(zhì)形成細(xì)胞分泌的VEGF對(duì)于銀屑病皮損部位血管異常起著決定作用[27-28]。

3.2 其他皮膚病 血管異常增生也是其他許多皮膚病病理過(guò)程的一個(gè)組成部分：（1）基底細(xì)胞癌:有研究表明VEGF在決定基底細(xì)胞癌的生長(zhǎng)速度和侵襲性方面起著重要的作用[29]；（2）鱗狀細(xì)胞癌:VEGF的表達(dá)與腫瘤的分化程度顯著相關(guān)[30]；（3）扁平苔蘚:皮損部位的VEGF染色顯示均陽(yáng)性[31]；（4）結(jié)節(jié)性癢疹:皮損表皮上層的角質(zhì)形成細(xì)胞可明顯表達(dá)VEGF[32]；（5）增生性瘢痕:VEGF在增生性瘢痕中大量表達(dá)[33]；（6）皮膚惡性黑素瘤:VEGF在皮膚惡性黑素瘤組織中高表達(dá)[34]；（7）皮膚血管瘤:在增殖期血管瘤中,VEGF的表達(dá)明顯增高[35]。

4 展望

HBXIP與血管異常增生性皮膚?。ㄈ玢y屑?。┙耘c血管異常增生有著密切的關(guān)系,那么，在血管異常增生性皮膚病中，是否因?yàn)镠BXIP促進(jìn)了血管生成刺激性調(diào)節(jié)因子，或者抑制了血管生成抑制性調(diào)節(jié)因子，從而促進(jìn)了銀屑病等血管異常增生性皮膚病的進(jìn)展？研究人員采用蛋白質(zhì)印跡和ELISA測(cè)定法檢查在HepG2細(xì)胞中的VEGF蛋白的表達(dá)水平，并在培養(yǎng)基中分泌培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)過(guò)度的HBXIP不能導(dǎo)致VEGF水平的分泌和增加[36]，因此HBXIP可能通過(guò)別的途徑使血管增生。

盡管經(jīng)文獻(xiàn)檢索，未見(jiàn)到證實(shí)HBXIP與血管異常增生性皮膚病相關(guān)的研究資料。但上述文獻(xiàn)的闡述使我們有理由相信，HBXIP與銀屑病等血管異常增生性疾病之間很可能存在相關(guān)性?？梢栽O(shè)想：如果能夠發(fā)現(xiàn)HBXIP對(duì)血管異常增生性皮膚病的作用靶點(diǎn)，那么將對(duì)新的治療方法的產(chǎn)生提供理論上的依據(jù)。

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