復(fù)方苦參酊劑對家兔皮膚刺激性研究

劉慧民 ，陳向齊 ，劉玉明 ，李珂嫻 ，何穎 ，沈先榮

（1.福建中醫(yī)藥大學(xué)，福州350122；2.福建中醫(yī)藥大學(xué)?？偨虒W(xué)醫(yī)院（南京軍區(qū)福州總醫(yī)院），福州350025；3.海軍醫(yī)學(xué)研究所，上海 200433）

皮膚病是日常生活中的一種常見病和多發(fā)病，尤其在現(xiàn)代軍事戰(zhàn)爭中，皮膚病的發(fā)生已成為影響戰(zhàn)斗力的主要因素之一，這對部隊訓(xùn)練和官兵作戰(zhàn)構(gòu)成了嚴(yán)重的威脅。目前在臨床中皮膚病的治療主要配發(fā)一些西藥制劑如皮炎平軟膏、達(dá)克寧軟膏、酮康唑軟膏等，也有用抗生素對皮膚病進行治療的?？股氐闹委熞桩a(chǎn)生耐藥性，而在采用西藥進行治療時，其作用單一、抗菌譜窄、不良反應(yīng)多且常易復(fù)發(fā)。本文所研究的皮膚病防治藥物復(fù)方苦參酊劑，其組方以苦參、苦瓜、辣椒、延胡索等組成，該藥物具有清熱利濕，殺菌消炎，去濕消滯，消炎止癢之功效。在前期研究中，已對該藥物的制備工藝、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、藥效學(xué)等內(nèi)容進行研究，本文旨在通過觀察該藥對兔子皮膚的刺激性，了解其在外用給藥過程中的安全性，以期為臨床用藥提供參考，也為該藥的新藥申報項目資料奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

1.1.1 藥品和試劑 復(fù)方苦參酊劑、賦形劑（70%乙醇溶液）均自制。

1.1.2 動物 成年健康白色家兔,雌雄各半，體質(zhì)量1.8～2.5 kg，由中國人民解放軍第二軍醫(yī)大學(xué)動物實驗中心提供，動物合格證：2007000545126；動物房合格證：200808096754。試驗環(huán)境為第二軍醫(yī)大學(xué)動物實驗中心，溫度（23±2）℃，濕度（60±10）%。試驗期間動物單獨分籠飼養(yǎng)，飼喂全價顆粒飼料和適量青飼料，自由飲用清潔自來水。

1.2 實驗方法

1.2.1 實驗動物準(zhǔn)備[1-2]于給藥前24 h，用動物剃毛刀將背部脊柱兩側(cè)去毛,每側(cè)去毛面積約為5 cm×10 cm[3]。破損皮膚模型的制作方法：給藥前用消毒處理的細(xì)砂紙打磨皮膚,以滲血為度制作破損皮膚，只限于損傷皮膚，不傷及皮下組織。

1.2.2 實驗分組與處理 選取16只健康白色家兔，雌雄各半，體質(zhì)量1.8～2.5 kg，隨機分為2組,每組8只,分別為完整皮膚組和破損皮膚組;各組均于左側(cè)脫毛部位涂抹酊劑1 mL，右側(cè)涂賦形劑（70%體積分?jǐn)?shù)乙醇）作為對照,每只家兔分籠飼養(yǎng)，2次/d，連續(xù)給藥8 d，停藥后用溫水清洗皮膚后觀察1周，每天進行體質(zhì)量稱量，觀察記錄每日的紅斑及水腫并進行評分,并觀察噴涂部位是否有色素沉著、出血點、皮膚粗糙或皮膚菲薄等情況,記錄其發(fā)生及消退時間。

1.2.3 評價標(biāo)準(zhǔn) 按刺激強度及刺激反應(yīng)評分標(biāo)準(zhǔn)見表1，評價多次給藥對完整與破損皮膚的刺激強度、刺激反應(yīng)的恢復(fù)情況和時間，并與對照組比較。反應(yīng)平均值的計算方法為紅斑形成總分與水腫形成總分的和除以同組實驗動物總數(shù)。根據(jù)所計算皮膚刺激性反應(yīng)評分反應(yīng)分值，其判斷標(biāo)準(zhǔn)為，無刺激性:平均反應(yīng)分值≤0.5；輕度刺激性：0.5＜平均反應(yīng)分值≤2.0；中度刺激性：平均反應(yīng)分值2.0～6.0；重度刺激性：平均反應(yīng)分值＞6.0[1-2]。

表1 皮膚刺激反應(yīng)的評分標(biāo)準(zhǔn)

2 結(jié)果

2.1 一般情況 實驗期間各組白兔外觀體征、行為活動、進食、排泄均正常。

無異常瘙癢行為，所有動物體質(zhì)量增長正常，受藥部位皮膚無色素沉著、無出血點、無皮膚粗糙、無皮膚菲薄，從給藥至觀察期結(jié)束，全部動物一般情況良好，無一只死亡。

2.2 皮膚刺激性反應(yīng)、皮膚刺激性強度 按照表1標(biāo)準(zhǔn)，逐日對白兔進行紅斑和水腫情況觀察和記錄，實驗結(jié)果見表2～4。

實驗結(jié)果表明，白色家兔完整皮膚刺激未見異常改變，破損皮膚涂藥部位亦未出現(xiàn)紅斑、水腫、出血點、色素沉著以及皮膚粗糙等。完整皮膚與破損皮膚刺激性反應(yīng)平均反應(yīng)分值均≤0.5，可評為無刺激性。表明該酊劑是一種安全性較好的外用制劑。

表2 多次給藥期間皮膚刺激性實驗觀察結(jié)果

表3 停藥后，溫水擦凈藥液后各組皮膚反應(yīng)

3 討論

復(fù)方苦參酊劑是以苦參、苦瓜、辣椒、延胡索為主要成分，經(jīng)過現(xiàn)代提取工藝，制備而得的一種純中藥外用制劑?？鄥槎箍苹睂僦参锟鄥⒌母?，性苦、涼，具有抗滴蟲、阿米巴原蟲作用，對結(jié)核菌、致病性皮膚真菌均有抑制作用，外用治療外陰瘙癢、陰道滴蟲病、燒燙傷；苦瓜為葫蘆科苦瓜屬植物，清熱解毒，外用治痱子、疔瘡癤腫；辣椒為茄科辣椒屬植物辣椒，性辛、熱，溫中散寒，健胃消食，外用能促進皮膚血循環(huán)、促進藥物吸收；延胡索為罌粟科紫堇屬植物延胡索的塊莖，性苦、微辛、溫，有活血散瘀、理氣止痛之功效。復(fù)方苦參酊劑通過清熱利濕，殺菌消炎，去濕消滯，消炎止癢等作用，從而用于治療各種常見皮膚病。

表4 對家兔損傷皮膚刺激的平均反應(yīng)分值 （n＝8）

致謝：感謝第二軍醫(yī)大學(xué)實驗動物中心，在本實驗期間提供的優(yōu)好的動物飼養(yǎng)環(huán)境和實驗條件，尤其感謝曹培老師在動物飼養(yǎng)中給予的指導(dǎo)和幫助；感謝第二軍醫(yī)大學(xué)生藥學(xué)教研室黃寶康教授在實驗期間給予的指導(dǎo)。

[1]謝秀瓊.中藥制劑開發(fā)與應(yīng)用[M].第2版.北京：人民衛(wèi)生出版社,2000:565-568.

[2]國家食品藥品監(jiān)督管理局.中藥、天然藥物刺激性和溶血性研究的技術(shù)指導(dǎo)原則[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社,2005:3.

[3]肖煜華，歐陽松山.速效止血涂膜劑對家兔皮膚刺激性試驗[J].中醫(yī)臨床研究，2012,11（4）：24-26.

[4]李黃仕孫，高桂娥，吳曙粵，等.中藥退黃外洗液皮膚給藥刺激性試驗[J].兒科藥學(xué)雜志，2008，14（1）：23-25.