1325份血培養(yǎng)標(biāo)本細(xì)菌耐藥性分析及耐藥酶檢測研究

徐金麗

目前, 我國大部分醫(yī)院都存在濫用抗菌藥物的現(xiàn)象, 這加快了臨床病原菌的變異及耐藥性生成的進(jìn)程, 遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過了目前抗菌藥物的研制進(jìn)度［1］, 長此以往, 將到導(dǎo)致未來幾十年內(nèi)無藥可用的嚴(yán)重問題, 因此及時監(jiān)測病原菌的耐藥性,指導(dǎo)臨床正確用藥, 是目前抗感染領(lǐng)域內(nèi)急需解決的首要問題。隨機(jī)抽取本院住院及門診患者血培養(yǎng)標(biāo)本1325份, 對其中部分陰性桿菌及表面葡萄球行藥敏試驗(yàn)分析, 旨在為規(guī)范和指導(dǎo)本院臨床正確用藥提供參考, 現(xiàn)將結(jié)果整理報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 材料 抽取本院2012年03月～2013年12月住院及門診患者血培養(yǎng)標(biāo)本1325份為研究對象, 共分離出305株菌株。

1.2 儀器及試劑 金黃色葡萄球菌、白色念株菌、銅綠假單胞菌以及大腸埃希菌均購買自上海撫生生物技術(shù)有限公司；行血標(biāo)本培養(yǎng)用的血培養(yǎng)儀(包含相關(guān)配套培養(yǎng)瓶)、M-H瓊脂及哥倫比亞瓊脂均購買自法國生物梅里埃公司；MIC法使用的真菌藥敏試劑盒均購買自株海市銀科醫(yī)學(xué)工程有限公司；KB藥敏紙片均購買自廣州納特生物科技有限公司。

1.3 方法 科室在抽取血樣標(biāo)本時, 均嚴(yán)格依照無菌操作規(guī)則進(jìn)行, 其中兒童患者采血3～5 ml, 成人患者采血5～10 ml［2］,血標(biāo)本采集后分別注入兒童瓶和成人瓶中, 并立即送入微生物室, 儲存于全自動血培養(yǎng)儀中；若培養(yǎng)儀結(jié)果提示為陽性,行轉(zhuǎn)種培養(yǎng), 有細(xì)菌生長為陽性；若儀器結(jié)果提示為陰性,標(biāo)本培養(yǎng)5 d后盲轉(zhuǎn)；本文試驗(yàn)中采取API鑒定系統(tǒng)對獲得菌種進(jìn)行鑒定；對獲得細(xì)菌菌株采取KB法行藥敏試驗(yàn), 對真菌菌株應(yīng)用MIC法行藥敏試驗(yàn)。

1.4 結(jié)果判定 均依據(jù)2000年NCCLS的判斷標(biāo)準(zhǔn)對本文培養(yǎng)結(jié)果及藥敏試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行判斷［3］。

2 結(jié)果

2.1 培養(yǎng)結(jié)果分析 2012～2013年1325份血標(biāo)本培養(yǎng)細(xì)菌檢測分布情況顯示, 有305株標(biāo)本結(jié)果顯示為陽性, 陽性率為23.02%；305株陽性標(biāo)本中, 其中202株為革蘭陰性桿菌,占66.23%；85株為革蘭陽性菌, 占27.87%；18株為真菌,占5.90%。

2.2 菌種分布 202株革蘭陰性桿菌中,最為常見的菌種依次為大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、肺炎克雷伯菌、不動桿菌屬及其他,所占比例依次為30.92%、26.13%、24.52%、16.31%和2.12%;85株革蘭陽性菌中, 其中最為常見的菌種依次為溶血葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腸球菌、金黃色葡萄球菌及其他, 所占比例依次為34.21%、28.50%、21.33%、12.72%、3.24%。其余8株為真菌, 占5.90%。

2.3 耐藥率檢測 對上述菌種行藥敏試驗(yàn), 發(fā)現(xiàn)對于革蘭陰性桿菌, 其多對哌拉西林、氨芐西林等抗菌藥物有著較高的耐藥性；而對于革蘭陽性菌, 其對青霉素、苯唑西林等抗菌藥物有著較高的耐藥率, 詳細(xì)檢測結(jié)果見表1。

表1 常見7種抗菌藥物耐藥率檢測情況(%)

3 討論

臨床上濫用抗生素的現(xiàn)象屢見不鮮, 報(bào)道多有提及, 而這一現(xiàn)象的泛濫直接加快了細(xì)菌耐藥率的增長, 尤其諸如耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)、高水平慶大霉素耐藥(HLGR)、耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌(MRCNS)及產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)為典型代表的革蘭性桿菌耐藥率日益高漲的問題, 已經(jīng)成為當(dāng)前感染領(lǐng)域亟需解決的問題。對于ESBLs細(xì)菌而言, 其多表現(xiàn)為多重耐藥性, 有研究報(bào)道顯示質(zhì)粒可介導(dǎo)其耐藥基因, 這為同種細(xì)菌與不同種細(xì)菌之間的交叉?zhèn)鞑ヌ峁┝似脚_, 若未能及時給與相應(yīng)抗生素預(yù)防及治療, 可引發(fā)較為嚴(yán)重的院內(nèi)交叉感染, 同時也會導(dǎo)致細(xì)菌耐藥性向外院擴(kuò)散；另外還有研究顯示, 該類菌株行藥敏試驗(yàn)時, 會呈現(xiàn)出對單酰胺類和頭孢類抗生素敏感, 而在臨床上的耐藥率卻較高, 致使臨床治療效果削弱, 延誤了治療。同時, 還有研究報(bào)道顯示, 細(xì)菌性感染疾病容易加重患者病情, 引發(fā)較為嚴(yán)重的并發(fā)癥；從臨床數(shù)據(jù)看來, 感染性疾病作為臨床上較為常見的一類病癥, 其惡化乃至導(dǎo)致患者死亡,很大程度上與菌血癥及敗血癥的發(fā)生有著直接關(guān)系, 因此提升臨床上檢測病原菌水平, 對各細(xì)菌菌種的耐藥率進(jìn)行監(jiān)測,為臨床合理使用抗生素提供有價值的指導(dǎo)性意見, 對于降低或治愈感染性疾病是極為重要的。

本文研究數(shù)據(jù)顯示, 血培養(yǎng)標(biāo)本中主要以格蘭陰性桿菌為主(66.23%), 其次為革蘭陽性菌；行藥敏試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)格蘭陰性桿菌對氨芐西林、頭孢唑林、哌拉西林、慶大霉素等抗生素的耐藥率較高；而革蘭陽性菌對青霉素、苯唑西林等抗生素耐藥率較高, 而這一實(shí)踐監(jiān)測數(shù)據(jù)顯示, 強(qiáng)化臨床上對血培養(yǎng)細(xì)菌的監(jiān)測, 行藥敏試驗(yàn), 依據(jù)試驗(yàn)結(jié)果給予針對性的抗生素治療, 盡量減少使用的不必要的廣譜抗菌素, 對于降低或延緩耐藥菌株的出現(xiàn)有著積極意義, 值得臨床重視。

［1］晉興,黃波,武愛榮,等.血液或無菌體液培養(yǎng)陽性標(biāo)本中病原菌檢測結(jié)果分析.現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展, 2013(29):5708-5712,5715.

［2］劉靜,王志娟,李昊,等.血培養(yǎng)標(biāo)本中病原菌分布及其耐藥性分析.第二十四屆航天醫(yī)學(xué)年會暨第七屆航天護(hù)理年會論文匯編.中國航天科工集團(tuán)公司, 2008:4.

［3］陶黎黎,胡必杰,周春妹,等.3644瓶陽性血培養(yǎng)病原菌分析及雙份血培養(yǎng)意義評價.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志, 2010(2):258-261.