急慢性特發(fā)性血小板減少性紫癜患者外周血淋巴細(xì)胞亞群的表達(dá)

張紅 劉慶華 田芳

特發(fā)性血小板減少性紫癜(idiopathic thrombocytopenic purpura, ITP)是一種獲得性器官特異性自身免疫性疾病, 以免疫介導(dǎo)的血小板減少為特征。其發(fā)病原因目前尚不清楚,發(fā)病機制也未完全闡明, 涉及免疫、遺傳、環(huán)境等多方面因素。但是目前研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)ITP患者在人體免疫調(diào)節(jié)的許多環(huán)節(jié)都存在異常。本研究通過分析ITP患者外周血的淋巴細(xì)胞亞群的表達(dá), 探討ITP患者的免疫狀態(tài)與其發(fā)病機制的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2011年11月～2013年6月在泰山醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院就診的74例ITP患者, 男28例, 女46例, 平均年齡36歲(3～77歲)。74例患者中急性型33例, 慢性型41例, 診斷標(biāo)準(zhǔn)參照文獻(xiàn)［1］。對照組為30例健康查體人員,男10例, 女20例, 平均年齡37.5歲(21～58歲)。

1.2 標(biāo)本的采集 取患者及健康查體人員的外周血標(biāo)本2 ml, 采用肝素抗凝, 立即送檢。急性ITP患者于治療前采集外周血標(biāo)本, 慢性ITP患者采集標(biāo)本時血小板水平低于100×109/L。

1.3 方法 流式細(xì)胞儀測定淋巴細(xì)胞亞群。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行分析。計量資料以均數(shù)± 標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示, 采用t檢驗。P<0.05 為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 ITP患者淋巴細(xì)胞亞群的表達(dá) ITP患者淋巴細(xì)胞亞群CD3+CD4+為 (34.15±8.55)%, 對 照 組 為 (36.74±3.65)%,t=2.166, P=0.033；ITP患者CD4+/CD8+為 (1.24±0.44)%, 對照組為(1.48±0.25)%, t=3.582, P=0.001；ITP患者CD3+CD8+為(30.63±7.72)%, CD19+為(18.23±7.67)%, 均顯著高于正對照組(P=0.000)。見表1。

2.2 急慢性ITP患者淋巴細(xì)胞亞群的表達(dá) 急性ITP患者外周血CD19+細(xì)胞比例為(22.60±7.25)%, 慢性ITP患者為(14.14±5.57)%, 兩者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=5.677,P=0.000)；而慢性ITP患者的CD3+細(xì)胞的比例為(76.02±11.00)%, 急性ITP患者為(66.82±10.95)%, t=3.583, P=0.001。

表1 ITP患者和對照組之間淋巴細(xì)胞亞群所占比例的比較(±s, %)

表1 ITP患者和對照組之間淋巴細(xì)胞亞群所占比例的比較(±s, %)

注：at=1.53, P=0.129；bt=2.166, P=0.033；ct=4.858, P=0.000；dt=3.582, P=0.001；et=7.442, P=0.000

組別 例數(shù) CD3+CD3+CD4+CD3+CD8+CD4+/CD8+CD19+對照組 30 69.88±3.59 36.74±3.65 25.20±3.65 1.48±0.25 11.22±1.67 ITP 組 74 72.18±11.62a 34.15±8.55b 30.63±7.72c 1.24±0.44d 18.23±7.67e

表2 急慢性ITP患者淋巴細(xì)胞亞群所占比例的比較(±s, %)

表2 急慢性ITP患者淋巴細(xì)胞亞群所占比例的比較(±s, %)

注：at=3.583, P=0.001；bt=0.68, P=0.499；ct=1.891, P=0.063；dt=0.681, P=0.498；et=5.677, P=0.000

組別 例數(shù) CD3+CD3+CD4+CD3+CD8+CD4+/CD8+CD19+急性型組 33 66.82±10.95 37.35±8.56 30.36±6.02 1.24±0.35 22.60±7.25慢性型組 41 76.02±11.00a 38.83±9.79b 33.34±7.54c 1.30±0.36d 14.14±5.57e

3 討論

ITP是臨床上最為常見的血小板減少癥, 發(fā)病率約為5～10/10萬人口［2］, 因為尚無明確的實驗室檢查指標(biāo),現(xiàn)在ITP診斷仍為排除性診斷。近年來,隨著細(xì)胞生物學(xué)和分子免疫學(xué)的飛速發(fā)展,國內(nèi)外針對ITP的病因和發(fā)病機制開展了一系列研究性試驗。目前認(rèn)為ITP的發(fā)生主要與免疫功能紊亂相關(guān)。不僅包括B淋巴細(xì)胞功能異常, 而且存在T淋巴細(xì)胞表達(dá)及功能的異常改變。自身反應(yīng)性T細(xì)胞識別血小板抗原特定表位,進(jìn)而活化,分泌細(xì)胞因子,并與相應(yīng)B淋巴細(xì)胞作用,激活B淋巴細(xì)胞, B淋巴細(xì)胞增殖分化為漿細(xì)胞,導(dǎo)致自身抗體的產(chǎn)生。目前認(rèn)為ITP患者血小板自身抗體主要是針對血小板膜糖蛋白 GPⅡb/Ⅲa和GP Ib/Ⅸ［3］。既然T淋巴細(xì)胞各亞群間正常的比例和功能是保持人體正常免疫應(yīng)答的基礎(chǔ)。那么, T淋巴細(xì)胞比例的失調(diào)就可以引起B(yǎng)淋巴細(xì)胞激活的增加, 從而產(chǎn)生抗血小板抗體, 使血小板的破壞增加［4］。因此, 目前學(xué)者認(rèn)為T淋巴細(xì)胞功能和比例失調(diào)導(dǎo)致B細(xì)胞激活是ITP主要的發(fā)病機制［5］。

CD4+T細(xì)胞可輔助B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體及分泌細(xì)胞因子,起輔助細(xì)胞和體液免疫的作用；CD8+T細(xì)胞具有細(xì)胞毒作用,抑制細(xì)胞和體液免疫。輔助性T細(xì)胞/細(xì)胞毒性T細(xì)胞的平衡在自身免疫性疾病的發(fā)生發(fā)展過程中起重要作用［6］。本研究發(fā)現(xiàn)ITP患者淋巴細(xì)胞亞群CD4+、CD4+/CD8+比例低于正常對照組, 而CD8+、CD19+比例高于正常對照組, 說明了ITP的發(fā)生不僅存在B淋巴細(xì)胞異常, 也存在T淋巴細(xì)胞的異常。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn), 急性ITP患者CD19+細(xì)胞比例高于慢性ITP患者；而慢性ITP患者的CD3+細(xì)胞的比例高于急性ITP患者。說明急性ITP和慢性ITP 的發(fā)病機制存在一定的差異, 急性ITP患者是以體液免疫功能亢進(jìn)為主, 慢性ITP患者則以細(xì)胞免疫功能亢進(jìn)為主。認(rèn)識急慢性ITP發(fā)病機制的不同對治療方案的選擇具有一定的指導(dǎo)意義［7］。急性ITP患者以體液免疫功能亢進(jìn)為主, 應(yīng)用糖皮質(zhì)激素往往能夠收到較好效果,而存在細(xì)胞免疫功能亢進(jìn)、對于糖皮質(zhì)激素治療欠佳的慢性ITP患者, 使用抑制細(xì)胞免疫功能的藥物對治療可能會有較大的幫助。

［1］張之南.血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn).第2版.北京：科學(xué)技術(shù)出版社, 1998:279-289.

［2］陸再英, 鐘南山.內(nèi)科學(xué).北京:人民衛(wèi)生出版社, 2008:648-649.

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［5］張峰, 侯明.T 細(xì)胞異常與特發(fā)性血小板減少性紫癜.中華血液學(xué)雜志, 2005, 26(3):188 -190.

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