陜西省水產(chǎn)品中4種硝基呋喃代謝物的檢測

張藝蓓，岳田利，喬海鷗，蔣旭鵬，賈 如，李 璐

(1 西北農(nóng)林科技大學(xué) 食品科學(xué)與工程學(xué)院，陜西 楊凌 712100； 2 陜西省疾病預(yù)防控制中心 理化檢驗(yàn)室，陜西 西安 710054)

陜西省水產(chǎn)品中4種硝基呋喃代謝物的檢測

張藝蓓1，岳田利1，喬海鷗2，蔣旭鵬1，賈 如1，李 璐1

(1 西北農(nóng)林科技大學(xué) 食品科學(xué)與工程學(xué)院，陜西 楊凌 712100； 2 陜西省疾病預(yù)防控制中心 理化檢驗(yàn)室，陜西 西安 710054)

【目的】 對(duì)陜西省市售水產(chǎn)品中4種硝基呋喃代謝物進(jìn)行檢測，為保證當(dāng)?shù)厥称钒踩峁┮罁?jù)。【方法】 從陜西西安、寶雞、安康、延安、咸陽、渭南、商洛、銅川、漢中和榆林共10個(gè)地市的超市和農(nóng)貿(mào)市場隨機(jī)采集16種120份魚樣品，將樣品勻漿后在酸性條件下用2-硝基苯甲醛避光振蕩衍生16 h，Oasis HLB固相萃取柱提取、凈化，超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測，同位素內(nèi)標(biāo)法定量，統(tǒng)計(jì)水產(chǎn)品中呋喃唑酮代謝物3-氨基-2-噁唑烷基酮(AOZ)、呋喃它酮代謝物5-甲基-嗎啉-3-氨基-2-噁唑烷基酮(AMOZ)、呋喃妥因代謝物1-氨基-2-內(nèi)酰脲(AHD)和呋喃西林代謝物氨基脲(SEM)的檢測結(jié)果，分析樣品中硝基呋喃類藥物的殘留情況?！窘Y(jié)果】 4種硝基呋喃代謝物的總檢出率為6.5%，呋喃唑酮代謝物檢出率最高，為8.3%；16種水產(chǎn)品中4種硝基呋喃代謝物殘留的樣品檢出率為15.0%；16種魚品種的檢出率為37.5%，其中武昌魚、羅非魚、草魚、鯰魚、鯉魚和鯽魚檢出率依次為100.0%，100.0%，20.6%，15.4%，15.2%和6.3%，其余魚樣未檢出；草魚中4種代謝物的平均含量遠(yuǎn)高于其他魚種；咸陽、商洛、延安、渭南、寶雞和西安的檢出率分別為22.9%，20.8%，8.3%，8.3%，2.1%和2.1%；咸陽的草魚、商洛的鯉魚、渭南的草魚和鯉魚在養(yǎng)殖或運(yùn)輸過程中有使用多種硝基呋喃類藥物的情況。【結(jié)論】 陜西省部分地區(qū)、部分魚種中硝基呋喃類藥物殘留水平超標(biāo)，草魚、鯉魚、鯰魚和鯽魚等當(dāng)?shù)仞B(yǎng)殖的魚類安全性較低，應(yīng)引起有關(guān)食藥監(jiān)部門的重視。

水產(chǎn)品；硝基呋喃代謝物；殘留檢測；陜西??；食品安全

硝基呋喃類藥物(Nitrofurans)是一類分子結(jié)構(gòu)中含有5-硝基呋喃環(huán)的化學(xué)合成類廣譜抗菌素，曾作為治療和預(yù)防埃希氏菌和沙門氏菌引起的哺乳動(dòng)物消化道疾病的藥物和飼料添加劑。硝基呋喃常見品種有呋喃唑酮(FZD)、呋喃它酮(FTD)、呋喃妥因(NFT)和呋喃西林(NFZ)4種藥物，對(duì)應(yīng)的代謝物分別為3-氨基-2-噁唑烷基酮(3-amino-2-oxalidone,AOZ)、5-甲基-嗎啉-3-氨基-2-噁唑烷基酮(5-morpholinomethyl-3-amino-2-oxalidinone,AMOZ)、1-氨基-2-內(nèi)酰脲(1-amino-hydantoin,AHD) 和氨基脲(Semicarbazide,SEM)。

近年來研究發(fā)現(xiàn)，硝基呋喃類藥物在生物體內(nèi)有慢性毒性，可以誘導(dǎo)基因突變，可致癌、致畸、致突變[1]。呋喃唑酮是硝基呋喃類藥物中最具代表性的一種，動(dòng)物服用呋喃唑酮后，原藥分子在動(dòng)物體內(nèi)不穩(wěn)定，幾小時(shí)內(nèi)迅速代謝，代謝物與細(xì)胞膜蛋白結(jié)合，長期保持穩(wěn)定[2]，蒸煮、烘烤、磨碎和微波等烹調(diào)方法均無法有效降解，且這種蛋白結(jié)合態(tài)的呋喃唑酮含有AOZ的完整側(cè)鏈，在人胃弱酸性條件下，AOZ側(cè)鏈從母體分子上解離下來，代謝成為β-羥乙基肼，可以致癌、致突變[3-5]。同樣，其他硝基呋喃代謝物AMOZ、SEM、AHD等都能在體內(nèi)與細(xì)胞膜蛋白結(jié)合形成穩(wěn)定的結(jié)合態(tài)長期存在，食用含有硝基呋喃類藥物的肉制品會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生一定的毒副作用[6-7]。因此，對(duì)其檢測監(jiān)控顯得相當(dāng)重要。

許多國家明令禁止硝基呋喃類藥物在食源性動(dòng)物中使用[8]。1990年7月歐盟頒布2377/90/EEC條例，將硝基呋喃類藥物及其代謝產(chǎn)物列為A類禁用藥物，規(guī)定其在動(dòng)物源性食品中的殘留檢測限為1.0 μg/kg[9]。美國和日本分別于1975、1977年禁止呋喃唑酮作為醫(yī)藥使用，在動(dòng)物性食品中的檢出限為0.5 μg/kg[10]。美國21CFR530.41中規(guī)定食源性動(dòng)物禁止使用呋喃唑酮和呋喃妥因。韓國2002年《食品公典》規(guī)定，豬肉中呋喃唑酮不得檢出。我國農(nóng)業(yè)部2002年4月發(fā)布了193號(hào)公告，公布了《食品動(dòng)物禁用獸藥及其他化合物清單》，該清單將硝基呋喃類藥物列為禁止使用藥物[11]，2003年又將水產(chǎn)品硝基呋喃代謝物納入殘留監(jiān)控計(jì)劃。

水產(chǎn)品硝基呋喃類藥物殘留超標(biāo)事件屢屢發(fā)生，嚴(yán)重威脅人民身體健康和我國進(jìn)出口貿(mào)易。動(dòng)物源性食品中抗生素殘留量的檢出已成為世界肉類貿(mào)易中的重要技術(shù)指標(biāo)和技術(shù)壁壘之一，我國出口歐盟的魚蝦、禽肉和腸衣等被檢出呋喃唑酮、呋喃西林，嚴(yán)重影響了動(dòng)物食品的出口貿(mào)易。因此，加強(qiáng)該類物質(zhì)的檢測和控制有著重要的現(xiàn)實(shí)意義。

目前，對(duì)于硝基呋喃類抗生素殘留的檢測主要是對(duì)其代謝物進(jìn)行檢測，方法主要有液相色譜-紫外法[12]、酶聯(lián)免疫法[13]、液相色譜-質(zhì)譜法[14-15]和液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法[16-17]，但液相色譜-紫外法、酶聯(lián)免疫法和液相色譜-質(zhì)譜法靈敏度較差，樣品前處理時(shí)間長、過程繁瑣。超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(Ultra-performance Liquid Chromatography-tandem Mass Spectrometry，UPLC-MS/MS)是近幾年發(fā)展起來的一種藥物殘留分析檢測技術(shù)，樣品前處理時(shí)間短、靈敏度和準(zhǔn)確性高，定性定量能力強(qiáng)，是國際上普遍采用的硝基呋喃代謝物檢測和確證方法[18-22]。

本研究采用UPLC-MS/MS技術(shù)，在酸性條件下，利用2-硝基苯甲醛對(duì)4種硝基呋喃代謝物進(jìn)行衍生，用Oasis HLB固相萃取柱凈化，對(duì)陜西省10個(gè)地市16種120份魚肉樣品中的硝基呋喃代謝物進(jìn)行檢測，以期為當(dāng)?shù)卣M(jìn)行食品安全監(jiān)管提供可靠數(shù)據(jù)，并對(duì)水產(chǎn)品的食品質(zhì)量安全進(jìn)行預(yù)警。

1 材料與方法

1.1 主要儀器和試劑

UltiMateTM3000超高效液相色譜儀，美國Dionex公司；API-3200三重四極桿質(zhì)譜儀，美國Applied Biosystems公司。硝基呋喃代謝物標(biāo)準(zhǔn)品： AOZ、AMOZ、AHD、SEM，同位素內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品：d4-AOZ、d5-AMOZ、13C3-AHD、13C-15N-SEM，硝基呋喃代謝物衍生物標(biāo)準(zhǔn)品：2-NP-AOZ、2-NP-AMOZ、2-NP-AHD、2-NP-SEM和硝基呋喃代謝物衍生物同位素內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品：2-NP-d4-AOZ、2-NP-d5-AMOZ、2-NP-13C3-AHD、2-NP-13C-15N-SEM，購自Sigma-Aldrich公司，所有標(biāo)準(zhǔn)品純度均≥99%。甲醇、乙腈、乙酸銨，均為色譜純。二甲亞砜(DMSO)、氫氧化鈉(NaOH)、0.2 mol/L鹽酸溶液，均為分析純。衍生劑：稱取0.075 g 2-硝基苯甲醛(2-NPA)溶于10 mL二甲亞砜，濃度為0.05 mol/L，現(xiàn)用現(xiàn)配。Oasis HLB固相萃取柱(60 mg,3 mL)。Millipore A10純水系統(tǒng)，美國Millipore公司。

1.2 UPLC-MS/MS檢測條件

1.2.1 色譜條件 色譜柱：Dionex Acclaim?RSLC C18柱 (2.1 mm×100 mm,2.2 μm)；流動(dòng)相A：乙腈；流動(dòng)相B：含5 mmol乙酸銨和體積分?jǐn)?shù)0.1%乙酸水溶液；A、B混合液(V(A)∶V(B)=1∶3)等梯度洗脫；流速：0.5 mL/min；柱溫：40 ℃；進(jìn)樣體積：10.0 μL。

1.2.2 質(zhì)譜條件 電噴霧ESI離子源(正離子)；掃描方式：多反應(yīng)監(jiān)測(MRM)；電噴霧電壓：5 000 V；氣簾氣壓力：68 kPa；霧化氣壓力：482 kPa；輔助氣壓力：206 kPa；離子源溫度：650 ℃。

1.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備

1.3.1 標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(1 mg/mL) 分別稱取10 mg 4種硝基呋喃代謝物標(biāo)準(zhǔn)品，置于10 mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，-18 ℃冷藏，避光保存。

1.3.2 混合標(biāo)準(zhǔn)溶液(1 μg/mL) 分別取0.1 mL 4種標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，置于10 mL容量瓶中，用甲醇稀釋成10 μg/mL標(biāo)準(zhǔn)中間液，再取1 mL的標(biāo)準(zhǔn)中間液，用甲醇水溶液(V(甲醇)∶V(水)=1∶1)稀釋成1 μg/mL混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，4 ℃冷藏，避光保存。

1.3.3 標(biāo)準(zhǔn)系列溶液 分別取l μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液0.01，0.05，0.10，0.20，0.50，1.00 mL于10 mL容量瓶中，用甲醇水溶液(V(甲醇)∶V(水)=1∶1 )定容到刻度，得到質(zhì)量濃度為1，5，10，20，50，100 ng/mL的標(biāo)準(zhǔn)系列溶液。

1.3.4 混合內(nèi)標(biāo)工作溶液 分別取硝基呋喃代謝物同位素內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品d4-AOZ、d5-AMOZ、13C3-AHD、13C-15N-SEM，用純水配成100 ng/mL混合溶液，4 ℃冷藏保存。

1.4 樣品的采集

根據(jù)全國食品污染物監(jiān)測網(wǎng)中規(guī)定的監(jiān)測項(xiàng)目和種類，結(jié)合陜西省經(jīng)濟(jì)發(fā)展水平、地域特征和人口分布情況，在西安、寶雞、安康、延安、咸陽、渭南、商洛、銅川、漢中和榆林共10個(gè)監(jiān)測點(diǎn)，采用隨機(jī)抽樣和定點(diǎn)抽樣相結(jié)合的方法，選擇20個(gè)農(nóng)貿(mào)市場對(duì)不同魚品種進(jìn)行采樣。共得到16個(gè)品種120份魚樣品。采樣后立即密封樣品，及時(shí)運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室冷藏，樣品的品種及數(shù)量見表1。

表1 陜西省10地市水產(chǎn)品中采集樣品的數(shù)量及種類Table 1 Species and numbers of aquatic products in 10 cities of Shaanxi province

續(xù)表1 Continued table 1

1.5 樣品的UPLC-MS/MS檢測

取魚樣可食部分勻漿，準(zhǔn)確稱取1.00 g(精確至0.01 g)已勻漿的樣品，置于50 mL離心管中，加入200 μL 100 ng/mL 4種硝基呋喃代謝物內(nèi)標(biāo)溶液，再加入10.0 mL 0.2 mol/L的鹽酸溶液和0.3 mL 2-硝基苯甲醛，渦旋混勻，37 ℃避光振蕩衍生16 h(過夜)；衍生完后，向溶液中加入約1.8 mL 1 mol/L氫氧化鈉溶液，調(diào)pH至7.2～7.5，室溫下10 000 r/min離心10 min。安裝Oasis HLB固相萃取柱，依次用3 mL甲醇和3 mL水活化，加入離心后得到的上清液，用3 mL純水淋洗，5 mL甲醇洗脫，洗脫液用氮?dú)獯蹈桑粯悠酚眉状妓芤?V(甲醇)∶V(水)=1∶3)定容至1.0 mL，漩渦混合1 min，過0.22 μm濾膜，取濾液進(jìn)行UPLC-MS/MS檢測。

1.6 標(biāo)準(zhǔn)曲線及最低檢出限

采用內(nèi)標(biāo)法定量。將4種硝基呋喃代謝物標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液稀釋成質(zhì)量濃度為1，5，10，20，50，100 ng/mL 的標(biāo)準(zhǔn)系列溶液，在空白魚肉樣品(1.5節(jié)未檢出硝基呋喃代謝物的樣品)中添加AOZ、AMOZ、AHD、SEM的標(biāo)準(zhǔn)系列溶液，分別取10 μL進(jìn)行UPLC-MS/MS分析。取100 ng/mL的硝基呋喃代謝物同位素內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品10 μL，進(jìn)行UPLC-MS/MS分析。以分析物質(zhì)量濃度與內(nèi)標(biāo)物質(zhì)量濃度的比值為橫坐標(biāo)(x)，以分析物峰面積與內(nèi)標(biāo)物峰面積的比值為縱坐標(biāo)(y)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。分別按信噪比(S/N)大于3和信噪比大于10計(jì)算本方法的檢出限(LOD)和定量限(LOQ)。

1.7 加標(biāo)回收率和精密度

以空白魚肉樣品為測試樣品，AOZ、AMOZ、AHD、SEM的添加質(zhì)量濃度均設(shè)50，100，200 ng/mL 3個(gè)水平，進(jìn)行UPLC-MS/MS分析，每個(gè)添加水平在相同的試驗(yàn)條件下做6個(gè)平行樣，對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算每個(gè)樣品的濃度，計(jì)算加標(biāo)回收率、相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)。

1.8 樣品中目標(biāo)化合物殘留量的計(jì)算

式中：w為樣品中待檢測化合物殘留量，μg/kg；C為由回歸曲線計(jì)算得到的上機(jī)試樣溶液中目標(biāo)化合物質(zhì)量濃度，ng/mL；m為樣品的質(zhì)量，g。

2 結(jié)果與分析

2.1 硝基呋喃代謝物檢測方法的準(zhǔn)確性確定

在質(zhì)量濃度為1～100ng/mL時(shí)，AOZ、AMOZ、AHD、SEM質(zhì)量濃度比值(x)與峰面積比值(y)均呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系，其線性回歸方程分別為：yAOZ=0.006 44x+0.010 20(r=0.998 5),yAMOZ=0.011 10x+0.013 00(r=0.998 8),yAHD=0.005 67x+0.004 97(r=0.998 1),ySEM=0.012 90x+0.017 00(r=0.995 9) (圖1)。4種物質(zhì)的檢出限為0.5μg/kg，定量限為1.5μg/kg，表明本方法具有良好的線性關(guān)系，線性范圍寬，靈敏度高。加標(biāo)回收試驗(yàn)顯示，回收率為87.8%～110.8%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.98 %～4.32 %，表明本方法具有較高的準(zhǔn)確性。

2.2 4種硝基呋喃代謝物殘留的總體檢出情況

陜西省16種水產(chǎn)品的120份樣品中4種硝基呋喃代謝物殘留量的檢測結(jié)果見表2。表2表明，120份樣品中，AOZ、AMOZ、AHD、SEM的檢出率分別為8.3%，7.5%，5.0%和5.0%，4種硝基呋喃代謝物的總檢出率為6.5%(31/480)。

2.3 16種水產(chǎn)品中硝基呋喃代謝物的檢測結(jié)果

檢測結(jié)果顯示，鰱魚、金昌魚、鱸魚、麒麟魚、梭邊魚、鮮帶魚、大黃魚、鱈魚、江團(tuán)魚、鮭魚等10種魚未檢測到硝基呋喃代謝物；武昌魚、羅非魚、草魚、鯰魚、鯉魚和鯽魚等6種魚檢測出硝基呋喃代謝物，魚種檢出率為37.5%(6/16)，其中檢出AOZ和AMOZ的各有3種(18.8%,3/16)，檢出AHD和SEM的各有4種(25.0%,4/16)，說明硝基呋喃類藥物在這6種魚的養(yǎng)殖和運(yùn)輸中均有使用。武昌魚、羅非魚、草魚、鯰魚、鯉魚和鯽魚的檢出率分別為100.0%，100.0%，20.6%，15.4%，15.2%和6.3%，2份武昌魚樣品中1份檢出AHD，另1份檢出SEM；僅有的1份羅非魚樣品中有SEM檢出；34份草魚樣品中分別有5，4，3，2份樣品有AOZ、AMOZ、AHD、SEM檢出，檢出率為20.6%；33份鯉魚樣品分別有4，4，1，2份樣品檢出了AOZ、AMOZ、AHD和SEM，檢出率為15.2%；13份鯰魚樣品分別各有1份樣品檢出AOZ和AHD，16份鯽魚樣品中只有1份樣品檢出AMOZ(表3)，16種水產(chǎn)品中4種硝基呋喃代謝物殘留的樣品檢出率為15.0%(18/120)。

圖1 4種硝基呋喃代謝物的線性回歸曲線

表2 陜西省水產(chǎn)品中4種硝基呋喃代謝物殘留的檢測結(jié)果(n=120)Table 2 Determination of four nitrofurans metabolites residues in commercial aquatic products in Shaanxi (n=120)

表3 陜西省16種水產(chǎn)品中硝基呋喃代謝物殘留的檢出率 Table 3 Determination of four nitrofurans metabolites residues in 16 kinds of aquatic products in Shaanxi %

表4顯示，從不同魚種看，16種魚品種中草魚、鯉魚、鯰魚、鯽魚、武昌魚、羅非魚6種魚檢出代謝物，其中草魚檢出4種代謝物，SEM、AOZ、AHD、AMOZ的平均殘留水平分別為159.00，132.54，94.89，63.47μg/kg，遠(yuǎn)高于其他魚種；鯉魚也檢出4種代謝物，AHD、SEM、AOZ、AMOZ殘留的平均水平分別為19.71，10.43，8.21，6.63μg/kg；鯰魚檢出AOZ、AHD殘留，其平均殘留水平分別為0.28，21.6μg/kg；武昌魚檢出AHD、SEM，其平均殘留水平分別為8.15，9.58μg/kg；鯽魚檢出AMOZ殘留，平均殘留水平為2.72μg/kg；羅非魚檢出SEM殘留，平均殘留水平為3.68μg/kg。

表4 陜西省水產(chǎn)品中4種硝基呋喃代謝物殘留的平均水平 Table 4 Mean levels of four nitrofurans metabolites residues in commercial aquatic products in Shaanxi μg/kg

2.4 10個(gè)地市水產(chǎn)品中4種硝基呋喃代謝物的檢測結(jié)果

在10個(gè)采樣地市中，安康、漢中、榆林、銅川4個(gè)地市未檢出硝基呋喃代謝物；咸陽、商洛、延安、渭南、寶雞和西安等6個(gè)地市的水產(chǎn)品中檢出了硝基呋喃代謝物，其檢出率分別為22.9%，20.8%，8.3%，8.3%，2.1%和2.1%，其中咸陽、商洛檢出率較高，且均檢出了4種代謝物，延安只檢出1種代謝物AOZ，渭南檢出2種代謝物AOZ和AMOZ，寶雞和西安只檢出1種代謝物SEM(表5)。

表5 陜西省10個(gè)地市水產(chǎn)品中4種硝基呋喃代謝物的檢出率Table 5 Determination of four nitrofurans metabolites residues in aquatic products in 10 cities of Shaanxi %

2.5 水產(chǎn)品中4種硝基呋喃類藥物的混用情況分析

檢測結(jié)果表明，咸陽的2份魚樣(草魚)和商洛的1份魚樣(鯉魚)中同時(shí)檢出AOZ、AMOZ、SEM、AHD4種代謝物；商洛的1份魚樣(鯉魚)中同時(shí)檢出了AOZ、AMOZ、SEM3種代謝物；渭南的2份魚樣(草魚和鯉魚)同時(shí)檢出了AOZ和AMOZ2種代謝物。該結(jié)果說明，咸陽的草魚、商洛的鯉魚、渭南的草魚和鯉魚在養(yǎng)殖或運(yùn)輸過程中使用過多種硝基呋喃類藥物。

3 討 論

3.1 硝基呋喃代謝物的檢測方法

目前，國際和國內(nèi)都針對(duì)4種硝基呋喃代謝物制定了高靈敏度、高特異性的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢測方法及評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)[23-24]，本研究參照GB/T21311-2007《動(dòng)物源性食品中硝基呋喃類藥物代謝物殘留量檢測方法-高效液相色譜/串聯(lián)質(zhì)譜法》[25]，根據(jù)現(xiàn)有儀器、試劑和實(shí)際情況對(duì)檢測方法進(jìn)行了優(yōu)化，采用UPLC-MS/MS方法檢測，內(nèi)標(biāo)法定量，優(yōu)化后的方法樣品前處理過程簡單，縮短了檢測時(shí)間，樣品用量較少，靈敏度和回收率高，保證了檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。

3.2 陜西省市售水產(chǎn)品中4種硝基呋喃代謝物的殘留狀況

陜西省地處內(nèi)陸，本地水產(chǎn)品較少，草魚、鯉魚、鯰魚和鯽魚等魚種多由本地生產(chǎn)，日常消費(fèi)的其他部分魚種由東南沿海運(yùn)輸購進(jìn)。東南沿海地區(qū)水產(chǎn)資源豐富，水產(chǎn)品進(jìn)出口貿(mào)易發(fā)達(dá)，水產(chǎn)品中獸藥殘留檢測頻率較高，歐安等[26]的研究結(jié)果顯示，2007-2012年湛江出口水產(chǎn)品硝基呋喃代謝物的總檢出率為1.9%，在2007-2011年呈遞減趨勢，2012年有所上升。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，陜西省市售水產(chǎn)品中4種硝基呋喃代謝物的總檢出率為6.5%，高于湛江地區(qū)的檢出率，說明陜西銷售的水產(chǎn)品在養(yǎng)殖運(yùn)輸過程中存在違規(guī)使用硝基呋喃類藥物的現(xiàn)象，應(yīng)該追根溯源，減少食品安全隱患。

本試驗(yàn)結(jié)果顯示，陜西省市售水產(chǎn)品中AOZ、AMOZ、AHD、SEM的檢出率分別為8.3%，7.5%，5.0%和5.0%，以AOZ的檢出率最高。岑小青等[27]研究顯示，2003-2005年湛江口岸出口水產(chǎn)品中4種硝基呋喃代謝物的檢出率為AOZ>SEM>AMOZ>AHD，可見4種硝基呋喃類藥物中呋喃唑酮的使用頻率最高。而同期施東華等[28]的研究顯示，2004年啟東地區(qū)出口小龍蝦產(chǎn)品中，SEM檢出率高達(dá)52%(26/50)，AOZ未檢出，呋喃西林違規(guī)使用呈上升趨勢，呋喃它酮和呋喃妥因在水產(chǎn)養(yǎng)殖中幾乎不用?？梢姴煌貐^(qū)、不同水產(chǎn)品中硝基呋喃類藥物的使用存在差異。

本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，從陜西省10個(gè)地市采集的16種120份魚樣中4種硝基呋喃代謝物的樣品檢出率為15.0%(18/120)，武昌魚、羅非魚、草魚、鯰魚、鯉魚和鯽魚的檢出率分別為100.0%，100.0%，20.6%，15.4%，15.2%和6.3%，其余10種魚中未檢出。2份武昌魚樣品中有1份檢出AHD，另1份檢出SEM，1份羅非魚樣品檢出SEM，2種魚的檢出率均為100.0%，這可能與采樣份數(shù)過少有關(guān)，因此不能簡單地認(rèn)為武昌魚和羅非魚的檢出率較高；但是34份草魚樣品和33份鯉魚樣品均檢出了4種代謝物，13份鯰魚樣品檢出AOZ和AHD，16份鯽魚樣品檢出AMOZ，因此認(rèn)為陜西市售的草魚、鯉魚、鯰魚和鯽魚安全性較低，而這幾種魚正是群眾日常消費(fèi)量較大且多為本地養(yǎng)殖的魚類，應(yīng)該引起重視。

草魚和鯉魚中均檢出4種硝基呋喃代謝物，鯰魚檢出AOZ、AHD，武昌魚檢出AHD、SEM，鯽魚檢出AMOZ，羅非魚檢出SEM，且草魚中4種代謝物的平均含量均遠(yuǎn)高于其他魚類，這可能是由于草魚更易生病，在其養(yǎng)殖、運(yùn)輸過程中使用硝基呋喃類藥物的情況更為普遍，也可能是由于草魚基質(zhì)與代謝物結(jié)合更為緊密，藥物分解速度慢。

本次檢測抽樣涵蓋陜西省陜南、關(guān)中、陜北共10個(gè)地市的大型水產(chǎn)品流通場所，各地抽樣量相同，地區(qū)代表性較好。從咸陽、商洛、延安、渭南、寶雞和西安6個(gè)地區(qū)水產(chǎn)品中檢出了硝基呋喃代謝物，其中咸陽、商洛檢出率較高，4種代謝物AOZ、AMOZ、AHD、SEM均有檢出，渭南檢出2種代謝物AOZ、AMOZ，延安只檢出1種代謝物AOZ，寶雞和西安只檢出1種代謝物SEM；安康、漢中、榆林、銅川未檢出。說明咸陽、商洛銷售的水產(chǎn)品中使用硝基呋喃類藥物的情況較為普遍。

值得注意的是，來自咸陽的2份草魚和來自商洛的1份鯉魚中同時(shí)檢出4種代謝物AOZ、AMOZ、AHD、SEM，來自商洛的另1份鯉魚中同時(shí)檢出了AOZ、AMOZ、SEM，來自渭南的1份草魚和1份鯉魚同時(shí)檢出了AOZ和AMOZ。說明咸陽的草魚、商洛的鯉魚、渭南的草魚和鯉魚，在養(yǎng)殖或運(yùn)輸過程中使用過多種硝基呋喃類藥物。

4 結(jié) 論

陜西省10地市的120份市售水產(chǎn)品樣品中，4種硝基呋喃代謝物均有檢出，其中以AOZ的檢出率最高；16種魚種中，武昌魚、羅非魚、草魚、鯰魚、鯉魚和鯽魚有硝基呋喃代謝物檢出，而鰱魚、金昌魚、鱸魚等10種魚未檢出硝基呋喃代謝物；草魚和鯉魚均檢出4種代謝物，且草魚中4種代謝物殘留的平均水平均遠(yuǎn)高于其他魚類；10個(gè)地市中有6個(gè)地市市售水產(chǎn)品檢出了硝基呋喃代謝物，其中咸陽、商洛檢出率較高。咸陽、商洛、渭南市售水產(chǎn)品在養(yǎng)殖或運(yùn)輸過程中有使用多種硝基呋喃類藥物的情況。陜西省部分地區(qū)、部分魚種硝基呋喃類藥物殘留水平超標(biāo)，草魚、鯉魚、鯰魚和鯽魚等當(dāng)?shù)仞B(yǎng)殖的魚類安全性較低，應(yīng)該引起有關(guān)食藥監(jiān)部門的足夠重視。

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Determination of four nitrofurans metabolites residues in aquatic products in Shaanxi Province

ZHANG Yi-bei1,YUE Tian-li1,QIAO Hai-ou2,JIANG Xu-peng1,JIA Ru1, LI Lu1

(1CollegeofFoodScienceandEngineering,NorthwestA&FUniversity,Yangling,Shaanxi712100,China; 2ShaanxiProvinceCenterforDiseaseControlandPrevention,Xi’an,Shaanxi710054,China)

【Objective】 The purpose of the study was to determine levels of four nitrofurans metabolites residues in commercial aquatic products in Shaanxi Province,and provide reference for food security.【Method】 A total of 16 kinds of 120 fish samples were collected randomly from major supermarkets and farmers markets in Xi’an,Baoji,Ankang,Yan’an,Xianyang,Weinan,Shangluo,Tongchuan,Hanzhong and Yulin,in Shaanxi Province.After being homogenated,16 h derivation was conducted with 2-nitrobenzaldenhyde under acidic condition.Extraction and purification were conducted by Oasis HLB solid phase extraction column,and concentrations of four nitrofurans metabolites residues in samples were quantified by ultra-performance liquid,chromatography-tandem mass spectrometry (UPLC-MS/MS),and isotope internal standard method.The detection results of furazolidone metabolites 3-amino-2-oxalidone (AOZ),furaltadone metabolites 5-morpholinomethyl-3-amino-2-oxalidinone (AMOZ),nitrofurantoin metabolites 1-amino-hydantoin (AHD),and nitrofurazone metabolites semicarbazide (SEM) in aquatic products were counted,and illegal use of nitrofurans drugs in aquaculture was analyzed.【Result】 The total detection rate of four nitrofurans metabolites was 6.5%,and that of furazolidone metabolites 3-amino-2-oxalidone (AOZ) was the highest of 8.3%.The detection rate of samples in 16 kinds of aquatic products was 15.0%.The detection rate of fish species was 37.5% with the rates in bluntnose block bream,tilapia,grass carp,catfish,carp,and crucian carp of 100.0%,100.0%,20.6%,15.4%,15.2% and 6.3%,respectively,while they were not detectable in other fish samples.The mean levels of four nitrofurans metabolites in grass carp were higher than other fish species.The detection rates of four nitrofurans metabolites in Xianyang,Shangluo,Yan’an,Weinan,Baoji,and Xi’an were 22.9%,20.8%,8.3%,8.3%,2.1% and 2.1%,respectively.Mixed use of nitrofurans drugs was found in grass carp from Xianyang,carp from Shangluo,and in grass carp and carp from Weinan.【Conclusion】 Levels of nitrofurans drugs residues in some aquatic products of some areas were higher than the standards in Shaanxi Province.The security levels of grass carp,carp,catfish and crucian carp were low and attention should be paid by food and drug supervision and administration department.

aquatic products;nitrofurans metabolites;residue determination;Shaanxi province;food safety

時(shí)間:2015-09-09 15:41

10.13207/j.cnki.jnwafu.2015.10.027

2014-02-28

2013年度西北農(nóng)林科技大學(xué)“大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計(jì)劃”校級(jí)重點(diǎn)項(xiàng)目(1201310712174)

張藝蓓(1993-)，女，陜西西安人，在讀本科，主要從事食品安全研究。E-mail：zhangyibei0666@163.com

岳田利(1965-)，男，陜西寶雞人，教授，博士，博士生導(dǎo)師，主要從事食品與發(fā)酵工程及食品安全控制技術(shù)研究。 E-mail：yuetl@nwsuaf.edu.cn

TS207.3

A

1671-9387(2015)10-0195-09

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