快速SPE—UPLC—MS/MS同時(shí)測(cè)定茶葉中的5種農(nóng)藥殘留

王多嬌等

摘要：建立了同時(shí)快速分析茶葉中5種農(nóng)藥殘留的方法。茶葉經(jīng)粉碎后，乙腈提取，低溫離心后，取乙腈層過(guò)Cleanert NANO CARB凈化柱，采用超高壓液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法分離、測(cè)定。結(jié)果表明滅多威、多菌靈、噻蟲(chóng)嗪、吡蟲(chóng)啉在2～50 μg/L、殺螟丹在10～200 μg/L范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，不同濃度（1、2、5、10倍定量限濃度）回收率為82.9%～106.0%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（n=5）小于15%，滅多威、多菌靈、噻蟲(chóng)嗪、吡蟲(chóng)啉和殺螟丹的定量限分別為3.0、10、5.0、5.0、20.0 μg/kg 。本方法簡(jiǎn)便、快速、重現(xiàn)性好，適用于茶葉中多種農(nóng)藥殘留的測(cè)定。

關(guān)鍵詞：茶葉；農(nóng)藥殘留；Cleanert NANO CARB固相萃取柱；超高壓液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜；前處理

中圖分類號(hào)： TS207.5+3文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A文章編號(hào)：1002-1302（2014）10-0280-03

收稿日期：2014-06-11

基金項(xiàng)目：江蘇省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局資助項(xiàng)目（編號(hào)：KJ112505）。

作者簡(jiǎn)介：王多嬌（1985—），女，江蘇豐縣人，碩士，助理工程師，主要從事食品安全檢測(cè)。E-mail：dodocpu@163.com。

通信作者：顏春榮，碩士，工程師，主要從事食品安全檢測(cè)技術(shù)研究。E-mail： chryan2@hotmail.com。茶葉是我國(guó)的傳統(tǒng)飲料，但是農(nóng)藥殘留問(wèn)題影響了人們對(duì)茶葉的消費(fèi)信心，甚至阻礙了茶葉出口貿(mào)易，研究茶葉中農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法對(duì)于茶葉質(zhì)量安全具有重要意義。目前，茶葉中農(nóng)藥殘留的分析檢測(cè)方法主要有氣相色譜法[1]、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法[2-5]、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法[6-9]，氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法僅在應(yīng)用于有機(jī)氯的分析時(shí)相對(duì)于液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法有一定的優(yōu)勢(shì)[10]，且氣相色譜法分析周期較長(zhǎng)，而液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、適于高通量檢測(cè)的特點(diǎn)。樣品的前處理方法主要有基質(zhì)固相分散法[2，9]、凝膠色譜凈化[3]、有機(jī)溶劑提取或采用有機(jī)溶劑提取后經(jīng)固相萃取小柱凈化[1，4，7] 等。凝膠色譜凈化法主要用于去除大分子量的物質(zhì)如油脂、蛋白等，前處理時(shí)間較長(zhǎng)、溶劑消耗量大，在茶葉的農(nóng)殘分析中應(yīng)用不多；固相萃取法中，常用的小柱主要有石墨化碳柱、石墨化碳氨基復(fù)合柱或Cleanert TPT茶葉專用柱，需要經(jīng)過(guò)活化、上樣、淋洗和洗脫的步驟，方法較繁瑣、回收率相對(duì)較低；基質(zhì)固相分散法具有快速、簡(jiǎn)便的特點(diǎn)，回收率較高，但過(guò)濾頭式SPE柱前處理更為簡(jiǎn)單。本研究采用過(guò)濾頭式SPE柱，結(jié)合超高效液相色譜的快速和串聯(lián)質(zhì)譜的高靈敏度特點(diǎn)，建立了同時(shí)測(cè)定茶葉中滅多威、多菌靈、噻蟲(chóng)嗪、吡蟲(chóng)啉和殺螟丹的方法，方法具有簡(jiǎn)便、快速的特點(diǎn)，易于推廣使用。

1材料與方法

1.1材料、試劑與儀器

市售茶葉。

滅多威（純度98.0%）、吡蟲(chóng)啉（純度99.0%）、多菌靈（純度99.5%）、殺螟丹（純度98.0%）、噻蟲(chóng)嗪（純度985%）標(biāo)準(zhǔn)品，購(gòu)于Dr. Ehrenstorfer公司；乙腈為色譜純，冰醋酸為分析純，水為超純水；1 mL過(guò)濾頭式SPE柱（IC-NN1510-C 型， 天津博納艾杰爾科技有限公司）。

Agilent Technologies 1290 Series超高壓液相色譜系統(tǒng) （美國(guó)安捷倫科技有限公司），AB API 4000 plus串聯(lián)四極桿質(zhì)量分析儀 （美國(guó)AB SCIEX公司）；Milli-Q純水儀 （美國(guó)Millipore公司）；ZD-2型調(diào)速多用振蕩器 （江蘇省金壇市國(guó)勝實(shí)驗(yàn)儀器廠）。

1.2方法

1.2.1樣品前處理稱取100 g茶葉，用粉碎機(jī)粉碎，四分法取樣，精確稱取5.00 g左右茶葉粉末于50 mL離心管中， 加10 mL水潤(rùn)濕，準(zhǔn)確加入10 mL含1%冰醋酸的乙腈溶液、2 g氯化鈉，渦旋3 min，在4 ℃下10 000 r/min冷凍離心 10 min，取上層清液1 mL用注射器推入Cleanert NANO CARB凈化柱，流出的凈化液用進(jìn)樣小瓶收集，供LC-MS/MS 分析測(cè)定。

1.2.2色譜條件色譜柱： Agilent Eclipse plus C18（2.1 mm×100 mm，粒徑1.8 μm）；流動(dòng)相：組分A為0.1%甲酸水溶液，組分B是乙腈，梯度洗脫，0→1.0 min（98% A）→2.0 min（80% A）→4.0 min（30% A）→ 4.1 min（98% A） →6.0 min（98% A）；流速：0.2 mL/min；柱溫：25 ℃；進(jìn)樣量：10 μL。

1.2.3質(zhì)譜條件離子源：電噴霧離子源（ESI）；掃描方式：正離子掃描；檢測(cè)方式：MRM模式；噴霧電壓：5 500 V；離子源溫度：600 ℃；碰撞氣壓力：0.082 8 MPa；霧化氣壓力：0.448 MPa；氣簾氣壓力：0.082 8 MPa；輔助氣壓力：0.345 MPa；5種農(nóng)藥殘留的質(zhì)譜分析參數(shù)見(jiàn)表1。

2結(jié)果與分析

2.1樣品前處理方法的優(yōu)化

多菌靈、吡蟲(chóng)啉、噻蟲(chóng)嗪、滅多威及殺螟丹這幾種農(nóng)藥在乙腈中溶解性均較好，因而選擇乙腈作為提取溶劑。茶葉基質(zhì)較干，加水潤(rùn)濕，可以去除一部分水溶性雜質(zhì)，提高乙腈的提取效率[8]；氯化鈉和離心可以促使水和乙腈分層。但是在試驗(yàn)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，用乙腈配制的殺螟丹標(biāo)準(zhǔn)溶液隨放置時(shí)間延長(zhǎng)會(huì)發(fā)生降解，因?yàn)闅⒚ぴ谒嵝詶l件下穩(wěn)定，pH值>9時(shí)即發(fā)生降解，其他4種農(nóng)藥在酸性條件下亦比較穩(wěn)定，因而

配制標(biāo)準(zhǔn)溶液的乙腈及作為提取溶劑的乙腈均需加入1%的冰醋酸。文獻(xiàn)中關(guān)于茶葉中殺螟丹殘留的檢測(cè)多為將其轉(zhuǎn)化為沙蠶毒素來(lái)測(cè)定，通過(guò)測(cè)定沙蠶毒素的量，換算為殺螟丹的含量[9，11]，直接測(cè)定殺螟丹的方法報(bào)道不多[12-13]；但是通過(guò)測(cè)定沙蠶毒素來(lái)間接測(cè)定殺螟丹含量的方法，不僅溶劑消耗多、耗時(shí)長(zhǎng)，而且如何確定殺螟丹完全轉(zhuǎn)化為沙蠶毒素未見(jiàn)報(bào)道，考慮到酸性條件下殺螟丹會(huì)以穩(wěn)定的殺螟丹鹽酸鹽的形式存在，因而本試驗(yàn)采用酸化后直接測(cè)定殺螟丹的方法。

茶葉中富含色素（如葉綠素、胡蘿卜素、葉黃素與花青素等）和茶多酚等，是農(nóng)藥殘留分析測(cè)定時(shí)的主要干擾物質(zhì)。NANO CARB為一種新型凈化材料——碳納米材料，比普通的石墨化碳黑比表面積大，載樣能力強(qiáng)，可以有效去除色素，同時(shí)相對(duì)于含石墨化碳黑（GCB）和N-丙基乙二胺（PSA）的方法，減少了GCB對(duì)平面結(jié)構(gòu)農(nóng)藥和PSA對(duì)殺螟丹[13]的吸附作用，相對(duì)于傳統(tǒng)樣品前處理方法，本方法回收率高，且檢測(cè)時(shí)間短，有機(jī)化學(xué)試劑用量少，可以滿足大批量樣品快速檢測(cè)的要求。

2.2色譜及質(zhì)譜條件的優(yōu)化

多菌靈、吡蟲(chóng)啉、噻蟲(chóng)嗪、滅多威及殺螟丹極性均較強(qiáng)，適于采用ESI源正離子模式進(jìn)行檢測(cè)。以流動(dòng)注射方式對(duì)上述幾種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行全掃描，確定其母離子，優(yōu)化去簇電壓（DP）及碰撞能量（CE），得到不同的子離子，選擇響應(yīng)好、穩(wěn)定的離子對(duì)為其定量及定性離子對(duì)，所獲得質(zhì)譜參數(shù)見(jiàn)表1。

流動(dòng)相的組成不僅會(huì)影響待分析物的分離度和峰形，在質(zhì)譜為檢測(cè)器時(shí)，還會(huì)影響到待分析物的靈敏度。文獻(xiàn)中農(nóng)藥的流動(dòng)相一般為酸性，其中甲酸可以提高農(nóng)藥的離子化效率，本試驗(yàn)比較了0.1%甲酸水-甲醇和0.1%甲酸水-乙腈流動(dòng)相體系，發(fā)現(xiàn)0.1%甲酸水-乙腈，體系下各色譜峰分離度更好，故選擇0.1%甲酸水-乙腈作為流動(dòng)相。圖1為各待測(cè)組分混合標(biāo)準(zhǔn)溶液MRM色譜圖。

2.3方法的驗(yàn)證

2.3.1標(biāo)準(zhǔn)曲線和定量限茶葉為基質(zhì)的農(nóng)藥殘留測(cè)定，存在一定的基質(zhì)效應(yīng)[8]，一般可以采用同位素內(nèi)標(biāo)、減少取樣量或采用基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)曲線來(lái)降低基質(zhì)對(duì)定量的干擾。本試驗(yàn)采用基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行定量的方式，以盡量減少基質(zhì)效應(yīng)干擾。 以空白茶葉樣品的提取液作為稀釋溶液，配成混合系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，其中滅多威、多菌靈、噻蟲(chóng)嗪、吡蟲(chóng)啉的濃度范圍為2～50 μg/L，殺螟丹的濃度范圍為10～200 μg/L，以待測(cè)組分峰面積（y）為縱坐標(biāo)、待測(cè)組分的濃度（x，μg/L）為橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，線性關(guān)系良好。以信噪比（S/N）為3確定方法的檢出限、信噪比（S/N）為10確定方法的定量限，結(jié)果見(jiàn)表2。

2.3.2精密度和回收率試驗(yàn)用空白茶葉樣品進(jìn)行添加回收率和精密度試驗(yàn)，樣品中添加1、2、5、10倍定量限（limitof

3結(jié)論

本研究建立了乙腈提取、過(guò)濾頭式SPE柱凈化，結(jié)合超高壓液相色譜-串聯(lián)四極桿質(zhì)譜同時(shí)快速測(cè)定茶葉中5種農(nóng)藥殘留的方法。該方法操作步驟簡(jiǎn)單，前處理時(shí)間短、消耗有機(jī)溶劑少，獲得了較滿意的回收率，適用于大批量樣品的快速檢測(cè)；采用串聯(lián)質(zhì)譜分析測(cè)定，可同時(shí)實(shí)現(xiàn)定性判定和定量測(cè)定，方法具有較好的重現(xiàn)性，可滿足實(shí)際檢測(cè)工作的需要。

參考文獻(xiàn)：

[1]蔣永祥，葉麗，湯淼榮. 茶葉中7種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量的同時(shí)測(cè)定[J]. 分析實(shí)驗(yàn)室，2007，26（1）：97-101.

[2]陳曉水，邊照陽(yáng)，楊飛，等. 對(duì)比3種不同的QuEChERS前處理方式在氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)分析煙草中上百種農(nóng)藥殘留中的應(yīng)用[J]. 色譜，2013，31（11）：1116-1128.

[3]蔣俊樹(shù)，趙彬，周莉.氣相色譜-質(zhì)譜法測(cè)定茶葉中36種農(nóng)藥殘留[J]. 食品科學(xué)，2009，30（14）：276-280.

[4]陳紅平，劉新，汪慶華，等. 氣相色譜-質(zhì)譜法同時(shí)測(cè)定茶葉中72種農(nóng)藥殘留量[J]. 食品科學(xué)，2011，32（6）：159-164.

[5]許秀瑩，施海燕，王鳴華.氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用測(cè)定大米中6種煙堿類農(nóng)藥殘留[J]. 質(zhì)譜學(xué)報(bào)，2012，33（2）：99-103.

[6]GB/T 23205茶葉中448種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量的測(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法[S].

[7]劉冰，趙紅霞. 超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法快速測(cè)定茶葉中18種農(nóng)藥殘留[J]. 分析實(shí)驗(yàn)室，2013，32（10）：77-83.

[8]賈瑋，黃峻榕，凌云，等. 高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時(shí)測(cè)定茶葉中290種農(nóng)藥殘留組分[J]. 分析測(cè)試學(xué)報(bào)，2013，32（1）：9-22.

[9]王連珠，周昱，黃小燕，等. 基于QuEChERS提取方法優(yōu)化的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定蔬菜中51種氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留[J]. 色譜，2013，31（12）：1167-1175.

[10]Alder L，Greulich K，Kempe G，et al. Residue analysis of 500 high priority pesticides：better by GC-MS or LC-MS/MS[J]. Mass Spectrometry Reviews，2006，25：838-865.

[11]吳剛，虞慧芳，鮑曉霞，等. 茶葉中殺螟丹殘留的氣相色譜分析方法研究[J]. 中國(guó)食品學(xué)報(bào)，2006，6（5）：129-132.

[12]吳剛，虞慧芳，鮑曉霞，等. 氣相色譜-微池電子捕獲檢測(cè)器分析茶葉中殺螟丹的殘留[J]. 色譜，2007，25（2）：288-289.

[13]陳紅平，劉新，王川丕，等. 親水作用色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定茶葉中殺螟丹農(nóng)藥殘留量[J]. 分析測(cè)試學(xué)報(bào)，2013，32（5）：619-624.

茶葉中富含色素（如葉綠素、胡蘿卜素、葉黃素與花青素等）和茶多酚等，是農(nóng)藥殘留分析測(cè)定時(shí)的主要干擾物質(zhì)。NANO CARB為一種新型凈化材料——碳納米材料，比普通的石墨化碳黑比表面積大，載樣能力強(qiáng)，可以有效去除色素，同時(shí)相對(duì)于含石墨化碳黑（GCB）和N-丙基乙二胺（PSA）的方法，減少了GCB對(duì)平面結(jié)構(gòu)農(nóng)藥和PSA對(duì)殺螟丹[13]的吸附作用，相對(duì)于傳統(tǒng)樣品前處理方法，本方法回收率高，且檢測(cè)時(shí)間短，有機(jī)化學(xué)試劑用量少，可以滿足大批量樣品快速檢測(cè)的要求。

2.2色譜及質(zhì)譜條件的優(yōu)化

多菌靈、吡蟲(chóng)啉、噻蟲(chóng)嗪、滅多威及殺螟丹極性均較強(qiáng)，適于采用ESI源正離子模式進(jìn)行檢測(cè)。以流動(dòng)注射方式對(duì)上述幾種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行全掃描，確定其母離子，優(yōu)化去簇電壓（DP）及碰撞能量（CE），得到不同的子離子，選擇響應(yīng)好、穩(wěn)定的離子對(duì)為其定量及定性離子對(duì)，所獲得質(zhì)譜參數(shù)見(jiàn)表1。

流動(dòng)相的組成不僅會(huì)影響待分析物的分離度和峰形，在質(zhì)譜為檢測(cè)器時(shí)，還會(huì)影響到待分析物的靈敏度。文獻(xiàn)中農(nóng)藥的流動(dòng)相一般為酸性，其中甲酸可以提高農(nóng)藥的離子化效率，本試驗(yàn)比較了0.1%甲酸水-甲醇和0.1%甲酸水-乙腈流動(dòng)相體系，發(fā)現(xiàn)0.1%甲酸水-乙腈，體系下各色譜峰分離度更好，故選擇0.1%甲酸水-乙腈作為流動(dòng)相。圖1為各待測(cè)組分混合標(biāo)準(zhǔn)溶液MRM色譜圖。

2.3方法的驗(yàn)證

2.3.1標(biāo)準(zhǔn)曲線和定量限茶葉為基質(zhì)的農(nóng)藥殘留測(cè)定，存在一定的基質(zhì)效應(yīng)[8]，一般可以采用同位素內(nèi)標(biāo)、減少取樣量或采用基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)曲線來(lái)降低基質(zhì)對(duì)定量的干擾。本試驗(yàn)采用基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行定量的方式，以盡量減少基質(zhì)效應(yīng)干擾。 以空白茶葉樣品的提取液作為稀釋溶液，配成混合系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，其中滅多威、多菌靈、噻蟲(chóng)嗪、吡蟲(chóng)啉的濃度范圍為2～50 μg/L，殺螟丹的濃度范圍為10～200 μg/L，以待測(cè)組分峰面積（y）為縱坐標(biāo)、待測(cè)組分的濃度（x，μg/L）為橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，線性關(guān)系良好。以信噪比（S/N）為3確定方法的檢出限、信噪比（S/N）為10確定方法的定量限，結(jié)果見(jiàn)表2。

2.3.2精密度和回收率試驗(yàn)用空白茶葉樣品進(jìn)行添加回收率和精密度試驗(yàn)，樣品中添加1、2、5、10倍定量限（limitof

3結(jié)論

本研究建立了乙腈提取、過(guò)濾頭式SPE柱凈化，結(jié)合超高壓液相色譜-串聯(lián)四極桿質(zhì)譜同時(shí)快速測(cè)定茶葉中5種農(nóng)藥殘留的方法。該方法操作步驟簡(jiǎn)單，前處理時(shí)間短、消耗有機(jī)溶劑少，獲得了較滿意的回收率，適用于大批量樣品的快速檢測(cè)；采用串聯(lián)質(zhì)譜分析測(cè)定，可同時(shí)實(shí)現(xiàn)定性判定和定量測(cè)定，方法具有較好的重現(xiàn)性，可滿足實(shí)際檢測(cè)工作的需要。

參考文獻(xiàn)：

[1]蔣永祥，葉麗，湯淼榮. 茶葉中7種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量的同時(shí)測(cè)定[J]. 分析實(shí)驗(yàn)室，2007，26（1）：97-101.

[2]陳曉水，邊照陽(yáng)，楊飛，等. 對(duì)比3種不同的QuEChERS前處理方式在氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)分析煙草中上百種農(nóng)藥殘留中的應(yīng)用[J]. 色譜，2013，31（11）：1116-1128.

[3]蔣俊樹(shù)，趙彬，周莉.氣相色譜-質(zhì)譜法測(cè)定茶葉中36種農(nóng)藥殘留[J]. 食品科學(xué)，2009，30（14）：276-280.

[4]陳紅平，劉新，汪慶華，等. 氣相色譜-質(zhì)譜法同時(shí)測(cè)定茶葉中72種農(nóng)藥殘留量[J]. 食品科學(xué)，2011，32（6）：159-164.

[5]許秀瑩，施海燕，王鳴華.氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用測(cè)定大米中6種煙堿類農(nóng)藥殘留[J]. 質(zhì)譜學(xué)報(bào)，2012，33（2）：99-103.

[6]GB/T 23205茶葉中448種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量的測(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法[S].

[7]劉冰，趙紅霞. 超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法快速測(cè)定茶葉中18種農(nóng)藥殘留[J]. 分析實(shí)驗(yàn)室，2013，32（10）：77-83.

[8]賈瑋，黃峻榕，凌云，等. 高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時(shí)測(cè)定茶葉中290種農(nóng)藥殘留組分[J]. 分析測(cè)試學(xué)報(bào)，2013，32（1）：9-22.

[9]王連珠，周昱，黃小燕，等. 基于QuEChERS提取方法優(yōu)化的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定蔬菜中51種氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留[J]. 色譜，2013，31（12）：1167-1175.

[10]Alder L，Greulich K，Kempe G，et al. Residue analysis of 500 high priority pesticides：better by GC-MS or LC-MS/MS[J]. Mass Spectrometry Reviews，2006，25：838-865.

[11]吳剛，虞慧芳，鮑曉霞，等. 茶葉中殺螟丹殘留的氣相色譜分析方法研究[J]. 中國(guó)食品學(xué)報(bào)，2006，6（5）：129-132.

[12]吳剛，虞慧芳，鮑曉霞，等. 氣相色譜-微池電子捕獲檢測(cè)器分析茶葉中殺螟丹的殘留[J]. 色譜，2007，25（2）：288-289.

[13]陳紅平，劉新，王川丕，等. 親水作用色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定茶葉中殺螟丹農(nóng)藥殘留量[J]. 分析測(cè)試學(xué)報(bào)，2013，32（5）：619-624.

茶葉中富含色素（如葉綠素、胡蘿卜素、葉黃素與花青素等）和茶多酚等，是農(nóng)藥殘留分析測(cè)定時(shí)的主要干擾物質(zhì)。NANO CARB為一種新型凈化材料——碳納米材料，比普通的石墨化碳黑比表面積大，載樣能力強(qiáng)，可以有效去除色素，同時(shí)相對(duì)于含石墨化碳黑（GCB）和N-丙基乙二胺（PSA）的方法，減少了GCB對(duì)平面結(jié)構(gòu)農(nóng)藥和PSA對(duì)殺螟丹[13]的吸附作用，相對(duì)于傳統(tǒng)樣品前處理方法，本方法回收率高，且檢測(cè)時(shí)間短，有機(jī)化學(xué)試劑用量少，可以滿足大批量樣品快速檢測(cè)的要求。

2.2色譜及質(zhì)譜條件的優(yōu)化

多菌靈、吡蟲(chóng)啉、噻蟲(chóng)嗪、滅多威及殺螟丹極性均較強(qiáng)，適于采用ESI源正離子模式進(jìn)行檢測(cè)。以流動(dòng)注射方式對(duì)上述幾種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行全掃描，確定其母離子，優(yōu)化去簇電壓（DP）及碰撞能量（CE），得到不同的子離子，選擇響應(yīng)好、穩(wěn)定的離子對(duì)為其定量及定性離子對(duì)，所獲得質(zhì)譜參數(shù)見(jiàn)表1。

流動(dòng)相的組成不僅會(huì)影響待分析物的分離度和峰形，在質(zhì)譜為檢測(cè)器時(shí)，還會(huì)影響到待分析物的靈敏度。文獻(xiàn)中農(nóng)藥的流動(dòng)相一般為酸性，其中甲酸可以提高農(nóng)藥的離子化效率，本試驗(yàn)比較了0.1%甲酸水-甲醇和0.1%甲酸水-乙腈流動(dòng)相體系，發(fā)現(xiàn)0.1%甲酸水-乙腈，體系下各色譜峰分離度更好，故選擇0.1%甲酸水-乙腈作為流動(dòng)相。圖1為各待測(cè)組分混合標(biāo)準(zhǔn)溶液MRM色譜圖。

2.3方法的驗(yàn)證

2.3.1標(biāo)準(zhǔn)曲線和定量限茶葉為基質(zhì)的農(nóng)藥殘留測(cè)定，存在一定的基質(zhì)效應(yīng)[8]，一般可以采用同位素內(nèi)標(biāo)、減少取樣量或采用基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)曲線來(lái)降低基質(zhì)對(duì)定量的干擾。本試驗(yàn)采用基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行定量的方式，以盡量減少基質(zhì)效應(yīng)干擾。 以空白茶葉樣品的提取液作為稀釋溶液，配成混合系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，其中滅多威、多菌靈、噻蟲(chóng)嗪、吡蟲(chóng)啉的濃度范圍為2～50 μg/L，殺螟丹的濃度范圍為10～200 μg/L，以待測(cè)組分峰面積（y）為縱坐標(biāo)、待測(cè)組分的濃度（x，μg/L）為橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，線性關(guān)系良好。以信噪比（S/N）為3確定方法的檢出限、信噪比（S/N）為10確定方法的定量限，結(jié)果見(jiàn)表2。

2.3.2精密度和回收率試驗(yàn)用空白茶葉樣品進(jìn)行添加回收率和精密度試驗(yàn)，樣品中添加1、2、5、10倍定量限（limitof

3結(jié)論

本研究建立了乙腈提取、過(guò)濾頭式SPE柱凈化，結(jié)合超高壓液相色譜-串聯(lián)四極桿質(zhì)譜同時(shí)快速測(cè)定茶葉中5種農(nóng)藥殘留的方法。該方法操作步驟簡(jiǎn)單，前處理時(shí)間短、消耗有機(jī)溶劑少，獲得了較滿意的回收率，適用于大批量樣品的快速檢測(cè)；采用串聯(lián)質(zhì)譜分析測(cè)定，可同時(shí)實(shí)現(xiàn)定性判定和定量測(cè)定，方法具有較好的重現(xiàn)性，可滿足實(shí)際檢測(cè)工作的需要。

參考文獻(xiàn)：

[1]蔣永祥，葉麗，湯淼榮. 茶葉中7種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量的同時(shí)測(cè)定[J]. 分析實(shí)驗(yàn)室，2007，26（1）：97-101.

[2]陳曉水，邊照陽(yáng)，楊飛，等. 對(duì)比3種不同的QuEChERS前處理方式在氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)分析煙草中上百種農(nóng)藥殘留中的應(yīng)用[J]. 色譜，2013，31（11）：1116-1128.

[3]蔣俊樹(shù)，趙彬，周莉.氣相色譜-質(zhì)譜法測(cè)定茶葉中36種農(nóng)藥殘留[J]. 食品科學(xué)，2009，30（14）：276-280.

[4]陳紅平，劉新，汪慶華，等. 氣相色譜-質(zhì)譜法同時(shí)測(cè)定茶葉中72種農(nóng)藥殘留量[J]. 食品科學(xué)，2011，32（6）：159-164.

[5]許秀瑩，施海燕，王鳴華.氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用測(cè)定大米中6種煙堿類農(nóng)藥殘留[J]. 質(zhì)譜學(xué)報(bào)，2012，33（2）：99-103.

[6]GB/T 23205茶葉中448種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量的測(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法[S].

[7]劉冰，趙紅霞. 超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法快速測(cè)定茶葉中18種農(nóng)藥殘留[J]. 分析實(shí)驗(yàn)室，2013，32（10）：77-83.

[8]賈瑋，黃峻榕，凌云，等. 高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時(shí)測(cè)定茶葉中290種農(nóng)藥殘留組分[J]. 分析測(cè)試學(xué)報(bào)，2013，32（1）：9-22.

[9]王連珠，周昱，黃小燕，等. 基于QuEChERS提取方法優(yōu)化的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定蔬菜中51種氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留[J]. 色譜，2013，31（12）：1167-1175.

[10]Alder L，Greulich K，Kempe G，et al. Residue analysis of 500 high priority pesticides：better by GC-MS or LC-MS/MS[J]. Mass Spectrometry Reviews，2006，25：838-865.

[11]吳剛，虞慧芳，鮑曉霞，等. 茶葉中殺螟丹殘留的氣相色譜分析方法研究[J]. 中國(guó)食品學(xué)報(bào)，2006，6（5）：129-132.

[12]吳剛，虞慧芳，鮑曉霞，等. 氣相色譜-微池電子捕獲檢測(cè)器分析茶葉中殺螟丹的殘留[J]. 色譜，2007，25（2）：288-289.

[13]陳紅平，劉新，王川丕，等. 親水作用色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定茶葉中殺螟丹農(nóng)藥殘留量[J]. 分析測(cè)試學(xué)報(bào)，2013，32（5）：619-624.