獻(xiàn)血者人類免疫缺陷病毒抗體有反應(yīng)性樣本確認(rèn)結(jié)果分析

曹誼，許建軍，王凱，王明元（.江蘇省蘇州市中心血站檢驗(yàn)科 5006；.江蘇省蘇州市中心血站昆山分站 5300）

隨著醫(yī)療技術(shù)水平的提高，臨床用血需求不斷增加，供血壓力日益加大，緩解血液緊張應(yīng)倡導(dǎo)開源和節(jié)流內(nèi)外兼修的同時，關(guān)注檢測假陽性獻(xiàn)血者屏蔽與歸隊成為采供血機(jī)構(gòu)重視的問題之一。如何在確保血液安全的前提下，防止假陽性引起的獻(xiàn)血員流失，更好地保留愛心獻(xiàn)血者越發(fā)重要。本研究通過對2008年1月至2013年6月蘇州市中心血站昆山分站檢測反應(yīng)性獻(xiàn)血者確認(rèn)結(jié)果分析，為獻(xiàn)血者的屏蔽及日后歸隊策略提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料

1.1.1 樣本來源樣本來自2008年1月到2013年6月蘇州市無償獻(xiàn)血者血液標(biāo)本共445438例，年齡19～55歲。

1.1.2 樣本處理與檢測靜脈采血分離血漿在24h內(nèi)分別由不同人不同試劑進(jìn)行2次酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測，初、復(fù)檢雙試劑有反應(yīng)性（灰區(qū)設(shè)置為s／co：0.5～＜1.0，灰區(qū)視為反應(yīng)性）者與初檢或復(fù)檢單試劑有反應(yīng)性經(jīng)同試劑復(fù)試雙孔或單孔有反應(yīng)性者，檢驗(yàn)結(jié)果判定為“待查”，將其樣本2～8℃保存，強(qiáng)反應(yīng)性即1周內(nèi)送蘇州市疾病預(yù)防控制中心（CDC）確認(rèn)。以確認(rèn)結(jié)果發(fā)布最終檢驗(yàn)報告，陰性獻(xiàn)血者歸隊，陽性永久屏蔽。

1.1.3 儀器與試劑 RSP200全自動加樣儀；EVO 全自動加樣儀；STAR 全自動加樣儀；FAME 24／20與24／30全自動酶免疫后處理器；初檢用北京金豪（2008～2011年）抗－HIVⅠ／ⅡELISA 三代試劑與北京萬泰（2012年1月到2013年6月）HIV－Ag／Ab ELISA 四代試劑檢測，復(fù)檢用廈門新創(chuàng)抗－HIVⅠ／ⅡELISA 三代試劑檢測。

1.2 檢測方法嚴(yán)格按照各試劑使用說明書進(jìn)行檢測并判定結(jié)果。

2 結(jié)果

從2008年1月到2013年6月檢驗(yàn)科共檢驗(yàn)樣本445438例，檢出抗－HIVⅠ／Ⅱ有反應(yīng)性樣本729例，送CDC 經(jīng)確認(rèn)陰性699例、陽性22例、不確定8例，分別占總送檢的95.9%、3.0%、1.1%；699例歸隊后獻(xiàn)血有389例，歸隊獻(xiàn)血率為55.7%。其中有209例為有效歸隊獻(xiàn)血，占總送檢的28.7%，占?xì)w隊獻(xiàn)血的29.9%；180例歸隊后再次送檢者中有81例（64例二次送檢，16例三次送檢，1例4次送檢）為歸隊獻(xiàn)血后二次及以上次被送檢，視為無效歸隊獻(xiàn)血，占總送檢的45.0%，占?xì)w隊獻(xiàn)血的11.6%。從180例再次送CDC確認(rèn)陰性樣本蘇州市中心血站ELISA檢測結(jié)果顯示，灰區(qū)樣本39例（初檢或復(fù)檢單試劑37例，初復(fù)檢雙試劑中有2例），占21.67%；單試劑反應(yīng)性樣本150例，占83.3%；雙試劑反應(yīng)性樣本30例，占16.67%；s／co＜5.0低值反應(yīng)性樣本124例，占單試劑反應(yīng)性樣本的82.7%。在22例確認(rèn)陽性樣本本站ELISA 檢測的結(jié)果均s／co＞15.0，呈強(qiáng)反應(yīng)性；8例不確定中有7例s／co＞5.0。見表1。

表1 180例確認(rèn)陰性樣本本站ELIAS檢測s／co值結(jié)果［n（%）］

3 討論

ELISA因其具有敏感性高、特異性強(qiáng)、操作簡單，易自動化等優(yōu)點(diǎn)，廣泛用于血液篩查，并發(fā)揮重要作用［1］。由于酶免疫檢測原理是抗原抗體的特異性反應(yīng)，受試驗(yàn)技術(shù)的限制有其局限性，內(nèi)源性干擾因素等假陽性、假陰性結(jié)果不能避免［2］。血站在進(jìn)行血液篩查時，為防止漏檢，應(yīng)用高靈敏度檢測試劑，也使弱反應(yīng)性假陽性增加。本研究結(jié)果顯示，經(jīng)CDC確認(rèn)95.9%為假陽性，其絕大多數(shù)為單試劑弱反應(yīng)性樣本與文獻(xiàn)［3－4］報道一致。全部對其進(jìn)行屏蔽，會造成大量血液的浪費(fèi)和愛心獻(xiàn)血者的流失。本研究原來的目的是為了防止假陽性引起的獻(xiàn)血員流失，對于獻(xiàn)血者歸隊起到一定的積極作用，但有近半數(shù)歸隊獻(xiàn)血被再次送檢而報廢，未能有效增加獻(xiàn)血員隊伍，相對增加了再次報廢的概率。加上采集、分離、檢驗(yàn)、包裝再報廢人力、物力、財力的投入，用血后返還的開支，其利弊尚須進(jìn)一步討論。提高試劑盒質(zhì)量，減少假陽性反應(yīng)尚為重要環(huán)節(jié)之一［5－6］。從CDC 確認(rèn)陽性均為ELISA 強(qiáng)反應(yīng)性樣本，作者建議血站抗－HIVⅠ／Ⅱ檢測可不設(shè)置灰區(qū)。

目前，國家尚未出臺相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)范。美國食品藥品監(jiān)督管理局2010年5月出臺的《HIV－1和HCV核酸檢測、血液處置和獻(xiàn)血者屏蔽與歸隊指引》（簡稱《指引》）對HIV 檢測反應(yīng)性獻(xiàn)血者的歸隊分了3種情況［1］。但《指引》只是一個技術(shù)建議，沒有相關(guān)法律要求［7］。因假陽性結(jié)果被屏蔽的獻(xiàn)血者歸隊當(dāng)下采取適當(dāng)方法降低ELISA檢測假陽性率，減少假陽性所致的獻(xiàn)血者淘汰與血液報廢，增加有效歸隊率。作者認(rèn)為初次檢測為弱反應(yīng)性假陽性的獻(xiàn)血者半年后進(jìn)行該項目的兩種試劑追蹤檢測，檢測結(jié)果仍為有反應(yīng)性則進(jìn)行永久屏蔽，檢測結(jié)果為無反應(yīng)性再進(jìn)行相關(guān)確認(rèn)試驗(yàn)，確認(rèn)結(jié)果陽性進(jìn)行永久屏蔽，確認(rèn)結(jié)果陰性則該獻(xiàn)血者可繼續(xù)獻(xiàn)血，捐獻(xiàn)的血液經(jīng)過檢測合格方可應(yīng)用于臨床［8］。

［1］孫庶麗，劉勤曉，李杰.對酶免四項弱反應(yīng)性獻(xiàn)血者的追蹤檢測［J］.中國實(shí)用醫(yī)藥，2013，8（32）：18－19.

［2］王鳳玲，馮秀河，畢麗鳳，等.酶聯(lián)免疫吸附法檢測梅毒抗體假陽性產(chǎn)生的原因探討［J］.實(shí)用醫(yī)技雜志，2007，14（11）：1417－1418.

［3］宮鋒巖，孫庶麗，劉勤曉.酶免四項再檢標(biāo)本檢測結(jié)果分析［J］.中國實(shí)用醫(yī)藥，2013，8（32）：16－17.

［4］劉宇寧，蔡菊英，劉曉音.血液篩查HBsAg，抗－HCV 假反應(yīng)性獻(xiàn)血者歸隊的調(diào)查分析［J］.中國輸血雜志，2012，25（3）：261.

［5］符慧杰，徐克前，侯玨，等.梅毒抗體篩查可疑感染獻(xiàn)血者回訪結(jié)果分析［J］.中國輸血雜志，2010，23（9）：724－725.

［6］勵曉濤，徐利虹，祝宏，等.無償獻(xiàn)血者抗－HIV 篩查及確認(rèn)情況分析［J］.浙江預(yù)防醫(yī)學(xué)，2012，24（8）：30－31.

［7］郭永建，姚鳳蘭，林授，等.HIV－1和HCV 核酸檢測、血液處置和獻(xiàn)血者屏蔽與歸隊指引（上）［J］.中國輸血雜志，2011，24（1）：79－85.

［8］葛紅衛(wèi)，林授，汪德海，等.HIV－1和HCV 核酸檢測規(guī)則，血液處置和獻(xiàn)血者屏蔽與歸隊指引（下）［J］.中國輸血雜志，2011，24（2）：172－176.