適宜桉樹皮栽培的秀珍菇優(yōu)良菌株篩選試驗(yàn)*

陳麗新，陳振妮，黃卓忠，王燦琴，韋仕巖，吳圣進(jìn)

(廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)院微生物研究所，廣西 南寧 530007)

桉樹是全世界最速生、經(jīng)濟(jì)價(jià)值最大、生態(tài)和社會(huì)效益最高的三大著名樹種之一 (其他兩種為松樹和楊樹)，廣西桉樹人工林面積、生長(zhǎng)量、蓄積量均居全國(guó)第一位[1]。桉樹木材在加工過程中會(huì)產(chǎn)生大量的桉樹皮，由于樹皮堆積密度低、體積大，且分布松散，不便于收集、儲(chǔ)藏和運(yùn)輸;樹皮又是一種高水分、高揮發(fā)分、低灰、低氮、低硫、發(fā)熱量低的不易燃燒的物質(zhì)，因此傳統(tǒng)的處理方式多以就地拋棄、焚燒或填埋等簡(jiǎn)單方式為主，既造成巨大的資源浪費(fèi)又嚴(yán)重污染環(huán)境[2]。隨著食用菌產(chǎn)業(yè)的迅猛發(fā)展，各地遇到了原料短缺、價(jià)格猛漲的制約產(chǎn)業(yè)跨越的瓶頸，探討新型食用菌培養(yǎng)基質(zhì)，尋求本地廉價(jià)的栽培資源已成為食用菌產(chǎn)業(yè)急待解決的問題[3]。桉樹產(chǎn)業(yè)廢棄物在食用菌上的應(yīng)用研究尚處于初始階段，有限的研究也多是桉樹屑的利用，應(yīng)用桉樹皮的相關(guān)報(bào)道極少。吳福堅(jiān)等[4]認(rèn)為，桉樹木材通過處理可袋栽香菇，是一種很有發(fā)展前景的食用菌原料林造林樹種;吳繼林等[5]采用木材加工后的桉樹木屑栽培鮑魚菇、茶樹菇、杏鮑菇等，均能順利出菇，適宜栽培珍稀食用菌;夏鳳娜等[6]將桉樹木屑 (皮屑、桿屑、皮桿混合屑)作為栽培基質(zhì)，對(duì)靈芝 (Ganoderma lucidum)、秀珍菇 (Pleurotus geesterani)、刺芹側(cè)耳 (Pleurotus eryngii)及金針菇 (Flammulina velutipes)等4種食用菌進(jìn)行栽培試驗(yàn)，結(jié)果表明靈芝、刺芹側(cè)耳、秀珍菇在桉樹皮桿混合屑 (皮∶桿=1∶3)培養(yǎng)料中顯示良好的適應(yīng)性，而金針菇在桉樹木屑培養(yǎng)料中菌絲生長(zhǎng)較弱，不能出菇;謝日祿等[7]進(jìn)行了用桉樹皮廢棄物栽培秀珍菇初探，顯示桉樹皮栽培秀珍菇的生物轉(zhuǎn)化率為79.9%。但上述研究多以可行性研究為主，適宜以桉樹皮為主要原料的食用菌優(yōu)良菌株的篩選研究尚未見報(bào)道。

秀珍菇質(zhì)地脆嫩，清甜爽口，營(yíng)養(yǎng)豐富，具有非常好的食用品質(zhì)，深受消費(fèi)者歡迎，栽培效益極為顯著[8]。為篩選出適合以桉樹皮為主要栽培基質(zhì)的秀珍菇優(yōu)良菌株，達(dá)到高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)、高效的目的，筆者對(duì)9個(gè)來源不同的秀珍菇菌株進(jìn)行了品種比較試驗(yàn)。現(xiàn)將試驗(yàn)結(jié)果報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 供試菌株

從國(guó)內(nèi)食用菌有關(guān)單位引進(jìn)及本單位保存的菌株共9個(gè):秀珍菇y(tǒng)z(廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)院微生物研究所食用菌研究中心保存)、秀珍菇1號(hào) (廣西大學(xué)微生物廠提供)、秀珍菇1671(廣西大學(xué)微生物廠提供)、秀珍菇x－1(廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)院微生物研究所食用菌研究中心保存)、臺(tái)灣秀珍菇 (福建農(nóng)林大學(xué)引進(jìn))、秀珍HP－1(廣西科學(xué)院生物所提供)、秀珍菇705(江蘇高郵食用菌研究所)、秀珍菇195(江蘇高郵食用菌研究所)、秀珍菇 (廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)院微生物研究所食用菌研究中心保存)。參試菌株經(jīng)同時(shí)復(fù)壯后，擴(kuò)大培養(yǎng)，采用相同的菌種等級(jí)進(jìn)行品比試驗(yàn)。

1.2 供試培養(yǎng)基

1.2.1 母種培養(yǎng)基

PDA培養(yǎng)基:馬鈴薯200 g、葡萄糖20 g、瓊脂20 g，加水1 000 mL，pH自然。

1.2.2 原種和栽培種培養(yǎng)基

棉籽殼40%、桑枝屑40%、麥麩16%、石灰2%、石膏1%、過磷酸鈣1%，含水量65%。

1.2.3 出菇培養(yǎng)基

桉樹皮73%、棉籽殼12%、玉米粉12%、石灰2%、石膏1%，含水量65%。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 菌種制作

分母種、原種、栽培種三級(jí)制種方法制種，培養(yǎng)基按常規(guī)方法配制、滅菌[9]，接種后置于溫度25℃～28℃下培養(yǎng)。

1.3.2 菌袋制作

根據(jù)配方比例及制袋量分別稱取各種原料。桉樹皮和棉籽殼提前預(yù)濕，常規(guī)方法拌料 (培養(yǎng)基含水量均控制在65%左右，pH值8.0～8.5)，裝袋 (使用規(guī)格為23 cm×45 cm的聚乙烯筒料袋)，100℃常壓滅菌10 h～12 h。冷卻后 (28℃以下)按無菌操作規(guī)程兩頭接種。每個(gè)菌株接種50袋，每袋以1.0 kg干料計(jì)算，重復(fù)3次。

1.3.3 菌絲體培養(yǎng)

接種后將各菌株菌種及菌袋置于培養(yǎng)室內(nèi)按常規(guī)進(jìn)行避光培養(yǎng)，室溫控制在25℃～28℃，空氣相對(duì)濕度為65%～70%。觀察菌絲的生長(zhǎng)情況，若有雜菌污染，及時(shí)將其撿出。觀察紀(jì)錄各菌株在PDA培養(yǎng)基及桉樹皮培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)情況，測(cè)量菌絲生長(zhǎng)速度 (采用直線生長(zhǎng)測(cè)量法)及菌絲生長(zhǎng)勢(shì) (分別將不同菌株的菌絲生長(zhǎng)情況相互比較，用“+”號(hào)表示菌絲密度和生長(zhǎng)勢(shì)強(qiáng)弱)。利用新復(fù)極差法對(duì)各菌株的生長(zhǎng)速度進(jìn)行差異顯著性分析。

1.3.4 出菇管理與采收

常規(guī)方法進(jìn)行[10]。

1.3.5 形態(tài)特征等農(nóng)藝性狀記錄

記錄各菌株的原基形成時(shí)間、形態(tài)特征、轉(zhuǎn)潮時(shí)間等。

1.3.6 產(chǎn)量統(tǒng)計(jì)

記錄統(tǒng)計(jì)各菌株前4潮鮮耳的產(chǎn)量，計(jì)算生物學(xué)效率，利用新復(fù)極差法進(jìn)行差異顯著性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同秀珍菇菌株菌絲體在PDA培養(yǎng)基上生長(zhǎng)狀況比較

不同菌株的菌絲體在PDA培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)狀況比較情況見表1。

表1 不同菌株菌絲體在PDA培養(yǎng)基上生長(zhǎng)狀況

由表1可知，在PDA培養(yǎng)基上，菌絲平均生長(zhǎng)速度以臺(tái)灣秀珍菇最快，為12.25 mm·d－1，在0.05水平和0.01水平上與秀珍菇y(tǒng)z、秀珍菇705、秀珍菇1671、秀珍菇195的菌絲生長(zhǎng)速度均存在顯著差異，但與秀珍菇1號(hào)、秀珍菇x－1、秀珍菇、秀珍HP－1之間差異不顯著;秀珍菇195平均生長(zhǎng)速度最慢，為10.70 mm·d－1，在0.05水平上均慢于其他菌株，在0.01水平上除與秀珍菇1671差異不顯著外，極顯著慢于其他菌株。秀珍菇y(tǒng)z、菌株秀珍菇705、菌株秀珍菇1671之間差異不顯著。參試菌株菌絲生長(zhǎng)勢(shì)除秀珍菇195一般，菌絲較稀，顏色淡、生長(zhǎng)不整齊，秀珍菇1671、菌株秀珍菇705生長(zhǎng)不夠整齊外，其余6個(gè)菌株菌絲長(zhǎng)勢(shì)均濃密、潔白、粗壯有力，生長(zhǎng)整齊。

2.2 不同菌株菌絲體在桉樹皮培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)狀況比較

不同菌株菌絲體在桉樹皮培養(yǎng)基上生長(zhǎng)狀況見表2。

表2 不同菌株菌絲體在桉樹皮培養(yǎng)基上生長(zhǎng)狀況

由表2可見，在桉樹皮培養(yǎng)基上，菌絲平均生長(zhǎng)速度以臺(tái)灣秀珍菇最快，達(dá)到10.47 mm·d－1，在0.05和0.01水平上，除與秀珍菇相比差異不顯著外，與其他菌株的生長(zhǎng)速度均存在顯著差異。秀珍菇195的菌絲生長(zhǎng)速度最慢，為8.95 mm·d－1，在0.05和0.01水平上與其他菌株的菌絲生長(zhǎng)速度均存在顯著差異。在0.05和0.01水平上，秀珍HP－1、秀珍菇x－1、秀珍菇1號(hào)、秀珍菇1671、秀珍菇705的菌絲生長(zhǎng)速度差異均不顯著。秀珍菇705與秀珍菇y(tǒng)z之間，在0.05水平上差異顯著，在0.01水平上，差異不顯著。

在菌絲長(zhǎng)勢(shì)方面，除秀珍菇1671和秀珍菇195顏色較淡、長(zhǎng)勢(shì)稍差外，其余菌株菌絲長(zhǎng)勢(shì)均濃密、潔白、粗壯、有力。

2.3 參試菌株子實(shí)體農(nóng)藝性狀比較

參試菌株子實(shí)體農(nóng)藝性狀見表3。

表3 參試菌株子實(shí)體農(nóng)藝性狀

由表3可知，參試菌株多為叢生，秀珍菇y(tǒng)z、秀珍菇195、秀珍菇子實(shí)體色澤為褐色或深褐色，菇蓋厚實(shí)，菌柄粗短;其他菌株子實(shí)體顏色呈灰褐色或灰白色，菌蓋偏薄，菌柄較長(zhǎng);各參試菌株原基形成較快，從接種至原基形成僅需20 d～27 d，其中最短的是秀珍菇1號(hào)和秀珍菇705，接種后僅20 d即開始現(xiàn)蕾?，F(xiàn)蕾時(shí)間最長(zhǎng)的是秀珍菇195，接種后27 d開始現(xiàn)蕾。各參試菌株轉(zhuǎn)潮時(shí)間為7 d～11 d，最慢的是秀珍菇1號(hào)轉(zhuǎn)潮時(shí)間為10 d～11 d，其次是秀珍菇705、秀珍菇195，為9 d～10 d，其他的為7 d～9 d。

2.4 不同菌株在桉樹皮培養(yǎng)基上的生物學(xué)效率比較

不同菌株在桉樹皮培養(yǎng)基上的生物學(xué)效率比較情況見表4。

表4 參試菌株生物學(xué)效率比較

試驗(yàn)結(jié)果表明，在桉樹皮培養(yǎng)基質(zhì)中秀珍菇1號(hào)鮮菇產(chǎn)量最高，生物學(xué)效率達(dá)96.2%，在0.05和0.01水平上與其他菌株均存在顯著差異。秀珍菇1671產(chǎn)量次之，在0.05和0.01水平上除與秀珍菇705差異不顯著外，與其他菌株均存在顯著差異。秀珍菇195產(chǎn)量最低，生物學(xué)效率只有38.5%，在0.05和0.01水平上與其他菌株均存在顯著差異。其他在0.05和0.01水平上，秀珍菇705與秀珍菇y(tǒng)z之間差異顯著，秀珍菇x－1、臺(tái)灣秀珍菇、秀珍菇、秀珍HP－1之間差異不顯著。

3 結(jié)果與討論

通過在PDA培養(yǎng)基和桉樹皮培養(yǎng)基上菌絲的生長(zhǎng)情況和生物學(xué)效率等的比較試驗(yàn)，結(jié)果表明，9個(gè)供試菌株之間存在明顯差異。在相同培養(yǎng)基和培養(yǎng)溫度條件下，不同秀珍菇菌株其菌絲長(zhǎng)勢(shì)、生長(zhǎng)速度存在個(gè)體差別。試驗(yàn)顯示，在PDA和桉樹皮培養(yǎng)基上，菌絲生長(zhǎng)最快、長(zhǎng)勢(shì)最強(qiáng)的是臺(tái)灣秀珍菇即臺(tái)灣秀珍菇;生長(zhǎng)最慢、長(zhǎng)勢(shì)最弱的是秀珍菇195。

9個(gè)秀珍菇菌株的生物學(xué)效率存在明顯差異，秀珍菇1號(hào)最高，在0.05和0.01水平上與其他菌株間的生物學(xué)效率均存在顯著差異;其次為秀珍菇1671和秀珍菇705，兩者在0.05和0.01水平上與其他菌株間均存在顯著差異，但兩者之間差異不顯著;生物學(xué)效率最低的是秀珍菇195。試驗(yàn)分析表明，菌株生長(zhǎng)存在極大的地域性，在外地表現(xiàn)良好的菌株并不一定適宜當(dāng)?shù)貧夂驐l件和原料栽培。

本試驗(yàn)中，臺(tái)灣秀珍菇、秀珍菇、秀珍HP－1、秀珍菇x－1的菌絲生長(zhǎng)速度較快，菌絲粗壯、潔白、整齊，長(zhǎng)勢(shì)強(qiáng)，但生物學(xué)效率卻不高，說明菌絲的生長(zhǎng)與生物學(xué)效率無正相關(guān)性。

從生產(chǎn)及市場(chǎng)需求分析，菌絲生長(zhǎng)、出菇、轉(zhuǎn)潮快，產(chǎn)量高，子實(shí)體厚實(shí)，色澤為褐色或深褐色，商品性好的品種最受消費(fèi)者喜愛。但本試驗(yàn)的9個(gè)菌株中，沒有綜合性狀都好的菌株，菌絲生長(zhǎng)快、長(zhǎng)勢(shì)好的臺(tái)灣秀珍菇生物學(xué)效率卻只是居中;生物學(xué)效率較高的秀珍菇1號(hào)、秀珍菇1671、秀珍菇705子實(shí)體顏色偏白，菌蓋偏薄容易破裂，商品性受到影響;子實(shí)體外觀和商品性較好的秀珍菇y(tǒng)z生物學(xué)效率尚可，但在桉樹皮培養(yǎng)基上生長(zhǎng)很慢，因此，還有待開展進(jìn)一步的育種研究。

盡管參試菌株均存在優(yōu)缺點(diǎn)，但綜合各菌株的菌絲生長(zhǎng)情況、子實(shí)體農(nóng)藝性狀和生物學(xué)效率，秀珍菇y(tǒng)z、秀珍菇1號(hào)、秀珍菇1671和秀珍菇705菌株較適宜廣西地區(qū)利用桉樹皮為主要栽培基質(zhì)進(jìn)行栽培，秀珍菇y(tǒng)z為廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)院微生物研究所長(zhǎng)期保存應(yīng)用的菌株，可直接推廣，而新引進(jìn)的秀珍菇705則還需進(jìn)行區(qū)域試驗(yàn)，進(jìn)一步驗(yàn)證其生長(zhǎng)情況、生物學(xué)效率及商品性后方可推廣，成為主栽品種。

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