硬頭鱒人工繁育和胚胎發(fā)育初探

寇景蓮

摘要：2013年12月-2014年5月，在豐寧天河龍養(yǎng)殖有限公司進行了硬頭鱒人工孵化和硬頭鱒人工種間雜交試驗。通過成熟卵和受精卵、過熟卵受精前后比較，受精卵不同時間卵徑變化比較，受精率、發(fā)眼率、孵化率、出苗率的觀察研究，結(jié)果表明：受精卵在不同時期卵徑變化不大，在5.21～5.27 mm，只是顏色由淺變深，由橘黃色或淡黃色變成微紅色；在平均溫度為4.82 ℃時，從授精到發(fā)眼需51.7 d，有效積溫達248.5 ℃·d；發(fā)眼后平均溫度為6.11 ℃時28 d破膜，有效積溫達391.8 ℃·d；發(fā)眼后63 d有效積溫達599.7 ℃·d上??；而在溫度為7.5 ℃時，發(fā)眼后17 d就破膜，29 d就上浮，溫度對冷水魚胚胎發(fā)育影響明顯；硬頭鱒純親本人工孵化受精率、發(fā)眼率、孵化率和出苗率分別是90.2%、88.4%、85.1%、80.4%，比硬頭鱒和金鱒雜交人工孵化分別高出23.1%、17.2%、15.7%、19.2%；初孵仔魚，全身透明，背鰭原基出現(xiàn)，血液循環(huán)和心跳清晰可見，心跳次數(shù)80～81次/min。

關(guān)鍵詞：硬頭鱒；金鱒；人工繁育；人工雜交；卵徑；胚胎發(fā)育；初孵仔魚

我國目前養(yǎng)殖的鮭科魚類主要有虹鱒、金鱒、彩虹鱒、山女鱒、硬頭鱒、哲羅魚、細鱗魚、紅點鮭等，其中虹鱒的飼養(yǎng)量最大。2012年我國淡水冷水魚養(yǎng)殖產(chǎn)量為8.3萬t，而鮭鱒魚產(chǎn)量約2.7萬t，占淡水冷水魚總產(chǎn)量32.5%。由于近幾年虹鱒的近親繁殖，導致親本規(guī)格越來越小，懷卵量和卵子質(zhì)量越來越差，受精率低，抗病力越來越弱。為此，2013年在河北省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系淡水養(yǎng)殖創(chuàng)新團隊支持下，河北省海洋與水產(chǎn)科學研究院和承德市水產(chǎn)技術(shù)推廣站在豐寧天河龍養(yǎng)殖有限公司進行了硬頭鱒人工繁育技術(shù)研究。

硬頭鱒原產(chǎn)于美國和加拿大，我國于1998年從美國引進，目前在北京、浙江、新疆、吉林、黑龍江等地均有硬頭鱒的養(yǎng)殖。與陸封型虹鱒相比，硬頭鱒的個體較大，身體青灰發(fā)亮，背部斑點大且疏，相對懷卵量和絕對懷卵量都高于虹鱒，卵子質(zhì)量也明顯好于虹鱒，個體大，飽滿、勻稱，色澤光亮，孵化率高。目前對冷水性魚類虹鱒、山女鱒和金鱒魚卵、胚胎發(fā)育研究的報道相對多一些，而對有關(guān)硬頭鱒的報道很少，僅限于硬頭鱒苗種養(yǎng)殖試驗[1]和硬頭鱒孵化試驗[2]，在國內(nèi)還沒有發(fā)現(xiàn)對硬頭鱒人工繁育和胚胎發(fā)育的報道。本文將對硬頭人工繁育和胚胎發(fā)育進行初步探索，旨在找到硬頭鱒胚胎發(fā)育規(guī)律，為規(guī)模生產(chǎn)提供基礎(chǔ)材料。

1材料與方法

1.1試驗地點和材料

試驗在豐寧天河龍養(yǎng)殖有限公司進行，所使用親魚為該場培育的硬頭鱒親魚、金鱒親魚群體。

1.2試驗時間

2013年12月-2014年5月。

1.3人工授精

1.3.1采卵人工采卵用擠腹法，即輕壓成熟雌魚后腹部，卵粒從生殖孔流出，接到用干凈毛巾擦凈的接卵盆內(nèi)。

1.3.2采精方法同上，操作時先擠出尿、糞的等污物，再擠精液。

1.3.3人工受精將精液直接擠到擠出的魚卵上，迅速用手輕輕地將精卵攪拌均勻，時間掌握在2～3 min內(nèi)。

1.3.4脫粘將攪拌均勻的精卵立即用干凈淡水沖洗，用手輕輕攪拌后，將水倒出，再加入新水，反復沖洗，直到受精卵不粘連。

1.3.5吸水脫粘后的受精卵，在水中靜置30～40 min，待充分吸水膨脹后，用量筒計數(shù)轉(zhuǎn)入孵化桶中進行孵化。

1.4試驗方法

1.4.1成熟卵和受精卵、過熟卵受精前后比較隨機取30粒成熟卵，用電子數(shù)顯卡尺分別測量每粒卵的粒徑并加以記錄，然后用電子秤稱出30粒卵的粒重，得出平均值；再隨機取出同一尾親魚產(chǎn)出的卵，經(jīng)受精充分吸水后，用同樣方法測出卵徑，稱出卵粒重；同時做了2尾過熟卵受精發(fā)育，單放在2個桶內(nèi)進行對比試驗，其它條件相同。受精卵放入流水孵化桶中孵化，至發(fā)眼期移至平列槽孵化至出苗，孵化期間最低水溫為4.5 ℃，最高為7.5 ℃。

1.4.2受精卵不同時間卵徑變化比較在受精后0～4 h內(nèi)，每間隔30 min采樣一次，4～24 h內(nèi)，每2 h采樣一次，每次采樣30粒；第3 d后每8 d測一次樣，每次采樣30粒（尾）。

1.4.3觀察方法用顯微鏡對所有樣品進行觀察，當發(fā)育過程中超過50%的個體達到某個時期，則記為該發(fā)育階段的起始時間，并用連接電腦的SZ760系列連續(xù)變倍體視顯微鏡影像系統(tǒng)和軟件進行拍照記錄。

1.5受精率、發(fā)眼率、孵化率、出苗率計算

受精后第8 d，從各桶隨機取出受精卵50粒，挑選出混濁發(fā)白的死卵，透明的就是授精成活的卵。發(fā)眼卵以胚胎發(fā)育中出現(xiàn)2個眼點為標志，卵淡黃色或微紅色。按常規(guī)方法計算受精率、發(fā)眼率、孵化率、出苗率。

1.6有效積溫的計算

在硬頭鱒胚胎發(fā)育中，完成某階段的平均水溫（℃）與發(fā)育到該階段所需要的天數(shù)的乘積，表示有效發(fā)育積溫。

1.7數(shù)據(jù)處理和分析

用QQ編輯圖片制作圖版，用Microsoft excel進行統(tǒng)計分析。

2結(jié)果

2.1成熟卵子、過熟卵子受精前后比較

2.1.1卵子授精前后變化卵子卵粒飽滿，勻稱，卵徑比虹鱒魚要大，色澤光亮，透明度較高，卵膜薄，稍碰即破，彈性差，顏色為橘黃色或淡黃色，大小均勻，平均為4.53 mm。受精吸水后，更加飽滿有光澤，晶瑩剔透，卵膜變厚有彈性，不易碎，吸水后粒徑為5.17 mm，相差0.64 mm（見表1）；受精卵歷經(jīng)74～79 d，在不同時期卵徑變化不大，在5.21～5.27 mm，只是顏色由淺變深，由橘黃色或淡黃色變成微紅色（見表2）。

表1硬頭鱒卵子受精前后變化

2.1.2成熟卵和過熟卵受精前后對比成熟卵呈桔黃色，半透明，卵膜內(nèi)表面具分散的細小透明黃色油球，受精率高，平均達95.2%以上，發(fā)眼率達88.4%，受精前后卵徑變化明顯，彈性大（圖1-a）；而過熟卵做的2尾，其中1尾當時受精率只有10%左右，到第二天幾乎為零，另一尾當時成活率可達50%～60%，但受精卵表面不干凈，發(fā)育緩慢、彈性小，到受精第16 d全部死亡，受精前卵徑5.11 mm，受精后1 h卵徑為5.21 mm。

2.2胚胎發(fā)育

2.2.1受精卵剛受精的受精卵色素分布均勻，含有大顆粒脂肪滴，受精吸水0.5 h后，卵徑由453 mm達到5.17 mm，卵質(zhì)膜和卵膜之間形成的圍卵周隙擴大，卵黃膜因受刺激而迅速離開卵子的表面向外隆起形成受精膜。受精后2 h，原生質(zhì)向動物極流動，逐漸形成胚盤，卵質(zhì)均勻分布（圖1-b）。

2.2.2囊胚期受精后第168 h，進入囊胚期，囊胚隆起達到最高，繼而進入囊胚中期，細胞變小，胚盤細胞呈帽狀；細胞向植物極移動，胚盤高度降低，稱低囊胚，進入囊胚晚期囊胚細胞內(nèi)卷下包形成胚環(huán)。如圖1-c。

2.2.3原腸期受精后第546 h，進入原腸期，囊胚表面細胞向卵黃部分下包約整個胚胎的1/3，細胞集中增厚，形成胚盾；繼而下包胚盤的1/2，胚盾延長；下包到胚盤的3/4，背面較為隆起。

2.2.4眼囊形成受精后第1 056 h，受精卵顏色變深，微紅，分布血管，頭部較明顯，隱約可見吻部；出現(xiàn)一個眼囊， （圖1-d）；脊索清晰可見，黑色素較淺， （圖1-e）。

2.2.5發(fā)眼期受精后第51 d，有效積溫達到250.3 ℃·d發(fā)眼（圖1-f），受精卵顏色更深，深紅色，頭部輪廓明顯，將卵黃囊全部包裹（圖1-g），眼球色素出現(xiàn)，腦部分化明顯（圖1-h），脊索色素加深。而雜交鱒有效積溫達到281.8 ℃·d發(fā)眼；比純硬頭鱒晚近7 d。

2.2.6出膜期受精后第79 d，有效積溫達到391.8℃·d破膜而出，此時身體弧狀彎曲，半透明，腹部有一個大的卵黃囊，給出膜仔魚提供營養(yǎng)，卵黃囊呈橢圓形，尾鰭寬大，呈扇形，為出膜仔魚主要運動器官（圖1-i）；大部分個體背部出現(xiàn)黑色素，鰭褶明顯，形成鰭條，出現(xiàn)嗅覺器官鼻子，并長出口裂圖；可見尾鰭呈扇形，透明狀（圖1-j），出現(xiàn)背鰭原基，出現(xiàn)鰓裂，卵黃囊血管清晰，心臟位于卵黃囊前端，心跳次數(shù)80～81次/min（圖1-k）；完全破膜的仔魚體長15.92±1.34 mm，卵黃囊長8.08±1.25 mm，寬6.01±1.07 mm ，（圖1-l）。

2.3仔魚發(fā)育

受精后第114 d，孵化后卵黃囊已被吸收一半以上，開始上浮，并開口攝食人工餌料的仔魚。純硬頭鱒，發(fā)眼后63 d，有效積溫達到599.7 ℃·d上浮。

2.4受精率、發(fā)眼率、孵化率和出苗率

在相同條件下硬頭鱒純親本人工孵化受精率、發(fā)眼率、孵化率和出苗率分別是90.2%、88.4%、85.1%、80.4%，分別比硬頭鱒和金鱒雜交人工孵化高23.1%、17.2%、15.7%、19.2%。見表3。

表3硬頭鱒和虹鱒雜交比較

在平均溫度為4.82 ℃時，從受精到發(fā)眼需51.7 d，有效積溫達248.5 ℃？d，見表4；平均溫度為6.11 ℃時，發(fā)眼后29 d時破膜，有效積溫達360.2 ℃·d；發(fā)眼后60 d有效積溫達605.2 ℃·d上??；而在溫度為7.5 ℃時，發(fā)眼后17 d就破膜，29 d有效積溫454.6 ℃·d時上浮，溫度對冷水魚胚胎發(fā)育影響明顯。見表5。

表4受精卵發(fā)眼時間統(tǒng)計表

3.1溫度對硬頭鱒胚胎發(fā)育的影響

溫度對胚胎發(fā)育影響較大，從受精卵到發(fā)眼，低溫時胚胎發(fā)育發(fā)眼、破膜、上浮明顯晚于較高溫度地區(qū)，7.12 ℃時，發(fā)眼后17 d有效積溫達3646 ℃·d時就破膜，29 d時有效積溫達454.6 ℃·d上浮?？梢娫谶m宜的水溫內(nèi)，溫度越高，硬頭鱒受精卵孵化的時間越短，與陳術(shù)強、張玉勇等研究的溫度對虹鱒、山女鱒雜交種胚胎發(fā)育的研究結(jié)果相吻合[3]。另外本試驗通過使用水霉靈、甲醛等藥物進行控制，孵化期間沒有發(fā)現(xiàn)水霉病，可見在4.5～7.5 ℃時人工孵化，水霉病發(fā)生幾率較低。

3.2硬頭鱒成熟卵與過熟卵的比較

成熟卵子授精前后卵粒飽滿有光澤，晶瑩剔透，卵膜變厚有彈性，不易碎，受精率高，平均達90%以上，發(fā)眼率達88.4%，授精前后卵徑變化明顯，彈性大；受精卵79 d內(nèi)，在不同時期卵徑變化不大，在5.21～5.27 mm，與黃金善等報道的相符[4]，只是顏色由淺變深，由橘黃色或淡黃色變成微紅色。而過熟卵受精率低，受精卵表面不干凈，發(fā)育緩慢、彈性小，到受精第16 d全部死亡，卵徑受精前后變化不大。

3.3硬頭鱒卵裂期

由于硬頭鱒卵壁較厚，在受精過程中未采取相關(guān)措施，在顯微鏡下沒有觀察到卵裂各細胞期，有待于今后進一步研究進行觀察。

a.未受精卵 b.受精卵 c.囊胚期 d.眼囊形成期 e.脊索形成 f.發(fā)眼期

g.胚胎完全包裹卵黃囊 h.頭尾相接 i.出膜前期 j.吻部明顯 k.呼吸系統(tǒng)明顯 l.完全破膜

圖1硬頭鱒胚胎發(fā)育照片

參考文獻：

[1]

陶洋洲.硬頭鱒孵化試驗[J].科學養(yǎng)魚，1998（7）：32

[2] 劉澧津.硬頭鱒苗種養(yǎng)殖試驗[J].河北漁業(yè)，2002（2）：48-49

[3] 陳術(shù)強，張玉勇，賈智英，等. 虹鱒（♀）×山女鱒（♂）雜交種胚胎及仔魚發(fā)育的研究[J].上海海洋大學學報，2010，19（6）：756-762

[4] 黃金善，范兆廷，賈忠賀，等. 沉性大卵徑魚卵的觀察方法與虹鱒的胚胎發(fā)育[J].經(jīng)濟動物學報，2005，9（4）：235-238

（收稿日期：2014-09-02；修回日期：2014-09-10）

2.2胚胎發(fā)育

2.2.1受精卵剛受精的受精卵色素分布均勻，含有大顆粒脂肪滴，受精吸水0.5 h后，卵徑由453 mm達到5.17 mm，卵質(zhì)膜和卵膜之間形成的圍卵周隙擴大，卵黃膜因受刺激而迅速離開卵子的表面向外隆起形成受精膜。受精后2 h，原生質(zhì)向動物極流動，逐漸形成胚盤，卵質(zhì)均勻分布（圖1-b）。

2.2.2囊胚期受精后第168 h，進入囊胚期，囊胚隆起達到最高，繼而進入囊胚中期，細胞變小，胚盤細胞呈帽狀；細胞向植物極移動，胚盤高度降低，稱低囊胚，進入囊胚晚期囊胚細胞內(nèi)卷下包形成胚環(huán)。如圖1-c。

2.2.3原腸期受精后第546 h，進入原腸期，囊胚表面細胞向卵黃部分下包約整個胚胎的1/3，細胞集中增厚，形成胚盾；繼而下包胚盤的1/2，胚盾延長；下包到胚盤的3/4，背面較為隆起。

2.2.4眼囊形成受精后第1 056 h，受精卵顏色變深，微紅，分布血管，頭部較明顯，隱約可見吻部；出現(xiàn)一個眼囊， （圖1-d）；脊索清晰可見，黑色素較淺， （圖1-e）。

2.2.5發(fā)眼期受精后第51 d，有效積溫達到250.3 ℃·d發(fā)眼（圖1-f），受精卵顏色更深，深紅色，頭部輪廓明顯，將卵黃囊全部包裹（圖1-g），眼球色素出現(xiàn)，腦部分化明顯（圖1-h），脊索色素加深。而雜交鱒有效積溫達到281.8 ℃·d發(fā)眼；比純硬頭鱒晚近7 d。

2.2.6出膜期受精后第79 d，有效積溫達到391.8℃·d破膜而出，此時身體弧狀彎曲，半透明，腹部有一個大的卵黃囊，給出膜仔魚提供營養(yǎng)，卵黃囊呈橢圓形，尾鰭寬大，呈扇形，為出膜仔魚主要運動器官（圖1-i）；大部分個體背部出現(xiàn)黑色素，鰭褶明顯，形成鰭條，出現(xiàn)嗅覺器官鼻子，并長出口裂圖；可見尾鰭呈扇形，透明狀（圖1-j），出現(xiàn)背鰭原基，出現(xiàn)鰓裂，卵黃囊血管清晰，心臟位于卵黃囊前端，心跳次數(shù)80～81次/min（圖1-k）；完全破膜的仔魚體長15.92±1.34 mm，卵黃囊長8.08±1.25 mm，寬6.01±1.07 mm ，（圖1-l）。

2.3仔魚發(fā)育

受精后第114 d，孵化后卵黃囊已被吸收一半以上，開始上浮，并開口攝食人工餌料的仔魚。純硬頭鱒，發(fā)眼后63 d，有效積溫達到599.7 ℃·d上浮。

2.4受精率、發(fā)眼率、孵化率和出苗率

在相同條件下硬頭鱒純親本人工孵化受精率、發(fā)眼率、孵化率和出苗率分別是90.2%、88.4%、85.1%、80.4%，分別比硬頭鱒和金鱒雜交人工孵化高23.1%、17.2%、15.7%、19.2%。見表3。

表3硬頭鱒和虹鱒雜交比較

在平均溫度為4.82 ℃時，從受精到發(fā)眼需51.7 d，有效積溫達248.5 ℃？d，見表4；平均溫度為6.11 ℃時，發(fā)眼后29 d時破膜，有效積溫達360.2 ℃·d；發(fā)眼后60 d有效積溫達605.2 ℃·d上浮；而在溫度為7.5 ℃時，發(fā)眼后17 d就破膜，29 d有效積溫454.6 ℃·d時上浮，溫度對冷水魚胚胎發(fā)育影響明顯。見表5。

表4受精卵發(fā)眼時間統(tǒng)計表

3.1溫度對硬頭鱒胚胎發(fā)育的影響

溫度對胚胎發(fā)育影響較大，從受精卵到發(fā)眼，低溫時胚胎發(fā)育發(fā)眼、破膜、上浮明顯晚于較高溫度地區(qū)，7.12 ℃時，發(fā)眼后17 d有效積溫達3646 ℃·d時就破膜，29 d時有效積溫達454.6 ℃·d上浮?？梢娫谶m宜的水溫內(nèi)，溫度越高，硬頭鱒受精卵孵化的時間越短，與陳術(shù)強、張玉勇等研究的溫度對虹鱒、山女鱒雜交種胚胎發(fā)育的研究結(jié)果相吻合[3]。另外本試驗通過使用水霉靈、甲醛等藥物進行控制，孵化期間沒有發(fā)現(xiàn)水霉病，可見在4.5～7.5 ℃時人工孵化，水霉病發(fā)生幾率較低。

3.2硬頭鱒成熟卵與過熟卵的比較

成熟卵子授精前后卵粒飽滿有光澤，晶瑩剔透，卵膜變厚有彈性，不易碎，受精率高，平均達90%以上，發(fā)眼率達88.4%，授精前后卵徑變化明顯，彈性大；受精卵79 d內(nèi)，在不同時期卵徑變化不大，在5.21～5.27 mm，與黃金善等報道的相符[4]，只是顏色由淺變深，由橘黃色或淡黃色變成微紅色。而過熟卵受精率低，受精卵表面不干凈，發(fā)育緩慢、彈性小，到受精第16 d全部死亡，卵徑受精前后變化不大。

3.3硬頭鱒卵裂期

由于硬頭鱒卵壁較厚，在受精過程中未采取相關(guān)措施，在顯微鏡下沒有觀察到卵裂各細胞期，有待于今后進一步研究進行觀察。

a.未受精卵 b.受精卵 c.囊胚期 d.眼囊形成期 e.脊索形成 f.發(fā)眼期

g.胚胎完全包裹卵黃囊 h.頭尾相接 i.出膜前期 j.吻部明顯 k.呼吸系統(tǒng)明顯 l.完全破膜

圖1硬頭鱒胚胎發(fā)育照片

參考文獻：

[1]

陶洋洲.硬頭鱒孵化試驗[J].科學養(yǎng)魚，1998（7）：32

[2] 劉澧津.硬頭鱒苗種養(yǎng)殖試驗[J].河北漁業(yè)，2002（2）：48-49

[3] 陳術(shù)強，張玉勇，賈智英，等. 虹鱒（♀）×山女鱒（♂）雜交種胚胎及仔魚發(fā)育的研究[J].上海海洋大學學報，2010，19（6）：756-762

[4] 黃金善，范兆廷，賈忠賀，等. 沉性大卵徑魚卵的觀察方法與虹鱒的胚胎發(fā)育[J].經(jīng)濟動物學報，2005，9（4）：235-238

（收稿日期：2014-09-02；修回日期：2014-09-10）

2.2胚胎發(fā)育

2.2.1受精卵剛受精的受精卵色素分布均勻，含有大顆粒脂肪滴，受精吸水0.5 h后，卵徑由453 mm達到5.17 mm，卵質(zhì)膜和卵膜之間形成的圍卵周隙擴大，卵黃膜因受刺激而迅速離開卵子的表面向外隆起形成受精膜。受精后2 h，原生質(zhì)向動物極流動，逐漸形成胚盤，卵質(zhì)均勻分布（圖1-b）。

2.2.2囊胚期受精后第168 h，進入囊胚期，囊胚隆起達到最高，繼而進入囊胚中期，細胞變小，胚盤細胞呈帽狀；細胞向植物極移動，胚盤高度降低，稱低囊胚，進入囊胚晚期囊胚細胞內(nèi)卷下包形成胚環(huán)。如圖1-c。

2.2.3原腸期受精后第546 h，進入原腸期，囊胚表面細胞向卵黃部分下包約整個胚胎的1/3，細胞集中增厚，形成胚盾；繼而下包胚盤的1/2，胚盾延長；下包到胚盤的3/4，背面較為隆起。

2.2.4眼囊形成受精后第1 056 h，受精卵顏色變深，微紅，分布血管，頭部較明顯，隱約可見吻部；出現(xiàn)一個眼囊， （圖1-d）；脊索清晰可見，黑色素較淺， （圖1-e）。

2.2.5發(fā)眼期受精后第51 d，有效積溫達到250.3 ℃·d發(fā)眼（圖1-f），受精卵顏色更深，深紅色，頭部輪廓明顯，將卵黃囊全部包裹（圖1-g），眼球色素出現(xiàn)，腦部分化明顯（圖1-h），脊索色素加深。而雜交鱒有效積溫達到281.8 ℃·d發(fā)眼；比純硬頭鱒晚近7 d。

2.2.6出膜期受精后第79 d，有效積溫達到391.8℃·d破膜而出，此時身體弧狀彎曲，半透明，腹部有一個大的卵黃囊，給出膜仔魚提供營養(yǎng)，卵黃囊呈橢圓形，尾鰭寬大，呈扇形，為出膜仔魚主要運動器官（圖1-i）；大部分個體背部出現(xiàn)黑色素，鰭褶明顯，形成鰭條，出現(xiàn)嗅覺器官鼻子，并長出口裂圖；可見尾鰭呈扇形，透明狀（圖1-j），出現(xiàn)背鰭原基，出現(xiàn)鰓裂，卵黃囊血管清晰，心臟位于卵黃囊前端，心跳次數(shù)80～81次/min（圖1-k）；完全破膜的仔魚體長15.92±1.34 mm，卵黃囊長8.08±1.25 mm，寬6.01±1.07 mm ，（圖1-l）。

2.3仔魚發(fā)育

受精后第114 d，孵化后卵黃囊已被吸收一半以上，開始上浮，并開口攝食人工餌料的仔魚。純硬頭鱒，發(fā)眼后63 d，有效積溫達到599.7 ℃·d上浮。

2.4受精率、發(fā)眼率、孵化率和出苗率

在相同條件下硬頭鱒純親本人工孵化受精率、發(fā)眼率、孵化率和出苗率分別是90.2%、88.4%、85.1%、80.4%，分別比硬頭鱒和金鱒雜交人工孵化高23.1%、17.2%、15.7%、19.2%。見表3。

表3硬頭鱒和虹鱒雜交比較

在平均溫度為4.82 ℃時，從受精到發(fā)眼需51.7 d，有效積溫達248.5 ℃？d，見表4；平均溫度為6.11 ℃時，發(fā)眼后29 d時破膜，有效積溫達360.2 ℃·d；發(fā)眼后60 d有效積溫達605.2 ℃·d上??；而在溫度為7.5 ℃時，發(fā)眼后17 d就破膜，29 d有效積溫454.6 ℃·d時上浮，溫度對冷水魚胚胎發(fā)育影響明顯。見表5。

表4受精卵發(fā)眼時間統(tǒng)計表

3.1溫度對硬頭鱒胚胎發(fā)育的影響

溫度對胚胎發(fā)育影響較大，從受精卵到發(fā)眼，低溫時胚胎發(fā)育發(fā)眼、破膜、上浮明顯晚于較高溫度地區(qū)，7.12 ℃時，發(fā)眼后17 d有效積溫達3646 ℃·d時就破膜，29 d時有效積溫達454.6 ℃·d上浮?？梢娫谶m宜的水溫內(nèi)，溫度越高，硬頭鱒受精卵孵化的時間越短，與陳術(shù)強、張玉勇等研究的溫度對虹鱒、山女鱒雜交種胚胎發(fā)育的研究結(jié)果相吻合[3]。另外本試驗通過使用水霉靈、甲醛等藥物進行控制，孵化期間沒有發(fā)現(xiàn)水霉病，可見在4.5～7.5 ℃時人工孵化，水霉病發(fā)生幾率較低。

3.2硬頭鱒成熟卵與過熟卵的比較

成熟卵子授精前后卵粒飽滿有光澤，晶瑩剔透，卵膜變厚有彈性，不易碎，受精率高，平均達90%以上，發(fā)眼率達88.4%，授精前后卵徑變化明顯，彈性大；受精卵79 d內(nèi)，在不同時期卵徑變化不大，在5.21～5.27 mm，與黃金善等報道的相符[4]，只是顏色由淺變深，由橘黃色或淡黃色變成微紅色。而過熟卵受精率低，受精卵表面不干凈，發(fā)育緩慢、彈性小，到受精第16 d全部死亡，卵徑受精前后變化不大。

3.3硬頭鱒卵裂期

由于硬頭鱒卵壁較厚，在受精過程中未采取相關(guān)措施，在顯微鏡下沒有觀察到卵裂各細胞期，有待于今后進一步研究進行觀察。

a.未受精卵 b.受精卵 c.囊胚期 d.眼囊形成期 e.脊索形成 f.發(fā)眼期

g.胚胎完全包裹卵黃囊 h.頭尾相接 i.出膜前期 j.吻部明顯 k.呼吸系統(tǒng)明顯 l.完全破膜

圖1硬頭鱒胚胎發(fā)育照片

參考文獻：

[1]

陶洋洲.硬頭鱒孵化試驗[J].科學養(yǎng)魚，1998（7）：32

[2] 劉澧津.硬頭鱒苗種養(yǎng)殖試驗[J].河北漁業(yè)，2002（2）：48-49

[3] 陳術(shù)強，張玉勇，賈智英，等. 虹鱒（♀）×山女鱒（♂）雜交種胚胎及仔魚發(fā)育的研究[J].上海海洋大學學報，2010，19（6）：756-762

[4] 黃金善，范兆廷，賈忠賀，等. 沉性大卵徑魚卵的觀察方法與虹鱒的胚胎發(fā)育[J].經(jīng)濟動物學報，2005，9（4）：235-238

（收稿日期：2014-09-02；修回日期：2014-09-10）