蛋白芯片技術(shù)檢測多種腫瘤標志物對消化道惡性腫瘤的診斷價值分析

杜金郎（內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院，呼和浩特 010050）

消化道腫瘤是臨床常見惡性疾病之一，因其病理發(fā)展過程較為復(fù)雜，在臨床診斷和預(yù)后判斷方面存在一定的困難。腫瘤標志物檢測是診斷消化道惡性腫瘤的重要參考依據(jù)，對于消化道腫瘤的診治和預(yù)后判斷具有重大意義［1－2］。然而，單一標志物檢測的診斷靈敏度低、特異性不強［3］?；瘜W(xué)發(fā)光法、酶聯(lián)免疫吸附法等是用于血清腫瘤標志物水平檢測的常用方法，但易受儀器、試劑和人為操作等因素影響，導(dǎo)致其在檢測靈敏度和特異度方面存在一定的缺陷，不能完全滿足臨床的需求。近年來，隨著生物科學(xué)技術(shù)的飛速發(fā)展，蛋白芯片技術(shù)的出現(xiàn)有效彌補了上述檢測方法的不足［4－5］。蛋白芯片技術(shù)具有高靈敏度和高特異性等特點，且較易實現(xiàn)微型化。相關(guān)研究表明，蛋白芯片檢測技術(shù)在多種疾病的診斷中具有一定的作用［5－7］。本研究對132例消化道惡性腫瘤患者和64例消化道良性疾病患者血清中的12種常用腫瘤標志物進行了蛋白芯片聯(lián)合檢測，旨在探討蛋白芯片對消化道惡性腫瘤的診斷價值和臨床意義。

1 資料與方法

1．1 一般資料 2012年1月至2013年1月于本院住院治療的132例消化道惡性腫瘤患者（惡性腫瘤組）和64例消化道良性疾病患者（良性疾病組）。同期于本院體檢健康者60例納入健康對照組。132例消化道惡性腫瘤患者中，男72例、女60例，年齡29～79歲，平均（55．6±11．4）歲，均經(jīng)病理學(xué)檢查證實，包括胃癌52例、食管癌45例、結(jié)腸癌35例。64例消化道良性疾病患者中，男40例、女24例，年齡23～72歲，平均（46．6±15．3）歲，包括消化性潰瘍28例、慢性胃炎16例、食管炎12例、食管平滑肌瘤4例、潰瘍性結(jié)腸炎4例。60例體檢健康者中，男40例、女20例，年齡22～81歲，平均（45．3±13．2）歲。

1．2 方法 患者入院后24h內(nèi)、體檢者于體檢當(dāng)日，以普通真空促凝管采集空腹靜脈血2mL，常規(guī)方法離心后分離血清標本進行癌胚抗原（CEA）、糖類抗原199（CA199）、糖類抗原242（CA242）、甲胎蛋白（AFP）、糖類抗原153（CA153）、糖類抗原125（CA125）、鐵蛋白、β－人絨毛膜促性腺激素（β－HCG）、游離型前列腺特異性抗原（f－PSA）、前列腺特異性抗原（PSA）、人生長激素（HGH）和神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）等12種腫瘤標志物聯(lián)合檢測。上述指標的檢測均采用蛋白芯片技術(shù)。HD－2001A生物芯片檢測儀及配套的多腫瘤標志物定量檢測試劑盒（蛋白芯片－化學(xué)發(fā)光法）購自湖州數(shù)康生物科技有限公司。采用蛋白芯片技術(shù)進行多指標聯(lián)合檢測時，任一指標檢測結(jié)果為陽性，即判為蛋白芯片檢測陽性。

1．3 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS19．0軟件進行數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計學(xué)分析。計數(shù)資料以百分率表示，組間比較差異顯著性檢驗采用卡方檢驗；P＜0．05為比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2．1 各研究組蛋白芯片檢測陽性率比較 各研究組蛋白芯片檢測陽性率比較見表1。惡性腫瘤組陽性率為76．53%，明顯高于良性疾病組的21．88%和健康對照組的8．33%（χ2值分別為46．56和198．23，P值均小于0．05）。根據(jù)特異度的計算公式：特異度＝真陽性例數(shù)／（真陰性例數(shù)＋假陽性例數(shù)）×100%，計算獲得蛋白芯片檢測結(jié)果對消化道惡性腫瘤的診斷特異度為88．5%。

表1 各組蛋白芯片檢測陽性率比較

2．2 不同腫瘤標志物在各研究組中的陽性率比較 12種腫瘤標志物在各研究組的陽性率比較見表2。惡性腫瘤組中，CEA、CA199、CA242、CA153、CA125和鐵蛋白的陽性率分別為33．33%、40．15%、31．82%、15．15%、33．33%和25．00%，明顯高于各腫瘤標志物在健康對照組和良性疾病組的陽性率（P＜0．05）。其余6項腫瘤標志物在各研究組的陽性率均較低，各組間陽性率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0．05）。就具體疾病而言，胃癌患者陽性率由高到低前三位的腫瘤標志物分別為CA199（40．15%）、CEA（25．00%）和 CA242（25．00%）；在食管癌患者中分別為 CA199（40．15%）、CEA（33．33%）和CA125（31．82%）；在直腸癌患者中分別為 CEA（41．18%）、CA242（39．22%）和 CA199（30．61%）。在惡性腫瘤組，12種腫瘤標志物聯(lián)合檢測的陽性率明顯高于任意單一標志物檢測的陽性率（P＜0．05）。

表2 各研究組12種腫瘤標志物陽性率比較（%）

3 討 論

消化道惡性腫瘤是嚴重威脅人體健康的高發(fā)性惡性疾病之一。相關(guān)研究表明，在全世界范圍內(nèi)，惡性腫瘤的發(fā)病率約為181．0／10萬，男性約為211．0／10萬，女性約為152．4／10萬，其中胃癌、食管癌、結(jié)腸癌的發(fā)病率分別排在第2位、第5位和第6位；2008年，中國惡性腫瘤患者中，胃癌、食管癌、結(jié)腸癌患者分別占16．5%、9．2%和7．9%［8－10］。由此可見，消化道惡性腫瘤的診治已是醫(yī)學(xué)研究者不可忽視的重大課題之一。對惡性腫瘤而言，早期診斷和治療具有重要的臨床和預(yù)防意義。通常情況下，不同類型的腫瘤可能會有一種或多種相同的腫瘤標志物出現(xiàn)異常，而同一腫瘤標志物的異常也可能會出現(xiàn)在不同類型的腫瘤中。因此，單一種類的血清腫瘤標志物檢測有可能因為靈敏度較低而出現(xiàn)假陰性結(jié)果。然而，多腫瘤標志物聯(lián)合檢測能夠提高對疾病的診斷靈敏度。

生物芯片最初是一種用于DNA測序和多態(tài)性分析的簡單、快速的方法［11］。蛋白芯片作為一種生物芯片，是在基因芯片載體上布滿高密度的不同種類的蛋白質(zhì)，采用熒光染料標記的已知抗體與標本中的靶蛋白競爭結(jié)合包被蛋白質(zhì)的原理，最終由計算機讀取和分析結(jié)果［12］。本研究采用的 HD－2001A生物芯片檢測技術(shù)可以同時對血清中的CEA、CA199、CA242、AFP、CA153、CA125、鐵 蛋 白、β－HCG、f－PSA、PSA、HGH 和NSE等12種腫瘤標志物進行聯(lián)合檢測。本研究結(jié)果顯示，惡性腫瘤組各腫瘤標志物聯(lián)合檢測陽性率為76．53%，明顯高于良性疾病組的21．88%和健康對照組的8．33%（P＜0．05），且各腫瘤標志物聯(lián)合檢測對消化道惡性腫瘤的診斷特異度達到了88．5%；胃癌患者中，檢測陽性率較高的腫瘤標志物為CA199、CEA和CA242；食管癌患者中，檢測陽性率較高的為CA199、CEA和CA125；直腸癌患者中，檢測陽性率較高的為CEA、CA242和CA199。然而，良性疾病組和健康對照組的檢測陽性率分別達到了21．88%和8．33%，說明蛋白芯片檢測存在一定程度的假陽性結(jié)果，表明蛋白芯片多腫瘤標志物聯(lián)合檢測技術(shù)尚需進一步改進，從而不斷提高其診斷價值。對于消化道惡性腫瘤而言，部分腫瘤標志物無診斷價值，如HGH等，部分腫瘤標志物的假陽性率較高，如鐵蛋白等，可以從蛋白芯片中剔除，并補充具有更高診斷特異度和靈敏度的其他腫瘤標志物［13－15］。

綜上所述，蛋白芯片聯(lián)合檢測技術(shù)用于消化道惡性腫瘤的早期診斷和預(yù)后評估，具有重要意義。

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