亞熱帶土壤氮素反硝化氣態(tài)產(chǎn)物研究

續(xù)勇波，蔡祖聰

1.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)煙草學(xué)院，云南 昆明 650201；2.南京師范大學(xué)地理科學(xué)學(xué)院，江蘇 南京 210097

反硝化是指將硝態(tài)氮或亞硝態(tài)氮還原成一氧化氮（NO）、一氧化二氮（N2O）和氮?dú)猓∟2）的過(guò)程，是氮循環(huán)中重要的轉(zhuǎn)化過(guò)程和環(huán)節(jié)。反硝化作用的環(huán)境效應(yīng)取決于其所產(chǎn)生的終產(chǎn)物，以及不同產(chǎn)物間的比例。通常認(rèn)為反硝化作用的主要終產(chǎn)物是N2O和N2，NO并不是土壤或水體中反硝化作用的主要終產(chǎn)物。但這是基于溫帶恒電荷土壤的研究結(jié)果(Hofstra和Bouwman, 2005)。關(guān)于熱帶亞熱帶土壤反硝化過(guò)程中NO排放的研究甚少(Maljanen等, 2007)，因此，影響熱帶亞熱帶地區(qū)土壤反硝化產(chǎn)物的主要因素和機(jī)理尚不十分清楚。

熱帶亞熱帶土壤為可變電荷土壤，土壤的化學(xué)性質(zhì)與溫帶地區(qū)恒電荷土壤有諸多不同特點(diǎn)(徐仁扣等, 2014)，如土壤高度風(fēng)化、鐵鋁氧化物含量顯著高于溫帶地區(qū)土壤(Qafoku等，2004；Zhang等，2009)，土壤氧化還原勢(shì)較高(丁昌璞，2008)，酸性較強(qiáng)(Xu和Cai，2007)，為繼承性肥力較低的氧化土（Oxisols）和老成土（Ultisols）。越來(lái)越多的證據(jù)表明熱帶亞熱帶土壤反硝化具有一些與溫帶土壤不同的特征（Zhang等，2009 ;Xu和 Cai，2007; Zhang等，2010），然而還需要進(jìn)一步深入研究造成熱帶亞熱帶土壤和溫帶土壤反硝化特性不同的原因和機(jī)理，這將有助于加深對(duì)熱帶亞熱帶環(huán)境條件下土壤 N循環(huán)的理解和認(rèn)識(shí)。

在前期的研究工作中，我們對(duì)采集自亞熱帶不同成土母質(zhì)和利用方式的45個(gè)土壤樣本，在密閉淹水厭氧培養(yǎng)試驗(yàn)條件下，研究了亞熱帶土壤反硝化特性、影響因素和機(jī)理等（Xu和Cai，2007;Xu等，2012)，發(fā)現(xiàn)隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)，排放到培養(yǎng)瓶上部空間的 N2O濃度逐漸上升，在第3～8天達(dá)到高峰，之后由于N2O被土壤進(jìn)一步還原成為N2而逐漸降低(Xu等，2012)。那么在達(dá)到N2O濃度高峰之前是否存在N2O產(chǎn)生的前提物質(zhì)——NO的大量產(chǎn)生？為此，我們進(jìn)行了穩(wěn)定性同位素15N示蹤試驗(yàn)，用K15NO3替代前述試驗(yàn)中的普通 KNO3，研究厭氧培養(yǎng) 1周內(nèi)反硝化過(guò)程中的產(chǎn)物問(wèn)題。

表1 供試土樣理化性質(zhì)Table 1 Selected physico-chemical properties of the tested soils

1 材料和方法

1.1 供試土樣和試驗(yàn)方法

供試土樣采自具有典型亞熱帶季風(fēng)濕潤(rùn)性氣候 特 點(diǎn) 的 江 西 省 （ 24°29'～30°04'N,113°34'～118°28'E）。由于受東南季風(fēng)氣候的影響，本區(qū)氣候高溫多雨，干濕季季節(jié)明顯。根據(jù)近 30年氣象統(tǒng)計(jì)資料，其年平均降雨量為1785 mm，其中50%集中于4—6月，年平均溫度為18.4 ℃，最高月平均溫29.9 ℃出現(xiàn)于7月，無(wú)霜期為261 d，≥10 ℃的積溫為 5000～9500 ℃。土壤類型為低活性強(qiáng)酸土(Acrisols)和鐵鋁土(Ferralsols)（FAO，2001）。供試土樣選擇包括由3種成土母質(zhì)(即第四紀(jì)紅土(Q)、第三紀(jì)紅砂巖(S)和花崗巖(G))和5種利用方式（即林地(F)、灌叢(B)、茶園(T)、旱地(U)和稻田(R)）組成的6個(gè)土壤類型組合，即SR、QR、QU、QB、GT、GF，采集0～20 cm新鮮土樣，風(fēng)干1～3 d，以能通過(guò)2 mm篩為宜，置于4 ℃保存?zhèn)溆貌⒘⒓撮_始試驗(yàn)。供試土壤理化性質(zhì)見(jiàn)表1。

試驗(yàn)方法參照文獻(xiàn)（Xu和Cai，2007；Xu等，2012），為了測(cè)定同位素15N豐度，采用K15NO3替代普通 KNO3，試驗(yàn)步驟和測(cè)試方法稍作改動(dòng)，具體為稱取相當(dāng)于 30 g烘干土質(zhì)量的上述新鮮土裝入250 mL三角瓶中，加蒸餾水30mL，蓋上橡膠塞，于30 ℃下淹水預(yù)培養(yǎng)7 d，以便激活土壤微生物。同時(shí)測(cè)定培養(yǎng)瓶有效空間體積和土壤全氮、NH4+-N,NO3--N的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，作為土壤背景值。預(yù)培養(yǎng)結(jié)束時(shí)，隨機(jī)選取3瓶測(cè)定土壤全氮、NH4+-N、NO3--N的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，記做起始質(zhì)量分?jǐn)?shù)。

將三角瓶用帶采氣孔的特殊硅橡膠塞(硅橡膠塞中間打一小孔，內(nèi)插玻璃管，管外套一段細(xì)硅橡膠管，其口用硅橡膠塞封口)蓋緊，并在瓶塞周圍涂抹704膠密封以防漏氣。從取樣口將三角瓶?jī)?nèi)抽成真空，通人氮?dú)猓俪槌烧婵?，如此反?fù)3次，最后通入1個(gè)大氣壓的高純氮。用注射器加入5 mL(含6 mg NO3--N)硝酸鉀溶液(K15NO3, 10 atom%15N)(相當(dāng)于200 mg·kg-1)，并用5 mL蒸餾水清洗1次，充分混合。最后將取樣口用704膠密封以保證厭氧培養(yǎng)環(huán)境，所有三角瓶置于 30 ℃下恒溫淹水厭氧培養(yǎng)。

分別在厭氧培養(yǎng)開始后的1、3、7 d采集20 mL氣樣3份，分別注入18 mL已抽成真空的貯氣瓶中，第1瓶供測(cè)定N2O體積分?jǐn)?shù)，第2瓶供測(cè)定15N2豐度，第3瓶供測(cè)定15N2O豐度用，抽取氣樣前用注射器反復(fù)抽提瓶?jī)?nèi)氣體3次以混勻氣體。取完氣樣后按V(液)∶m(土)=4∶1 加入 3 mol·L-1KCl 80 mL(已加水量考慮在內(nèi)，使最終濃度為2 mol·L-1，總體積為 120 mL)，于 25 ℃、250 r·min-1下震蕩 1 h，離心，定量濾紙過(guò)濾，收集濾液于塑料瓶中。

吸取一定體積的濾液于蒸餾裝置中，加入0.2 g氧化鎂蒸餾，以硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，測(cè)定餾出液中NH4+-N的質(zhì)量分?jǐn)?shù)；再加代氏合金蒸餾，轉(zhuǎn)化成銨鹽后, 硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，測(cè)定(NO3-+NO2-)-N總量。在測(cè)定完硝態(tài)氮和氨態(tài)氮質(zhì)量分?jǐn)?shù)的溶液中分別加入6滴硫酸溶液(3 mol·L-1)酸化，于80 ℃烘箱中濃縮至干，用同位素質(zhì)譜儀分析豐度。

離心管中的土壤轉(zhuǎn)移到鋁盒中，放入 45 ℃烘箱中烘干，磨細(xì)過(guò)100目篩，稱取適量土樣于消煮管中，按土壤全氮開氏消煮法進(jìn)行消煮、蒸餾、硫酸滴定，測(cè)定完全氮質(zhì)量分?jǐn)?shù)后，滴定過(guò)的餾出液同上述方法酸化，放入 80 ℃烘箱中濃縮至干，用同位素質(zhì)譜儀分析土壤全氮中的15N豐度。同時(shí)測(cè)定土壤含水量。

1.2 計(jì)算公式

N2O氣體體積分?jǐn)?shù)用裝有63Ni電子捕獲器(ECD)的氣相色譜儀 (Shimadzu GC-14B, 日本)測(cè)定。色譜柱為80/100目的Porapak Q填充柱，進(jìn)樣口、檢測(cè)器以及填充柱的溫度分別為100 ℃、300 ℃和65 ℃。載氣為95%氬氣+5%甲烷，流速為40 mL·min-1。標(biāo)準(zhǔn)氣為日本國(guó)立農(nóng)業(yè)環(huán)境研究所提供。溶解到水中的N2O體積分?jǐn)?shù)經(jīng)Bunsen常數(shù)校正(Tiedje, 1982)。

N2O累積排放量計(jì)算公式

式中：MN為N2O的累積排放量，以N2O-N計(jì)算，單位：mg·kg-1。ρ為標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài)下N2O-N的密度，為1.25 kg·m-3；C為N2O氣體體積分?jǐn)?shù)，為×10-6；Vg是培養(yǎng)瓶上部有效空間體積，單位是m3；Vl為液體體積，單位是m3；α為Bunsen校正系數(shù)，30 ℃時(shí)為0.472；W為培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的烘干土質(zhì)量，單位是kg；t為測(cè)定氣體時(shí)的溫度(℃)。

N2體積分?jǐn)?shù)由于試驗(yàn)條件所限無(wú)法直接測(cè)定，通過(guò)下列公式計(jì)算得到。溶解到水中的 N2體積分?jǐn)?shù)經(jīng)Bunsen系數(shù)校正(Tiedje, 1982)。

在已知有效空間體積、加入的水體積、土樣質(zhì)量，且充滿純氮?dú)獾呐囵B(yǎng)瓶中，N2累積排放量（mg·kg-1）可按下式計(jì)算：

式中：C為N2累積排放量，單位為mg·kg-1；1.13為30 ℃時(shí)的N2密度，單位為kg·m-3；Vg為培養(yǎng)瓶有效空間體積，單位為 m3；Vl為加入的水體積，單位為m3；a為Bunsen校正系數(shù)，30 ℃時(shí)為0.0136；W為土樣質(zhì)量，單位為kg。

其中：C’為15N2累積排放量，單位為mg·kg-1，C為公式（2）計(jì)算得到的培養(yǎng)瓶中N2累積排放量，單位為mg·kg-1；A為測(cè)定得到的15N2豐度，單位為atom%。

本文中氣態(tài)氮產(chǎn)物的損失率是指占施入15N總量的體積分?jǐn)?shù)（%），總氣態(tài)氮損失率的實(shí)測(cè)值是指測(cè)定和計(jì)算得到的N2O與N2損失率的總和；總氣態(tài)氮損失率的估計(jì)值為差減法計(jì)算得到，即總加入15N量減去土壤全氮、銨態(tài)氮和硝態(tài)氮中的15N的差值。

2 結(jié)果與分析

從表2中不同取樣時(shí)間觀測(cè)數(shù)據(jù)可以看出，隨培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)，土壤15NO3-質(zhì)量分?jǐn)?shù)、15N2O和15N2累積排放量有明顯變化，而土壤全氮(Total15N)和15NH4+質(zhì)量分?jǐn)?shù)變化不大，表明該體系中發(fā)生的主要氮素轉(zhuǎn)化過(guò)程是反硝化。

不同土樣第1天的回收率都在95%以上(表2)，表明測(cè)定方法和計(jì)算方法無(wú)誤，誤差在允許范圍內(nèi)。但隨著培養(yǎng)時(shí)間的推移，回收率逐漸下降，到第 7天回收率僅為 67.2%～93.3%，平均為(80.8±9.1)%。與之相對(duì)應(yīng)的是15NO3-質(zhì)量分?jǐn)?shù)由于反硝化作用而隨培養(yǎng)時(shí)間逐漸減少。土壤總殘留的15NO3-質(zhì)量分?jǐn)?shù)和回收率之間存在顯著正相關(guān)關(guān)系(圖1)，r2＝0.917(p<0.001)，表明反硝化勢(shì)越低的土樣回收率越高。

15N2O和15N2累積排放量隨培養(yǎng)時(shí)間推移而逐漸增加，總氣態(tài)氮損失率的估計(jì)值和實(shí)測(cè)值都隨培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)呈上升趨勢(shì)，兩者之間存在顯著正相關(guān)性(r2＝0.81，p<0.001)(圖2)?？倸鈶B(tài)氮損失率的估計(jì)值顯著高于實(shí)測(cè)值(p<0.01)，兩者之差高達(dá)6.7%～32.8%，平均為(18.6±9.0)%，即這部分氣態(tài)氮損失占施入15N總量的18.6%。而N2O、N2分別占總施入氮量的(4.4±2.3%)、(2.0±1.2)%。

表2 不同土樣不同培養(yǎng)時(shí)間的回收率和氣態(tài)氮損失Table 2 The recovery rate and the gaseous nitrogen loss for different soils at different sampling time

3 討論

在用標(biāo)準(zhǔn)(NH4++NO3-)-N溶液對(duì)測(cè)定NO3--N和NH4+-N質(zhì)量分?jǐn)?shù)的氧化鎂-代氏合金(MgO-Devarda)蒸餾法所做的方法檢驗(yàn)試驗(yàn)結(jié)果表明，回收率均在97%以上。開氏消煮法也是成熟的土壤全氮測(cè)定方法，因此，土壤中氮的測(cè)定誤差不是造成反硝化試驗(yàn)中總回收率低的主要原因。此外，氮化合物和N2的豐度測(cè)定方法以及 N2O體積分?jǐn)?shù)的測(cè)定方法也都是成熟技術(shù)，N2累積排放量計(jì)算方法在理論上也是正確的。

盡管厭氧條件下加入的 NO3--N有可能通過(guò)非生物固定作用轉(zhuǎn)化成可溶性有機(jī)氮（DON），這一N轉(zhuǎn)化途徑在溫帶森林土壤中是氮循環(huán)的重要組成環(huán)節(jié)，但在氧化還原勢(shì)（Eh）較高的熱帶亞熱帶土壤中并非如此(Zhang等，2010)。因此在本試驗(yàn)條件下這一轉(zhuǎn)化過(guò)程可忽略不計(jì)。

(N2+N2O)-15N實(shí)測(cè)值低于總氣態(tài)氮損失的估計(jì)值，原因之一可能是由于對(duì)N2O和N2的不完全回收。盡管計(jì)算N2O和N2產(chǎn)生量已包括了溶解在水中的N2O和N2量(Tiedje, 1982)，本實(shí)驗(yàn)按文獻(xiàn)中的溶解系數(shù)計(jì)算得到的水中溶解的15N2O和15N2量分別占施入15N總量最高不到0.5%和0.01%，這雖然與 Buresh和 Austin(1988)提出的水中溶解的15N2O量占施入15N總量不到1%的結(jié)果相似，但有可能低估了N2O和N2產(chǎn)生量，因?yàn)橥寥篮屯寥廊芤壕杀籒2O和N2所飽和，其可溶解量可高達(dá)周圍空氣濃度的46倍(Kaplan等，1978)。此外，土壤也可吸附N2-15N和N2O-15N，據(jù)Lindau等（1988）報(bào)道，淹水土壤中加入15N尿素后的33 d中28%被土壤以N2-15N的形態(tài)截留，在無(wú)淋洗、徑流損失的情況下直接測(cè)定得到的(N2+N2O)-15N回收率在41%～73%。而Chen等（1998）認(rèn)為施入15NO3-5 d后90%的氣態(tài)氮產(chǎn)物被土壤吸附和截留。因此，按文獻(xiàn)中的溶解系數(shù)計(jì)算得到的水中溶解的 N2O和N2的量可能低估了溶解到水中的N2O和N2的量，也意味著忽視了被土壤吸附和截留的N2O和N2數(shù)量，從而導(dǎo)致計(jì)算的N2O和N2產(chǎn)生量有可能低估了實(shí)際N2O和N2排放量。

由于本試驗(yàn)條件的限制，NO累積排放量無(wú)法直接測(cè)定，但從本實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算，這部分氣態(tài)氮損失可能占到了總氣態(tài)氮損失的67.5%～78.6%，平均為(74.1±4.2)%；占施入15N總量的(18.6±9.0)%。NO濃度有可能對(duì)反硝化氣態(tài)產(chǎn)物的貢獻(xiàn)達(dá)到顯著水平，因此有必要對(duì)熱帶亞熱帶土壤反硝化產(chǎn)物 NO進(jìn)行深入研究。

濕潤(rùn)型熱帶亞熱帶土壤自養(yǎng)硝化作用和反硝化作用較溫帶地區(qū)低（Zhang等，2010a, 2009b；Xu和Cai，2007；Zhao等，2007）。有研究表明，在氣候因素、土壤特性、較快的氮循環(huán)速率等綜合作用下，熱帶亞熱帶森林土壤氣態(tài)氮氧化物損失較溫帶森林土壤高，且是全球最大的N2O和NO自然排放源（Davidson和 Kingerlee, 1997; Stehfest和Bouwman, 2006)。厭氧培養(yǎng)條件下，濕潤(rùn)熱帶亞熱帶地區(qū)森林土壤反硝化過(guò)程中產(chǎn)生的NO占總氣態(tài)氮產(chǎn)物的比率和 N2O占總氣態(tài)氮產(chǎn)物的比率通常顯著高于溫帶森林土壤（Zhang等，2009；Parsons等，1993），Zhang等認(rèn)為這和熱帶亞熱帶土壤氧化物含量顯著高于溫帶地區(qū)土壤（丁昌璞，2008）、較高的氧化還原勢(shì)抑制了土壤反硝化的進(jìn)行，從而使得 NO和 N2O占總氣態(tài)氮產(chǎn)物的比率增加有關(guān)（Zhang等，2009），進(jìn)一步證實(shí)本試驗(yàn)供試亞熱帶土壤NO可能是反硝化的主要產(chǎn)物之一。

本試驗(yàn)中添加的 NO3--N質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 200 mg·kg-1，NO3-濃度也是影響反硝化產(chǎn)物的因素之一。通常認(rèn)為高濃度的 NO3-或 NO2-會(huì)抑制 NO還原為N2O，即抑制N2O的產(chǎn)生，使NO排放量增加。如Luo等（1996）認(rèn)為NO3--N質(zhì)量分?jǐn)?shù)>100 mg·kg-1會(huì)抑制N2O的產(chǎn)生。而有的學(xué)者認(rèn)為NO3--N質(zhì)量分?jǐn)?shù)范圍在 10～30 mg·kg-1即足以抑制上述過(guò)程（Cho和Mills，1979）。通常在施肥后農(nóng)田土壤NO3-濃度可達(dá)這一標(biāo)準(zhǔn)。由于電子競(jìng)爭(zhēng)作用，高濃度的NO3-不僅抑制N2O還原酶的合成和活性，而且也能抑制NO還原酶和NO2-還原酶（Gaskell等，1981）。反硝化還原酶的合成存在依次滯后的現(xiàn)象，即酶合成的先后順序是NO3-還原酶、NO2-還原酶、NO還原酶和 N2O還原酶，而且當(dāng) NO3-濃度越高，合成滯后的時(shí)間越長(zhǎng)，因此有NO、N2O的暫時(shí)積累，且NO、N2O的排放先于N2的排放（Holtan-Hartwig等，2000）。

反硝化菌的生長(zhǎng)和酶的合成在含有豐富氧化物且氧化還原勢(shì)較高的濕潤(rùn)型熱帶亞熱帶土壤上也可能會(huì)受到抑制（Zhang等，2009）。我們的研究結(jié)果也證實(shí)濕潤(rùn)型亞熱帶土壤反硝化菌豐富度較低（Xu和 Cai，2007）。然而關(guān)于土壤氧化物如何直接影響反硝化微生物的生長(zhǎng)、酶合成和活性有待于進(jìn)一步研究。另外，濕潤(rùn)熱帶亞熱帶土壤pH值較低，遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于大多數(shù)反硝化菌生長(zhǎng)和活性發(fā)揮的適宜pH值6～8范圍（Aulakh等，1992）。

已有大量證據(jù)表明 NO也可由化學(xué)反硝化產(chǎn)生，即厭氧條件下 Fe2＋和 NO3-或 NO2-發(fā)生化學(xué)反硝化產(chǎn)生Fe3＋和NO（Philips等，2003）。我國(guó)亞熱帶土壤中含有豐富的鐵氧化物（徐仁扣等，2014；Qafoku等，2004），其活性較高的部分為Fe參與反硝化創(chuàng)造了物質(zhì)基礎(chǔ)，我們的試驗(yàn)結(jié)果也證實(shí)了酸性亞熱帶土壤Fe2＋參與了NO3-反硝化過(guò)程（Xu和Cai，2007；Xu 等，2013）。

以上這些因素的綜合作用可能導(dǎo)致反硝化過(guò)程中N2O和N2排放量較低，而NO是反硝化的主要產(chǎn)物之一。這也可能是造成反硝化回收率低的原因之一。但是造成熱帶亞熱帶地區(qū)土壤和溫帶地區(qū)土壤反硝化氣態(tài)產(chǎn)物及不同產(chǎn)物間比例差異的因素和機(jī)理尚需進(jìn)一步研究。

從我們以往的研究結(jié)果可知，亞熱帶土壤N2O產(chǎn)生速率較其被進(jìn)一步還原的速率高（Xu等，2012），因此，我們有理由推測(cè)反硝化在厭氧培養(yǎng)開始的頭幾天時(shí)間里，相對(duì)于N2O還原潛勢(shì)較弱、N2O產(chǎn)生潛勢(shì)較大，N2O排放占主導(dǎo)地位的情況下，作為N2O生成前提物質(zhì)的NO有可能大量累積。如果不能回收的那部分都以NO形式排放，本實(shí)驗(yàn)中NO損失平均占總氣態(tài)氮損失的(74.1±4.2)%，而以N2O和 N2形態(tài)損失的氮素只分別占總氣態(tài)氮損失的(17.1±2.1)%、(8.7±4.8)%。NO在大氣中的活性很強(qiáng)，是形成酸雨和光化學(xué)煙霧的前提物質(zhì)（Hou等，2000），其環(huán)境危害不容低估。

此外，反硝化氣態(tài)產(chǎn)物中NO和N2O總量占總氣態(tài)氮損失的91.3%，意味著在亞熱帶土壤氮素反硝化中NO可能是反硝化的主要終產(chǎn)物，而非對(duì)環(huán)境無(wú)害的N2，因此在亞熱帶土壤反硝化研究中使用乙炔抑制方法可能意義不大。這一推理可從王連峰（2003）以亞熱帶紅壤為材料所做的反硝化試驗(yàn)結(jié)果中得到部分支持，即經(jīng)淹水或濕潤(rùn)(40%WHC)處理110 d的旱地紅砂土在100%WHC水分條件下培育5 d，乙炔的加入與否對(duì)土壤N2O累積排放量未造成顯著影響。

4 結(jié)論

1）亞熱帶土壤反硝化培養(yǎng)過(guò)程中隨培養(yǎng)時(shí)間推移，15N回收率逐漸下降，土樣反硝化作用強(qiáng)弱與回收率呈顯著負(fù)相關(guān)。

2）總氣態(tài)氮損失率的估計(jì)值和實(shí)測(cè)值都隨培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)呈上升趨勢(shì)，兩者之間存在顯著正相關(guān)性。

3）根據(jù)15N示蹤試驗(yàn)結(jié)果估計(jì)，厭氧培養(yǎng) 7天內(nèi)反硝化作用產(chǎn)生的氣態(tài)產(chǎn)物中NO、N2O和N2分別占總氣態(tài)氮損失的74.1%、17.1%和8.7%。

4）反硝化作用產(chǎn)生的氣態(tài)產(chǎn)物中NO、N2O和N2分別占總施入氮量的18.6%、4.4%和2.0%。

5）亞熱帶土壤氮素反硝化過(guò)程中 N2O和 N2排放量較低，而NO是反硝化的主要?dú)怏w產(chǎn)物之一，其環(huán)境危害不容低估。

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