茶多酚的測定及飼用效果研究進展

張哲　付柯　楊敏

摘要：茶多酚具有多種生理功效，作為飼料添加劑能夠有效的增強禽畜的免疫力，提高動物生產(chǎn)性能，還能達到不同程度的除臭作用，改善飼養(yǎng)環(huán)境。本文簡要介紹了幾種主要的茶多酚測定方法，重點綜述了其飼用效果，對飼用中存在的問題進行探討。

關(guān)鍵字：茶多酚；測定；飼用效果；

前言

畜牧業(yè)的長足發(fā)展需要飼料工業(yè)作堅強后盾，天然綠色飼料添加劑能夠有效保障飼料的營養(yǎng)價值及飼用安全性能。茶多酚具有多種生理功效，作為飼料添加劑飼養(yǎng)效果較好，能有效清除動物體內(nèi)的自由基、改善腸道微生物結(jié)構(gòu)進而促進消化，抑制和殺滅病原微生物，提高動物的生產(chǎn)性能，延長飼料的保質(zhì)期，同時還能增強動物的免疫力。本文對茶多酚的測定方法及飼用效果進行綜述，展望了其在飼料工業(yè)中的應(yīng)用前景，旨在為茶多酚在飼料工業(yè)的長遠發(fā)展提供參考。

1 茶多酚的測定方法

茶多酚含量的高低直接影響飼用效果，其含量的測定也能適時的反應(yīng)飼料品質(zhì)，因此建立高效、快捷的茶多酚含量檢測方法尤為重要。目前茶多酚檢測方法應(yīng)用最多且測定結(jié)果較好的屬紫外分光光度法、高效液相色譜法和電化學分析法。

1.1 紫外分光光度法

紫外分光光度法以朗伯-比爾定律為基礎(chǔ)，被測物質(zhì)經(jīng)過紫外輻射后分子中價電子能級躍遷，在特定波長處或一定波長范圍內(nèi)能對紫外光進行吸收，根據(jù)吸光度與被測物質(zhì)濃度之間的線性關(guān)系進行定量分析。

茶多酚在進行紫外分光光度法測定之前要進行顯色反應(yīng)，多用酒石酸亞鐵比色法和福林酚比色法。茶多酚結(jié)構(gòu)中的酚羥基與二甲鐵離子反應(yīng)生成藍紫色絡(luò)合物，在540nm處測定吸光度再計算含量，但研究發(fā)現(xiàn)酒石酸亞鐵顯色測定茶多酚含量一般比福林酚顯色高出百分之三十左右，究其原因，茶多酚中的多種酚類化合物對測定結(jié)果有一定的干擾，因此適用于成分單一的茶多酚的檢測。福林酚法主要利用福林酚的強氧化性，與茶多酚反應(yīng)變藍，在765nm處進行檢測，福林酚一般還用于蛋白質(zhì)的檢測中，用福林酚法顯色，并不能真正的區(qū)分飼料中的茶多酚和蛋白質(zhì)，因此檢測時首先要除蛋白。紫外分光光度法由于高效快捷、重現(xiàn)性好等優(yōu)點成為茶多酚的常用檢測方法，用于飼料中茶多酚的檢測應(yīng)采用福林酚法顯色，可信度高。

1.2 高效液相色譜法

混合物流經(jīng)固相時發(fā)生力的作用，各物質(zhì)在結(jié)構(gòu)及性質(zhì)上的不同和與固相發(fā)生作用大小有所差異，高效液相色譜法正是借助于這種推動力使不同組分進行分離并測定。高效液相色譜法（HPLC）選擇性高并且可以排除茶多酚顯色時帶入體系中的雜質(zhì)對測定結(jié)果的影響，得到茶多酚的絕對含量，精確度高，用于飼料中茶多酚含量測定效果好。

高效液相色譜法測定茶多酚，在色譜柱為Kromasil C18、流動相為乙酸：甲醇：N，N-二基甲酰胺：水=1：1：40：58（V/V） 、色譜柱溫30℃、進樣量10μL、檢測器為紫外檢測器、檢測波長280.0nm 的色譜條件下對綠茶中茶多酚含量進行測定，變異系數(shù)小于3.04%，回收率為 99.16%～100.60%，測定方法簡便、準確。

1.3 電化學分析法

電化學分析法是根據(jù)溶液中物質(zhì)的電化學性質(zhì)及其變化規(guī)律，建立在以電位、電導、電流和電量等電參數(shù)與被測物質(zhì)濃度間存在一定關(guān)系的基礎(chǔ)之上，對組分進行定性定量的儀器分析方法。電化學分析方法，主要有毛細管電泳測定法和示波電位法，毛細管電泳測定法是指溶質(zhì)以電場為推動力，在毛細管中按淌度差異而實現(xiàn)組分的分離及測定。電化學分析法測定茶多酚最大的優(yōu)勢就是檢測設(shè)備成本低，用于飼料行業(yè)可行性好。

電化學分析法操作簡單，分離效率高，速度快，用于多酚的分離檢測發(fā)展較快，近年來相關(guān)報道不斷增多。鄭阿萍等研究了磷鉬酸在緩沖溶液中的電化學行為以及對茶多酚的電催化活性，檢測結(jié)果表明磷鉬酸對溶液中茶多酚的氧化反應(yīng)具有良好的催化活性，此法測定茶多酚快速、簡便、準確，為茶多酚的快速檢測提供了理論依據(jù)。朱丹以自制的玻碳工作電極在茶多酚的測定中進行應(yīng)用，結(jié)果表明茶多酚含量測定的重復性和準確性好，與國標福林酚法相比檢測時間大幅度縮短，其他并無顯著性差異。

2 茶多酚的飼用效果

2.1 提高生產(chǎn)性能

飼糧中添加茶多酚能夠一定程度地提高畜禽生產(chǎn)性能，改善畜產(chǎn)品品質(zhì)。飼糧中添加100-200mg/kg茶多酚，其能夠減少蛋黃中脂質(zhì)過氧化物的形成，降低雞蛋中的膽固醇和丙二醛含量，增加蛋黃中脂質(zhì)的穩(wěn)定性，有利于雞蛋的保鮮，延長了雞蛋的貨架期。茶多酚還能夠在一定程度上提高蛋重，100mg/kg為最佳添加量。

樓洪興等的飼養(yǎng)效果表明，日糧中添加不同劑量茶多酚對蛋雞產(chǎn)蛋率和飼料利用率有一定的改善，但未見隨茶多酚添加水平的升高而提高的趨勢。日糧中添加0.1%茶多酚可提高蛋黃中VE和VA含量，添加0.025%茶多酚降低蛋黃中膽固醇，茶多酚對全蛋中含硫氨基酸有增高趨勢，重金屬指標符合無公害雞蛋要求；產(chǎn)蛋后期日糧中添加0.025%～0.1%茶多酚可降低破軟蛋率。日糧中添加0.4%茶多酚分別降46周齡蛋雞血清總膽固醇19.65%、甘油三醑19.99%、低密度脂蛋白7.69%，提高高密度脂蛋白45.35%，對蛋雞血脂指標影響不顯著。

茶多酚具有清自由基抗氧化等作用，改善腸道微生物結(jié)構(gòu)進而促進消化，減少了動物機體內(nèi)多余脂肪的積累，提高肉質(zhì)，保證生物體內(nèi)細胞結(jié)構(gòu)和功能的完整性。以不同劑量的茶多酚復合添加劑加入動物日糧中，通過三個月的試驗觀察，監(jiān)測生長性能，全部屠殺測定肉質(zhì)特性，結(jié)果顯示0.1%的茶多酚添加量能顯著提高日增質(zhì)量，極顯著的提高豬肉pH值。0.3%的茶多酚添加量能極顯著提高日增質(zhì)量、豬肉pH值和失水率，劑量再增大，作用效果基本不變，所以實際喂養(yǎng)時應(yīng)以0.3%的劑量為參考標準。

2.2 改善肉質(zhì)

維生素E是肌細胞內(nèi)非酶促系統(tǒng)抗氧化劑，能抑制磷脂酶的活性，從而阻斷了脂質(zhì)過氧化。茶多酚與維生素E協(xié)同作用能增強抗氧化功效。蔡?，摰扔皿w重約28Kg左右的杜×長×大三元雜交肥育豬40頭，通過在日糧中添加不同濃度的茶多酚和維生素E，檢測100kg左右豬胴體眼肌肉樣的肉質(zhì)常規(guī)和生化指標，研究飼料中茶多酚對維生素E的增效作用以及茶多酚和維生素E改善豬肉質(zhì)的協(xié)同作用。結(jié)果表明：一定濃度的茶多酚能提高豬肉維生素E的含量；荼多酚和維生素E有穩(wěn)定豬肉色、提高豬肌肉系水力和抗氧化的協(xié)同作用，其中飼料200 mg/kg維生素E基礎(chǔ)上添加茶多酚300mg/kg效果最佳。

要全面考察茶多酚對豬肉質(zhì)的影響，要對不同生長階段及不同品質(zhì)的豬進行喂養(yǎng)試驗及肉質(zhì)測定。日糧中添加一定配比的茶多酚與肉質(zhì)改善劑對肥育豬飼料效率及肉質(zhì)有較明顯的改善作用。在斷奶仔豬日糧中使用，減輕了仔豬斷奶的不良應(yīng)激，保證仔豬較快生長，并能獲得較好的飼料轉(zhuǎn)化效率和飼養(yǎng)效率。在育肥豬日糧中添加1.0%的茶多酚復合添加劑明顯改善肉色，添加0.5%和1.0%的茶多酚復合添加劑對肌內(nèi)脂肪含量和嫩度均有改善作用。

李麗評估添加茶多酚對高酒糟（DDGS）日糧肉雞生產(chǎn)性能和抗氧化特性的影響，肉仔雞后期日糧中添加15%DDGS對生產(chǎn)性能無顯著影響，但降低了肉仔雞機體及肌肉的抗氧化（T-AOC）水平和谷胱甘肽過氧化物酶（GSH.Px）活性，在15%DDGS型肉雞日糧中添加300 mg/kg以上的TP可以抑制肉仔雞肌肉的脂質(zhì)過氧化。添加茶多酚提高了血液的T-AOC和GSH.Px活性，隨著茶多酚添加劑量的升高，T-AOC和GSH.Px有升高的趨勢，但各水平組之間差異不顯著。

2.3 提高免疫抵抗力

機體的抗氧化能力的強弱反應(yīng)了其抵抗力和健康狀況，抗氧化作用一般主要通過消除自由基和活性氧以免引發(fā)脂質(zhì)過氧化，分解過氧化氫，阻斷過氧化鏈，除去催化作用的金屬離子等途徑來實現(xiàn)。日糧中添加茶多酚能提高豬肌肉總抗氧化能力，其效果以添加以300～400mg/kg較好；在一定的濃度條件下，茶多酚有利于提高生長肥育豬的免疫機能，并對降低生長豬的腹瀉率有一定的作用。

茶多酚可以刺激淋巴細胞分裂后發(fā)生轉(zhuǎn)化，通常以其轉(zhuǎn)化率的高低來衡量淋巴細胞的功能狀態(tài)與機體的免疫狀況，還可以刺激淋巴細胞分泌細胞因子，從而增強機體的抵抗力。國外研究者在豬受到刀豆凝集素應(yīng)激時，將1%的茶多酚添加入豬日糧中，飼養(yǎng)結(jié)果顯示，脾臟細胞和IL-6水平增加。在受到脂多糖應(yīng)激時，脾臟細胞和抗腫瘤壞死因子水平相應(yīng)增加，豬的體液免疫功能增強。

李永義等采用Diquat誘導仔豬氧化應(yīng)激，考察茶多酚（TP）對應(yīng)激仔豬生長性能和免疫功能的影響。飼養(yǎng)對比結(jié)果表明，氧化應(yīng)激降低仔豬生長性能和免疫功能，添加TP能緩解應(yīng)激對仔豬生長性能和免疫功能的抑制。

茶多酚通過調(diào)節(jié)免疫球蛋白的量和活性，實現(xiàn)抑制或殺滅各種病原體，增強機體的免疫力作用。張建偉等建立大強度耐力訓練動物模型，測定小鼠腹腔巨噬細胞和淋巴細胞增殖能力、脾T淋巴細胞的CD3+、CD4+、CD8+細胞比率和血清SIgA、IgM和IgG。結(jié)果表明茶多酚組與運動組比較，小鼠腹腔巨噬細胞和淋巴細胞增殖能力顯著增強，脾T淋巴細胞的CD3+、CD4+、CD8+細胞比率顯著增加，血清SIgA、IgM和IgG含量顯著增加，證明茶多酚具有提高力竭小鼠免疫力的作用。

2.4 改善飼養(yǎng)環(huán)境

家禽糞便的清潔處理一直以來是養(yǎng)殖業(yè)的頭疼問題，茶多酚具有一定的殺菌作用，其結(jié)構(gòu)式上的酚羥基與菌體內(nèi)的二氫葉酸合成酶肽鍵上的氨基酸殘基作用，使二氫葉酸合成酶失活，從而影響細菌的核酸合成，使細菌的生長繁殖受到抑制，同時能促進有益菌群生長、調(diào)整腸道微生態(tài)環(huán)境，降低糞便臭味，從根源上解決禽畜糞便的處理問題，改善飼養(yǎng)環(huán)境。

除了殺菌作用外，茶多酚強的吸附作用也促進了除臭效果。國外的研究結(jié)果表明在仔豬的日糧中加入茶多酚喂養(yǎng)一個月，從第二周開始，仔豬糞便中的乳酸桿菌數(shù)量增加，抑制了糞便中細菌的增長，梭狀桿菌磷酸酯酶的檢出率下降，使仔豬糞便發(fā)臭的對甲酚和類酚的含量降低，短鏈脂肪酸和乳酸菌數(shù)量顯著增加，pH值略有下降，臭味明顯減小。

結(jié)語

近年來由于激素類飼料添加劑的大量應(yīng)用導致多種疾病的發(fā)生，家禽的免疫抵抗力也降低，多發(fā)疾病不僅增加了飼養(yǎng)成本，還不時的引發(fā)食用恐慌，要從根本上解決此類問題，首先應(yīng)該加強飼料添加劑的安全使用教育，此外尋求天然綠色飼料添加劑也迫在眉睫。

茶葉多酚可以降低血糖和膽固醇含量，改變動物體內(nèi)代謝，改善動物肉質(zhì)，對于提高畜禽肉產(chǎn)品的質(zhì)量起到積極作用。我國是畜牧大國，飼料需求量大，激素類飼料添加劑的危害隨著飼養(yǎng)過程不斷凸顯，天然綠色飼料添加劑成為新寵。茶多酚作為飼料添加劑應(yīng)用還存在幾個問題：

（1）茶多酚的飼用添加劑量要進行實際探索及控制，與維生素E協(xié)同作用會增強抗氧化活性，因此茶多酚與其他飼料添加劑的復合使用效果應(yīng)該進行更多探索。

（2）茶多酚結(jié)構(gòu)中的大量酚羥基易與飼料中的微量金屬元素螯合，降低其吸收率，應(yīng)該盡量避免同時飼用。

我國茶葉資源豐富，飲用后的茶葉及低檔茶葉均可作為飼用多酚的提取原料，隨著科研工作者對茶多酚的飼用價值的深入研究，茶多酚在飼料工業(yè)中的應(yīng)用將會越來越廣泛。

（參考文獻略）