安陽市無償獻(xiàn)血血液檢測陽性結(jié)果分析

冀 慧 沙瑩浩 河南安陽中心血站，河南省安陽市 455000； 河南安陽口腔醫(yī)院

為保證受血者的安全，血站在選擇ELISA試劑時(shí)一般都會選擇靈敏度高的試劑，但提高靈敏度的同時(shí)也可影響到試劑的準(zhǔn)確度。我站規(guī)定同一位獻(xiàn)血者連續(xù)三次實(shí)驗(yàn)室檢測為陽性則將被取消獻(xiàn)血資格，同時(shí)血站在向獻(xiàn)血者進(jìn)行結(jié)果反饋時(shí)也是以實(shí)驗(yàn)室檢測結(jié)果為準(zhǔn)。其中因試劑原因?qū)е碌募訇栃越Y(jié)果不僅影響到獻(xiàn)血者的招募而且還增加了與獻(xiàn)血者產(chǎn)生糾紛的可能。經(jīng)統(tǒng)計(jì)我站因?qū)嶒?yàn)室陽性而報(bào)廢的血制品占總報(bào)廢率的73.5%。在血液資源有限的前提下如何從多方面減少實(shí)驗(yàn)室陽性結(jié)果產(chǎn)生的報(bào)廢已成為我站近幾年較為突出的一項(xiàng)工作。現(xiàn)將我站647例實(shí)驗(yàn)室陽性血液標(biāo)本進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，為我站科學(xué)合理地開展獻(xiàn)血工作提供一定的數(shù)據(jù)支持。

1 材料與方法

1.1 研究對象 選取2013年8－12月安陽市中心血站無償獻(xiàn)血ALT、HBsAg、抗－HCV、抗－HIV、梅毒陽性標(biāo)本647例。雙試劑灰區(qū)，單試劑陽性＋單試劑灰區(qū)，雙試劑陽性，ALT單試劑陽性數(shù)值≥40U／L為檢驗(yàn)科實(shí)驗(yàn)室陽性血液報(bào)告標(biāo)準(zhǔn)。154例HBsAg、抗－HCV實(shí)驗(yàn)室陽性血液標(biāo)本PCR檢測結(jié)果。

1.2 儀器與試劑 STAR全自動加樣器，F(xiàn)AME24／20全自動酶免系統(tǒng)（瑞士Hamilton），AU400全自動生化分析儀（日本奧林巴斯），MX3000R熒光定量PCR儀（美國STRATAGENE）。ALT試劑（北京倍肯、上?？迫A），HBsAg試劑（上海科華、珠海麗珠），抗－HCV試劑（北京科衛(wèi)、珠海麗珠），抗－HIV試劑（法國BIO－RAD），梅毒試劑（上?？迫A、珠海麗珠），乙肝病毒核酸擴(kuò)增熒光定量試劑（深圳達(dá)安），丙肝病毒核酸擴(kuò)增熒光定量試劑（深圳達(dá)安）。所用試劑均為中國生物制品鑒定所鑒定合格的產(chǎn)品，在有效期內(nèi)使用。

1.3 檢測方法 按《全血及成分血質(zhì)量要求GB18469－2012》［1］進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢查，ALT采用1種試劑（速率法）進(jìn)行檢測，HBsAg、抗－HCV、抗－HIV、梅毒采用2種不同生產(chǎn)廠家ELISA試劑檢測，乙肝病毒、丙肝病毒采用1種試劑檢測病毒核酸，所有試劑均按照使用說明書操作。

2 結(jié)果

647例無償獻(xiàn)血實(shí)驗(yàn)室陽性標(biāo)本中ALT陽性率最高，占總陽性率的63.5%，HBsAg、抗－HCV陽性率是血液報(bào)廢的第二大原因，占總陽性率的23.8%，梅毒報(bào)廢率是血液報(bào)廢的第三大原因，占總陽性率的9.0%，見表1。HBsAg、抗－HCV陽性血灰區(qū)報(bào)廢率分別占57.5%、55.2%，見表2。HBsAg灰區(qū)標(biāo)本核酸病毒檢出率僅3.7%，抗－HCV灰區(qū)標(biāo)本核酸病毒檢出率僅3.2%，見表3。

表1 647例實(shí)驗(yàn)室陽性血液標(biāo)本報(bào)廢率

表2 ELISA實(shí)驗(yàn)室陽性血液標(biāo)本檢出率

表3 154例HBsAg、抗－HCV ELISA標(biāo)本核酸陽性檢出率

3 討論

從表1可以看出因ALT高而報(bào)廢的血液是我站目前血液報(bào)廢的首要因素。隨著無償獻(xiàn)血工作的深入開展，我站對ALT的檢查已日趨規(guī)范，初篩統(tǒng)一采用干式生化法，實(shí)驗(yàn)室統(tǒng)一采用速率法，速率法復(fù)檢陽性血液按報(bào)廢處理。以上情況表明在初篩統(tǒng)一采用干式化學(xué)法的情況下速率法仍存在很高的淘汰率，因影響ALT升高的因素很多，筆者認(rèn)為主要應(yīng)控制以下幾個(gè)環(huán)節(jié)：（1）在一些生理情況下如劇烈運(yùn)動、通宵加班、情緒過度緊張等，也可引起一時(shí)性的輕度升高［2］，所以應(yīng)首先將獻(xiàn)血前的健康征詢工作作為初篩工作的重點(diǎn)，要求體檢人員在對獻(xiàn)血者進(jìn)行健康征詢時(shí)要給予必要的指導(dǎo)和溝通。（2）時(shí)刻保持干式化學(xué)儀的靈敏度，尤其是隨采血車配置的干式化學(xué)儀，要求工作人員完全掌握儀器及配套試劑的使用要求及注意事項(xiàng)，對儀器的維護(hù)、保養(yǎng)工作落實(shí)到人，切實(shí)保證儀器正確有效的使用。（3）因ALT在溫度＞30℃時(shí)不合格率更高［3］，所以不僅要求采血時(shí)要注意采血環(huán)境溫度的控制，而且對采血后標(biāo)本的運(yùn)輸及實(shí)驗(yàn)室加樣過程都應(yīng)全程控制溫度。

HBsAg、抗－HCV陽性率是血液報(bào)廢的第二大原因，占實(shí)驗(yàn)室總陽性率的23.8%。HBsAg、抗－HCV陽性血灰區(qū)報(bào)廢率分別占57.5%、55.2%，而HBsAg灰區(qū)標(biāo)本核酸病毒檢出率僅3.7%，抗－HCV灰區(qū)標(biāo)本核酸病毒檢出率僅3.2%。

從表2、表3可以看出HBsAg、抗－HCV灰區(qū)假陽性率很高。筆者分析引起假陽性的原因可能有以下幾個(gè)方面的因素：如個(gè)體差異引起的試劑本身的非特異性反應(yīng)，試劑本身因方法學(xué)原因?qū)е碌撵`敏度高而特異性不高，標(biāo)本脂血，檢驗(yàn)人員的操作技術(shù)和判斷誤差等都可造成ELISA結(jié)果的假陽性。為保證受血者的安全，血站在選擇ELISA試劑時(shí)一般都會選擇靈敏度高的試劑，血制品的報(bào)廢以實(shí)驗(yàn)室ELISA檢測結(jié)果為準(zhǔn)。同時(shí)血站在向獻(xiàn)血者反饋結(jié)果時(shí)也是以實(shí)驗(yàn)室ELISA結(jié)果為準(zhǔn)，獻(xiàn)血者往往會重新再去醫(yī)院進(jìn)行抽血復(fù)查，不僅重復(fù)浪費(fèi)資源，還引起很多不必要的糾紛，血站還要專門組織工作人員對其進(jìn)行大量的解釋工作；我站還規(guī)定同一位獻(xiàn)血者如連續(xù)三次實(shí)驗(yàn)室檢測為陽性則將被取消獻(xiàn)血資格，從以上數(shù)據(jù)可以看出有很多假陽性結(jié)果的獻(xiàn)血者被血站采血系統(tǒng)屏蔽，無法再次獻(xiàn)血，也給無償獻(xiàn)血招募工作帶來一定的負(fù)面影響。PCR技術(shù)因所檢測對象是病原體核酸，所以準(zhǔn)確率高、可大大降低假陽性結(jié)果的產(chǎn)生，但PCR技術(shù)試劑成本高、操作繁瑣［4］。因此筆者認(rèn)為有必要對HBsAg、抗－HCV陽性標(biāo)本進(jìn)行核酸檢測，以核酸檢測結(jié)果對獻(xiàn)血者進(jìn)行結(jié)果反饋，不僅可提高血站實(shí)驗(yàn)室結(jié)果報(bào)告準(zhǔn)確度，而且還可以減少糾紛，降低負(fù)面影響。

梅毒ELISA試劑假陽性率也較高［5，6］，血站為了保證血液安全另外又增加了灰區(qū)設(shè)置，這些因素也使得梅毒ELISA檢測非特異性反應(yīng)大幅升高，不僅導(dǎo)致血液浪費(fèi)，更給獻(xiàn)血者管理和結(jié)果反饋帶來了問題，易引起抱怨和投訴。TPPA法是美國疾病預(yù)防控制中心2002年推薦的梅毒檢測確認(rèn)方法，亦是中國衛(wèi)生部頒布的性病診療規(guī)范和性病治療推薦方案中的檢測方法。TPPA法檢測的是梅毒的特異性抗體，具有很高的敏感性和特異性。但TPPA需用肉眼判讀結(jié)果，無法保留原始記錄，且經(jīng)濟(jì)昂貴、操作繁瑣，檢測時(shí)需將標(biāo)本做系列稀釋不利于大批量樣本的篩查［7］。血站對獻(xiàn)血者梅毒結(jié)果的反饋，更是一敏感話題，應(yīng)慎之又慎，筆者建議對梅毒ELISA陽性標(biāo)本進(jìn)行TPPA法確認(rèn)試驗(yàn)，并以TPPA確認(rèn)結(jié)果對獻(xiàn)血者進(jìn)行結(jié)果反饋，不僅可以減少獻(xiàn)血者的流失，又給獻(xiàn)血者一個(gè)客觀準(zhǔn)確的結(jié)果，還可提高血站實(shí)驗(yàn)室結(jié)果的準(zhǔn)確度。

［1］中華人民共和國衛(wèi)生部，中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會.GB18469－2012全血及成分血質(zhì)量要求〔S〕.北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2012.

［2］汪小華，龍子淵，王英桃.獻(xiàn)血者ALT檢測的影響因素分析〔J〕.臨床輸血與檢驗(yàn)，2005，7（1）：48.

［3］吳士定，鮑紅日.氣溫對血液中轉(zhuǎn)氨酶陽性等檢出率的影響〔J〕.中國衛(wèi)生雜志，2000，8（10）：478－479.

［4］余加宏，王南，劉林.ELISA法抗－HVC陽性獻(xiàn)血者分片段試劑和RT－PCR法檢測結(jié)果分析〔J〕.淮海醫(yī)藥，2008，9（26）：403－404.

［5］尚桂芳，聶冬梅，楊立新.兩種梅毒檢測試劑敏感性和特異性比較〔J〕.中國輸血雜志，2003，16（5）：333－334.

［6］孫文利，張獻(xiàn)清，穆士杰，等.ELISA與TRUST法在梅毒檢測中的比較〔J〕.中國輸血雜志，2002，15（3）：185.

［7］夏瑞，李殊英，陳苗水.TPPA、ELISA、TRUST 3種梅毒檢測方法的比較〔J〕.現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)，2008，35（24）：4864－4865.