浙江省樂(lè)清灣圍塘養(yǎng)殖泥蚶繁殖生物學(xué)研究

于銘茹 YU Ming-ru

（國(guó)家海洋標(biāo)準(zhǔn)計(jì)量中心，天津 300112）

（National Center of Ocean Standards and Metrology，Tianjin 300112，China）

0 引言

泥蚶（Tegillarca granosa）隸屬軟體動(dòng)物門(mén)（Mollusca）、瓣鰓綱（Lamellibranchia）、翼形亞綱（Pteriomorphia）、蚶目（Arcoida）、蚶科（Arcidae）、蚶屬（Tegillarca），俗稱(chēng)血蚶、寧蚶、花蚶、銀蚶、蚶子等，屬熱帶及溫帶生物，是一種棲息于沿海灘涂的廣溫性廣鹽性雙殼類(lèi)軟體動(dòng)物。泥蚶為灘涂中營(yíng)埋棲生活的種類(lèi)，喜棲于中、低潮區(qū)交界處，在生態(tài)上和經(jīng)濟(jì)上都具有重要作用。

浙江樂(lè)清灣（介于東經(jīng) 120°2′-120°10′和北緯 27°58′-28°24′之間）位于浙江省甌江口的北側(cè)，是一個(gè)葫蘆形的內(nèi)灣，灣長(zhǎng)40km，平均寬度10km，全灣有水面270km2，標(biāo)準(zhǔn)水面上的灘涂約200km2，是我國(guó)最大的泥蚶苗種生產(chǎn)和養(yǎng)殖基地，泥蚶苗種產(chǎn)量占全國(guó)市場(chǎng)份額的80%以上，有“中國(guó)泥蚶之鄉(xiāng)”之稱(chēng)，也是我國(guó)較早研究人工育苗和中間培育的場(chǎng)所，每年為南方各省開(kāi)展泥蚶養(yǎng)殖提供一定數(shù)量苗種。由于近年來(lái)海上活動(dòng)的日益增加，海洋環(huán)境急劇惡化，海洋資源嚴(yán)重受損，泥蚶賴以生存的生態(tài)環(huán)境遭破壞，天然資源日趨衰竭，產(chǎn)量每況愈下。發(fā)展泥蚶增養(yǎng)殖業(yè)，需要得到高質(zhì)量的精子和卵子以保證幼蟲(chóng)的健康，為了得到高質(zhì)量的精子和卵子，有必要了解泥蚶自然群體的狀況，故對(duì)該地區(qū)泥蚶繁殖生物學(xué)的研究十分必要。到目前為止，關(guān)于泥蚶的繁殖生物學(xué)研究，國(guó)內(nèi)林志強(qiáng)等[1]對(duì)人工育苗作過(guò)研究，鄭家聲等[2]研究了山東省乳山灣泥蚶的性腺發(fā)育和生殖周期；而對(duì)樂(lè)清灣泥蚶繁殖生物學(xué)研究至今未見(jiàn)詳細(xì)報(bào)道。本研究對(duì)浙江省樂(lè)清灣圍塘泥蚶的繁殖周期及環(huán)境因子進(jìn)行了周年調(diào)查，旨在為保護(hù)和利用浙江樂(lè)清灣泥蚶的種質(zhì)資源，提高樂(lè)清灣泥蚶在養(yǎng)殖及開(kāi)展良種選育等工作提供基礎(chǔ)資料和理論依據(jù)，為我國(guó)泥蚶的人工育苗技術(shù)深入研究提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 樣品采集 自2010年3月至2010年8月于浙江樂(lè)清灣沿海圍塘采集泥蚶，每月下旬一次，每次隨機(jī)采集100-120個(gè)體，將樣品鮮活運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室，并現(xiàn)場(chǎng)測(cè)定取樣海區(qū)海水的鹽度和溫度，同時(shí)采集采樣地海水樣品，采用分光度法[3]測(cè)定葉綠素a含量。

1.2 肥滿度 每月取30個(gè)個(gè)體解剖，測(cè)量殼高，殼長(zhǎng)，殼寬，殼重，軟體部重，將軟體部和殼分別在105℃烘箱恒溫烘干至恒重，稱(chēng)殼干重，軟體干重，計(jì)算肥滿度。

1.3 組織學(xué) 每個(gè)月取90-100個(gè)泥蚶個(gè)體，對(duì)樣品進(jìn)行解剖、觀察，并將切取的一部分性腺組織用波恩氏液固定，常規(guī)石蠟包埋組織切片（切片厚度6μm），蘇木精-伊紅（H-E）染色。在顯微鏡下觀察每個(gè)月份泥蚶的性腺發(fā)育狀況。每個(gè)月份取5-10個(gè)雌性個(gè)體，每個(gè)個(gè)體觀察、測(cè)量50-100個(gè)卵母細(xì)細(xì)胞的直徑、求平均值以確定泥蚶性腺的成熟度。

1.3.1 試劑 無(wú)水乙醇（A.R，安徽安特生物化學(xué)有限公司）、二甲苯（A.R，無(wú)錫市佳妮化工有限公司）、苦味酸（A.R，中國(guó)醫(yī)藥集團(tuán)上?；瘜W(xué)試劑公司）、甲醛（A.R，衢州巨化試劑有限公司、冰醋酸（A.R，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）、石蠟（熔點(diǎn)56-58℃，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）、明膠、中性樹(shù)膠（國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）。

1.3.2 實(shí)驗(yàn)工具和儀器 手術(shù)剪，鑷子，解剖刀，稱(chēng)量紙，酒精燈，量筒，樣品瓶，擦鏡紙，載玻片，蓋玻片：用100%酒精浸泡24h，酒精燈灼燒。

包埋機(jī)（全自動(dòng)生物包埋機(jī)YD-6D）、切片機(jī)（TD-1508A輪轉(zhuǎn)式切片機(jī)）、烤片機(jī)（YD-B烤片機(jī)）、脫水機(jī)（生物組織脫水機(jī)YD-12G）、顯微鏡（熒光顯微鏡Nikon Eclipse80i,生物顯微鏡Nikon YS100）、染色機(jī)（電腦自動(dòng)染色機(jī)YAB0700）、電子天平、離心機(jī)、分光光度計(jì)等。

1.3.3 實(shí)驗(yàn)方法與步驟

①固定、保存。固定劑選用波恩（Bouin）液，固定24h，后換多次70%乙醇，褪色，直至洗去黃色。

②脫水。樣品退去黃色后依次放入80%酒精1h，95%酒精 30min，95%酒精 30min，100%酒精 30min，100%酒精30min。

③透明。樣品依次放入1/2純酒精1/2二甲苯1h，二甲苯Ⅰ20min，二甲苯Ⅱ20min。

④浸蠟。樣品依次放入1/2二甲苯1/2石蠟1h，純蠟Ⅰ1h，純蠟Ⅱ1h。

⑤包埋。包埋過(guò)程中要注意盡量避免產(chǎn)生氣泡而影響切片效果。

⑥切片、貼片、展片。采用輪轉(zhuǎn)式切片機(jī)，切片厚度為6 μm，后將切好的蠟片用1%明膠貼于干凈的載玻片上，加幾滴蒸餾水，酒精燈烘烤展片。

⑦染色。將烘干的切片依次放入二甲苯10min，1/2純酒精1/2二甲苯4min，100%乙醇4min，95%乙醇4min，80%乙醇4min，70%乙醇4min，50%乙醇 4min，蒸餾水 4min，蘇木精8min，染色后用自來(lái)水6min，酸酒精1min分色，50%乙醇 4min，95%乙醇 4min，曙紅 30s，90%乙醇 15s，100%乙醇Ⅰ2min，乙醇Ⅱ2min，1/2純酒精1/2二甲苯4min，二甲苯10min，二甲苯15min，取出切片后，立即用中性樹(shù)膠封片。

⑧烘干。封片后的切片自然風(fēng)干或烘干。

⑨挑選比較清晰的切片進(jìn)行顯微鏡觀察、拍照。

1.4 數(shù)據(jù)分析 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS 17.0軟件處理。對(duì)條件指數(shù)和卵母細(xì)胞直徑的測(cè)量數(shù)據(jù)用單因素方差分析（ANOVA）進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)，月間的差異采用Turkey檢驗(yàn)（P<0.05），圖片用 Adobe Photoshop CS 8.0.1 軟件處理。

2 結(jié)果與分析

2.1 環(huán)境因子的周年變化 圖1顯示了采樣圍塘海水水溫和鹽度的周年變化。其中水溫呈明顯的季節(jié)性變化，在6月份的時(shí)候達(dá)到最高值（29.8℃），隨后逐漸降低，至12月達(dá)到最低（4.5℃），之后溫度回升。鹽度為10.0-30.0，年平均值為22.7，7月和8月波動(dòng)明顯，與研究期間2010年3-7月浙江樂(lè)清灣正值雨季，雨水較多有關(guān)。

圖2顯示了葉綠素a含量的周年變動(dòng)模式。表現(xiàn)為春、夏季高，秋、冬季低的特點(diǎn)。3月份葉綠素a含量逐漸升高至6月達(dá)到最高值，含量為22.60μg/L。8月迎來(lái)次高峰，葉綠素a含量為22.43μg/L。隨后葉綠素a的含量逐漸下降，并于12月降至全年最低值，為2.43μg/L。此后，葉綠素a含量開(kāi)始上升。

圖1 取樣圍塘水溫和鹽度的周年變化

圖2 取樣圍塘葉綠素a含量的周年變化

2.2 泥蚶生物學(xué)性狀和肥滿度的周年變化 表1為泥蚶的生物學(xué)性狀，月平均殼高的變化范圍為20.12-23.33 mm，月平均殼長(zhǎng)為26.04-30.11mm，月平均殼寬為17.55-21.64mm，月平均軟體部濕重在1.12-2.65g之間變化，在12月，軟體部的濕重和干重都達(dá)到了最低值，分別為1.12g和 0.14g。

圖3顯示了泥蚶肥滿度的周年變化，波動(dòng)不大，3月份起，肥滿度平均值開(kāi)始增大，增殖期開(kāi)始，5月份達(dá)到最大值7.74×10-2，此時(shí)正值卵巢內(nèi)的卵母細(xì)胞的大生長(zhǎng)期，隨著成熟期和排放的來(lái)臨，肥滿度迅速下降，8月份達(dá)到最低值3.25×10-2，9月份為3.42×10-2，以后各月逐漸平緩穩(wěn)定，12月為3.30×10-2，此后又開(kāi)始上升。

2.3 泥蚶繁殖周期 泥蚶配子發(fā)育和卵徑存在周年變化，泥蚶的配子發(fā)育具有明顯的季節(jié)性（圖5），卵徑月間差異顯著（P<0.05）。

參考Ivell，結(jié)合泥蚶性腺的組織學(xué)和外部形態(tài)特征，將泥蚶的性腺發(fā)育分為5個(gè)時(shí)期：增殖期，生長(zhǎng)期，成熟期，排放期和休止期（圖4）。

表1 泥蚶的生物學(xué)性狀。平均值±標(biāo)準(zhǔn)差，n=30

圖3 泥蚶肥滿度的周年變化

第Ⅰ期，即增殖期，本期發(fā)育時(shí)間為3月初至4月底，隨著海區(qū)水溫的回升，此期性別剛剛分化，月平均水溫為16.6-20.6℃。組織切片觀察，雌性濾泡開(kāi)始出現(xiàn)，濾泡腔大，濾泡壁由單層上皮構(gòu)成，配子發(fā)育剛剛開(kāi)始。隨著濾泡壁開(kāi)始增厚，卵巢內(nèi)出現(xiàn)單層不連續(xù)的卵原細(xì)胞，卵原細(xì)胞處在活躍增殖時(shí)期，胞體呈卵圓或三角形（圖4Ⅰ-O），3月份平均直徑約8.87μm，為全年最低值，至4月份，平均卵徑值可增至16.99μm（圖5），3月57.84%的個(gè)體處于Ⅰ期，4月74.47%的個(gè)體處于Ⅰ期（圖5）。雄性濾泡開(kāi)始出現(xiàn)，體積小壁薄不規(guī)則，濾泡間結(jié)締組織豐富。濾泡壁上形成多層的精原細(xì)胞，數(shù)量逐漸增多，精原細(xì)胞呈圓形或三角形（圖4Ⅰ-T）。

第Ⅱ期，生長(zhǎng)期，濾泡數(shù)量增加，體積增大，分布范圍廣。卵原細(xì)胞繼續(xù)分裂增殖，雌性濾泡腔內(nèi)空隙逐漸減少，卵原細(xì)胞逐漸分化，其一端已明顯地突向?yàn)V泡腔，呈長(zhǎng)形或倒梨形有少量成熟卵子出現(xiàn)（圖4Ⅱ-O），本期發(fā)育時(shí)間主要為5月份，有60.78%的個(gè)體處于生長(zhǎng)期，并有少量個(gè)體（8.82%）性腺發(fā)育成熟（圖5），此期平均卵徑為34.08 μm，水溫為27.2℃。雄性濾泡數(shù)量增多，體積增大，壁加厚，顏色加深，可觀察到精原細(xì)胞到精子各個(gè)生長(zhǎng)階段，少量精子形成，至本期中，精原細(xì)胞約占濾泡截面積的50%以上（圖4Ⅱ-T）。

第Ⅲ期，成熟期，配子發(fā)育結(jié)束，產(chǎn)卵還未發(fā)生或剛剛開(kāi)始。本期發(fā)育6月和7月為成熟期，性腺發(fā)育成熟的個(gè)體分別占42.50%和58.06%（圖5），有部分個(gè)體開(kāi)始產(chǎn)卵，平均水溫為29.5-29.8℃。本期濾泡為全年最豐滿，僅少量結(jié)締組織存在，濾泡間的間隙基本消失。游離的成熟卵約占80%以上，卵子互相擠壓，成不規(guī)則形狀，有橢圓形、梨形、多邊形等（圖4Ⅲ-O），卵徑在6月份為42.20μm，7月卵徑達(dá)最大值，為 48.47μm（圖 5）。本期精巢達(dá)到全年最豐滿階段，濾泡腔內(nèi)充滿了成熟的精子，精子為鞭毛型，呈輻射狀排列，精子頭部朝向?yàn)V泡壁，尾部朝向?yàn)V泡腔（圖4Ⅲ-T）。

第Ⅳ期，排放期，自7月下旬開(kāi)始，濾泡內(nèi)生殖細(xì)胞逐漸減少，開(kāi)始出現(xiàn)大小不等的空腔，濾泡腔體積逐漸減小，雌雄排放期和成熟期均有重疊現(xiàn)象存在。雌性濾泡壁上僅剩少量卵母細(xì)胞，有些濾泡壁破裂，濾泡腔內(nèi)殘存少量成熟卵子（圖4Ⅳ-O），此期發(fā)育時(shí)間為7月下旬至 8月下旬，8月為排放鼎盛期，8月卵徑降低至18.57μm，部分個(gè)體產(chǎn)卵期會(huì)延續(xù)到11月份；雄性濾泡開(kāi)始出現(xiàn)大小不等輻射狀的腔，濾泡萎縮，精子數(shù)量明顯減少，濾泡腔內(nèi)仍有少量精母細(xì)胞和精子存在（圖4Ⅳ-T）。

第Ⅴ期，即休止期，本期發(fā)育時(shí)間為9月至翌年2月，個(gè)別為排放期和增殖期，此期間，僅4.91%個(gè)體可辨雌雄，顯微鏡觀察卵徑減小現(xiàn)象明顯，故未進(jìn)行測(cè)量計(jì)數(shù)。切片觀察濾泡空虛，變成一個(gè)大空腔，形狀不規(guī)則，濾泡壁薄，隨后濾泡逐漸變小直至消失，結(jié)締組織占據(jù)了整個(gè)性腺（圖4Ⅴ-ND），性腺發(fā)育完成一個(gè)周期。圖4所示為泥蚶性腺發(fā)育分期。

圖4 泥蚶性腺發(fā)育分期

3 討論

圖5 泥蚶卵徑和性腺發(fā)育狀況的周年變化

3.1 泥蚶的性腺發(fā)育周期與環(huán)境因子的關(guān)系 海洋貝類(lèi)的繁殖周期受外部因素（溫度，鹽度，食物豐度等）和內(nèi)部因素（神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)調(diào)節(jié)等）共同影響[5]。貝類(lèi)的繁殖策略可以認(rèn)為是對(duì)周?chē)h(huán)境（如溫度和鹽度）和食物的可得性等的一種適應(yīng)，因環(huán)境隨海區(qū)差異變化較大，不同海區(qū)海洋貝類(lèi)性腺開(kāi)始發(fā)育和產(chǎn)卵時(shí)間是不同的[6,7]。

3.1.1 水溫與繁殖周期關(guān)系 本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，樂(lè)清灣圍塘大部分泥蚶配子發(fā)育的開(kāi)始時(shí)間為3-4月，此時(shí)水溫16.6-20.6℃。本實(shí)驗(yàn)的組織學(xué)結(jié)果顯示，5月份50%以上的個(gè)體的泥蚶處于Ⅱ期，并有部分個(gè)體性成熟，6月開(kāi)始有個(gè)體產(chǎn)卵、排精，此時(shí)水溫為29.8℃，7月后大規(guī)模產(chǎn)卵、排精。由此可見(jiàn)，泥蚶產(chǎn)卵所需溫度要高于配子發(fā)育啟動(dòng)所需溫度。

3.1.2 鹽度與繁殖周期關(guān)系 水域中的鹽度也會(huì)影響泥蚶的繁殖周期，泥蚶對(duì)鹽度適應(yīng)能力強(qiáng)，成蚶在鹽度為10.4-32.5之間的海水中均能正常生活，不過(guò)在河口或海水鹽度較低的內(nèi)灣，雨季使海水鹽度降得過(guò)低時(shí)，泥蚶則向下層潛伏，出入水孔被淤閉，使其在泥層中受到保護(hù)，待鹽度上升后，泥蚶再回到上層，進(jìn)行正常生活。樣品都是從淤泥里采集，觀察泥蚶存活情況，有個(gè)別死亡現(xiàn)象，9月開(kāi)始雨水天氣減少，鹽度保持在30左右，采樣發(fā)現(xiàn)泥蚶存活率保持在較高水平，9月開(kāi)始值翌年雨季前，存活率均超過(guò)95%。本實(shí)驗(yàn)中，鹽度在3月到8月變化很大，在10.02-26.16之間波動(dòng)，特別是6月中旬到8月上旬，鹽度一直維持在較低水平（10-14），主要原因是這段時(shí)間降雨過(guò)久，而樂(lè)清灣又屬內(nèi)灣，鹽度受降雨量影響明顯，實(shí)驗(yàn)期間浙江省6月中旬至7月中旬經(jīng)歷2000-2010年少有的典型梅雨季節(jié)，而8月下旬鹽度增至26.16，并逐漸穩(wěn)定，泥蚶于8月進(jìn)入產(chǎn)卵鼎盛期，據(jù)此判斷樂(lè)清灣泥蚶產(chǎn)卵具有雨季之后鹽度較高時(shí)開(kāi)始大規(guī)模產(chǎn)卵的特點(diǎn)，該規(guī)律與Suja等[8]對(duì)分布在印度的兩個(gè)不同地區(qū)的嬰兒蛤的研究結(jié)果基本一致。而國(guó)內(nèi)的報(bào)道鮮有提到鹽度對(duì)泥蚶繁殖的影響，因此兩者之間的關(guān)系有待進(jìn)一步研究。

3.1.3 食物與繁殖周期關(guān)系 本實(shí)驗(yàn)對(duì)取樣圍塘的葉綠素a的含量進(jìn)行了周年測(cè)定，3-6月葉綠素含量呈現(xiàn)快速增加的趨勢(shì)，且含量總體上處于較高水平，結(jié)合組織學(xué)觀察結(jié)果，樂(lè)清灣海區(qū)圍塘養(yǎng)殖泥蚶在3月至4月配子開(kāi)始發(fā)育，而春季的葉綠素a的值也很高，餌料豐富，且溫度也超過(guò)發(fā)育起始最低溫度，符合性腺發(fā)育規(guī)律。泥蚶的配子發(fā)育不僅需要起始最低溫度（性腺發(fā)育生物學(xué)零度），也需要充足的餌料保障。6月份泥蚶配子發(fā)育進(jìn)入生長(zhǎng)期，葉綠素a的值達(dá)到最高（22.6μg/L），餌料最豐富，為泥蚶發(fā)育提供了良好的食物基礎(chǔ)，有重要的促進(jìn)作用。8月泥蚶已進(jìn)入排放鼎盛期，而葉綠素a的值達(dá)到次高峰（22.43 μg/L），水中浮游植物數(shù)量很大，平均溫度達(dá)次高峰29.7℃。9月到翌年2月，取樣圍塘海水葉綠素a含量較低，水中浮游植物數(shù)量很少，并且由于雨雪天氣，夏季至秋冬季溫度降低尤為迅速，致此段時(shí)期泥蚶性腺基本處于休止期，性腺不發(fā)育，極少數(shù)處在增殖期。

3.2 成熟度的判斷 本研究中通過(guò)測(cè)定肥滿度的周年變化，發(fā)現(xiàn)8-12月泥蚶的肥滿度波動(dòng)不明顯，而同一時(shí)期，組織學(xué)觀察結(jié)果是泥蚶處于排放鼎盛期及休止期，盡管排放期間和排放后，肥滿度開(kāi)始下降，兩者之間存在一定關(guān)系，但總體而言，在這一時(shí)期泥蚶的肥滿度未能很好的幫助我們準(zhǔn)確判斷泥蚶的性腺成熟狀況，同時(shí)有研究指出，肥滿度作為魚(yú)類(lèi)繁殖周期的判定標(biāo)準(zhǔn)，精確度并不很高，因此泥蚶的肥滿度不建議作為判斷泥蚶性腺成熟的直接標(biāo)準(zhǔn)。

3.3 雌雄同體問(wèn)題 瓣鰓類(lèi)中的雌雄同體現(xiàn)象較普遍[9,10]。本研究在1243個(gè)泥蚶性腺切片觀察結(jié)果表明，雌雄比例為1:1.13，雄性略多于雌性，與吳洪喜等[7]觀察相符，與鄭家聲等[2]對(duì)418顆生長(zhǎng)在山東青島市薛家島鎮(zhèn)唐島灣的泥蚶觀察結(jié)果，雌雄比l:1.16很接近，本研究中未發(fā)現(xiàn)泥蚶雌雄同體現(xiàn)象，相關(guān)報(bào)道[2]也未提及發(fā)現(xiàn)雌雄同體現(xiàn)象，因此可以斷定泥蚶為雌雄異體貝類(lèi)，不存在雌雄同體現(xiàn)象。

4 結(jié)論

本文對(duì)浙江省溫州市樂(lè)清灣圍塘養(yǎng)殖的泥蚶的繁殖生物學(xué)性狀、繁殖周期及其與環(huán)境因子（溫度、鹽度和葉綠素a含量）的關(guān)系進(jìn)行了研究。泥蚶為雌雄異體，其性腺發(fā)育受到餌料豐富度的影響成周年變化，同時(shí)泥蚶產(chǎn)卵時(shí)所需溫度要高于配子發(fā)育啟動(dòng)所需溫度，且具有雨季之后鹽度較高時(shí)開(kāi)始大規(guī)模產(chǎn)卵的特點(diǎn)。泥蚶配子發(fā)育始于3-4月，配子主要在6、7月成熟，大規(guī)模產(chǎn)卵主要在8月份，雌雄異體。泥蚶卵徑的周年變化是判斷泥蚶成熟度的良好指標(biāo)。海洋貝類(lèi)的繁殖周期受外部因素和內(nèi)部因素共同影響，要真正了解控制泥蚶繁殖周期的生理機(jī)制還需要對(duì)影響其繁殖周期的內(nèi)部因素（神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)調(diào)節(jié)等）做大量的工作。

[1]林志強(qiáng),汪德清,徐桂仙等.泥蚶人工育苗試驗(yàn)報(bào)告[J].浙南水產(chǎn)科技,1980,1:1-11.

[2]鄭家聲,王梅林,王志勇等.泥蚶的性腺發(fā)育和生殖周期[J].青島海洋大學(xué)學(xué)報(bào),1995,25(4):503-510.

[3]戴玉蓉,盧敬讓.養(yǎng)殖水體浮游植物葉綠素a的簡(jiǎn)易測(cè)定[J].齊魯漁業(yè),1997,14:35-36.

[4]Ivell R.The biology and ecolog y of a brackish lagoon bivalve,Cerastoderma glaucum Bruguiere,in an English lagoon,the widewater,Sussex[J].J Moll Stud,1979,45:383-400.

[5]Berthelin C,Kellner K,Mathieu M.Storage metabolism in the Pacific oyster (Crassostrea gigas)in relation to summer mortalities and reproductive cycle(west coast of France)[J].Comp Biochem Physiol,2000,125 B:359-369.

[6]Ahn I Y,Surh J,Park Y G,et al.Growth and seasonal energetics of the Antarctic bivalve Laternula elliptica from King George Island,Antarctica[J].Mar Ecol Prog Ser,2003,257:99-110.

[7]Dridi S,Romdhane M S,Elcafsi M.Seasonal variation inweight and biochemicalcomposition ofthe Pacific oyster,Crassostrea gigasin relation to the gametogenic cycle and environmentalconditions ofthe Bizertlagoon,Tunisia [J].Aquaculture,2007,263:238-248.

[8]Suja N,Muthiah P.The reproductive biology of the baby clam,Marcia opima,from two geographically separated areas of India.Aquaculture,2007,273:700-710.

[9]樓允東.組織胚胎學(xué)[M].北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，1996：223-238.

[10]陳品健,游嵐,倪法鴻.尖刀蟶的生殖周期[J].海洋科學(xué)，1994，18(4):38-42.