從茶葉中提取茶多酚的工藝技術(shù)研究

張紅

【摘要】茶多酚又叫茶單寧、茶鞣質(zhì)，是決定茶湯滋味、顏色的主體成分，它的藥用價值很高，具有抗氧化、抗腫瘤、抗動脈粥樣硬化、抑菌等藥理作用。在本文中將采用沸水浸提法及傳統(tǒng)有機(jī)溶劑提取法等不同提取方法，并用酒石酸亞鐵作顯色劑，測定茶多酚的含量。

【關(guān)鍵詞】茶葉；茶多酚；酒石酸亞鐵

一、試驗(yàn)方法

吸取適量茶多酚標(biāo)準(zhǔn)溶液于25mL比色管中，然后依次加入4mL水和酒石酸亞鐵溶液5mL，充分混合，加pH值為7.5的磷酸鹽緩沖溶液定容至刻度，搖勻，放置20min，以試劑空白為參比，用1cm比色皿在545nm處測定吸光度。

二、結(jié)果與討論

1.最大吸收波長的選擇

取1.0mL茶多酚標(biāo)準(zhǔn)溶液，用1cm比色皿，以試劑空白為參比，波長在470～590nm范圍掃描吸收光譜，每隔10nm測一次吸光度，在最大吸收峰附近，每隔5nm測一次吸光度A，可知絡(luò)合物的最大吸收波長為545nm。

2.反應(yīng)溫度的影響

溫度對配合物的形成影響很顯著，當(dāng)反應(yīng)溫度高于30℃時吸光度變化比較大，因此本試驗(yàn)應(yīng)在室溫條件下進(jìn)行。

3.反應(yīng)時間的影響

取1.0mL茶多酚標(biāo)準(zhǔn)溶液，按試驗(yàn)方法操作，用1cm比色皿，以試劑空白為參比，依次測量放置5，10，20，30，60，……，120min，在選擇波長下測定吸光度A值，結(jié)果表明絡(luò)合物在顯色55min后吸光度變化較大。

4.緩沖體系及pH值的影響

使用不同pH值緩沖體系進(jìn)行試驗(yàn)，結(jié)果表明溶液在pH值為7.5時的吸光度較大且基本不變，試驗(yàn)選用pH值為7.5的磷酸鹽緩沖溶液。

5.酒石酸亞鐵的用量

僅改變酒石酸亞鐵的用量，按試驗(yàn)方法配制系列溶液，酒石酸亞鐵在5.0mL吸光度較大且較穩(wěn)定，選用加入酒石酸亞鐵量為5.0mL。

6.線性關(guān)系考察

在25mL比色管中依次加入0，0.5，1.5，2.0，2.5，3.0，3.5，4.0，4.5mL茶多酚標(biāo)準(zhǔn)溶液，按試驗(yàn)方法處理后進(jìn)行測定，其線性回歸方程為：A=7.67939c+0.00513，R=0.9997，結(jié)果表明，茶多酚在0.00～0.09mg·mL－1范圍內(nèi)，吸光度與質(zhì)量濃度呈良好的線性關(guān)系。

7.干擾性試驗(yàn)

（1）抗壞血酸、蔗糖和氨基酸干擾性試驗(yàn)。茶葉中的抗壞血酸，蔗糖和氨基酸可能對測定產(chǎn)生影響，經(jīng)用茶葉內(nèi)所含純品驗(yàn)證：對于質(zhì)量濃度為0.02mg/mL的茶多酚標(biāo)準(zhǔn)溶液，同倍的抗壞血酸，3倍的氨基酸，3倍的蔗糖對測定無干擾，一般情況下茶葉中的抗壞血酸，氨基酸和蔗糖的含量均小于此值，可以不考慮其干擾。

（2）咖啡因干擾性試驗(yàn)。取茶湯濾液20mL裝于125mL的分液漏斗中，加入10mL四氯化碳，振蕩2min，進(jìn)行咖啡因萃取，分出四氯化碳層，如此操作2次，棄去四氯化碳層．取剩余液1.0mL于25mL比色管中，按試驗(yàn)方法加入試劑，測定吸光度，平行3次，平均吸光度A為0.355，沒有除咖啡因時平均吸光度A為0.358．因此本試驗(yàn)可以不考慮咖啡因的干擾。

三、樣品的測定

1.茶湯的制備

（1）沸水浸提法。分別準(zhǔn)確稱取1.5g磨碎試樣3份于250mL錐形瓶中，加沸蒸餾水225mL，立即移人沸水浴中，浸提45min（每隔10min搖動1次）．浸提完畢后立即趁熱減壓過濾（加0.45μm濾膜）。濾液移入250mL容量瓶中，殘?jiān)蒙倭繜嵴麴s水洗滌2次，并將濾液移入上述容量瓶中，冷卻后用蒸餾水稀釋至刻度。

（2）茶多酚含量的測定。吸取茶湯試液1.0mL于25mL比色管中，然后依次加入4mL水和5mL酒石酸亞鐵溶液，充分混合，再加pH值為7.5的磷酸鹽緩沖溶液定容至刻度，搖勻，以試劑空白為參比，測定溶液在545nm處的吸光度。試驗(yàn)結(jié)果：沸水浸提法提取樣品中茶多酚質(zhì)量分?jǐn)?shù)為20.62%。

（3）加標(biāo)回收試驗(yàn)。準(zhǔn)確移取4號樣品1mL，分別加入不同質(zhì)量濃度的茶多酚標(biāo)準(zhǔn)品，按照2.6試驗(yàn)方法測定，每種樣品平行測定5次，其吸光度加標(biāo)前A=0.372，加標(biāo)后A=0.378，根據(jù)回收率公式計算出回收率，結(jié)果測得加標(biāo)回收率為98.40%，RSD為1.31%，采用本方法對茶葉茶多酚進(jìn)行定量分析是可行的，結(jié)果穩(wěn)定可靠．加標(biāo)回收率計算公式：（加標(biāo)試樣測定值－試樣測定值）/加標(biāo)量×100%。

2.乙酸乙酯提取法

稱取經(jīng)過磨碎的干茶葉沫1.5001g放入250mL錐形瓶，加入225mL90℃水中攪拌浸提45min（每隔10min搖1次），過濾，濾液移入125mL分液漏斗，先后用15mL的乙酸乙酯萃取3次，合并3次有機(jī)相于燒杯中，并用無水硫酸鈉干燥，減壓蒸餾（77℃），除去乙酸乙酯溶劑得白色粉末狀茶多酚，稱量為0.0302g，提取率為2.01%。

四、結(jié)語

茶多酚的最大吸收波長為545nm，茶多酚在0.00～0.09mg·mL－1范圍內(nèi)，吸光度與質(zhì)量濃度呈良好的線性關(guān)系。試驗(yàn)結(jié)果表明，同等條件下，超聲波法具有省時、成本低、操作簡便、提取率高、氧化損耗小、產(chǎn)品純度高等優(yōu)點(diǎn)，提取的效果優(yōu)于沸水浸提法和傳統(tǒng)有機(jī)溶劑法。

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