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    臨床血液檢驗(yàn)中不同細(xì)菌鑒定法結(jié)果及與藥敏結(jié)果的符合率對(duì)比評(píng)價(jià)

    2020-03-02 14:17:40許春來(lái)
    關(guān)鍵詞:革蘭符合率細(xì)菌

    許春來(lái)

    (江蘇省建湖縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科,江蘇 鹽城 224700)

    細(xì)菌作為一種原核微生物,具有結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單以及形態(tài)微小的特點(diǎn),但是肉眼無(wú)法直接觀察,因此,在臨床的診斷和治療過(guò)程中,細(xì)菌檢驗(yàn)占據(jù)十分重要的作用。近年來(lái),伴隨細(xì)菌檢驗(yàn)技術(shù)的發(fā)展不斷成熟和完善,臨床上對(duì)于細(xì)菌鑒定以及藥敏結(jié)果的分析要求隨之不斷提高,目前,臨床上對(duì)于細(xì)菌的鑒定方法和技術(shù)也相對(duì)較多,由于檢驗(yàn)操作的過(guò)程并不相同,加之容易受到主觀因素的影響,將會(huì)直接影響鑒定結(jié)果[1]。選取我院檢驗(yàn)科所接收的264例陽(yáng)性血液標(biāo)本,分別采取常規(guī)藥敏以及直接藥敏的檢驗(yàn)方法,觀察鑒定結(jié)果和藥敏結(jié)果的符合率。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料

    抽取我院2018年10月~2019年10月檢驗(yàn)科所接收的264例陽(yáng)性血液標(biāo)本,研究時(shí)間在,按照不同檢驗(yàn)方法分為常規(guī)組和直接組。其中,男142例,女122例,年齡16~82歲,平均(46.52±2.47)歲。納入標(biāo)準(zhǔn):①患者自愿參與研究;②簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn):①血液系統(tǒng)疾?。虎诓杉簶颖?8h內(nèi),并未用藥或者接受其他治療;③凝血功能障礙;④資料不全。

    1.2 檢驗(yàn)方法

    留取患者20 mL的血液樣本,分別放置含溶血素厭氧菌以及含樹脂需氧培養(yǎng)瓶中,并將其放置于全自動(dòng)血液培養(yǎng)儀器中。對(duì)于培養(yǎng)陽(yáng)性血標(biāo)本分別采取以下兩種方法進(jìn)行檢驗(yàn)。

    常規(guī)組采取常規(guī)藥敏試驗(yàn)的方法進(jìn)行檢驗(yàn)。將血液標(biāo)本放置于血平板、巧克力平板以及麥康凱平板培養(yǎng),分別放置于濃度為5%、溫度為35攝氏度的CO2環(huán)境中進(jìn)行培養(yǎng),持續(xù)20h。取菌落涂片后,進(jìn)行常規(guī)的革蘭染色,并根據(jù)檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行觸酶或者氧化酶試驗(yàn)。利用微生物鑒定儀,進(jìn)行細(xì)菌鑒定以及藥敏試驗(yàn)。具體操作步驟如下:使用無(wú)菌棉簽取菌落,并放置于鑒定管中,混合均勻后靜置10 s,出現(xiàn)氣泡則為鑒定失敗。使用比濁儀將菌液濃度調(diào)整為0.5麥?zhǔn)蠁挝唬号渲猛瓿珊笮柙?0 s內(nèi)完成操作。最后,將145 μL鑒定管菌懸液轉(zhuǎn)入藥敏管當(dāng)中,充分混勻。藥敏和鑒定板卡分別插入AST藥敏管以及鑒定管中。輸入最終鑒定以及藥敏結(jié)果,并將藥敏以及鑒定板放入儀器當(dāng)中,關(guān)閉艙門,完成檢驗(yàn)。

    直接組則采取直接藥敏試驗(yàn)的方法進(jìn)行檢驗(yàn)。使用無(wú)菌注射器抽取10 mL血液樣本,將其放置于無(wú)菌試管中,使用密度梯度離心法,按照每分鐘1500轉(zhuǎn)進(jìn)行離心處理,處理時(shí)間在5~10 min,收集上清液后,將其轉(zhuǎn)移到全新的離心管中,隨后按照每分鐘3000轉(zhuǎn)進(jìn)行離心處理,處理時(shí)間15m in,去除上清液后,進(jìn)行PBS洗滌和沉淀。此外,取20 μL懸液涂片進(jìn)行革蘭染色處理,將其倒置于顯微鏡下繼續(xù)觀察,鑒定細(xì)菌為陰性菌或者革蘭染色陽(yáng)性菌。最后,使用無(wú)菌棉簽取沉淀物,并利用全自動(dòng)細(xì)菌鑒定系統(tǒng)或者藥敏系統(tǒng)進(jìn)行細(xì)菌鑒定以及藥敏檢驗(yàn)。

    1.3 臨床觀察指標(biāo)

    分別采取以上兩種檢驗(yàn)方法后,比較兩組細(xì)菌鑒定結(jié)果和藥敏結(jié)果的符合率。

    1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

    觀察指標(biāo)確定后,將兩組研究對(duì)象的指標(biāo)數(shù)據(jù)通過(guò)SPSS 19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)進(jìn)行測(cè)評(píng),計(jì)數(shù)資料采用(n,%)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)描述,采用x2檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)推斷。當(dāng)P值小于0.05時(shí),表示兩組數(shù)據(jù)結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)參考價(jià)值。

    2 結(jié) 果

    2.1 細(xì)菌鑒定結(jié)果

    所有血液標(biāo)本經(jīng)過(guò)檢驗(yàn),陽(yáng)性檢出率為251例(95.08%)。直接組對(duì)于革蘭陽(yáng)性球菌的檢驗(yàn)符合率53例(20.08%),對(duì)于革蘭陰性桿菌的檢驗(yàn)符合率209例(79.17%),與常規(guī)組53例(20.08%)、209例(79.17%)相比并無(wú)明顯差異,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

    2.2 藥敏試驗(yàn)結(jié)果

    直接組對(duì)于革蘭陰性桿菌的檢驗(yàn)敏感率257例(97.35%)以及耐藥率256例(96.97%),對(duì)于革蘭陽(yáng)性球菌檢驗(yàn)敏感率258例(97.73)以及耐藥率259例(98.11%),與常規(guī)組256例(96.97%)、255例(96.59%)比較并無(wú)明顯差異,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

    3 討 論

    對(duì)于感染患者來(lái)說(shuō),體內(nèi)將會(huì)帶有耐藥性的細(xì)菌,此時(shí),若未進(jìn)一步增強(qiáng)細(xì)菌的耐藥性,將會(huì)導(dǎo)致患者病情加重,增加治療難度。因此,臨床上對(duì)于感染患者來(lái)說(shuō),進(jìn)行血液細(xì)菌學(xué)以及耐藥性的檢驗(yàn)對(duì)于臨床診斷和后續(xù)的用藥治療具有十分重要的作用。近年來(lái),伴隨抗生素濫用的問(wèn)題十分普遍,細(xì)菌耐藥性以及對(duì)于抗生素的敏感性隨之發(fā)生了巨大的變化,將會(huì)導(dǎo)致細(xì)菌檢驗(yàn)的難度增加,因此,臨床上尋求一種有效而又快速的檢驗(yàn)方法十分重要,進(jìn)而提高檢驗(yàn)質(zhì)量,為臨床的治療提供可靠的數(shù)據(jù)支持[2-3]。

    目前,臨床上通常采取基因鑒定以及表型鑒定兩種鑒定方法,表型鑒定法主要是根據(jù)生理變化、具體形態(tài)、蛋白質(zhì)以及細(xì)胞組分等方面的變化進(jìn)行細(xì)菌的鑒定,目前,對(duì)于大部分醫(yī)院來(lái)說(shuō),由于醫(yī)療條件有限,難以全面開展基因型鑒定。對(duì)于藥敏試驗(yàn)的檢驗(yàn)方法相對(duì)較多,如:稀釋法、擴(kuò)散法以及抗生素濃度梯度法,但是不同檢驗(yàn)方法的檢驗(yàn)結(jié)果也各不相同[4-5]。

    常規(guī)的檢驗(yàn)方法對(duì)于陽(yáng)性血液標(biāo)本的檢出率相對(duì)較高,但是藥敏試驗(yàn)以及細(xì)菌鑒定的速度相對(duì)緩慢,難以滿足臨床診斷和治療的需求[6]。經(jīng)過(guò)研究,得出以下結(jié)果:所有血液標(biāo)本經(jīng)過(guò)檢驗(yàn),陽(yáng)性檢出率為251例(95.08%)。直接組對(duì)于革蘭陽(yáng)性球菌的檢驗(yàn)符合率以及革蘭陰性桿菌的檢驗(yàn)符合率與常規(guī)組相比并無(wú)明顯差異,直接組對(duì)于革蘭陰性桿菌的檢驗(yàn)敏感率以及耐藥率以及革蘭陽(yáng)性球菌檢驗(yàn)敏感率與常規(guī)組比較并無(wú)明顯差異,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。因此可見(jiàn),直接藥敏試驗(yàn)的過(guò)程中,處于適當(dāng)?shù)臏囟认?,?duì)于抑菌環(huán)大小進(jìn)行藥敏試驗(yàn),在此期間無(wú)需進(jìn)行培菌培養(yǎng),使得鑒定更加快捷和方便,能夠?yàn)榕R床的診斷和后續(xù)的治療提供有效的依據(jù)[7-10]。對(duì)于病情并不嚴(yán)重以及復(fù)雜的患者來(lái)說(shuō),短時(shí)間并不會(huì)威脅患者生命安全,則可進(jìn)行常規(guī)檢查,通常情況下直接進(jìn)行藥敏試驗(yàn)將可以達(dá)到檢驗(yàn)要求,已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于臨床當(dāng)中。

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