丹參在云南昆明引種栽培研究△

方艷，王麗，王家金，陳美蘭，石亞娜，季鵬章，劉大會，3

(1. 云南省農業(yè)科學院 園藝作物研究所，云南 昆明 650205；2.云南省農業(yè)科學院 藥用植物研究所，云南 昆明 650205；3.道地藥材國家重點實驗室，北京 100700；4.中國中醫(yī)科學院 中藥資源中心，北京 100700)

丹參在云南昆明引種栽培研究△

方艷1，王麗2*，王家金2，陳美蘭3，4，石亞娜2，季鵬章2，劉大會2，3

(1. 云南省農業(yè)科學院 園藝作物研究所，云南 昆明 650205；2.云南省農業(yè)科學院 藥用植物研究所，云南 昆明 650205；3.道地藥材國家重點實驗室，北京 100700；4.中國中醫(yī)科學院 中藥資源中心，北京 100700)

目的：通過對云南昆明地區(qū)引種的陜西商洛丹參產量、外觀質量及藥效成分含量進行比較評價，為正品丹參在云南引種栽培及質量控制提供理論依據。方法：采用田間試驗和室內檢測方法對引種商洛丹參、云南野生丹參、對照原產地商洛丹參的農藝性狀、主要藥效成分含量進行比較分析。結果：云南昆明引種商洛丹參，根條粗壯、勻長，表面呈紅棕色，斷面較平整，氣微，味微苦澀，符合《中國藥典》2010年版對丹參藥材性狀描述之要求；昆明直播2年生和分根1年生丹參的丹參酮ⅡA和丹酚酸B含量均大幅高于《藥典》要求；昆明直播2年生和分根1年生丹參脂溶性成分和總丹參酮接近對照陜西商洛分根1年生丹參，丹酚酸B和水溶性總酚含量明顯高于對照陜西商洛分根1年生丹參；昆明野生滇丹參除二氫丹參酮、迷迭香酸、丹參素含量略高于引種和原產地丹參外，其他成分含量均較低，達不到《中國藥典》2010年版要求。結論：綜合比較云南引種丹參與云南野生滇丹參、對照原產地陜西商洛丹參外觀質量性狀及內在品質，正品丹參適合在云南昆明地區(qū)引種栽培。

丹參；引種栽培；丹參酮；丹酚酸B；外觀質量

丹參又名紫丹參，為唇形科植物丹參SalviamiltiorrhizaBge.的干燥根和根莖，始載于《神農本草經》，具有活血祛淤、通經止痛、清心除煩、涼血消癰功效，主要用于心血管疾病的治療[1-2]。丹參活性成分包括脂溶性的丹參酮類(丹參酮Ⅰ、丹參酮ⅡA、隱丹參酮、二氫丹參酮等)和水溶性的丹酚酸類(丹參素、迷迭香酸、丹酚酸等)兩大類[3-4]。丹參以前主要靠采挖野生藥材，隨著人們對丹參藥用價值認識的不斷提高，以及復方丹參片、復方丹參滴丸、丹參舒心片等中成藥及丹參注射液、丹紅注射液等新制劑對心血管疾病的顯著療效，野生丹參已很難滿足日益擴大的市場需求，現(xiàn)在很多地區(qū)開始大面積人工引種栽培，其中陜西商洛、山東臨沂、四川中江、河南方城等地為丹參藥材的道地產地和栽培主產地。丹參除了正品丹參外，還有滇丹參、大紫丹參、南丹參等近緣品種做替代品。其中，滇丹參、大紫丹參、南丹參的野生資源在云南分布廣泛，并常被作為丹參藥材替代品入藥使用。云南野生藥用丹參資源較為豐富，目前發(fā)現(xiàn)鼠尾草屬Salvia共有40余種(含變種、變型)的根及其根莖作丹參替代品使用，其中云南就有20種左右(含變種、變型)[5-7]，但云南一直沒有正品丹參的大面積人工栽培。隨著云南制藥工業(yè)和中醫(yī)藥事業(yè)的發(fā)展，對丹參藥材的年需求量逐年大幅增加，取消滇丹參等地方丹參藥材替代品，使用《中國藥典》正品丹參，保證用藥安全已是迫切所需。為此，筆者從陜西商洛天士力丹參GAP基地引種正品栽培丹參到云南昆明進行試種，調查了引種丹參的農藝性狀，并分析了引種丹參的有效成分含量，為正品丹參在云南昆明地區(qū)的引種栽培提供參考。

1 材料與方法

1.1引種地概況

引種地點為云南省農業(yè)科學院藥用植物研究所設在云南省昆明市官渡區(qū)小哨街道辦的試驗基地。試驗地地理信息：東經：102°58′，北緯：25°11′，海拔：1986m左右，田間坡度<5°。屬北緯亞熱帶地區(qū)，具有典型的溫帶氣候特點，年均氣溫14.5℃，最熱月(7月)平均氣溫19.7℃，最冷月(1月)平均氣溫7.5℃，日照數(shù)年均2445.6h，日照率56%，全年降水量約1031mm(其中5月至9月為雨季，10月至次年4月為旱季)，相對濕度為74%，全年無霜期均在240d以上。試驗地種植丹參之前為荒草地，土壤類型為紅壤，土壤基本理化性狀為：pH5.57，有機質5.06g·kg-1，全氮0.106%，全磷0.049%，全鉀2.31%，堿解氮61.00mg·kg-1，有效磷1.20mg·kg-1，速效鉀72.00mg·kg-1。

1.2引種種源和材料

供試丹參種子和種根來源于陜西省商洛市天津天士力丹參GAP種植基地，由西北農林科技大學梁宗鎖教授提供。云南滇丹參采自云南昆明梁王山，陜西商洛分根栽培1年生丹參采自陜西商洛市丹鳳和商州種植基地。

1.3引種種植方法

1.3.1種子直播法 于2010年5月中旬播種，穴播按行距60cm、穴距30cm打淺穴，每穴點種5～6粒，不覆土。7～10d丹參種子發(fā)芽出苗。1個月后進行間苗、定苗和補苗，每穴留2株丹參。試驗設置3個小區(qū)，每小區(qū)面積50m2。種植期間每年施用2次復合肥(N∶P2O5∶K2O=15∶15∶15)，施用量為150kg·hm-2，其他田間管理按照常規(guī)方式進行。

1.3.2分根栽培法 于2011年1月下旬，選擇色紅、無腐爛、發(fā)育充實、直徑0.7cm～1.0cm左右的1年生根條作分根繁殖的種根。在整平耙細的栽植地上，按行距40cm，株距30cm挖穴，穴深5～7cm，根頭向上，直立插入2段4～6cm的根段，覆蓋火灰土，再蓋2cm細土，壓實，澆水，并在畦面覆蓋秸稈保濕。1個月左右丹參開始發(fā)芽，每穴定苗1株。試驗設置3個小區(qū)，每小區(qū)面積50m2。種植期間每年施用2次復合肥(N∶P2O5∶K2O=15∶15∶15)，施用量為150kg·hm-2，其他田間管理按照常規(guī)方式進行。

1.4外觀質量及產量的測定

采用多點隨機混合取樣，每個小區(qū)分別選取長勢一致的12株丹參樣品。測量株高、根長、根條數(shù)、根粗、根重(干重)。株高和根長用直尺測量，莖粗、根粗(最大直徑)用游標卡尺測量，根重采用稱重法測定。采集的樣品在同一條件下陰干，裝入封口袋中密封冷藏、備用。公頃產量(干重)=單株總根重(干重)×種植密度。

1.5云南引種丹參及藥用成分的測定方法

1.5.1脂溶性丹參酮類成分測定 丹參酮ⅡA、隱丹參酮、丹參酮Ⅰ、二氫丹參酮含量測定按文獻[8]方法進行。

1.5.2水溶性成分測定 丹酚酸B、迷迭香酸含量測定按文獻[9]方法進行。

丹參素的測定為天士力集團企業(yè)內部標準。稱取1.0g丹參根樣品粉末，加入10mL堿液，于90℃水浴中煮1.5h，定容至8mL，離心，取上清液0.2mL加入無水乙醇4mL，超聲提取20min，離心，取上清液1mL，加入3mL無水乙醇，于紫外分光光度計281nm處比色，記錄吸光度值。根據標準曲線求得總丹參素含量。

2 結果與分析

2.1引種丹參的主要外觀質量性狀及產量表現(xiàn)

云南昆明引種丹參主要外觀質量性狀如表1所示。三種引種栽培方式丹參外觀上總體表現(xiàn)為根條長，沒有分枝，粗細均勻，呈圓柱形，外形美觀，較粗壯，上中部直徑在1cm以上；根表面紅棕色，具縱皺紋，外皮緊貼不易剝落；質堅實，易折斷，斷面較平整，灰白色，不空心，略呈角質樣；干燥后粉性足，氣微，味微苦澀。不同種植方式的丹參在農藝性狀上也存在顯著差異：直播2年生丹參根條數(shù)、根長、根粗、總根重均顯著高于直播1年生和分根1年生丹參，其中尤以總根重差異最為顯著，分別為直播1年生丹參的3.21倍，分根1年生丹參的1.81倍；分根1年生丹參在株高、單根重上表現(xiàn)較優(yōu)，分別為直播2年生丹參的1.26倍和1.11倍，為直播1年生丹參的2.85倍和3.41倍；直播1年生丹參由于生長時間短，上述各個外觀質量指標較低，但其根條數(shù)和根長兩指標較分根1年生栽培丹參高。

三種栽培方式丹參的單位面積產量(干重)相比，直播2年生丹參的畝產最高，可達10161±733.5kg·hm-2，其次為分根1年生的丹參4219.5±609kg·hm-2，產量最低為直播1年生丹參，僅為3168±633kg·hm-2。綜合以所述，直播1年生丹參雖然發(fā)根(單株根條數(shù))多，但生長時間短，根較細，造成單根重和總根重較低，所以畝產比較低；分根1年生丹參由于無性繁殖發(fā)根(單株根條數(shù))少，造成單株總根重不高，畝產也較低；而采用直播2年生丹參在植株和藥材外觀性狀較好，單株總根重較高，畝產也較高，為昆明地區(qū)比較適合推廣的栽培方式。

表1 引種丹參主要外觀質量性狀指標

2.2引種丹參的主要活性成分含量

2.2.1丹參酮類成分含量 云南昆明引種丹參和陜西商洛原產地丹參丹參酮類成分含量如表2所示。同原產地相比，昆明直播2年生丹參的隱丹參酮含量略低于原產地，丹參酮Ⅰ和二氫丹參酮接近原產地，而丹參酮ⅡA和總量是高于原產地，其中丹參酮ⅡA的含量較原產地提高了37.4%～43.2%。昆明分根1年生丹參的丹參酮Ⅰ含量略低于原產地，丹參酮ⅡA和二氫丹參酮接近或略高于原產地，隱丹參酮和總量是高于原產地。昆明直播1年生丹參的各丹參酮類成分含量除二氫丹參酮含量接近原產地外，其他各成分均低于原產地?！吨袊幍洹?010年版要求丹參藥材丹參酮ⅡA含量不少于0.20%，昆明直播2年生和分根1年生丹參的丹參酮ⅡA含量均大幅高于《中國藥典》2010年版要求。另外，昆明野生滇丹參的各丹參酮類成分含量除二氫丹參酮含量略高于引種和原產地丹參藥材外，其他成分含量較低，同昆明引種直播1年生丹參的含量差異不大。說明昆明引種正品丹參的丹參酮類成分要顯著優(yōu)于本地野生滇丹參。

表2 不同產地丹參的丹參酮類成分含量 /%

2.2.2 丹參酚酸類成分含量 云南昆明引種丹參和陜西商洛原產地丹參酚酸類成分含量如表3所示。同原產地相比，昆明直播2年生丹參的迷迭香酸含量低于原產地，丹參素略高于原產地，而丹酚酸B和三者總量遠高于原產地，其中丹酚酸B的含量較原產地提高了83.2%～103.3%。昆明分根1年生丹參的迷迭香酸含量也低于原產地，丹參素接近或略高于原產地，丹酚酸B和三者總量遠高于原產地。昆明直播1年生丹參的各丹參酮類成分含量除丹參素含量接近原產地外，其他各成分均低于原產地?！吨袊幍洹?010年版要求丹參藥材丹酚酸B含量不少于3.0%，昆明直播2年生和分根1年生丹參的丹酚酸B含量均大幅高于《中國藥典》2010年版要求。另外，昆明野生滇丹參的迷迭香酸、丹參素含量遠高于引種和原產地丹參藥材，而丹酚酸B含量較低，同昆明引種丹參的含量差異較大，且低于《中國藥典》2010年版要求。說明昆明引種正品丹參的丹酚酸B含量也是顯著優(yōu)于本地野生滇丹參。

表3 不同產地丹參的丹參酚酸類成分含量 /%

3 討論

通過對云南昆明地區(qū)引種的陜西商洛丹參的產量、外觀質量的比較評價發(fā)現(xiàn)，昆明地區(qū)引種丹參藥材性狀符合《中國藥典》2010版要求。與梁宗鎖等[10-13]研究相比，昆明地區(qū)引種種子直播2年生丹參在株高、根條數(shù)、根長、根粗、根重(干重)、產量方面接近陜西、山東、四川等丹參主產地。

通過對云南昆明地區(qū)引種陜西商洛丹參藥效成分含量的比較研究發(fā)現(xiàn)，昆明地區(qū)引種種子直播2年生丹參和引種分根栽培1年生丹參二氫丹參酮、丹酚酸B、水溶性成分總和顯著高于對照產地陜西商洛分根栽培1年生丹參。昆明地區(qū)引種種子直播2年生丹參和引種分根栽培1年生丹參有效成分丹參酮Ⅰ、隱丹參酮、丹參酮ⅡA、丹參酮總量、丹參素與對照產地陜西商洛分根栽培1年生丹參接近。以丹酚酸B和丹參酮ⅡA為評價指標，昆明地區(qū)引種種子直播2年生丹參和引種分根栽培1年生丹參有效成分含量較高，均符合《中國藥典》2010版要求。這也說明正品丹參可以在云南昆明地區(qū)引種栽培。

通過對云南昆明地區(qū)引種陜西商洛丹參藥效成分含量與文獻[14]報道各地栽培丹參藥效成分含量的比較研究發(fā)現(xiàn)，不同產地丹參藥材及栽培品種藥效成分差異十分顯著；云南昆明地區(qū)引種陜西商洛正品丹參，其有效成分丹參酮ⅡA明顯優(yōu)于四川中江、陜西西安、山東、安微、河北、上海崇明等地的栽培丹參。

綜合考慮畝產和有效藥用成分含量等因素，昆明地區(qū)引種陜西商洛直播2年生丹參明顯優(yōu)于直播1年生丹參，故在昆明地區(qū)應采用引種種子直播方法種植丹參2年。昆明地區(qū)引種分根栽培1年生丹參在有效成分含量，特別是在脂溶性成分含量上有較好的表現(xiàn)，但其畝產比較低，如果在昆明地區(qū)引種采用此方法，需要提高種植密度。

引種種植方式、生長年限對丹參主要外觀質量、產量和活性成分具有較大影響[15-17]。因此云南地區(qū)在引種栽培丹參時應加強對引種種植環(huán)境(如土質、地勢、氣候等)，引種栽培模式和丹參生長年限與有效成分累積、產量等進行深入研究，以保證藥品質量，以確保臨床療效。

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StudiesonIntroductionandCultivationofSalviamiltiorrhizainKunming

FANG Yan1，WANG Li2*，WANG Jiajin2，CHEN Meilan3，4，SHI Yana2，JI Pengzhang2，LIU Dahui2，3

(1.Horticultural Research Institute，Yunnan Academy of Agricultural Sciences，Kunming 650205，China；2.Institute of Medicinal Plants，Yunnan Academy of Agricultural Sciences，Kunming 650205，China；3.State Key Laboratory of Dao-di Herbs，National Resource Center for Chinese Materia Medica，China Academy of Chinese Medical Sciences，Beijing 100700，China；4.National Resource Center for Chinese Medica，China Academy of Chinese Medical Sciences，Beijing 100700，China)

Objective：By analyzing and comparing the yield，appearance quality and effective components ofSalviamiltiorrhizawhich are introduced in Kunming and cultivated in Shangluo to provide theoretical basis forS.miltiorrhizaintroduction cultivation in Kunming.Methods：The combination method of field experiment and laboratory analysis was used to determine the yield，appearance quality and effective components ofS.miltiorrhiza.Results：The medicinal properties of Yunnan introduction cultivationS.miltiorrhizawere in accordance with ‘Chinese Pharmacopoeia(ChP)’ 2010 edition requirements.Yunnan introduction cultivation split root one-year-old and living two-year-oldS.miltiorrhiza，their salvianolic acid B and tanshinone ⅡAwere in accordance with ChP 2010 edition requirements.Yunnan introduction cultivation split root one-year-old and living two-year-oldS.miltiorrhiza，their fat-soluble and total tanshinone were content close to comparison Shangluo producing area split root one-year-oldS.miltiorrhiza，but the content of salvianolic acid B and the total water-soluble were phenolic significantly higher than those in Shangluo producing area.WildS.yunnanensiseffective components content is lower than Yunnan introduction cultivationS.miltiorrhiza，except dihydrotanshinone，rosemarinic acid，danshensu.Conclusion：GenuineSalviamiltiorrhizacan be introduced and cultivated in Kunming.

Salviamiltiorrhiza；Introduction；Effective components；Appearance quality

國家科技部滇池水專項子課題“湖濱退耕區(qū)面源污染綜合控制技術與工程示范”(2012ZX07102-003-03)；中央本級重大增減支項目“名貴中藥資源可持續(xù)利用能力建設”(2060302)，國家自然科學基金項目(81130070)

*

王麗，Tel：(0871)65033441，E-mail：lwang20@163.com

10.13313/j.issn.1673-4890.2014.10.011

2014-04-19)