短梗五加果實(shí)中異嗪皮啶的提取工藝研究

郝婧瑋+趙玥琪+孫曉薇+肖春雷+柴軍紅+宛春雷

摘要：分別以不同的提取時(shí)間、料液比、提取次數(shù)、提取溶劑為因素，考察各單因素對異嗪皮啶提取率的影響。保持其他條件不變的情況下，提取溶劑為30%乙醇溶液，料液比達(dá)到1∶10的條件下，40分鐘，提取2次提取率達(dá)到極佳狀態(tài)，此時(shí)提取率為4.2179%，在5克的短梗五加果粉碎樣品中，異嗪皮啶的含量高達(dá)0.21克。

關(guān)鍵詞：異嗪皮啶；HPLC；短梗五加果

項(xiàng)目支持：牡丹江師范學(xué)院校級項(xiàng)目 短梗五加果實(shí)高效利用工藝研究

項(xiàng)目編號：QY201219

中圖分類號：R284.1 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號： 1674-0432（2014）-13-29-21短梗五加及其花色苷

短梗五加， 五加科五加屬落葉灌木或小喬木植物[1]。其嫩莖俗稱“刺拐棒”、“綠參”[2]。特別是患有心肺功能不全的病人, 偏愛選食“刺拐棒”[3]。近年來，國內(nèi)外對短梗五加的化學(xué)成分以及藥理成分進(jìn)行了廣泛的研究，證明它們具有較高的藥用價(jià)值[4]。異嗪皮啶是短梗五加的次生代謝產(chǎn)物之一[5]。具有明顯的鎮(zhèn)靜安神作用，不僅使入睡時(shí)間明顯縮短，而且持續(xù)時(shí)間也顯著延長，能有效改善睡眠質(zhì)量，異嗪皮啶同時(shí)還具有明顯的抗炎作用[6]?，F(xiàn)在國內(nèi)常用的含有異嗪皮啶的藥物，多是由刺五加的根提取，對刺五加資源的迫害較大，本實(shí)驗(yàn)將刺五加的根換成短梗五加果實(shí)，對環(huán)境資源影響較小。更有利于資源的再生[7]。

2 材料與方法

2.1 實(shí)驗(yàn)用品

短梗五加果實(shí)、異嗪皮啶對照品、色譜純乙腈、電子天平、高效液相色譜儀、微型植物粉碎機(jī)、超聲波清洗器、抽濾機(jī) 。

2.2 實(shí)驗(yàn)方法

2.2.1短梗五加的預(yù)處理 經(jīng)過科技烘干的短梗五加果實(shí)，利用微型植物粉碎機(jī)粉碎，每份樣品稱取短梗五加果實(shí)5克。

2.2.2提取時(shí)間 每份樣品按照提取溶劑為水，料液比是1∶10，在每個(gè)時(shí)間點(diǎn)分別取樣1毫升，分別在40℃下超聲提取。

2.2.3料液比 每份樣品均為粉碎的五加果實(shí)5克，按照提取溶劑為水，提取時(shí)間30 分鐘，分別在40℃下超聲提取。

2.2.4提取溶劑 每份樣品均為粉碎的五加果實(shí)5克，按照料液比1∶10，提取時(shí)間30分鐘，分別在40℃下超聲提取。

2.2.5提取次數(shù) 每份樣品均為粉碎的五加果實(shí)5克，按照提取溶劑為水、料液比是1∶10，提取時(shí)間是30分鐘，分別在40℃下超聲提取。

2.3異嗪皮啶測定的色譜條件

高效液相色譜儀，HiQ SiL C18V色譜柱，乙腈-水=2∶8，加入0.1%的乙酸，等度洗脫，洗脫流速為1.0毫升/分鐘，柱溫30℃，檢測波長245納米，進(jìn)樣體積變化。在上述色譜條件下，異秦皮啶保留時(shí)間10分鐘出峰。標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)樣，計(jì)算異嗪皮啶的含量。

異秦皮啶標(biāo)準(zhǔn)曲線：y = 20420126.0494 x + 139160.1741 （R2 = 0.9916）

3 結(jié)果與分析

3.1提取時(shí)間對異嗪皮啶含量的影響

在40~90分鐘的提取率無太大變化，這段時(shí)間內(nèi)短梗五加果實(shí)中的異嗪皮啶含量釋放大致相同，在40分鐘左右異嗪皮啶含量達(dá)到最高。為了縮短生產(chǎn)工藝的周期，最佳時(shí)間為提取40分鐘。

3.2料液比對異嗪皮啶提取率的影響

如圖3-1所示，料液比1∶10提取率最高。由圖可看出，料液比超過1∶10時(shí)，提取率反而隨著提取溶劑體積的增加而下降。

3.3提取溶劑對異嗪皮啶提取率的影響

由圖3-2可以看出，乙醇含量為30%時(shí)提取率最高，有機(jī)溶劑和水共同決定著異嗪皮啶的提取率，只有在兩者達(dá)到最佳配比的時(shí)候，提取率最高。

3.4提取次數(shù)對異嗪皮啶含量的影響

由圖3-3可知，提取2次，基本提取完全，以后雖然有提高，但是變化不大，為了縮短生產(chǎn)工藝的周期，2為最佳提取次數(shù)。參考文獻(xiàn) [1]陳柏利,孫秀芳,陳麗君,薛志友. 培技術(shù)藥用植物刺五加栽[J]. 中國農(nóng)技推廣. 2003,(04). [2]張素梅,王煥偉,劉亞芹.高效液相色譜法測定更年康片中異嗪皮定含量[J] .沈陽藥科大學(xué)學(xué)報(bào), 1996, 13(3) :216-217. [3]TAISUKE YAMAZAKI, SHIGEHIRO SHIMOSAKA, MASAYUKI SAKURAI, et al. Anti-inflammatory effects of a major component of Acanthopanax senticosus Harms, isofraxidin [J]. J Electrophoresis, 2004, 48(2): 55-58. [4]DAVYDOV M, KRIKORIAN A D. Eleutherococcus senticosus (Rupr. & Maxim.) Maxim. (Araliaceae) as an adaptogen: a closer look [J]. J Ethnopharm, 2000, 72(3): 345- 393. [5]葉水泉.神通廣大的刺五加[ J] .東方藥膳, 2007,( 3) : 112. [6] LIU Q H, ZHU L, LI W L. The chemistry and pharmacology research of active composition from Acanthopanax senticosus (Rupr. et Maxim.) Harms [J]. Lishzhen Med Mater Med Res. [7]曾里,夏之寧. 超聲波和微波對中藥提取的促進(jìn)和影響[J]. 化學(xué)研究與應(yīng)用,2002，14(3):245-248. [8]劉起華,朱禮,李文蘭.刺五加主要活性成分化學(xué)與藥理研究[J].時(shí)珍國醫(yī)國藥,1999，10(4): 305-306. 作者簡介：郝婧瑋，碩士學(xué)歷，牡丹江師范學(xué)院生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，助教，研究方向：植物化學(xué)與植物藥。

摘要：分別以不同的提取時(shí)間、料液比、提取次數(shù)、提取溶劑為因素，考察各單因素對異嗪皮啶提取率的影響。保持其他條件不變的情況下，提取溶劑為30%乙醇溶液，料液比達(dá)到1∶10的條件下，40分鐘，提取2次提取率達(dá)到極佳狀態(tài)，此時(shí)提取率為4.2179%，在5克的短梗五加果粉碎樣品中，異嗪皮啶的含量高達(dá)0.21克。

關(guān)鍵詞：異嗪皮啶；HPLC；短梗五加果

項(xiàng)目支持：牡丹江師范學(xué)院校級項(xiàng)目 短梗五加果實(shí)高效利用工藝研究

項(xiàng)目編號：QY201219

中圖分類號：R284.1 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號： 1674-0432（2014）-13-29-21短梗五加及其花色苷

短梗五加， 五加科五加屬落葉灌木或小喬木植物[1]。其嫩莖俗稱“刺拐棒”、“綠參”[2]。特別是患有心肺功能不全的病人, 偏愛選食“刺拐棒”[3]。近年來，國內(nèi)外對短梗五加的化學(xué)成分以及藥理成分進(jìn)行了廣泛的研究，證明它們具有較高的藥用價(jià)值[4]。異嗪皮啶是短梗五加的次生代謝產(chǎn)物之一[5]。具有明顯的鎮(zhèn)靜安神作用，不僅使入睡時(shí)間明顯縮短，而且持續(xù)時(shí)間也顯著延長，能有效改善睡眠質(zhì)量，異嗪皮啶同時(shí)還具有明顯的抗炎作用[6]?，F(xiàn)在國內(nèi)常用的含有異嗪皮啶的藥物，多是由刺五加的根提取，對刺五加資源的迫害較大，本實(shí)驗(yàn)將刺五加的根換成短梗五加果實(shí)，對環(huán)境資源影響較小。更有利于資源的再生[7]。

2 材料與方法

2.1 實(shí)驗(yàn)用品

短梗五加果實(shí)、異嗪皮啶對照品、色譜純乙腈、電子天平、高效液相色譜儀、微型植物粉碎機(jī)、超聲波清洗器、抽濾機(jī) 。

2.2 實(shí)驗(yàn)方法

2.2.1短梗五加的預(yù)處理 經(jīng)過科技烘干的短梗五加果實(shí)，利用微型植物粉碎機(jī)粉碎，每份樣品稱取短梗五加果實(shí)5克。

2.2.2提取時(shí)間 每份樣品按照提取溶劑為水，料液比是1∶10，在每個(gè)時(shí)間點(diǎn)分別取樣1毫升，分別在40℃下超聲提取。

2.2.3料液比 每份樣品均為粉碎的五加果實(shí)5克，按照提取溶劑為水，提取時(shí)間30 分鐘，分別在40℃下超聲提取。

2.2.4提取溶劑 每份樣品均為粉碎的五加果實(shí)5克，按照料液比1∶10，提取時(shí)間30分鐘，分別在40℃下超聲提取。

2.2.5提取次數(shù) 每份樣品均為粉碎的五加果實(shí)5克，按照提取溶劑為水、料液比是1∶10，提取時(shí)間是30分鐘，分別在40℃下超聲提取。

2.3異嗪皮啶測定的色譜條件

高效液相色譜儀，HiQ SiL C18V色譜柱，乙腈-水=2∶8，加入0.1%的乙酸，等度洗脫，洗脫流速為1.0毫升/分鐘，柱溫30℃，檢測波長245納米，進(jìn)樣體積變化。在上述色譜條件下，異秦皮啶保留時(shí)間10分鐘出峰。標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)樣，計(jì)算異嗪皮啶的含量。

異秦皮啶標(biāo)準(zhǔn)曲線：y = 20420126.0494 x + 139160.1741 （R2 = 0.9916）

3 結(jié)果與分析

3.1提取時(shí)間對異嗪皮啶含量的影響

在40~90分鐘的提取率無太大變化，這段時(shí)間內(nèi)短梗五加果實(shí)中的異嗪皮啶含量釋放大致相同，在40分鐘左右異嗪皮啶含量達(dá)到最高。為了縮短生產(chǎn)工藝的周期，最佳時(shí)間為提取40分鐘。

3.2料液比對異嗪皮啶提取率的影響

如圖3-1所示，料液比1∶10提取率最高。由圖可看出，料液比超過1∶10時(shí)，提取率反而隨著提取溶劑體積的增加而下降。

3.3提取溶劑對異嗪皮啶提取率的影響

由圖3-2可以看出，乙醇含量為30%時(shí)提取率最高，有機(jī)溶劑和水共同決定著異嗪皮啶的提取率，只有在兩者達(dá)到最佳配比的時(shí)候，提取率最高。

3.4提取次數(shù)對異嗪皮啶含量的影響

由圖3-3可知，提取2次，基本提取完全，以后雖然有提高，但是變化不大，為了縮短生產(chǎn)工藝的周期，2為最佳提取次數(shù)。參考文獻(xiàn) [1]陳柏利,孫秀芳,陳麗君,薛志友. 培技術(shù)藥用植物刺五加栽[J]. 中國農(nóng)技推廣. 2003,(04). [2]張素梅,王煥偉,劉亞芹.高效液相色譜法測定更年康片中異嗪皮定含量[J] .沈陽藥科大學(xué)學(xué)報(bào), 1996, 13(3) :216-217. [3]TAISUKE YAMAZAKI, SHIGEHIRO SHIMOSAKA, MASAYUKI SAKURAI, et al. Anti-inflammatory effects of a major component of Acanthopanax senticosus Harms, isofraxidin [J]. J Electrophoresis, 2004, 48(2): 55-58. [4]DAVYDOV M, KRIKORIAN A D. Eleutherococcus senticosus (Rupr. & Maxim.) Maxim. (Araliaceae) as an adaptogen: a closer look [J]. J Ethnopharm, 2000, 72(3): 345- 393. [5]葉水泉.神通廣大的刺五加[ J] .東方藥膳, 2007,( 3) : 112. [6] LIU Q H, ZHU L, LI W L. The chemistry and pharmacology research of active composition from Acanthopanax senticosus (Rupr. et Maxim.) Harms [J]. Lishzhen Med Mater Med Res. [7]曾里,夏之寧. 超聲波和微波對中藥提取的促進(jìn)和影響[J]. 化學(xué)研究與應(yīng)用,2002，14(3):245-248. [8]劉起華,朱禮,李文蘭.刺五加主要活性成分化學(xué)與藥理研究[J].時(shí)珍國醫(yī)國藥,1999，10(4): 305-306. 作者簡介：郝婧瑋，碩士學(xué)歷，牡丹江師范學(xué)院生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，助教，研究方向：植物化學(xué)與植物藥。

摘要：分別以不同的提取時(shí)間、料液比、提取次數(shù)、提取溶劑為因素，考察各單因素對異嗪皮啶提取率的影響。保持其他條件不變的情況下，提取溶劑為30%乙醇溶液，料液比達(dá)到1∶10的條件下，40分鐘，提取2次提取率達(dá)到極佳狀態(tài)，此時(shí)提取率為4.2179%，在5克的短梗五加果粉碎樣品中，異嗪皮啶的含量高達(dá)0.21克。

關(guān)鍵詞：異嗪皮啶；HPLC；短梗五加果

項(xiàng)目支持：牡丹江師范學(xué)院校級項(xiàng)目 短梗五加果實(shí)高效利用工藝研究

項(xiàng)目編號：QY201219

中圖分類號：R284.1 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號： 1674-0432（2014）-13-29-21短梗五加及其花色苷

短梗五加， 五加科五加屬落葉灌木或小喬木植物[1]。其嫩莖俗稱“刺拐棒”、“綠參”[2]。特別是患有心肺功能不全的病人, 偏愛選食“刺拐棒”[3]。近年來，國內(nèi)外對短梗五加的化學(xué)成分以及藥理成分進(jìn)行了廣泛的研究，證明它們具有較高的藥用價(jià)值[4]。異嗪皮啶是短梗五加的次生代謝產(chǎn)物之一[5]。具有明顯的鎮(zhèn)靜安神作用，不僅使入睡時(shí)間明顯縮短，而且持續(xù)時(shí)間也顯著延長，能有效改善睡眠質(zhì)量，異嗪皮啶同時(shí)還具有明顯的抗炎作用[6]?，F(xiàn)在國內(nèi)常用的含有異嗪皮啶的藥物，多是由刺五加的根提取，對刺五加資源的迫害較大，本實(shí)驗(yàn)將刺五加的根換成短梗五加果實(shí)，對環(huán)境資源影響較小。更有利于資源的再生[7]。

2 材料與方法

2.1 實(shí)驗(yàn)用品

短梗五加果實(shí)、異嗪皮啶對照品、色譜純乙腈、電子天平、高效液相色譜儀、微型植物粉碎機(jī)、超聲波清洗器、抽濾機(jī) 。

2.2 實(shí)驗(yàn)方法

2.2.1短梗五加的預(yù)處理 經(jīng)過科技烘干的短梗五加果實(shí)，利用微型植物粉碎機(jī)粉碎，每份樣品稱取短梗五加果實(shí)5克。

2.2.2提取時(shí)間 每份樣品按照提取溶劑為水，料液比是1∶10，在每個(gè)時(shí)間點(diǎn)分別取樣1毫升，分別在40℃下超聲提取。

2.2.3料液比 每份樣品均為粉碎的五加果實(shí)5克，按照提取溶劑為水，提取時(shí)間30 分鐘，分別在40℃下超聲提取。

2.2.4提取溶劑 每份樣品均為粉碎的五加果實(shí)5克，按照料液比1∶10，提取時(shí)間30分鐘，分別在40℃下超聲提取。

2.2.5提取次數(shù) 每份樣品均為粉碎的五加果實(shí)5克，按照提取溶劑為水、料液比是1∶10，提取時(shí)間是30分鐘，分別在40℃下超聲提取。

2.3異嗪皮啶測定的色譜條件

高效液相色譜儀，HiQ SiL C18V色譜柱，乙腈-水=2∶8，加入0.1%的乙酸，等度洗脫，洗脫流速為1.0毫升/分鐘，柱溫30℃，檢測波長245納米，進(jìn)樣體積變化。在上述色譜條件下，異秦皮啶保留時(shí)間10分鐘出峰。標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)樣，計(jì)算異嗪皮啶的含量。

異秦皮啶標(biāo)準(zhǔn)曲線：y = 20420126.0494 x + 139160.1741 （R2 = 0.9916）

3 結(jié)果與分析

3.1提取時(shí)間對異嗪皮啶含量的影響

在40~90分鐘的提取率無太大變化，這段時(shí)間內(nèi)短梗五加果實(shí)中的異嗪皮啶含量釋放大致相同，在40分鐘左右異嗪皮啶含量達(dá)到最高。為了縮短生產(chǎn)工藝的周期，最佳時(shí)間為提取40分鐘。

3.2料液比對異嗪皮啶提取率的影響

如圖3-1所示，料液比1∶10提取率最高。由圖可看出，料液比超過1∶10時(shí)，提取率反而隨著提取溶劑體積的增加而下降。

3.3提取溶劑對異嗪皮啶提取率的影響

由圖3-2可以看出，乙醇含量為30%時(shí)提取率最高，有機(jī)溶劑和水共同決定著異嗪皮啶的提取率，只有在兩者達(dá)到最佳配比的時(shí)候，提取率最高。

3.4提取次數(shù)對異嗪皮啶含量的影響

由圖3-3可知，提取2次，基本提取完全，以后雖然有提高，但是變化不大，為了縮短生產(chǎn)工藝的周期，2為最佳提取次數(shù)。參考文獻(xiàn) [1]陳柏利,孫秀芳,陳麗君,薛志友. 培技術(shù)藥用植物刺五加栽[J]. 中國農(nóng)技推廣. 2003,(04). [2]張素梅,王煥偉,劉亞芹.高效液相色譜法測定更年康片中異嗪皮定含量[J] .沈陽藥科大學(xué)學(xué)報(bào), 1996, 13(3) :216-217. [3]TAISUKE YAMAZAKI, SHIGEHIRO SHIMOSAKA, MASAYUKI SAKURAI, et al. Anti-inflammatory effects of a major component of Acanthopanax senticosus Harms, isofraxidin [J]. J Electrophoresis, 2004, 48(2): 55-58. [4]DAVYDOV M, KRIKORIAN A D. Eleutherococcus senticosus (Rupr. & Maxim.) Maxim. (Araliaceae) as an adaptogen: a closer look [J]. J Ethnopharm, 2000, 72(3): 345- 393. [5]葉水泉.神通廣大的刺五加[ J] .東方藥膳, 2007,( 3) : 112. [6] LIU Q H, ZHU L, LI W L. The chemistry and pharmacology research of active composition from Acanthopanax senticosus (Rupr. et Maxim.) Harms [J]. Lishzhen Med Mater Med Res. [7]曾里,夏之寧. 超聲波和微波對中藥提取的促進(jìn)和影響[J]. 化學(xué)研究與應(yīng)用,2002，14(3):245-248. [8]劉起華,朱禮,李文蘭.刺五加主要活性成分化學(xué)與藥理研究[J].時(shí)珍國醫(yī)國藥,1999，10(4): 305-306. 作者簡介：郝婧瑋，碩士學(xué)歷，牡丹江師范學(xué)院生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，助教，研究方向：植物化學(xué)與植物藥。