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    PCR技術(shù)在高中生物中的重要作用

    2014-09-22 06:55:39張忠燕
    中學教學參考·理科版 2014年8期
    關(guān)鍵詞:特斯里斯科學態(tài)度

    張忠燕

    PCR,即聚合酶鏈式反應(yīng)的縮寫,是由美國“西特斯”(Cetus)生物技術(shù)公司的穆里斯(K.Mullis)等人于1988年發(fā)明的一種DNA(包括RNA)體外擴增技術(shù),能在短時間內(nèi)將極微量的特定核酸片段精確復(fù)制出成百萬份的拷貝。在PCR技術(shù)問世前,要獲得一個靶基因,必須依賴克隆技術(shù),以活的生物體作為復(fù)制遺傳物質(zhì)的載體,先建立基因組文庫,再從成千上萬的菌落中通過Southernblot雜交篩選出含有靶基因的克隆,既費時又費錢,特別是真核基因的克隆難度更大。而PCR技術(shù)在擺脫活體依賴性方面前進了一大步,基因操作效率及靈活性等方面也明顯提高,使微量的核酸操作變得簡單易行。

    在誕生后二十幾年的時間里,PCR技術(shù)因其實用性和極強的生命力,從無到有,從只能單純擴增已知兩端序列之間的DNA片段,發(fā)展到應(yīng)用于各個領(lǐng)域的幾十種PCR方法,在生物學、基礎(chǔ)醫(yī)學、法醫(yī)學、考古學等領(lǐng)域作出突出貢獻。這一推動生命科學和社會迅猛發(fā)展的新技術(shù)必然影響到學校教育。高中生物教材與時俱進,選用“利用PCR技術(shù)擴增目的基因”一節(jié),介紹PCR的反應(yīng)原理及操作,力圖表達生命科學前沿知識,引導(dǎo)學生關(guān)注現(xiàn)代生物技術(shù)新進展和學科發(fā)展方向,增強科技創(chuàng)新意識,發(fā)展學生的思維能力?,F(xiàn)筆者談?wù)凱CR技術(shù)在高中生物中的重要作用。

    一、PCR技術(shù)的發(fā)明是培養(yǎng)學生科學態(tài)度和樹立學生正確價值觀的良好素材

    PCR的產(chǎn)生傾注了發(fā)明者穆里斯的全部心力。1983年春天,穆里斯前往鄉(xiāng)間度周末,他驅(qū)車行駛在蜿蜒的州際高速公路上,靈感閃現(xiàn),孕育出PCR技術(shù)的原型,即DNA分子能在適當條件下擺脫染色體結(jié)構(gòu)的束縛并獲得指數(shù)擴增。穆里斯對這一新奇念頭充滿熱切希望,回到西特斯,穆里斯做了關(guān)于先有技術(shù)的文獻檢索,沒找到任何有價值的、有助于確定他所需要的實驗參數(shù)的技術(shù)文獻,但他堅信自己所走的是一條創(chuàng)新的道路,于是堅持不懈地對此設(shè)想進行了大量實驗。開始時,他使用大腸桿菌DNA聚合酶Ⅰ的Klenow片段擴增目的基因,因該酶不耐熱,每次加熱變性DNA后需重新補加,而多份標本的操作更是耗時、費力且易出錯,所以使得PCR技術(shù)在當時成了一種笨拙且中看不中用的實驗室方法。

    穆里斯苦苦思索,他曾寫道:“我當然不知道什么是‘適當條件,也不知道自己所選擇的條件是不是發(fā)生PCR所必需的。我能做的只是不斷改進實驗方法和程序,直到擴增反應(yīng)能夠順利進行。在沒有獲得確切的DNA擴增結(jié)果前,我完全是在黑暗中摸索。只要有哪怕一丁點兒的擴增,我就能夠通過改變部分實驗參數(shù)的方法迅速優(yōu)化反應(yīng)體系?!闭悄吕锼沟膱?zhí)著和敏銳,努力不懈探索未知,使得耐熱的TaqDNA聚合酶應(yīng)用于PCR反應(yīng),實驗條件逐步成熟完善,繼而第一臺PCR熱循環(huán)儀實現(xiàn)了該技術(shù)的自動化,促成PCR技術(shù)迅速發(fā)展和廣泛應(yīng)用。

    杰出生物學家穆里斯的卓越事跡對培養(yǎng)學生的科學態(tài)度和樹立學生正確的價值觀具有重要意義。在學習PCR技術(shù)發(fā)明的過程中,學生必然為科學家堅忍不拔的毅力、精益求精的勞作、勇敢超越的精神、舉世矚目的成就所震撼,由此轉(zhuǎn)化為科學的態(tài)度和正確的價值觀。同時,PCR技術(shù)發(fā)明的過程富含科學家的心路歷程、科學發(fā)現(xiàn)的奇聞軼事,因而在培養(yǎng)學生的興趣、好奇心、求知欲等方面具有極其重要的價值。并且,科學探索的艱難和曲折及科學發(fā)展承受的誤區(qū)和歧義,會引發(fā)學生理性反思和審慎思考,進而培養(yǎng)學生不屈的進取精神、樂觀的生活態(tài)度及對真理的追求與熱愛。endprint

    PCR,即聚合酶鏈式反應(yīng)的縮寫,是由美國“西特斯”(Cetus)生物技術(shù)公司的穆里斯(K.Mullis)等人于1988年發(fā)明的一種DNA(包括RNA)體外擴增技術(shù),能在短時間內(nèi)將極微量的特定核酸片段精確復(fù)制出成百萬份的拷貝。在PCR技術(shù)問世前,要獲得一個靶基因,必須依賴克隆技術(shù),以活的生物體作為復(fù)制遺傳物質(zhì)的載體,先建立基因組文庫,再從成千上萬的菌落中通過Southernblot雜交篩選出含有靶基因的克隆,既費時又費錢,特別是真核基因的克隆難度更大。而PCR技術(shù)在擺脫活體依賴性方面前進了一大步,基因操作效率及靈活性等方面也明顯提高,使微量的核酸操作變得簡單易行。

    在誕生后二十幾年的時間里,PCR技術(shù)因其實用性和極強的生命力,從無到有,從只能單純擴增已知兩端序列之間的DNA片段,發(fā)展到應(yīng)用于各個領(lǐng)域的幾十種PCR方法,在生物學、基礎(chǔ)醫(yī)學、法醫(yī)學、考古學等領(lǐng)域作出突出貢獻。這一推動生命科學和社會迅猛發(fā)展的新技術(shù)必然影響到學校教育。高中生物教材與時俱進,選用“利用PCR技術(shù)擴增目的基因”一節(jié),介紹PCR的反應(yīng)原理及操作,力圖表達生命科學前沿知識,引導(dǎo)學生關(guān)注現(xiàn)代生物技術(shù)新進展和學科發(fā)展方向,增強科技創(chuàng)新意識,發(fā)展學生的思維能力?,F(xiàn)筆者談?wù)凱CR技術(shù)在高中生物中的重要作用。

    一、PCR技術(shù)的發(fā)明是培養(yǎng)學生科學態(tài)度和樹立學生正確價值觀的良好素材

    PCR的產(chǎn)生傾注了發(fā)明者穆里斯的全部心力。1983年春天,穆里斯前往鄉(xiāng)間度周末,他驅(qū)車行駛在蜿蜒的州際高速公路上,靈感閃現(xiàn),孕育出PCR技術(shù)的原型,即DNA分子能在適當條件下擺脫染色體結(jié)構(gòu)的束縛并獲得指數(shù)擴增。穆里斯對這一新奇念頭充滿熱切希望,回到西特斯,穆里斯做了關(guān)于先有技術(shù)的文獻檢索,沒找到任何有價值的、有助于確定他所需要的實驗參數(shù)的技術(shù)文獻,但他堅信自己所走的是一條創(chuàng)新的道路,于是堅持不懈地對此設(shè)想進行了大量實驗。開始時,他使用大腸桿菌DNA聚合酶Ⅰ的Klenow片段擴增目的基因,因該酶不耐熱,每次加熱變性DNA后需重新補加,而多份標本的操作更是耗時、費力且易出錯,所以使得PCR技術(shù)在當時成了一種笨拙且中看不中用的實驗室方法。

    穆里斯苦苦思索,他曾寫道:“我當然不知道什么是‘適當條件,也不知道自己所選擇的條件是不是發(fā)生PCR所必需的。我能做的只是不斷改進實驗方法和程序,直到擴增反應(yīng)能夠順利進行。在沒有獲得確切的DNA擴增結(jié)果前,我完全是在黑暗中摸索。只要有哪怕一丁點兒的擴增,我就能夠通過改變部分實驗參數(shù)的方法迅速優(yōu)化反應(yīng)體系?!闭悄吕锼沟膱?zhí)著和敏銳,努力不懈探索未知,使得耐熱的TaqDNA聚合酶應(yīng)用于PCR反應(yīng),實驗條件逐步成熟完善,繼而第一臺PCR熱循環(huán)儀實現(xiàn)了該技術(shù)的自動化,促成PCR技術(shù)迅速發(fā)展和廣泛應(yīng)用。

    杰出生物學家穆里斯的卓越事跡對培養(yǎng)學生的科學態(tài)度和樹立學生正確的價值觀具有重要意義。在學習PCR技術(shù)發(fā)明的過程中,學生必然為科學家堅忍不拔的毅力、精益求精的勞作、勇敢超越的精神、舉世矚目的成就所震撼,由此轉(zhuǎn)化為科學的態(tài)度和正確的價值觀。同時,PCR技術(shù)發(fā)明的過程富含科學家的心路歷程、科學發(fā)現(xiàn)的奇聞軼事,因而在培養(yǎng)學生的興趣、好奇心、求知欲等方面具有極其重要的價值。并且,科學探索的艱難和曲折及科學發(fā)展承受的誤區(qū)和歧義,會引發(fā)學生理性反思和審慎思考,進而培養(yǎng)學生不屈的進取精神、樂觀的生活態(tài)度及對真理的追求與熱愛。endprint

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    PCR的產(chǎn)生傾注了發(fā)明者穆里斯的全部心力。1983年春天,穆里斯前往鄉(xiāng)間度周末,他驅(qū)車行駛在蜿蜒的州際高速公路上,靈感閃現(xiàn),孕育出PCR技術(shù)的原型,即DNA分子能在適當條件下擺脫染色體結(jié)構(gòu)的束縛并獲得指數(shù)擴增。穆里斯對這一新奇念頭充滿熱切希望,回到西特斯,穆里斯做了關(guān)于先有技術(shù)的文獻檢索,沒找到任何有價值的、有助于確定他所需要的實驗參數(shù)的技術(shù)文獻,但他堅信自己所走的是一條創(chuàng)新的道路,于是堅持不懈地對此設(shè)想進行了大量實驗。開始時,他使用大腸桿菌DNA聚合酶Ⅰ的Klenow片段擴增目的基因,因該酶不耐熱,每次加熱變性DNA后需重新補加,而多份標本的操作更是耗時、費力且易出錯,所以使得PCR技術(shù)在當時成了一種笨拙且中看不中用的實驗室方法。

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