略陽烏雞7～12周齡可消化蛋氨酸需要量的研究

張 靜 閔育娜 牛竹葉 劉少凱 王哲鵬 李華磊 何祖富 劉福柱

(西北農(nóng)林科技大學(xué)動物科技學(xué)院，楊凌 712100)

略陽烏雞是陜西古老而特有的珍稀家禽，中心產(chǎn)區(qū)位于略陽縣以東的黑河流域，故名黑河烏雞，20世紀(jì)80年代更名為略陽烏雞。略陽烏雞具有“六黑”特征，即烏皮、烏腿、烏趾、烏喙、烏冠、烏舌。1982年經(jīng)我國農(nóng)業(yè)部和中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院考察鑒定和血型因子分析，確認(rèn)略陽烏雞是一個單獨(dú)的烏雞品種，在全國四大烏雞品種中，略陽烏雞體形最大，而且肉質(zhì)細(xì)嫩、味醇香、營養(yǎng)豐富，被列為陜西省唯一的保護(hù)雞種。蛋氨酸是家禽飼糧中第一限制性氨基酸，其含量的多少會影響飼糧中其他氨基酸的利用和需要量。NRC(1994)標(biāo)準(zhǔn)中關(guān)于未成熟萊航褐殼蛋雞7～12周齡蛋氨酸需要量為0.23%，萊航白殼蛋雞為0.25%。我國《雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》(2004)中，黃羽肉種雞7～12周齡蛋氨酸的需要量為0.29%。石天虹等［1］根據(jù)不同蛋氨酸水平對泰和絲毛烏雞生長性能的影響，認(rèn)為7～12周齡泰和絲毛烏雞蛋氨酸需要量為0.28%～0.29%。瞿明仁等［2］綜合研究了不同蛋氨酸水平對泰和絲毛烏雞生長性能、血清尿素氮含量以及氮存留率的影響，認(rèn)為7～12周齡泰和絲毛烏雞的蛋氨酸需要量為:公雞0.26% ～0.35%，母雞0.24%～0.31%。然而，目前關(guān)于烏雞蛋氨酸營養(yǎng)需要的研究較少，且多數(shù)以泰和烏雞為研究對象，關(guān)于略陽烏雞蛋氨酸營養(yǎng)需要的研究尚未見報道。為此，本試驗(yàn)旨在將飼養(yǎng)試驗(yàn)與代謝試驗(yàn)相結(jié)合，測定不同蛋氨酸水平對略陽烏雞生長性能、組織器官發(fā)育及血清尿酸和尿素氮含量的影響，以期確定7～12周齡略陽烏雞的可消化蛋氨酸需要量，為合理地設(shè)計略陽烏雞的飼糧配方提供科學(xué)依據(jù)，進(jìn)而為略陽烏雞選育與生產(chǎn)提供關(guān)鍵技術(shù)支撐。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)1:飼養(yǎng)試驗(yàn)

1.1.1 試驗(yàn)動物與分組

試驗(yàn)1采用單因子完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計，選取6周齡末健康略陽烏雞600羽，公母各占1/2，隨機(jī)分為5組，每組6個重復(fù)，每個重復(fù)20只雞，每籠10只雞。

1.1.2 試驗(yàn)飼糧

基礎(chǔ)飼糧參照我國地方黃羽肉種雞、泰和烏雞和NRC(2004)肉種雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)配制，采用玉米-花生粕型基礎(chǔ)飼糧，向基礎(chǔ)飼糧中添加0、0.10%、0.20%、0.30%、0.40%的 DL-蛋氨酸，配制成5種含不同水平蛋氨酸的試驗(yàn)飼糧，各試驗(yàn)飼糧其他營養(yǎng)水平一致。7～12周齡略陽烏雞基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

1.1.3 試驗(yàn)方法

以籠為單位，試驗(yàn)開始稱取每籠雞的初始重，經(jīng)分析差異不顯著(P＞0.05)。試驗(yàn)期間統(tǒng)計試驗(yàn)階段每籠雞的采食量。試驗(yàn)期42 d，自由采食和飲水，其他飼養(yǎng)管理按常規(guī)［3］進(jìn)行。

1.1.4 樣品采集與指標(biāo)測定

1.1.4.1 生長性能指標(biāo)

在整個試驗(yàn)期每周統(tǒng)計各組各重復(fù)的飼料消耗。分別在試驗(yàn)期的第1天和最后1天，以籠為單位對試雞進(jìn)行空腹稱重，以計算平均日增重(ADG，g/d)、平均日采食量(ADFI，g/d)、料重比(F/G，ADFI/ADG)和相對生長率(RGR，%)。

RGR(%)=100×總體增重/初始體重。

1.1.4.2 血清尿酸和尿素氮含量

試驗(yàn)第42天時每個重復(fù)抽取1只接近平均體重的雞，空腹12 h，自由飲水，于第2天08:00時，翅靜脈采血4～5 mL，3 000 r/min離心15 min，取血清，-20℃保存，待測尿酸、尿素氮含量。

1.1.4.3 組織器官發(fā)育指標(biāo)

采血后解剖，分別取心臟、肝臟、胸腺、脾臟、法氏囊、肌胃和腺胃(去內(nèi)容物)進(jìn)行稱重，分別取左側(cè)胸肌和腿肌稱重，剝離腹脂稱重。其中腸道去腸脂，清出腸道中的內(nèi)容物并稱重。計算各組織器官重量占相應(yīng)活重的百分比(%)。

1.2 試驗(yàn)2:代謝試驗(yàn)

1.2.1 試驗(yàn)動物與分組

試驗(yàn)2選取體重相近的健康成年雄性略陽烏雞16只，隨機(jī)分為2組，一組為內(nèi)源校正組，體重為(2.14±0.12)kg;另一組為試驗(yàn)組，體重為(2.09±0.14)kg。

1.2.2 試驗(yàn)飼糧

代謝試驗(yàn)所用無氮飼糧組成及營養(yǎng)水平見表2。

表2 無氮飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 2 Composition and nutrient levels of the nitrogen-free diet(air-dry basis) %

1.2.3 試驗(yàn)方法

試驗(yàn)分為預(yù)試期、禁食排空期、正試期。預(yù)試期3 d，試驗(yàn)組和內(nèi)源校正組雞只均采食7～12周齡略陽烏雞基礎(chǔ)飼糧。準(zhǔn)確記錄禁食排空開始時間，隨后禁食48 h，在此期間，每只試雞每天飲水補(bǔ)飼50 g葡萄糖。禁食結(jié)束后，用強(qiáng)飼器給試驗(yàn)組每只雞準(zhǔn)確強(qiáng)飼50 g基礎(chǔ)飼糧，給內(nèi)源校正組每只雞準(zhǔn)確強(qiáng)飼50 g風(fēng)干無氮飼糧，及時準(zhǔn)確記錄個體強(qiáng)飼時間。強(qiáng)飼后自由飲水［4-5］。

1.2.4 樣品采集與指標(biāo)測定連續(xù)分別收集每只雞48 h排泄物(每2 h收集1次)，將排泄物置于已恒重培養(yǎng)皿中，稱取重量，按每100 g鮮糞加入10%鹽酸溶液10 mL進(jìn)行固氮，以防止排泄物中氨的損失及抑制微生物對排泄物中氨基酸和其他營養(yǎng)素的降解作用。將排泄物烘干，返潮后稱重，計算每只雞48 h總排泄物風(fēng)干樣品重量，裝瓶待分析。

將飼料樣品或排泄物風(fēng)干樣品粉碎，過60目篩，取一部分測定風(fēng)干樣品中的含水量，其余按中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)(GB/T 15399—94)經(jīng)過甲酸氧化后水解，再用氨基酸自動分析儀測定蛋氨酸含量［6］。

基礎(chǔ)飼糧的蛋氨酸代謝率計算公式［7］:

基礎(chǔ)飼糧蛋氨酸表觀消化率(%)=100×［食入蛋氨酸(g)-排泄物中蛋氨酸(g)］∕食入蛋氨酸(g);

基礎(chǔ)飼糧蛋氨酸真消化率(%)=100×［食入蛋氨酸(g)-排泄物中蛋氨酸(g)+內(nèi)源性蛋氨酸(g)］∕食入蛋氨酸(g)。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

用Excel軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)整理，采用SPSS 20.0軟件進(jìn)行單因素方差分析(one-way ANOVA)和回歸分析，差異顯著者進(jìn)行Duncan氏法多重比較，結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(mean±SD)表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同蛋氨酸水平對7～12周齡略陽烏雞生長性能的影響

由表3可知，不同蛋氨酸水平對7～12周齡略陽烏雞的ADFI影響極顯著(P＜0.01)，隨著蛋氨酸水平的增加，ADFI降低;不同蛋氨酸水平對7～12周齡略陽烏雞的ADG影響極顯著(P＜0.01);不同蛋氨酸水平對7～12周齡略陽烏雞的F/G影響不顯著(P＞0.05);不同水平的蛋氨酸對7～12周齡略陽烏雞的RGR有顯著影響(P＜0.05)?；貧w分析表明，略陽烏雞ADG(y，g)與飼糧蛋氨酸水平(x，%)之間存在先升高后降低的極顯著二次曲線相關(guān)(y=-26.331x2+18.647x+15.282，P＜0.01，R2=0.691)。而略陽烏雞RGR與飼糧蛋氨酸水平之間不存在較強(qiáng)的二次曲線相關(guān)(R2=0.365)。略陽烏雞F/G也表現(xiàn)出先降低后升高的二次曲線變化趨勢，但經(jīng)回歸分析相關(guān)不顯著(P ＞0.05，R2=0.204)。

表3 不同蛋氨酸水平對7～12周齡略陽烏雞生長性能的影響Table 3 Effects of dietary Met level on growth performance of Lueyang black-boned chickens aged from 7 to 12 weeks

2.2 不同蛋氨酸水平對7～12周齡略陽烏雞血清尿酸和尿素氮含量的影響

由表4可知，不同蛋氨酸水平對7～12周齡略陽烏雞血清尿酸、尿素氮含量的影響均不顯著(P＞0.05)。但蛋氨酸水平為0.42%時，血清尿酸和尿素氮的含量相對較低。

表4 不同蛋氨酸水平對7～12周齡略陽烏雞血清尿酸和尿素氮含量的影響Table 4 Effects of dietary Met level on serum uric acid and urea nitrogen contents of Lueyang black-boned chickens aged from 7 to 12 weeks mmol/L

2.3 不同蛋氨酸水平對7～12周齡略陽烏雞組織器官發(fā)育的影響

由表5和表6可知，不同蛋氨酸水平對7～12周齡略陽烏雞肌肉組織、脂肪組織、免疫器官以及部分消化器官占體重的百分比影響均不顯著(P＞0.05)。

表5 不同蛋氨酸水平對7～12周齡略陽烏雞部分組織發(fā)育的影響Table 5 Effects of dietary Met level on some tissues development of Lueyang black-boned chickens aged from 7 to 12 weeks %

2.4 7～12周齡略陽烏雞蛋氨酸表觀消化率和真消化率

由表7可知，試驗(yàn)測得7～12周齡略陽烏雞蛋氨酸表觀消化率為92.05%，真消化率為94.97%。

表6 不同蛋氨酸水平對7～12周齡略陽烏雞部分器官發(fā)育的影響Table 6 Effects of dietary Met level on some organ development of Lueyang black-boned chickens aged from 7 to 12 weeks %

表7 7～12周齡略陽烏雞蛋氨酸表觀消化率和真消化率Table 7 Met apparent and true digestibility of Lueyang black-boned chickens aged from 7 to 12 weeks

3 討論

3.1 不同蛋氨酸水平對7～12周齡略陽烏雞生長性能的影響

蛋氨酸是禽類第一限制性氨基酸，在家禽生長中發(fā)揮著重要作用。許多研究證明，飼糧中蛋氨酸的缺乏會導(dǎo)致肉雞生長明顯抑制，飼料利用率顯著降低;適當(dāng)添加蛋氨酸可改善肉雞的生長性能;當(dāng)飼糧中的蛋氨酸達(dá)到一定的水平后，若繼續(xù)添加蛋氨酸則對肉雞生長性能無影響，甚至產(chǎn)生毒害作用［2，8-14］。但也有一些研究結(jié)果表明，在家禽生長的某些時期，一定范圍內(nèi)飼糧蛋氨酸水平的變化對家禽的生長并未產(chǎn)生顯著的影響［1，15-20］。

石天虹等［1］研究了蛋氨酸對0～12周齡泰和烏雞生產(chǎn)性能的影響，以烏雞生產(chǎn)性能和經(jīng)濟(jì)效益為判斷指標(biāo)，研究結(jié)果認(rèn)為烏雞蛋氨酸的需要量為:0～4周齡蛋氨酸0.32%，5～8周齡蛋氨酸0.29%，9～12周齡蛋氨酸0.28%。瞿明仁等［2］對泰和烏雞0～12周齡蛋氨酸的需要量進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)不同處理對烏雞的體增重影響不顯著，但對ADFI和F/G影響顯著，研究結(jié)果認(rèn)為不同性別烏雞的蛋氨酸需要量為:5～8周齡公雞0.35%，母雞 0.31%;9～12周齡公雞 0.26%，母雞0.24%。謝明等［8］研究了蛋氨酸對3～6周齡雄性北京鴨生產(chǎn)性能的影響，結(jié)果表明:蛋氨酸對3～6周齡雄性北京鴨ADG和ADFI均產(chǎn)生了顯著影響，但對F/G無顯著影響。以ADG為評價指標(biāo)，依據(jù)二次曲線模型，3～6周齡雄性北京鴨的蛋氨酸需要量為0.365%。

本研究結(jié)果表明蛋氨酸水平極顯著影響了略陽烏雞的 ADFI，進(jìn)而顯著影響了其 ADG以及RGR，但對F/G的影響沒有達(dá)到顯著水平。分析結(jié)果后發(fā)現(xiàn)，飼糧蛋氨酸水平對略陽烏雞7～12周的ADFI有極顯著影響，隨著蛋氨酸水平的增加，ADFI總體呈下降趨勢，ADG、RGR呈先升高后降低的二次曲線變化，F(xiàn)/G也有先降低后上升的二次曲線變化趨勢，表明飼糧中蛋氨酸水平較低時，略陽烏雞的ADFI較高，ADG較低，飼料效率較低，隨著飼糧中合成蛋氨酸的添加，ADFI逐漸降低，ADG升高，提高了飼料效率，達(dá)到適宜蛋氨酸水平后繼續(xù)添加蛋氨酸則導(dǎo)致蛋氨酸過量，進(jìn)一步降低了略陽烏雞的ADFI，過量蛋氨酸不利于略陽烏雞的生長，導(dǎo)致ADG降低，飼料效率降低。本試驗(yàn)通過略陽烏雞ADG與飼糧蛋氨酸水平之間的二次曲線模型估算出，7～12周齡略陽烏雞蛋氨酸需要量為0.354%，以蛋氨酸/粗蛋白質(zhì)為基礎(chǔ)，本試驗(yàn)結(jié)果(0.022 12)高于NRC(1994)7～12周齡未成熟褐殼萊航蛋雞(0.015 33)、白殼萊航蛋雞(0.015 63)、中國雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)(2004)7～12周齡黃羽肉種雞(0.019 33)以及瞿明仁等［2］7～12周齡泰和烏雞(0.141 2～0.201 5)的研究結(jié)果，低于 Saki等［12］的研究結(jié)果(0.023)。

3.2 不同蛋氨酸水平對7～12周齡略陽烏雞血清尿酸和尿素氮含量的影響

尿酸是禽類蛋白質(zhì)代謝的主要終產(chǎn)物。Featherston［21］研究認(rèn)為，當(dāng)禽類因從飼糧中攝取的外源性必需氨基酸不足或氨基酸不平衡時，將引起機(jī)體蛋白質(zhì)的分解，進(jìn)而導(dǎo)致血清尿酸含量上升，氮的利用率下降。Miles等［22］研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)?shù)谝幌拗菩园被岵蛔銜r，雞排出尿酸的量增加，氮利用率降低，對其補(bǔ)充限制性氨基酸后，尿酸的排出量減少。

姚元枝等［10］研究了0～8周齡雪峰烏雞飼糧不同蛋氨酸水平的影響，結(jié)果表明，蛋氨酸水平對血清尿素氮含量影響顯著，使尿素氮含量最低的飼糧蛋氨酸水平0～4周齡為0.560%，5～8周齡為0.404% ～0.464%。瞿明仁等［23］研究了不同蛋氨酸水平對0～12周齡泰和烏雞血清尿素氮的影響，結(jié)果表明，不同蛋氨酸水平對泰和烏雞血清尿素氮含量有顯著影響。車向榮等［13］研究了DL-蛋氨酸對蛋雛雞的影響，結(jié)果表明，蛋氨酸對血清尿素氮和尿酸的含量影響不顯著。程茂基等［16］研究了蛋氨酸對0～3周齡肉仔雞生長性能、血清尿酸含量的影響，結(jié)果表明，飼糧蛋氨酸水平低于0.28%或高于1.50%時，肉仔雞生長性能顯著下降，血清尿酸含量顯著升高;飼糧蛋氨酸水平為0.50%～1.00%時，蛋氨酸對肉仔雞生長性能和血清尿酸含量沒有顯著影響。李忠榮等［18］研究了低蛋白質(zhì)補(bǔ)充氨基酸對北京鴨血清生化指標(biāo)的影響，結(jié)果表明，低蛋白質(zhì)補(bǔ)充氨基酸飼糧對北京鴨血清生化指標(biāo)沒有顯著影響。

本試驗(yàn)結(jié)果表明，飼糧不同蛋氨酸水平對7～12周齡略陽烏雞血清尿酸和尿素氮的含量均影響不顯著，但蛋氨酸水平為0.42%時，血清尿酸和尿素氮的含量都相對較低。該試驗(yàn)結(jié)果與上述研究結(jié)果相似。原因可能是略陽烏雞生長周期長，生長較為緩慢，7～12周齡階段內(nèi)短期對氨基酸濃度變化的敏感度較低。

3.3 不同蛋氨酸水平對7～12周齡略陽烏雞組織器官發(fā)育的影響

Hickling等［24］研究了不同蛋氨酸水平對雄性肉仔雞屠宰性能和胸肌率的影響，結(jié)果表明，不同蛋氨酸水平對雄性肉仔雞的屠宰性能和胸肌率的影響趨于顯著。席鵬彬等［15］研究了不同蛋氨酸水平對7～9周齡黃羽肉雞生長性能、胴體品質(zhì)等的影響，并根據(jù)二次回歸模型估測取得最低料重比的蛋氨酸飼糧中總需要量為0.353%，結(jié)果表明，蛋氨酸水平顯著影響了黃羽肉雞的胸肌率，并對公雞的腹脂率有顯著影響。車向榮等［13］研究表明，蛋氨酸可顯著提高蛋雛雞胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)和法氏囊指數(shù)。黎觀紅等［25］研究了0～12周齡泰和烏雞內(nèi)臟器官的發(fā)育規(guī)律，結(jié)果表明，內(nèi)臟器官的發(fā)育峰期在8周齡以前，但各內(nèi)臟器官的生長發(fā)育速度不一致，心臟、肝臟、肺、腺胃、胰腺、小腸的發(fā)育早于其他內(nèi)臟器官的發(fā)育，全消化道、小腸、肌胃、胰腺、肝臟的發(fā)育早于體重的發(fā)育。

本試驗(yàn)測得在0.22% ～0.62%，不同飼糧蛋氨酸水平對7～12周齡略陽烏雞各內(nèi)臟器官重量占體重的百分比無顯著影響，與上述研究一致。

3.4 略陽烏雞蛋氨酸的表觀消化率和真消化率

石天虹等［26］采用強(qiáng)飼法測定了成年泰和烏雞對飼料原料氨基酸的表觀消化率和真消化率，結(jié)果表明，成年泰和烏雞對玉米蛋氨酸的表觀消化率為85.39%，真消化率為90.49%;對豆粕蛋氨酸的表觀消化率為89.06%，真消化率為90.29%。席鵬彬等［14］采用強(qiáng)飼法測得玉米、豆粕和花生粕的蛋氨酸真消化率分別為91.7%、90.6%和85.5%，基礎(chǔ)飼糧(玉米68.08%、豆粕20.44%、花生粕5.00%，代謝能為12.62 MJ/kg、粗蛋白質(zhì)為17.50%)的蛋氨酸真消化率為90.63%。瞿明仁等［27］采用強(qiáng)飼法測定了20周齡泰和公雞對基礎(chǔ)飼糧(玉米70.0%、豆粕19.0%、菜籽粕6.5%、魚粉2.0%，代謝能為11.96 MJ/kg，粗蛋白質(zhì)為16.97%)蛋氨酸的表觀消化率和真消化率，測得其對基礎(chǔ)飼糧蛋氨酸的表觀消化率為94.10%，真消化率為95.28%。

經(jīng)分析計算，本試驗(yàn)測得略陽烏雞對本試驗(yàn)基礎(chǔ)飼糧的蛋氨酸表觀消化率為92.05%，真消化率為 94.97%，高于石天虹等［26］以及席鵬彬等［14］的研究結(jié)果，低于瞿明仁等［27］的研究結(jié)果。

4 結(jié)論

①通過ADG與飼糧蛋氨酸水平之間的二次曲線模型估算得出，7～12周齡略陽烏雞飼糧蛋氨酸適宜水平為0.354%。

②不同蛋氨酸水平對7～12周齡略陽烏雞血清尿酸和尿素氮含量以及部分組織器官發(fā)育無顯著影響。

③7～12周齡略陽烏雞對基礎(chǔ)飼糧的蛋氨酸表觀消化率為92.05%，真消化率為94.97%。其表觀可消化蛋氨酸需要量為0.326%，真可消化蛋氨酸需要量為0.336%。

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