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    MiR-34a通過(guò)調(diào)控Fra-1影響人胃癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移

    2014-09-18 06:57:24杜益萍王同杉邱天竹周鑫劉平
    中國(guó)生化藥物雜志 2014年5期
    關(guān)鍵詞:熒光素酶調(diào)控胃癌

    杜益萍,王同杉,邱天竹,周鑫,劉平

    (南京醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院 腫瘤科,江蘇 南京 210009)

    MiR-34a通過(guò)調(diào)控Fra-1影響人胃癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移

    杜益萍,王同杉,邱天竹,周鑫,劉平Δ

    (南京醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院 腫瘤科,江蘇 南京 210009)

    目的探討過(guò)表達(dá)miR-34a對(duì)胃癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移增殖能力的影響,以及其可能的作用機(jī)制。方法通過(guò)轉(zhuǎn)染miR-34a mimics上調(diào)其表達(dá),利用劃痕遷移實(shí)驗(yàn)、transwell侵襲實(shí)驗(yàn)和CCK8實(shí)驗(yàn)檢測(cè)過(guò)表達(dá)miR-34a對(duì)SGC-7901,BCG-823細(xì)胞的遷移、侵襲和增殖能力的影響。采用生物信息學(xué)預(yù)測(cè)及雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)考察miR-34a對(duì)靶基因Fra-1的靶向調(diào)控機(jī)制。結(jié)果轉(zhuǎn)染miR-34a mimics過(guò)表達(dá)miR-34a能顯著抑制胃癌細(xì)胞SGC-7901,BCG-823的遷移、侵襲和增殖能力。miR-34a能夠靶向負(fù)性調(diào)控Fra-1的表達(dá),影響下游侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白分子MMP9、Cyclin D1的表達(dá)。結(jié)論過(guò)表達(dá)胃癌細(xì)胞系中miR-34a可靶向抑制Fra-1的表達(dá),從而抑制胃癌細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移增殖能力,影響胃癌進(jìn)展。

    胃癌;miR-34a;遷移;侵襲;Fra-1

    Micro RNA是一類存在于真核生物體內(nèi)長(zhǎng)度約為19~25個(gè)核苷酸的非編碼小分子RNA,在轉(zhuǎn)錄后水平影響下游基因的表達(dá)從而發(fā)揮重要生物學(xué)功能[5]。研究表明,miRNA作為類似癌基因或者抑癌基因,不僅影響胚胎早期發(fā)育,細(xì)胞生長(zhǎng)增殖,細(xì)胞表面各種因子異常表達(dá),而且在腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用[6]。MiR-34a是非編碼小RNA分子中重要一員,作為抑癌基因位于人類染色體抑癌區(qū)域1p36.23,與p53信號(hào)通路調(diào)節(jié)相關(guān),在多種癌癥中由于啟動(dòng)子甲基化、基因缺失和p53基因突變失活等原因而表達(dá)異常[7-8]。已有文章研究表明:miR-21、miR-107、miR-34a、miR-145、miR-199、miR-335等在胃瘤中表達(dá)異常,并在侵襲轉(zhuǎn)移中發(fā)揮一定作用。MiR-21在胃癌中高表達(dá),通過(guò)靶向PTEN促進(jìn)胃癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移;miR-335的促進(jìn)侵襲轉(zhuǎn)移作用與轉(zhuǎn)錄因子sp1相關(guān),但是相關(guān)調(diào)控機(jī)制的研究還有待于更進(jìn)一步的研究[9-11]。

    本實(shí)驗(yàn)通過(guò)在2種胃癌細(xì)胞系中過(guò)表達(dá)miR-34a,研究其在腫瘤生長(zhǎng)增殖、侵襲轉(zhuǎn)移方面的影響,并進(jìn)一步探究miR-34a影響胃癌腫瘤轉(zhuǎn)移的內(nèi)在機(jī)制,進(jìn)而為臨床胃癌轉(zhuǎn)移的早期診斷及預(yù)后判斷提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 材料 人胃癌細(xì)胞株SGC7901、BCG-823購(gòu)自上海細(xì)胞生物研究所。RPMI1640培養(yǎng)基,小胎牛血清購(gòu)自美國(guó)Gbico公司。TRIzol,Lipofectamine購(gòu)自美國(guó)Invitrogen公司。CCK8試劑盒購(gòu)自日本 Dojindo公司,miR-34a mimics以及陰性對(duì)照(negative control)購(gòu)自上海吉碼制藥技術(shù)有限公司。熒光素酶報(bào)告基因試劑盒購(gòu)自美國(guó)Promega公司。Fra-1-3'-UTR熒光素酶報(bào)告質(zhì)粒由廣州銳博生物有限公司構(gòu)建。Fra-1抗體購(gòu)自美國(guó)Santa Cruz公司,MMP9抗體,Cyclin D1抗體購(gòu)自美國(guó)Cell signal公司。羊抗兔二抗購(gòu)自美國(guó)Bioworld公司。

    1.2 方法

    1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)及轉(zhuǎn)染:人胃癌細(xì)胞株SGC7901、BCG823用含10%胎牛血清和100 U/mL青霉素和100mg/mL鏈霉素的RPMI1640培養(yǎng)基,置于37℃,5%CO2,飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),2~3 d換液,細(xì)胞呈貼壁生長(zhǎng),當(dāng)細(xì)胞融合度達(dá)到80%~90%時(shí),用0.25%胰酶消化傳代。取對(duì)數(shù)期生長(zhǎng)細(xì)胞以每孔5×105鋪于6孔板,貼壁24 h后,按照Lipofectamine說(shuō)明書將miR-34amimics以及negative control分別轉(zhuǎn)染到胃癌細(xì)胞系中。

    1.2.2 劃痕遷移實(shí)驗(yàn):將分別轉(zhuǎn)染miR-34a,negative control的細(xì)胞分別鋪6孔板,每孔細(xì)胞數(shù)為5×105個(gè)。待細(xì)胞80%貼壁后,用10 uL的白色槍頭在6孔板中間劃開一條縫隙,每隔12 h觀察縫隙處細(xì)胞的融合狀態(tài),并拍照記錄,待縫隙逐漸變窄,細(xì)胞停止培養(yǎng)。

    1.2.3 Transwell侵襲實(shí)驗(yàn):按上所述分別轉(zhuǎn)染2種細(xì)胞,生長(zhǎng)48 h后,消化細(xì)胞并計(jì)數(shù),在均勻鋪有Matrigel膠的transwell上層小室加入200 uL含有5×104細(xì)胞的無(wú)血清培養(yǎng)基,下層小室加入500 uL含10%血清的培養(yǎng)基;置于37℃、5%CO2恒溫箱孵育24 h,取出小室,PBS洗2遍,用4%的多聚甲醛固定細(xì)胞10min;PBS再重復(fù)洗2遍,結(jié)晶紫染色15min,PBS洗2遍,用棉簽小心的擦去上層小室的細(xì)胞,顯微鏡下隨機(jī)取8個(gè)視野拍照記錄。

    1.2.4 細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn):按上所述分別轉(zhuǎn)染2種細(xì)胞,生長(zhǎng)48 h后,消化細(xì)胞并計(jì)數(shù),在96孔板中每孔加入100 uL含有5000個(gè)細(xì)胞的懸液,將培養(yǎng)板置于37℃,5%CO2恒溫箱下待貼壁后,向每孔加入10uL的 CCK-8試劑溶液,分別在24、48、72 h用酶標(biāo)儀測(cè)定450 nm處的吸光度。以時(shí)間為橫坐標(biāo),以吸光值為縱坐標(biāo)繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線。

    1.2.5 Western Blot檢測(cè)轉(zhuǎn)染前后蛋白表達(dá)差異:細(xì)胞以每孔5×105分別鋪于6孔板,貼壁24 h后,將miR-34amimics以及negative control分別轉(zhuǎn)染細(xì)胞。培養(yǎng)72 h后,蛋白裂解液抽提總蛋白,BCA法測(cè)定蛋白濃度,10%聚丙烯酰胺凝膠電泳分離蛋白質(zhì),以 GAPDH為內(nèi)參。檢測(cè)轉(zhuǎn)染 miR-34a前后 Fra-1,MMP9,Cyclin D1的表達(dá)差異。MMP9,Cyclin D1抗體稀釋度均為1∶1 000,F(xiàn)ra-1抗體稀釋度為1∶500,二抗稀釋濃度為1∶5 000。

    1.2.6 雙熒光素酶實(shí)驗(yàn):構(gòu)建包含F(xiàn)ra-1-3'UTR區(qū)野生型和突變型序列的報(bào)告基因質(zhì)粒。人胚腎細(xì)胞系HEK293T以每孔1.5×105的濃度鋪于24孔板中,置于37℃,5%CO2恒溫箱孵育24 h,按照 Lipofectamine說(shuō)明,將野生型或突變型 pGL3-Fra-1-3'UTR,與miR-34a mimics或者negative control按照實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)共同轉(zhuǎn)入細(xì)胞,24 h后,運(yùn)用雙熒光素酶報(bào)告基因測(cè)試系統(tǒng)檢測(cè)熒光素酶活性。

    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 每組實(shí)驗(yàn)至少重復(fù)3次,由SPSS11.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,正態(tài)計(jì)量數(shù)據(jù)用“±s”表示,兩樣本均數(shù)間比較采用t檢驗(yàn),多組間比較采用單因素方差分析及q′檢驗(yàn),以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 MiR-34a過(guò)表達(dá)對(duì)細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移能力的影響 劃痕結(jié)果顯示,與陰性對(duì)照組相比,轉(zhuǎn)染miR-34amimics組細(xì)胞的遷移能力明顯減弱(見圖1)。Transwell實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:與陰性對(duì)照組相比,SGC7901和BCG823細(xì)胞中轉(zhuǎn)染miR-34a后侵襲轉(zhuǎn)移能力明顯下降(見圖2)。

    圖1 miR-34a過(guò)表達(dá)對(duì)2種細(xì)胞遷移能力的影響Fig.1 Effect ofmiR-34a overexpression on cell invasion of GC cell lines BCG-823 and SGC-7901

    圖2 miR-34a過(guò)表達(dá)對(duì)2種細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移能力的影響Fig.2 Effect ofmiR-34a overexpression on cell invasion and migration of GC cell lines BCG-823 and SGC-7901

    2.2 MiR-34a過(guò)表達(dá)對(duì)BCG-823、SGC7901細(xì)胞增殖的影響 細(xì)胞轉(zhuǎn)染miR-34amimics和negative control后,按要求加入CCK8試劑,置于37℃,5%CO2恒溫箱培養(yǎng),不同時(shí)間段測(cè)定吸光度繪制生長(zhǎng)曲線。結(jié)果顯示:與陰性對(duì)照組相比,轉(zhuǎn)染miR-34a后細(xì)胞生長(zhǎng)受到明顯抑制(見圖3)。

    圖3 miR-34a過(guò)表達(dá)對(duì)BCG-823(A),SGC7901(B)細(xì)胞增殖能力的影響Fig.3 Effect of overexpression miR-34a on GC cell lines BCG-823(A),SGC-7901(B)proliferation

    2.3 MiR-34a靶基因的驗(yàn)證 通過(guò)TargetScan分析軟件預(yù)測(cè)Fra-1可能是miR-34a的靶基因。在雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)中,與轉(zhuǎn)染陰性對(duì)照片段和Fra-1-3'-UTR的對(duì)照組相比,實(shí)驗(yàn)組共轉(zhuǎn)染miR-34a mimics和Fra-1-3'-UTR后熒光素酶活性顯著降低,而將Fra-1-3'UTR結(jié)合位點(diǎn)突變后,熒光素酶活性顯著降低(見圖 4)。

    圖4 熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)結(jié)果*P<0.05,與轉(zhuǎn)染陰性對(duì)照組比較Fig.4 Dual luciferase assay results*P<0.05,compared with the negative control

    2.4 Western blot檢測(cè)結(jié)果 與陰性對(duì)照組相比,轉(zhuǎn)染miR-34a mimics的 BCG823,SGC7901細(xì)胞 Fra-1、MMP9、Cyclin D1表達(dá)均明顯下降(見圖5)。

    圖5 Western印跡法檢測(cè)轉(zhuǎn)染miR-34amimics后BCG-823(A)和SGC7901(B)細(xì)胞中Fra-1、MMP9和Cyclin D1蛋白的表達(dá)Fig.5 Expression of Fra-1,MMP9,Cyclin D1 protein in BCG-823(A)and SGC-7901(B)cells aftermiR-34amimics transfection

    3 討論

    胃癌是消化道常見惡性腫瘤,占世界范圍內(nèi)因癌癥死亡人數(shù)的第二位。它的發(fā)生發(fā)展是多因素調(diào)控的復(fù)雜連續(xù)過(guò)程,例如癌基因抑癌基因的突變,DNA甲基化,非編碼RNA的表達(dá)異常等。侵襲和轉(zhuǎn)移是癌細(xì)胞的重要特征之一,是瘤細(xì)胞從原發(fā)部位脫離后向周圍和(或)遠(yuǎn)處組織侵襲和轉(zhuǎn)移的一個(gè)復(fù)雜過(guò)程,涉及腫瘤細(xì)胞的黏附性改變,細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrix,ECM)的降解增加,腫瘤細(xì)胞的遷移,新生血管生成等一系列過(guò)程,上述過(guò)程涉及許多基因的異常表達(dá)及一系列基因結(jié)構(gòu)功能的異常[12]。MiR-34a,miR-126,miR-145等作為抑制乳腺癌轉(zhuǎn)移的影響因素已被人們廣泛了解接受,miR-34a在結(jié)直腸癌中的研究也顯示miR-34a的高表達(dá)是抑制腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的重要因素[13-14]。這些研究表明,miRNA在調(diào)控腫瘤細(xì)胞的侵襲、轉(zhuǎn)移過(guò)程中起著非常重要的作用,有可能作為將來(lái)胃癌診斷治療的分子標(biāo)記物。

    MiR-34a在胃癌細(xì)胞系SGC-7901,BCG-823中呈現(xiàn)過(guò)表達(dá)已在文獻(xiàn)中有所報(bào)道[15-16],本實(shí)驗(yàn)通過(guò)過(guò)表達(dá)miR-34a來(lái)研究其對(duì)胃癌細(xì)胞生物學(xué)功能的影響。劃痕實(shí)驗(yàn)和Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:過(guò)表達(dá)miR-34a后,胃癌細(xì)胞系SGC-7901和BCG-823細(xì)胞的侵襲能力、遷移能力和增殖能力均受到明顯抑制。

    腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移是一個(gè)多因素多步驟的復(fù)雜過(guò)程,miRNA通過(guò)不同途徑發(fā)揮促進(jìn)或抑制作用。目前miRNA在腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移過(guò)程中的作用機(jī)制已得到廣泛研究,有研究表明:在乳腺癌中miR-21主要通過(guò)抑制BCL-2、TPM1、PDCD4、PTEN和 MASPIN等靶基因來(lái)促進(jìn)腫瘤發(fā)生和侵襲轉(zhuǎn)移,這些靶基因?qū)δ[瘤發(fā)生和侵襲轉(zhuǎn)移具有重要的調(diào)控作用。最近研究發(fā)現(xiàn)在侵襲性乳腺上皮細(xì)胞中miR-155表達(dá)上調(diào),通過(guò)TGF-β/Smad 4通路調(diào)節(jié)TGF-β,從而誘導(dǎo)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化,細(xì)胞粘附性降低和遷移能力增強(qiáng),從而促進(jìn)腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的發(fā)生[17-18]。在結(jié)直腸癌中miR-499通過(guò)調(diào)控靶基因PDCD4和FOXO4等的表達(dá)發(fā)揮促進(jìn)轉(zhuǎn)移的作用[19]。最近研究表明:miR-145能夠抑制包括肺癌、胃癌和結(jié)腸癌等癌癥的侵襲轉(zhuǎn)移;肺癌中,其通過(guò)調(diào)節(jié)靶基因c-Wyc和IRS-1來(lái)抑制NSCLC癌細(xì)胞的增殖作用,而且還能特異性地調(diào)節(jié)G1/S期的mRNA使細(xì)胞G1期阻滯,從而抑制細(xì)胞增殖進(jìn)展[20]。

    另外,本研究通過(guò)生物信息學(xué)方法預(yù)測(cè)miR-34a可能通過(guò)作用靶基因Fra-1從而影響腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移。通過(guò)雙熒光素酶進(jìn)行驗(yàn)證,結(jié)果顯示miR-34a對(duì)細(xì)胞中靶基因Fra-1具有調(diào)控作用,通過(guò)與其3′-UTR區(qū)結(jié)合,抑制其表達(dá)翻譯及下游周期相關(guān)蛋白MMP9,Cyclin D1的表達(dá),從而影響腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移。Fra-l屬原癌基因,位于染色體 llgl3,編碼長(zhǎng)度約為1.7kb的成熟mRNA分子,其表達(dá)產(chǎn)物Fra-l蛋白由27l個(gè)氨基酸組成,相對(duì)分子質(zhì)量為29000,為核蛋白Fos家族的重要成員[21]。Fra-1過(guò)表達(dá)可促進(jìn)惡性腫瘤細(xì)胞的浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移,其主要機(jī)制為可誘導(dǎo)MMP9、MMP1、TMP-1的表達(dá),增強(qiáng)細(xì)胞的侵襲能力,調(diào)控VEGF、BCL2、BCL-XL、FASL表達(dá),在血管生成和細(xì)胞凋亡方面發(fā)揮重要作用。研究表明:Fra-1通過(guò)誘導(dǎo)MMP-1的高表達(dá)可以增強(qiáng)骨肉瘤細(xì)胞的侵襲性。在結(jié)直腸癌中,F(xiàn)ra-1作用于RAS-ERK和TGFb信號(hào)通路影響腫瘤的進(jìn)展,對(duì)腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移有一定促進(jìn)作用。Fra-1在乳腺癌中已得到廣泛研究,F(xiàn)ra-1過(guò)表達(dá)促進(jìn)了腫瘤進(jìn)展相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄及誘導(dǎo)上皮細(xì)胞間質(zhì)化(EMT),如人MCF-7乳腺癌細(xì)胞,過(guò)表達(dá)Fra-1可上調(diào)侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)基因MMP-9、MMP-1、VEGF、Cyclin D1(細(xì)胞周期素 D1)和 TIMP-1表達(dá),增強(qiáng)細(xì)胞的增殖侵襲和血管生成能力,轉(zhuǎn)染后的MCF-7細(xì)胞侵襲力顯著增強(qiáng)[22-23]。Andersen等[23]研究發(fā)現(xiàn),F(xiàn)ra-1可誘導(dǎo)人乳腺癌細(xì)胞骨橋蛋白(osteopontin,OPN),血小板反應(yīng)(thrombospondin)和CD44的表達(dá),這3個(gè)蛋白均與腫瘤的轉(zhuǎn)移有著十分緊密的聯(lián)系。在本試驗(yàn)中,通過(guò)在胃癌細(xì)胞中上調(diào)miR-34a,可以靶向抑制Fra-1及其下游分子MMP-9和CyclinD1的表達(dá)。CyclinD1能促進(jìn)細(xì)胞周期依賴性激酶激活從而促進(jìn)細(xì)胞從G1期過(guò)渡到S期,實(shí)現(xiàn)細(xì)胞增殖,MMP-9與細(xì)胞外基質(zhì)和基底膜的降解密切相關(guān)。

    目前關(guān)于胃癌細(xì)胞中miR-34a異常表達(dá)的上游調(diào)控機(jī)制研究很少,具體機(jī)制仍待進(jìn)一步研究。通過(guò)查詢UCSC數(shù)據(jù)庫(kù)(http://genome.ucsc.edu)發(fā)現(xiàn),在腫瘤細(xì)胞中存在 miR-34a基因的啟動(dòng)子區(qū)域CpG島甲基化現(xiàn)象,推測(cè)啟動(dòng)子甲基化程度的差異可能引起了不同腫瘤中miR-34a的表達(dá)差異,但是具體的機(jī)制還需要進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)來(lái)闡明。

    綜上所述,過(guò)表達(dá)miR-34a能顯著減弱胃癌細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移能力,并且miR-34a的調(diào)控作用是通過(guò)靶向調(diào)控基因Fra-1及其下游分子MMP9、Cyclin D1的表達(dá)實(shí)現(xiàn)的,提示miR-34a過(guò)表達(dá)在胃癌的進(jìn)展及遠(yuǎn)處器官轉(zhuǎn)移過(guò)程中起重要作用,這將有可能為未來(lái)臨床上胃癌的早期診斷和藥物治療等提供有效的分子標(biāo)記物。

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    (編校:吳茜)

    MiR-34a inhibit invasion and migration via targeting Fra-1 in gastric cancer

    DU Yi-ping,WANG Tong-shan,QIU Tian-zhu,ZHOU Xin,LIU PingΔ

    (Department of Oncology,The First Affiliated Hospital of Nanjing Medical University,Nanjing 210009,China)

    ObjectiveTo investigate the effect ofmiR-34a on the proliferation,migration and invasion of gastric cancer(GC)cell lines SGC-7901,BCG-823 and find out the potential target genes.MethodsMiR-34a mimics were transfected into two GC cell lines.Wound healing assay,transwell assay and CCK8 testwere performed to explore the effect ofmiR-34a on the proliferation,migration and invasion of gastric cancer(GC)cell lines.Bioinformatics and Dual luciferase experiment were performed to investigate the potential target genes.ResultsUp-regulation of miR-34a could inhibit the proliferation,migration and invasion of SGC-7901,BCG-823 cells.Dual luciferase experiment confirmed that Fra-1 was a potential targetgene ofmiR-34a,which could reduce the expression of downstream molecular(MMP-9 and Cyclin D1).ConclusionOverexpression miR-34a could inhibit the proliferation,migration and invasion of GC cell lines through or partly via regulating the target gene Fra-1 and its downstream molecular MMP-9 and Cyclin D1.

    gastric cancer;miR-34a;invasion;migration;Fra-1

    R735.2

    A

    1005-1678(2014)05-0001-04

    胃癌是全球常見惡性腫瘤之一,居男性常見腫瘤的第四位和女性的第五位,在亞洲地區(qū)呈現(xiàn)高發(fā)。由于早期診斷率低,確診的胃癌患者大部分已經(jīng)處于疾病進(jìn)展期并伴有淋巴結(jié)或腹腔臟器的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移,手術(shù)切除或有效的輔助治療后,胃癌死亡率仍然很高,位居全球第二,其中腫瘤晚期的侵襲轉(zhuǎn)移引起的病人死亡占重要部分[1]。腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移是一個(gè)涉及多因素的復(fù)雜生物學(xué)過(guò)程,基因?qū)W與表觀遺傳學(xué)同時(shí)發(fā)揮著重要作用。一些癌基因、核轉(zhuǎn)錄因子、生長(zhǎng)因子等通過(guò)影響下游相關(guān)的信號(hào)通路,控制細(xì)胞生長(zhǎng)增殖,引起上皮間質(zhì)化轉(zhuǎn)變,從而在腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移過(guò)程中發(fā)揮重要作用[2]。

    原癌基因Fra-1是FOS基因家族的一員,其表達(dá)產(chǎn)物通過(guò)亮氨酸拉鏈結(jié)構(gòu)域與JUN家族蛋白結(jié)合,共同構(gòu)成同源或者異源二聚體形成轉(zhuǎn)錄因子AP-1[3]。AP-1是重要核轉(zhuǎn)錄因子中的一員,其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的活化與多種重要生物學(xué)效應(yīng)有關(guān),例如細(xì)胞的癌變、增殖分化、凋亡等生物學(xué)過(guò)程,尤其在腫瘤細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)遷移、細(xì)胞外基質(zhì)的降解、腫瘤細(xì)胞的異常黏附及新生血管生成等多個(gè)侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)環(huán)節(jié)中發(fā)揮著重要作用[4]。

    國(guó)家自然科學(xué)基金(81201796)

    杜益萍,女,碩士,研究方向:miRNA與胃癌侵襲轉(zhuǎn)移,E-mail:Duyp1989@126.com;通信作者:劉平,男,教授,博士生導(dǎo)師,研究方向:消化道腫瘤相關(guān)研究,E-mail:liu-ping@csco.org.cn。

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