MiR-34a通過(guò)調(diào)控Fra-1影響人胃癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移

杜益萍，王同杉，邱天竹，周鑫，劉平

（南京醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院 腫瘤科，江蘇 南京 210009）

MiR-34a通過(guò)調(diào)控Fra-1影響人胃癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移

杜益萍，王同杉，邱天竹，周鑫，劉平Δ

（南京醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院 腫瘤科，江蘇 南京 210009）

目的探討過(guò)表達(dá)miR-34a對(duì)胃癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移增殖能力的影響，以及其可能的作用機(jī)制。方法通過(guò)轉(zhuǎn)染miR-34a mimics上調(diào)其表達(dá)，利用劃痕遷移實(shí)驗(yàn)、transwell侵襲實(shí)驗(yàn)和CCK8實(shí)驗(yàn)檢測(cè)過(guò)表達(dá)miR-34a對(duì)SGC-7901，BCG-823細(xì)胞的遷移、侵襲和增殖能力的影響。采用生物信息學(xué)預(yù)測(cè)及雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)考察miR-34a對(duì)靶基因Fra-1的靶向調(diào)控機(jī)制。結(jié)果轉(zhuǎn)染miR-34a mimics過(guò)表達(dá)miR-34a能顯著抑制胃癌細(xì)胞SGC-7901，BCG-823的遷移、侵襲和增殖能力。miR-34a能夠靶向負(fù)性調(diào)控Fra-1的表達(dá)，影響下游侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白分子MMP9、Cyclin D1的表達(dá)。結(jié)論過(guò)表達(dá)胃癌細(xì)胞系中miR-34a可靶向抑制Fra-1的表達(dá)，從而抑制胃癌細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移增殖能力，影響胃癌進(jìn)展。

胃癌；miR-34a；遷移；侵襲；Fra-1

Micro RNA是一類存在于真核生物體內(nèi)長(zhǎng)度約為19～25個(gè)核苷酸的非編碼小分子RNA，在轉(zhuǎn)錄后水平影響下游基因的表達(dá)從而發(fā)揮重要生物學(xué)功能［5］。研究表明，miRNA作為類似癌基因或者抑癌基因，不僅影響胚胎早期發(fā)育，細(xì)胞生長(zhǎng)增殖，細(xì)胞表面各種因子異常表達(dá)，而且在腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用［6］。MiR-34a是非編碼小RNA分子中重要一員，作為抑癌基因位于人類染色體抑癌區(qū)域1p36.23，與p53信號(hào)通路調(diào)節(jié)相關(guān)，在多種癌癥中由于啟動(dòng)子甲基化、基因缺失和p53基因突變失活等原因而表達(dá)異常［7-8］。已有文章研究表明：miR-21、miR-107、miR-34a、miR-145、miR-199、miR-335等在胃瘤中表達(dá)異常，并在侵襲轉(zhuǎn)移中發(fā)揮一定作用。MiR-21在胃癌中高表達(dá)，通過(guò)靶向PTEN促進(jìn)胃癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移；miR-335的促進(jìn)侵襲轉(zhuǎn)移作用與轉(zhuǎn)錄因子sp1相關(guān)，但是相關(guān)調(diào)控機(jī)制的研究還有待于更進(jìn)一步的研究［9-11］。

本實(shí)驗(yàn)通過(guò)在2種胃癌細(xì)胞系中過(guò)表達(dá)miR-34a，研究其在腫瘤生長(zhǎng)增殖、侵襲轉(zhuǎn)移方面的影響，并進(jìn)一步探究miR-34a影響胃癌腫瘤轉(zhuǎn)移的內(nèi)在機(jī)制，進(jìn)而為臨床胃癌轉(zhuǎn)移的早期診斷及預(yù)后判斷提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料 人胃癌細(xì)胞株SGC7901、BCG-823購(gòu)自上海細(xì)胞生物研究所。RPMI1640培養(yǎng)基，小胎牛血清購(gòu)自美國(guó)Gbico公司。TRIzol，Lipofectamine購(gòu)自美國(guó)Invitrogen公司。CCK8試劑盒購(gòu)自日本 Dojindo公司，miR-34a mimics以及陰性對(duì)照（negative control）購(gòu)自上海吉碼制藥技術(shù)有限公司。熒光素酶報(bào)告基因試劑盒購(gòu)自美國(guó)Promega公司。Fra-1-3'-UTR熒光素酶報(bào)告質(zhì)粒由廣州銳博生物有限公司構(gòu)建。Fra-1抗體購(gòu)自美國(guó)Santa Cruz公司，MMP9抗體，Cyclin D1抗體購(gòu)自美國(guó)Cell signal公司。羊抗兔二抗購(gòu)自美國(guó)Bioworld公司。

1.2 方法

1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)及轉(zhuǎn)染：人胃癌細(xì)胞株SGC7901、BCG823用含10%胎牛血清和100 U／mL青霉素和100mg／mL鏈霉素的RPMI1640培養(yǎng)基，置于37℃，5%CO2，飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，2～3 d換液，細(xì)胞呈貼壁生長(zhǎng)，當(dāng)細(xì)胞融合度達(dá)到80%～90%時(shí)，用0.25%胰酶消化傳代。取對(duì)數(shù)期生長(zhǎng)細(xì)胞以每孔5×105鋪于6孔板，貼壁24 h后，按照Lipofectamine說(shuō)明書將miR-34amimics以及negative control分別轉(zhuǎn)染到胃癌細(xì)胞系中。

1.2.2 劃痕遷移實(shí)驗(yàn)：將分別轉(zhuǎn)染miR-34a，negative control的細(xì)胞分別鋪6孔板，每孔細(xì)胞數(shù)為5×105個(gè)。待細(xì)胞80%貼壁后，用10 uL的白色槍頭在6孔板中間劃開一條縫隙，每隔12 h觀察縫隙處細(xì)胞的融合狀態(tài)，并拍照記錄，待縫隙逐漸變窄，細(xì)胞停止培養(yǎng)。

1.2.3 Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)：按上所述分別轉(zhuǎn)染2種細(xì)胞，生長(zhǎng)48 h后，消化細(xì)胞并計(jì)數(shù)，在均勻鋪有Matrigel膠的transwell上層小室加入200 uL含有5×104細(xì)胞的無(wú)血清培養(yǎng)基，下層小室加入500 uL含10%血清的培養(yǎng)基；置于37℃、5%CO2恒溫箱孵育24 h，取出小室，PBS洗2遍，用4%的多聚甲醛固定細(xì)胞10min；PBS再重復(fù)洗2遍，結(jié)晶紫染色15min，PBS洗2遍，用棉簽小心的擦去上層小室的細(xì)胞，顯微鏡下隨機(jī)取8個(gè)視野拍照記錄。

1.2.4 細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)：按上所述分別轉(zhuǎn)染2種細(xì)胞，生長(zhǎng)48 h后，消化細(xì)胞并計(jì)數(shù)，在96孔板中每孔加入100 uL含有5000個(gè)細(xì)胞的懸液，將培養(yǎng)板置于37℃，5%CO2恒溫箱下待貼壁后，向每孔加入10uL的 CCK-8試劑溶液，分別在24、48、72 h用酶標(biāo)儀測(cè)定450 nm處的吸光度。以時(shí)間為橫坐標(biāo)，以吸光值為縱坐標(biāo)繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線。

1.2.5 Western Blot檢測(cè)轉(zhuǎn)染前后蛋白表達(dá)差異：細(xì)胞以每孔5×105分別鋪于6孔板，貼壁24 h后，將miR-34amimics以及negative control分別轉(zhuǎn)染細(xì)胞。培養(yǎng)72 h后，蛋白裂解液抽提總蛋白，BCA法測(cè)定蛋白濃度，10%聚丙烯酰胺凝膠電泳分離蛋白質(zhì)，以 GAPDH為內(nèi)參。檢測(cè)轉(zhuǎn)染 miR-34a前后 Fra-1，MMP9，Cyclin D1的表達(dá)差異。MMP9，Cyclin D1抗體稀釋度均為1∶1 000，F(xiàn)ra-1抗體稀釋度為1∶500，二抗稀釋濃度為1∶5 000。

1.2.6 雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)：構(gòu)建包含F(xiàn)ra-1-3＇UTR區(qū)野生型和突變型序列的報(bào)告基因質(zhì)粒。人胚腎細(xì)胞系HEK293T以每孔1.5×105的濃度鋪于24孔板中，置于37℃，5%CO2恒溫箱孵育24 h，按照 Lipofectamine說(shuō)明，將野生型或突變型 pGL3-Fra-1-3'UTR，與miR-34a mimics或者negative control按照實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)共同轉(zhuǎn)入細(xì)胞，24 h后，運(yùn)用雙熒光素酶報(bào)告基因測(cè)試系統(tǒng)檢測(cè)熒光素酶活性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 每組實(shí)驗(yàn)至少重復(fù)3次，由SPSS11.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，正態(tài)計(jì)量數(shù)據(jù)用“±s”表示，兩樣本均數(shù)間比較采用t檢驗(yàn)，多組間比較采用單因素方差分析及q′檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 MiR-34a過(guò)表達(dá)對(duì)細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移能力的影響 劃痕結(jié)果顯示，與陰性對(duì)照組相比，轉(zhuǎn)染miR-34amimics組細(xì)胞的遷移能力明顯減弱（見圖1）。Transwell實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：與陰性對(duì)照組相比，SGC7901和BCG823細(xì)胞中轉(zhuǎn)染miR-34a后侵襲轉(zhuǎn)移能力明顯下降（見圖2）。

圖1 miR-34a過(guò)表達(dá)對(duì)2種細(xì)胞遷移能力的影響Fig.1 Effect ofmiR-34a overexpression on cell invasion of GC cell lines BCG-823 and SGC-7901

圖2 miR-34a過(guò)表達(dá)對(duì)2種細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移能力的影響Fig.2 Effect ofmiR-34a overexpression on cell invasion and migration of GC cell lines BCG-823 and SGC-7901

2.2 MiR-34a過(guò)表達(dá)對(duì)BCG-823、SGC7901細(xì)胞增殖的影響 細(xì)胞轉(zhuǎn)染miR-34amimics和negative control后，按要求加入CCK8試劑，置于37℃，5%CO2恒溫箱培養(yǎng)，不同時(shí)間段測(cè)定吸光度繪制生長(zhǎng)曲線。結(jié)果顯示：與陰性對(duì)照組相比，轉(zhuǎn)染miR-34a后細(xì)胞生長(zhǎng)受到明顯抑制（見圖3）。

圖3 miR-34a過(guò)表達(dá)對(duì)BCG-823（A），SGC7901（B）細(xì)胞增殖能力的影響Fig.3 Effect of overexpression miR-34a on GC cell lines BCG-823（A），SGC-7901（B）proliferation

2.3 MiR-34a靶基因的驗(yàn)證 通過(guò)TargetScan分析軟件預(yù)測(cè)Fra-1可能是miR-34a的靶基因。在雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)中，與轉(zhuǎn)染陰性對(duì)照片段和Fra-1-3'-UTR的對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組共轉(zhuǎn)染miR-34a mimics和Fra-1-3'-UTR后熒光素酶活性顯著降低，而將Fra-1-3'UTR結(jié)合位點(diǎn)突變后，熒光素酶活性顯著降低（見圖 4）。

圖4 熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)結(jié)果*P＜0.05，與轉(zhuǎn)染陰性對(duì)照組比較Fig.4 Dual luciferase assay results*P＜0.05，compared with the negative control

2.4 Western blot檢測(cè)結(jié)果 與陰性對(duì)照組相比，轉(zhuǎn)染miR-34a mimics的 BCG823，SGC7901細(xì)胞 Fra-1、MMP9、Cyclin D1表達(dá)均明顯下降（見圖5）。

圖5 Western印跡法檢測(cè)轉(zhuǎn)染miR-34amimics后BCG-823（A）和SGC7901（B）細(xì)胞中Fra-1、MMP9和Cyclin D1蛋白的表達(dá)Fig.5 Expression of Fra-1，MMP9，Cyclin D1 protein in BCG-823（A）and SGC-7901（B）cells aftermiR-34amimics transfection

3 討論

胃癌是消化道常見惡性腫瘤，占世界范圍內(nèi)因癌癥死亡人數(shù)的第二位。它的發(fā)生發(fā)展是多因素調(diào)控的復(fù)雜連續(xù)過(guò)程，例如癌基因抑癌基因的突變，DNA甲基化，非編碼RNA的表達(dá)異常等。侵襲和轉(zhuǎn)移是癌細(xì)胞的重要特征之一，是瘤細(xì)胞從原發(fā)部位脫離后向周圍和（或）遠(yuǎn)處組織侵襲和轉(zhuǎn)移的一個(gè)復(fù)雜過(guò)程，涉及腫瘤細(xì)胞的黏附性改變，細(xì)胞外基質(zhì)（extracellular matrix，ECM）的降解增加，腫瘤細(xì)胞的遷移，新生血管生成等一系列過(guò)程，上述過(guò)程涉及許多基因的異常表達(dá)及一系列基因結(jié)構(gòu)功能的異常［12］。MiR-34a，miR-126，miR-145等作為抑制乳腺癌轉(zhuǎn)移的影響因素已被人們廣泛了解接受，miR-34a在結(jié)直腸癌中的研究也顯示miR-34a的高表達(dá)是抑制腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的重要因素［13-14］。這些研究表明，miRNA在調(diào)控腫瘤細(xì)胞的侵襲、轉(zhuǎn)移過(guò)程中起著非常重要的作用，有可能作為將來(lái)胃癌診斷治療的分子標(biāo)記物。

MiR-34a在胃癌細(xì)胞系SGC-7901，BCG-823中呈現(xiàn)過(guò)表達(dá)已在文獻(xiàn)中有所報(bào)道［15-16］，本實(shí)驗(yàn)通過(guò)過(guò)表達(dá)miR-34a來(lái)研究其對(duì)胃癌細(xì)胞生物學(xué)功能的影響。劃痕實(shí)驗(yàn)和Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：過(guò)表達(dá)miR-34a后，胃癌細(xì)胞系SGC-7901和BCG-823細(xì)胞的侵襲能力、遷移能力和增殖能力均受到明顯抑制。

腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移是一個(gè)多因素多步驟的復(fù)雜過(guò)程，miRNA通過(guò)不同途徑發(fā)揮促進(jìn)或抑制作用。目前miRNA在腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移過(guò)程中的作用機(jī)制已得到廣泛研究，有研究表明：在乳腺癌中miR-21主要通過(guò)抑制BCL-2、TPM1、PDCD4、PTEN和 MASPIN等靶基因來(lái)促進(jìn)腫瘤發(fā)生和侵襲轉(zhuǎn)移，這些靶基因?qū)δ[瘤發(fā)生和侵襲轉(zhuǎn)移具有重要的調(diào)控作用。最近研究發(fā)現(xiàn)在侵襲性乳腺上皮細(xì)胞中miR-155表達(dá)上調(diào)，通過(guò)TGF-β／Smad 4通路調(diào)節(jié)TGF-β，從而誘導(dǎo)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化，細(xì)胞粘附性降低和遷移能力增強(qiáng)，從而促進(jìn)腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的發(fā)生［17-18］。在結(jié)直腸癌中miR-499通過(guò)調(diào)控靶基因PDCD4和FOXO4等的表達(dá)發(fā)揮促進(jìn)轉(zhuǎn)移的作用［19］。最近研究表明：miR-145能夠抑制包括肺癌、胃癌和結(jié)腸癌等癌癥的侵襲轉(zhuǎn)移；肺癌中，其通過(guò)調(diào)節(jié)靶基因c-Wyc和IRS-1來(lái)抑制NSCLC癌細(xì)胞的增殖作用，而且還能特異性地調(diào)節(jié)G1／S期的mRNA使細(xì)胞G1期阻滯，從而抑制細(xì)胞增殖進(jìn)展［20］。

另外，本研究通過(guò)生物信息學(xué)方法預(yù)測(cè)miR-34a可能通過(guò)作用靶基因Fra-1從而影響腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移。通過(guò)雙熒光素酶進(jìn)行驗(yàn)證，結(jié)果顯示miR-34a對(duì)細(xì)胞中靶基因Fra-1具有調(diào)控作用，通過(guò)與其3′-UTR區(qū)結(jié)合，抑制其表達(dá)翻譯及下游周期相關(guān)蛋白MMP9，Cyclin D1的表達(dá)，從而影響腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移。Fra-l屬原癌基因，位于染色體 llgl3，編碼長(zhǎng)度約為1.7kb的成熟mRNA分子，其表達(dá)產(chǎn)物Fra-l蛋白由27l個(gè)氨基酸組成，相對(duì)分子質(zhì)量為29000，為核蛋白Fos家族的重要成員［21］。Fra-1過(guò)表達(dá)可促進(jìn)惡性腫瘤細(xì)胞的浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移，其主要機(jī)制為可誘導(dǎo)MMP9、MMP1、TMP-1的表達(dá)，增強(qiáng)細(xì)胞的侵襲能力，調(diào)控VEGF、BCL2、BCL-XL、FASL表達(dá)，在血管生成和細(xì)胞凋亡方面發(fā)揮重要作用。研究表明：Fra-1通過(guò)誘導(dǎo)MMP-1的高表達(dá)可以增強(qiáng)骨肉瘤細(xì)胞的侵襲性。在結(jié)直腸癌中，F(xiàn)ra-1作用于RAS-ERK和TGFb信號(hào)通路影響腫瘤的進(jìn)展，對(duì)腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移有一定促進(jìn)作用。Fra-1在乳腺癌中已得到廣泛研究，F(xiàn)ra-1過(guò)表達(dá)促進(jìn)了腫瘤進(jìn)展相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄及誘導(dǎo)上皮細(xì)胞間質(zhì)化（EMT），如人MCF-7乳腺癌細(xì)胞，過(guò)表達(dá)Fra-1可上調(diào)侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)基因MMP-9、MMP-1、VEGF、Cyclin D1（細(xì)胞周期素 D1）和 TIMP-1表達(dá)，增強(qiáng)細(xì)胞的增殖侵襲和血管生成能力，轉(zhuǎn)染后的MCF-7細(xì)胞侵襲力顯著增強(qiáng)［22-23］。Andersen等［23］研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)ra-1可誘導(dǎo)人乳腺癌細(xì)胞骨橋蛋白（osteopontin，OPN），血小板反應(yīng)（thrombospondin）和CD44的表達(dá)，這3個(gè)蛋白均與腫瘤的轉(zhuǎn)移有著十分緊密的聯(lián)系。在本試驗(yàn)中，通過(guò)在胃癌細(xì)胞中上調(diào)miR-34a，可以靶向抑制Fra-1及其下游分子MMP-9和CyclinD1的表達(dá)。CyclinD1能促進(jìn)細(xì)胞周期依賴性激酶激活從而促進(jìn)細(xì)胞從G1期過(guò)渡到S期，實(shí)現(xiàn)細(xì)胞增殖，MMP-9與細(xì)胞外基質(zhì)和基底膜的降解密切相關(guān)。

目前關(guān)于胃癌細(xì)胞中miR-34a異常表達(dá)的上游調(diào)控機(jī)制研究很少，具體機(jī)制仍待進(jìn)一步研究。通過(guò)查詢UCSC數(shù)據(jù)庫(kù)（http：／／genome.ucsc.edu）發(fā)現(xiàn)，在腫瘤細(xì)胞中存在 miR-34a基因的啟動(dòng)子區(qū)域CpG島甲基化現(xiàn)象，推測(cè)啟動(dòng)子甲基化程度的差異可能引起了不同腫瘤中miR-34a的表達(dá)差異，但是具體的機(jī)制還需要進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)來(lái)闡明。

綜上所述，過(guò)表達(dá)miR-34a能顯著減弱胃癌細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移能力，并且miR-34a的調(diào)控作用是通過(guò)靶向調(diào)控基因Fra-1及其下游分子MMP9、Cyclin D1的表達(dá)實(shí)現(xiàn)的，提示miR-34a過(guò)表達(dá)在胃癌的進(jìn)展及遠(yuǎn)處器官轉(zhuǎn)移過(guò)程中起重要作用，這將有可能為未來(lái)臨床上胃癌的早期診斷和藥物治療等提供有效的分子標(biāo)記物。

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［19］Liu X，Zhang Z，Sun L，et al.MicroRNA-499-5p promotes cellular invasion and tumormetastasis in colorectal cancer by targeting FOXO4 and PDCD4［J］.Carcinogenesis，2011，32（12）：1798-1805.

［20］Feng Y，Zhu J，Ou C，et al.MicroRNA-145 inhibits tumour growth and metastasis in colorectal cancer by targeting fascin-1［J］.Br JCancer，2014，110（9）：2300-2309.

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［22］Belguise K，Kersual N，Galtier F，etal.FRA-1 expression level regulates proliferation and invasiveness of breast cancer cells［J］.Oncogene，2005，24（8）：1434-1444.

［23］Andersen H，Mahmood S，Tkach V，et al.The ability of Fos family members to produce phenotypic changes in epithelioid cells is not directly linked to their transactivation potentials［J］.Oncogene，2002，21（31）：4843-4848.

（編校：吳茜）

MiR-34a inhibit invasion and migration via targeting Fra-1 in gastric cancer

DU Yi-ping，WANG Tong-shan，QIU Tian-zhu，ZHOU Xin，LIU PingΔ

（Department of Oncology，The First Affiliated Hospital of Nanjing Medical University，Nanjing 210009，China）

ObjectiveTo investigate the effect ofmiR-34a on the proliferation，migration and invasion of gastric cancer（GC）cell lines SGC-7901，BCG-823 and find out the potential target genes.MethodsMiR-34a mimics were transfected into two GC cell lines.Wound healing assay，transwell assay and CCK8 testwere performed to explore the effect ofmiR-34a on the proliferation，migration and invasion of gastric cancer（GC）cell lines.Bioinformatics and Dual luciferase experiment were performed to investigate the potential target genes.ResultsUp-regulation of miR-34a could inhibit the proliferation，migration and invasion of SGC-7901，BCG-823 cells.Dual luciferase experiment confirmed that Fra-1 was a potential targetgene ofmiR-34a，which could reduce the expression of downstream molecular（MMP-9 and Cyclin D1）.ConclusionOverexpression miR-34a could inhibit the proliferation，migration and invasion of GC cell lines through or partly via regulating the target gene Fra-1 and its downstream molecular MMP-9 and Cyclin D1.

gastric cancer；miR-34a；invasion；migration；Fra-1

R735.2

A

1005－1678（2014）05－0001－04

胃癌是全球常見惡性腫瘤之一，居男性常見腫瘤的第四位和女性的第五位，在亞洲地區(qū)呈現(xiàn)高發(fā)。由于早期診斷率低，確診的胃癌患者大部分已經(jīng)處于疾病進(jìn)展期并伴有淋巴結(jié)或腹腔臟器的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，手術(shù)切除或有效的輔助治療后，胃癌死亡率仍然很高，位居全球第二，其中腫瘤晚期的侵襲轉(zhuǎn)移引起的病人死亡占重要部分［1］。腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移是一個(gè)涉及多因素的復(fù)雜生物學(xué)過(guò)程，基因?qū)W與表觀遺傳學(xué)同時(shí)發(fā)揮著重要作用。一些癌基因、核轉(zhuǎn)錄因子、生長(zhǎng)因子等通過(guò)影響下游相關(guān)的信號(hào)通路，控制細(xì)胞生長(zhǎng)增殖，引起上皮間質(zhì)化轉(zhuǎn)變，從而在腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移過(guò)程中發(fā)揮重要作用［2］。

原癌基因Fra-1是FOS基因家族的一員，其表達(dá)產(chǎn)物通過(guò)亮氨酸拉鏈結(jié)構(gòu)域與JUN家族蛋白結(jié)合，共同構(gòu)成同源或者異源二聚體形成轉(zhuǎn)錄因子AP-1［3］。AP-1是重要核轉(zhuǎn)錄因子中的一員，其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的活化與多種重要生物學(xué)效應(yīng)有關(guān)，例如細(xì)胞的癌變、增殖分化、凋亡等生物學(xué)過(guò)程，尤其在腫瘤細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)遷移、細(xì)胞外基質(zhì)的降解、腫瘤細(xì)胞的異常黏附及新生血管生成等多個(gè)侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)環(huán)節(jié)中發(fā)揮著重要作用［4］。

國(guó)家自然科學(xué)基金（81201796）

杜益萍，女，碩士，研究方向：miRNA與胃癌侵襲轉(zhuǎn)移，E-mail：Duyp1989＠126.com；通信作者：劉平，男，教授，博士生導(dǎo)師，研究方向：消化道腫瘤相關(guān)研究，E-mail：liu－ping＠csco.org.cn。