哮喘患者經(jīng)糖皮質(zhì)激素治療前后血清介素水平變化及意義

葉先智，徐紅貞

（1.武漢市第三醫(yī)院（關(guān)山院區(qū)）急診科，湖北 武漢 430074；2.浙江大學醫(yī)學院附屬兒童醫(yī)院 呼吸科，浙江 杭州 310003）

哮喘患者經(jīng)糖皮質(zhì)激素治療前后血清介素水平變化及意義

葉先智1，徐紅貞2

（1.武漢市第三醫(yī)院（關(guān)山院區(qū)）急診科，湖北 武漢 430074；2.浙江大學醫(yī)學院附屬兒童醫(yī)院 呼吸科，浙江 杭州 310003）

目的探討支氣管哮喘發(fā)病機制中白細胞介素-18（interleukin-18，IL-18）及白細胞介素-33（interleukin-33，IL-33）的作用。方法選擇2011年3月～2012年1月收治于武漢市第三醫(yī)院的支氣管哮喘急性發(fā)作期患者40例作為激素組，同期體檢健康者30例作為對照組。測定對照組與激素組治療前后血清中IL-18、IL-33水平，1秒用力呼氣容積（forced expiratory volume in one second，F(xiàn)EV1）與用力肺活量（forced vital capacity，F(xiàn)VC）的比值 FEV1%，檢測嗜酸粒細胞（eosinophil cell，EOS）及免疫球蛋白 E（immunoglobulin E，IgE）的數(shù)量；觀察激素組治療前后血清中IL-18、IL-33水平變化，分析與FEV1%、EOS、IgE等的關(guān)聯(lián)。結(jié)果治療前激素組血清IL-18、IL-33水平顯著高于對照組（P＜0.05），F(xiàn)EV1%、EOS和IgE與對照組差異顯著（P＜0.05）；經(jīng)糖皮質(zhì)激素聯(lián)合霧化治療后激素組IL-18、IL-33顯著低于治療前（P＜0.05），F(xiàn)EV1%、EOS和IgE與治療前相比改善顯著（P＜0.05）；激素組治療后IL-18、IL-33、FEV1%和IgE與對照組相比無顯著性差異；根據(jù)皮爾森相關(guān)系數(shù)分析得出，IL-18與IgE呈正相關(guān)性，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；IL-33與EOS呈正相關(guān)性（P＜0.05）；IL-18、IL-33與FEV1%呈負相關(guān)性（P＜0.05）。結(jié)論支氣管哮喘急性發(fā)作期中，IL-18和IL-33參與并促進炎性反應(yīng)的發(fā)生。

哮喘；糖皮質(zhì)激素；白細胞介素-18；白細胞介素-33

1 資料與方法

1.1 一般資料 本研究中激素組選擇于武漢市第三醫(yī)院2011年3月～2012年1月收治的支氣管哮喘患者40例，均為急性發(fā)作期，男16例，女24例，平均（37.3±4.6）歲；對照組選擇2011年6月～2012年1月于我院體檢中心體檢健康者30例，男11例，女19例，平均（38.2±3.9）歲；2組年齡、性別等一般資料差異均無統(tǒng)計學意義，具有可比性。本研究經(jīng)倫理委員會批準，所有研究對象均簽署知情同意書。

1.2 納入標準 納入標準：①符合《哮喘防治指南》的診斷標準［4］；②多次發(fā)作，且伴有氣促、咳嗽、胸悶、發(fā)作性喘息甚至胸痛等癥狀；③無任何變態(tài)反應(yīng)及家族藥物過敏史；④無吸煙史；⑤半年內(nèi)未經(jīng)任何糖皮質(zhì)類激素治療。

1.3 排除標準 排除標準：①超敏C反應(yīng)蛋白水平在陽性值范圍；②存在慢性阻塞性肺疾病、肺炎、肺間質(zhì)性疾??；③心、肝、肺、腎、脾等器官有重度病變；④降鈣素原水平在陽性值范圍；⑤存在其它系統(tǒng)炎癥疾病或自身免疫系統(tǒng)疾病。

1.4 方法

1.4.1 糖皮質(zhì)激素治療：參照《哮喘防治指南》中相關(guān)藥物的用量規(guī)定［5］，激素組40例患者給予甲潑尼龍琥珀酸鈉（輝瑞制藥有限公司生產(chǎn)，國藥準字H20080284）40～80mg，連續(xù)靜滴3～5 d，根據(jù)患者病情酌情減少用藥量，聯(lián)合靜脈滴注布地奈德（上海信誼百路達藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，國藥準字H20010551）1mg、硫酸特布他林（成都華宇制藥有限公司，國藥準字H20010703）5mg、生理鹽水10mL混合注射液；或聯(lián)合霧化吸入布地奈德1mg、復(fù)方異丙托溴銨（上海勃林格殷格翰藥業(yè)有限公司，國藥準字H20046118）2.5mL、生理鹽水10mL混合液，2次／d，連續(xù)用藥7～14 d。

1.4.2 外周血采集：激素組患者治療前、治療后以及對照組，分別于晨間空腹狀態(tài)下抽取外周靜脈血，采血量為5mL。采用美國 Beckmancoulter公司離心機，離心 10min，3 000 r／min，抽取上層血清，經(jīng)無菌分裝后，存置于－80℃冰箱待檢。

1.4.3 樣本檢測：通過酶聯(lián)免疫吸附法（enzyme linked immunosorbentassay，ELISA）對激素組治療前后共計80例和對照組30例血清樣本，進行IL-18、IL-33水平檢測，所用試劑盒購自上海卓康生物科技有限公司，操作步驟嚴格依照試劑盒說明書執(zhí)行。同時使用全自動特種蛋白分析儀（美國Beckmltrl-Coulter公司，ARRAY360）、血細胞分析儀（泰諾科貿(mào)有限公司，HF-3000）以及化學發(fā)光免疫分析儀（美國Beckmltrl-Coulter公司，ACCESS 2）對110例血清樣本進行嗜酸粒細胞（eosinophil cell，EOS）、超敏 C反應(yīng)蛋白（high-sensitivity C-reactive protein，hs-CRP）及降鈣素原（procalcitonin，PCT）水平檢測。

1.4.4 肺功能檢查：對受檢者身體狀況未構(gòu)成不良影響的基礎(chǔ)上，停止使用支氣管舒張藥≥1／2 d后，采用肺功能儀（美國respironic公司，SP-3600）對激素組受檢者治療前后，及對照組受檢者的FEV1%水平等進行檢測并記錄檢測數(shù)據(jù)。

1.4.5 統(tǒng)計學方法：本次研究使用SPSS17.0軟件進行統(tǒng)計學相關(guān)分析，正態(tài)計量資料以“±s”表示。多組間變動趨勢使用皮爾森相關(guān)系數(shù)分析法；激素組與對照組的組間比較使用兩獨立樣本t檢驗；激素組患者治療前后的比較使用配對t檢驗，以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 激素組治療前后肺功能和白細胞介素的變化 激素組治療后FEV1%值顯著高于用藥前，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），激素組治療后 IgE、EOS、IL-18、IL-33值顯著降低，差異均具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05，見表1）。

2.2 激素組與對照組肺功能和白細胞介素變化的比較激素組治療前FEV1%值顯著低于對照組，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；激素組治療前 IgE、EOS、IL-18、IL-33值均顯著高于對照組，差異均具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；激素組治療后FEV1%值與對照組相比，差異無統(tǒng)計學意義；激素組治療后IgE、IL-18、IL-33均高于對照組，差異無統(tǒng)計學意義；但激素組治療后EOS值顯著高于對照組（P＜0.05，見表1）。

表1 2組血清各指標水平比較Tab.1 Comparison of serum indexes in two groups

2.3 激素組治療前各指標關(guān)聯(lián)分析 根據(jù)皮爾森相關(guān)系數(shù)法分析得出，IL-18變動趨勢與IgE變動趨勢一致，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；IL-33變動趨勢與EOS變動趨勢一致，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；IL-18變動趨勢與FEV1%變動趨勢相反，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；IL-33變動趨勢與FEV1%變動趨勢相反，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；IL-18和IL-33變動趨勢與hs—CRP和PCT變動趨勢無關(guān)聯(lián)，差異均無統(tǒng)計學意義（見表2）。

表2 激素組治療前各指標的關(guān)聯(lián)Tab.2 Relevance of inspection statistical data of hormone group pre-treatment

3 討論

本研究通過對哮喘患者使用糖皮質(zhì)激素治療前后IL-18及IL-33水平變化對比，以及其與體檢健康者對比，從而分析哮喘患者經(jīng)糖皮質(zhì)激素治療前后血清介素水平的變化和意義，為臨床相關(guān)研究提供參考意見。在本研究中，激素組患者治療前血清中IL-33水平顯著高于對照組，而激素組患者用藥后血清中IL-33水平顯著低于激素組患者治療前，且僅略高于對照組，患者臨床癥狀有所緩解；由此推斷，IL-33水平升高可能參與氣道炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致哮喘發(fā)作；且糖皮質(zhì)激素有效降低血清中IL-18、IL-33水平，進而減輕患者臨床癥狀。Rogala B等［6］通過對慢性阻塞性肺疾?。╟hronic obstructive pulmonary disease，COPD）患者單核細胞及巨噬細胞中IL-18水平的檢測發(fā)現(xiàn)，COPD患者組織單核及巨噬細胞中IL-18水平顯著提高，且IL-18水平變化趨勢與患者氣道炎癥嚴重程度呈正比，由此推測，哮喘發(fā)作可能與IL-18有很大關(guān)系；IL-18屬于IL-1家族，起初稱之為干擾素-γ（interferon-γ，IFN-γ），后改稱 IL-18［7-9］。Kurowska SM等［10-11］認為，哮喘的發(fā)作是由于IL-18直接刺激Th2輔助淋巴細胞，使Th2輔助淋巴細胞分泌大量IL-10、組胺和IL-13，進而引起患者氣道炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致哮喘發(fā)作。本研究中，激素組患者治療前血清中IL-18水平顯著高于對照組，而激素組患者治療后血清中IL-18水平顯著低于激素組患者治療前，且僅略高于對照組，患者臨床癥狀也有所緩解；由此推斷，IL-18水平升高可能參與氣道炎癥反應(yīng)，引起氣道高反應(yīng)，氣道黏膜水腫，氣道痙攣，甚至引起氣道上皮細胞損害，最終導(dǎo)致哮喘發(fā)作，此推斷結(jié)果與謝莉等［12-14］研究結(jié)果一致。

綜上所述，支氣管哮喘急性發(fā)作期中，IL-18和IL-33參與且促進炎性反應(yīng)的發(fā)生。通過研究血清介素水平的變化可以更深入地探究支氣管哮喘的發(fā)作機制。同時，該研究具有重要的臨床意義：哮喘患者血清介素水平的變化可作為糖皮質(zhì)激素藥物療效的評估依據(jù)；并且為支氣管哮喘的防治提供新的思路。然而，激素治療后嗜酸粒細胞數(shù)量雖然顯著低于治療前（P＜0.05），但仍顯著高于對照組（P＜0.05），該結(jié)果可能與本研究樣本量偏小有關(guān)，可以適當擴大樣本量進行更加全面且深入的研究。

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（編校：李璐璐）

Clinical singificance of serum interleukin changes in the treatment of asthma by glucocorticoids

YE Xian-zhi1，XU Hong-zhen2

（1.Department of emergency，The Third Hospital ofWuhan（Guanshan District），Wuhan 430074，China；2.Department of Respiration，Children's Hospital Affiliated of Medical College of Zhejiang University，Hangzhou 310003，China）

ObjectiveTo investigate the role of interleukin-18（IL-18）and interleukin-33（IL-33）in the pathogenesis of bronchial asthma.Methods40 caseswith acute attack ofbronchialasthma admitted in Wuhan Third Hospital from March 2011 to January 2012 were chosen as the hormone group，and 30 cases healthy people in the same period who underwent routine physical examination were chosen as control group.The serum levels of IL-18 and IL-33，the rate of forced expiratory volume in one second（FEV1）and forced vitalcapacity（FVC，F(xiàn)EV1%），the number of eosinophil cells（EOS）and immunoglobulin E（IgE）were detected in control group and hormone group before and after treatment.Compare the serum levels of IL-18 and IL-33 in hormone group before and after treatment，and the relevance between IL-18，IL-33 and IgE，EOS and FEV1%.ResultsCompared with control group，the serum levels of IL-18 and IL-33 in hormone group pre-treatmentwere significantly increased（P＜0.05），F(xiàn)EV1%，EOSand IgE had significant difference（P＜0.05）.Compared with hormone group pre-treatment the serum levels of IL-18 and IL-33 in hormone group post-treatmentwere significantly decreased（P＜0.05），F(xiàn)EV1%，EOSand IgE improved significantly（P＜0.05）.Compared with control group，the serum levels of IL-18，IL-33，F(xiàn)EV1%and IgE in hormone group post-treatment had no significant difference.The pearson correlative analysis showed that there were positive correlations between the levels of IL-18，IL-33，IgE and EOS，respectively（P＜0.05），and therewere negative correlations between IL-18，IL-33 levels and FEV1%，respectively（P＜0.05）.ConclusionIL-18 and IL-33 participate in the acute asthma，and may play stimulation role in the inflammatory process of asthma.

asthma；glucocorticoid；interleukin-18；interleukin-33

R544

A

1005－1678（2014）04－0118－03

支氣管哮喘主要是由肥大細胞、嗜酸性粒細胞（eosinophil cell，EOS）和T淋巴細胞參與的以氣道高反應(yīng)慢性氣道炎癥為主要特征的變態(tài)反應(yīng)性疾病［1］。患者接觸花粉、灰塵、動物、刺激性氣霧等變應(yīng)原之后易發(fā)作支氣管哮喘，癥狀常于夜間加重，臨床癥狀主要為氣促、咳嗽、胸悶、發(fā)作性喘息甚至胸痛等。支氣管哮喘發(fā)病機理復(fù)雜，目前學術(shù)界尚無定論。有研究顯示細胞因子間的比例失衡與哮喘發(fā)作有很大關(guān)系［2-3］，其中細胞因子IL-33及IL-18成為研究熱點，但關(guān)于此2種細胞因子是否參與了哮喘發(fā)病過程的研究較少。因此，本研究將根據(jù)哮喘患者經(jīng)糖皮質(zhì)激素治療前后血清介素水平的變化，分析IL-18和IL-33在哮喘發(fā)作中的作用及其與EOS、免疫球蛋白E（immunoglobulin E，IgE）、1秒用力呼氣容積（forced expiratory volume in one second，F(xiàn)EV1）與用力肺活量（forced vital capacity，F(xiàn)VC）的比值FEV1%的相關(guān)性。

浙江省醫(yī)藥衛(wèi)生計劃（2011KYA097）

葉先智，男，本科，主治醫(yī)師，研究方向：急診工作，E-mail：155109859＠qq.com。