Rho激酶抑制劑與芪藶強(qiáng)心膠囊對(duì)慢性心力衰竭患者細(xì)胞因子的影響

徐慶國(guó)，談金強(qiáng)，張瑞菊，李坤

（1.山東省交通醫(yī)院 心內(nèi)科，山東 濟(jì)南 250031；2.濟(jì)南市濟(jì)陽(yáng)縣人民醫(yī)院 心內(nèi)科，山東 濟(jì)南 251400；3.山東省交通醫(yī)院 皮膚科，山東 濟(jì)南 250031；4.山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院附屬醫(yī)院 婦產(chǎn)科，山東 濟(jì)南 250031）

Rho激酶抑制劑與芪藶強(qiáng)心膠囊對(duì)慢性心力衰竭患者細(xì)胞因子的影響

徐慶國(guó)1，談金強(qiáng)2，張瑞菊3，李坤4

（1.山東省交通醫(yī)院 心內(nèi)科，山東 濟(jì)南 250031；2.濟(jì)南市濟(jì)陽(yáng)縣人民醫(yī)院 心內(nèi)科，山東 濟(jì)南 251400；3.山東省交通醫(yī)院 皮膚科，山東 濟(jì)南 250031；4.山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院附屬醫(yī)院 婦產(chǎn)科，山東 濟(jì)南 250031）

目的觀察Rho激酶抑制劑、芪藶強(qiáng)心膠囊分別及聯(lián)合短期應(yīng)用對(duì)慢性心力衰竭患者細(xì)胞因子（腫瘤壞死因子-α、白細(xì)胞介素-6）水平的作用，并探討其機(jī)制。方法120例慢性心力衰竭患者符合紐約心臟協(xié)會(huì)（New York Heart Association，NYHA）分級(jí)Ⅱ～Ⅲ級(jí)，在接受常規(guī)心衰治療的基礎(chǔ)上，隨機(jī)分成4組，分別是空白對(duì)照組（A組，n＝30），單用Rho激酶抑制劑治療組（B組，n＝30），單用芪藶強(qiáng)心膠囊治療組（C組，n＝30）和Rho激酶抑制劑與芪藶強(qiáng)心膠囊聯(lián)合治療組（D組，n＝30）均治療4周。治療前后測(cè)定腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor，TNF-α）、白細(xì)胞介素-6（interleukin-6，IL-6）、腦尿鈉肽（brain natriuretic peptide，BNP）評(píng)估心功能。結(jié)果治療后B、C、D組分別與對(duì)照組A組相比TNF-α、IL-6、BNP水平均顯著降低（P＜0.05），治療組間（B組、C組、D組）治療后，D組較B組、C組水平顯著降低（P＜0.05）。結(jié)論Rho激酶抑制劑聯(lián)合芪藶強(qiáng)心膠囊能顯著降低慢性心力衰竭患者血清細(xì)胞因子TNF-α、IL-6水平，改善心功能，有利于慢性心力衰竭的治療。

Rho激酶抑制劑；芪藶強(qiáng)心膠囊；細(xì)胞因子；慢性心力衰竭

1 材料與方法

1.1 一般資料 選擇2010年1月～2013年1月期間在山東省交通醫(yī)院收治的心衰患者（符合NYHA分級(jí)Ⅱ～Ⅲ級(jí)）120例，其中冠心病65例，擴(kuò)張型心肌病17例，高血壓病28例，風(fēng)濕性心臟病10例。男性62例，年齡57～74歲，平均（64.5±5.6）歲，女性58例，年齡59～73歲，平均（66.2±5.5）歲。病程10個(gè)月～12年，平均（4.6±2.8）年。排除標(biāo)準(zhǔn)：6個(gè)月內(nèi)的急性心肌梗死、感染、惡性腫瘤、腦卒中、未控制的高血壓、糖尿病、肝腎功能不全、痛風(fēng)、外科手術(shù)或嚴(yán)重創(chuàng)傷、免疫系統(tǒng)疾病、甲狀腺功能異常、應(yīng)用過(guò)甾體類抗炎藥及血液系統(tǒng)疾病等。

1.2 儀器設(shè)備、藥品及試劑 鹽酸法舒地爾（天津紅日藥業(yè)，國(guó)藥準(zhǔn)字H20040356），芪藶強(qiáng)心膠囊（以嶺藥業(yè)，國(guó)藥準(zhǔn)字Z20040141），TNF試劑盒（上海拜力生物科技有限公司，）和IL-6試劑盒（上海越研生物科技有限公司），BNP試紙條（德國(guó)羅氏公司），Cardiac Reader心肌標(biāo)志物定量檢測(cè)分析儀（德國(guó)羅氏公司）。

1.3 方法

1.3.1 分組：所有入選患者均于入院次日檢測(cè)TNF-α、IL-6、BNP水平，并隨機(jī)分為4組，分別是空白對(duì)照組（A組，n＝30），單用Rho激酶抑制劑治療組（B組，n＝30），單用芪藶強(qiáng)心膠囊治療組（C組，n＝30）和Rho激酶抑制劑與芪藶強(qiáng)心膠囊聯(lián)合治療組（D組，n＝30）。4組研究對(duì)象年齡、性別、吸煙史、高血壓、糖尿病、血脂水平、基礎(chǔ)用藥情況及治療前TNF-α、IL-6、BNP水平的差異無(wú)顯著性。4組均應(yīng)用劑量相似的ACEⅠ或ARB類、利尿劑、地高辛和β受體阻滯劑等治療，B組加用Rho激酶抑制劑鹽酸法舒地爾60mg靜點(diǎn)2次／d，C組加用芪藶強(qiáng)心膠囊4?？诜?次／d，D組加用Rho激酶抑制劑鹽酸法舒地爾60 mg靜點(diǎn)2次／d同時(shí)芪藶強(qiáng)心膠囊4?？诜?次／d。所有患者均連續(xù)應(yīng)用4周，均常規(guī)檢測(cè)血常規(guī)、凝血功能、肝腎功能等。研究經(jīng)我院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有患者均簽署知情同意書(shū)。

1.3.2 TNF-α、IL-6測(cè)定：采用 ELISA法測(cè)定 TNF-α和IL-6。所有受檢者空腹12 h以上，清晨7∶00-8∶00采血，采血時(shí)平臥位，休息15min以上，采集肘正中靜脈血4～6mL，室溫下自然凝固，1 500 r／min離心10min后，分離血清，置于－80℃超低溫冰箱保存待標(biāo)本收集完全后同批測(cè)定。肝腎功能采用普通干管，采靜脈血4mL，分離血清后當(dāng)日在生化室檢測(cè)。

1.3.3 BNP測(cè)定：BNP標(biāo)本采集：4組受試者均在治療前及治療結(jié)束后于清晨空腹采肘靜脈血2 m L置于肝素鋰抗凝管中混勻，不需離心，采用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定血漿BNP水平。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 所有數(shù)據(jù)輸入SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，正態(tài)計(jì)量資料用“±s”表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，組內(nèi)治療前后比較用配對(duì)t檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 4組患者一般資料比較 4組患者的年齡組成、性別比例、病史等一般臨床資料無(wú)顯著性差異（見(jiàn)表1）。

表1 4組患者一般資料Tab.1 Comparison of general information in four groups

2.2 治療組治療后與對(duì)照組比較，TNF-α、IL-6、BNP水平顯著降低（P＜0.05），治療組間（B、C、D組間）治療后，D組較 B組、C組水平顯著降低（P＜0.05）。

表 2 4組患者治療前后 TNF-α、IL-6、BNP水平比較（ng／L）Tab.2 Comparison of TNF-α，IL-6，BNP levels in four groups before and after treatment（ng／L）

3 討論

CHF因其高發(fā)病率、高死亡率目前仍是心血管領(lǐng)域尚未攻破的堡壘之一。研究表明，原發(fā)性心肌損傷與負(fù)荷過(guò)重，通過(guò)神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)的激活以及多種炎癥細(xì)胞因子的參與，使得心肌組織中多條信號(hào)調(diào)節(jié)途徑激活，進(jìn)而表現(xiàn)為心臟代償性肥厚、心肌細(xì)胞重構(gòu)，這一導(dǎo)致心衰的關(guān)鍵環(huán)節(jié)的病理生理機(jī)制則包括心肌細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的增高和TNF-α、IL-6在內(nèi)的多種炎癥因子的生成，這些都有Rho激酶通路的參與［3］。針對(duì)Rho／ROCK信號(hào)通路抑制劑的藥物研發(fā)策略，主要集中在防治高血壓、動(dòng)脈粥樣硬化、心肌梗死和心力衰竭等心腦血管疾病。TNF-α、IL-6是由激活的單核巨噬細(xì)胞分泌的可以誘導(dǎo)凋亡的炎癥細(xì)胞因子，具有多種負(fù)面生物學(xué)效應(yīng)，2者通過(guò)負(fù)性肌力作用、誘導(dǎo)心室重構(gòu)、誘發(fā)心肌細(xì)胞凋亡，加快心衰進(jìn)程［4］。致炎細(xì)胞因子TNF-α、IL-6可作為心力衰竭病理生理狀態(tài)和預(yù)后評(píng)價(jià)的標(biāo)記物。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明Rho激酶抑制劑可以拮抗CHF患者的炎癥反應(yīng)，降低TNF-α、IL-6炎癥因子的水平。

Rho激酶是具有信息傳導(dǎo)和分子開(kāi)關(guān)功能的信號(hào)多肽［5］，參與動(dòng)脈粥樣硬化、血管再狹窄及血管痙攣的發(fā)病機(jī)制［6］。Breslin［7］等報(bào)道，Rho激酶抑制劑可抑制C5a活化的中性粒細(xì)胞所誘導(dǎo)的冠狀靜脈內(nèi)皮細(xì)胞肌動(dòng)蛋白重構(gòu)及內(nèi)皮屏障功能的紊亂，降低內(nèi)皮的通透性。故 Rho激酶抑制劑通過(guò)抑制炎細(xì)胞的浸潤(rùn)，減少炎癥介質(zhì)的產(chǎn)生，可拮抗炎癥反應(yīng)，從而改善CHF患者心功能。長(zhǎng)期給予Rho激酶抑制劑法舒地爾（8周），能夠逆轉(zhuǎn)實(shí)驗(yàn)豬的粥樣硬化冠脈痙攣、損傷、壓力重構(gòu)等血管性疾病的發(fā)展，對(duì)抗心肌缺血。中醫(yī)理論認(rèn)為心衰為氣血兩虛、血瘀氣滯、陽(yáng)虛水泛所致，認(rèn)為心氣虛乏、運(yùn)血無(wú)力是心衰發(fā)病的中醫(yī)病機(jī)根本。芪藶強(qiáng)心膠囊正是基于此病機(jī)的有效治療CHF的中成藥制劑，其按照君臣佐使配伍，由黃芪、人參、附子、丹參、葶藶子、澤瀉、玉竹、桂枝、紅花、香加皮、陳皮等組成。其中40余種單體化合物可能通過(guò)協(xié)同或互補(bǔ)作用治療心衰［8］。方中黃芪、附子為君，益氣溫陽(yáng)而促進(jìn)心功能，具有強(qiáng)心作用［9］。人參、丹參、葶藶子為臣，三藥合用，共達(dá)補(bǔ)氣、活血、利水、通絡(luò)之功效。人參可改善心室重構(gòu)［10］；丹參可增加心肌ATP含量［11］；葶藶子強(qiáng)心利尿［12］；佐藥紅花、香加皮、澤瀉、陳皮、玉竹活血通絡(luò)、利水消腫；桂枝引藥入洛。諸藥合用以奏效機(jī)［13］。充分發(fā)揮其復(fù)方多環(huán)節(jié)、多途徑、多靶點(diǎn)的治療優(yōu)勢(shì)。本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明單用Rho激酶抑制劑或單用芪藶強(qiáng)心膠囊較治療前顯著降低TNF-α、IL-6、BNP水平，與對(duì)照組比較亦效果顯著，但2者比較治療效果相當(dāng)，無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，2者聯(lián)合則更進(jìn)一步明顯改善炎癥因子及心功能指標(biāo)。故本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明在常規(guī)心衰治療的基礎(chǔ)上，Rho激酶抑制劑聯(lián)合芪藶強(qiáng)心膠囊可以進(jìn)一步拮抗慢性心衰患者的炎癥反應(yīng)，進(jìn)而改善患者心功能，值得臨床推廣應(yīng)用，但2者聯(lián)合的相互作用機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

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（編校：譚玲）

Effects of Rho-kinase inhibitor and Qiliqiangxin capsules on serum cytokines in patients w ith chronic heart failure

XU Qing-guo1，TAN Jin-qiang2，ZHANG Rui-ju3，LIKun4，LIU Yan-mei5

（1.Department of Cardiology，Traffic Hospital of Shandong Province，Ji'nan 250031，China；2.Department of Cardiology，People's Hospital of Jiyang，Ji'nan 251400，China；3.Department of Dermatology，Traffic Hospital of Shandong Province，Ji'nan 250031，China；4.Department of Obstetrics and Gynecology，Affiliated Hospital of Shandong Academy of Medical Science，Ji'nan 250031，China）

ObjectiveTo observe the short term effects of Rho-kinase inhibitor and Qiliqiangxin capsule on serum tumor necrosis factor-α（TNF-α）and interleukin-6（IL-6）levels in patientswith chronic heart failure，and explore themechanism.Methods120 chronic heart failure patients received conventional treatment for 4 weekswere divided into blank control group（Group A，n＝30），Rho-kinase inhibitor treated group（Group B，n＝30），Qiliqiangxin capsules-treated group（Group C，n＝30），and the other 30 cases were treated with Rho-kinase inhibitor combined with Qiliqiangxin capsules（GroupD，n＝30）.TNF-α，IL-6 and BNPweremeasured and cardiac function was evaluated before and after treatment.The difference between 4 groupswas analyzed.ResultsAfter treatment，the levels of TNF-α，IL-6，BNP in the observation group were lower than that in the control group.The difference was statistically significant（P＜0.05）.The levels of TNF-α，IL-6，BNP in the D group were lower than that in the B and C group.The difference was statistically significant（P＜0.05）.ConclusionRho-kinase inhibitor combined with Qiliqiangxin capsule can improve cardiac function and reduce levels of serum cytokines associated with chronic heart failure，which is conducive to the treatment of chronic heart failure.

Rho-kinase inhibitor；Qiliqiangxin capsules；cytokines；chronic heart failure

R541.4

A

1005－1678（2014）04－0076－03

慢性心力衰竭（chronic heart failure，CHF）是心血管疾病的最終結(jié)果，其發(fā)生發(fā)展是一復(fù)雜而長(zhǎng)期的過(guò)程，包括炎性細(xì)胞因子在內(nèi)的多種因素的影響，細(xì)胞因子參與多種免疫反應(yīng)，細(xì)胞因子在體內(nèi)的高度表達(dá)與心功能惡化相關(guān)［1］。故有效降低心衰患者血清細(xì)胞因子水平，為臨床治療心衰提供了新思路［2］。已有研究表明，心力衰竭時(shí)心肌組織中Rho激酶mRNA水平呈明顯高表達(dá)，故Rho激酶抑制劑能有效抑制心衰進(jìn)展。芪藶強(qiáng)心膠囊作為中成藥制劑對(duì)心衰有明確治療作用。本研究旨在觀察Rho激酶抑制劑法舒地爾及芪藶強(qiáng)心膠囊對(duì)慢性心力衰竭患者細(xì)胞因子（TNF-α、IL-6）水平及心功能的影響，并探討其可能的機(jī)制。

山東省自然科學(xué)基金 （ZR2009CL027）；濟(jì)南市科技局科技明星計(jì)劃（20100118）；山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院基金（201023）

徐慶國(guó)，男，本科，研究方向：冠心病介入，E-mail：xqg6635＠163.com。