密度與施肥對(duì)半年生喜樹苗喜樹堿含量的影響

馮立新，蘇付保，黎健杏，溫中林，秦鳳梅，楊燕紅

(廣西生態(tài)工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院、廣西珍貴樹種良種培育中心，廣西 柳州 545004)

密度與施肥對(duì)半年生喜樹苗喜樹堿含量的影響

馮立新，蘇付保，黎健杏，溫中林，秦鳳梅，楊燕紅

(廣西生態(tài)工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院、廣西珍貴樹種良種培育中心，廣西 柳州 545004)

以喜樹半年生播種苗為試材，研究栽植密度和施肥配比、施肥量對(duì)葉片喜樹堿含量的影響。結(jié)果表明：半年生喜樹播種苗移栽密度以50株·m-2左右喜樹堿含量最高。施用高氮肥料、高用肥量或加施B肥均導(dǎo)致葉片的喜樹堿含量降低，以施用等比例NPK 26.7 g·m-2喜樹堿含量最高。

喜樹；喜樹堿含量；移栽密度；施肥配比

喜樹各器官中可以提取喜樹堿，喜樹堿及其衍生物是醫(yī)療上常用的抗腫瘤和艾滋病的藥劑，喜樹被預(yù)測(cè)為21世紀(jì)抗癌與抗艾滋病首選植物。王博文等[1]研究了遮蔭對(duì)葉片、莖及全株喜樹堿含量的影響。吳子龍等[2]、于洋等[3]研究了接種叢枝菌根對(duì)幼苗根、葉片和全株喜樹堿含量的影響。牧文等[4]研究了水楊酸處理和機(jī)械傷害誘導(dǎo)對(duì)幼苗喜樹堿含量的影響。邢軍會(huì)[5]、孫世芹[6]研究了氮對(duì)喜樹堿含量的影響。魏煥勇[7]研究了密度對(duì)喜樹堿含量的影響。為了進(jìn)一步研究提高喜樹堿含量的有效栽培措施，作者在實(shí)施“廣西喜樹堿優(yōu)質(zhì)種質(zhì)資源圃建設(shè)研究”過程中，開展了苗木密度與施肥的對(duì)比試驗(yàn)，旨在探索密度、施肥配方與用量對(duì)半年生播種苗喜樹堿含量的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)地概況

試驗(yàn)地設(shè)在廣西生態(tài)工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院苗圃，苗圃地處廣西柳州市柳北區(qū)沙塘鎮(zhèn)，北緯24°28′06″、東經(jīng)109°23′03″，海拔123 m。年均氣溫20.1 ℃，極端高溫39.4 ℃，極端低溫-5.8 ℃；年均降水量1429.7 mm，年均空氣相對(duì)濕度78%。土壤為紅壤，土層厚度≥100 cm，呈酸性。試驗(yàn)苗圃地采用高床整地，床高30 cm，寬1 m，長(zhǎng)10 m，床間距30 cm，整個(gè)小區(qū)與其他苗圃地有50 cm高土埂隔離。

1.2 研究方法

1.2.1 播種 種子來自廣西天峨縣。2013年3月22日催芽后密集播于沙床上，加強(qiáng)水分管理，確保種子發(fā)芽和幼苗正常生長(zhǎng)，發(fā)芽15 d時(shí)葉面噴0.5%的氮肥1次。

1.2.2 移植 2013年5月16日(幼苗高約5 cm)移植，種植行間距20 cm，種植行寬10 cm，行內(nèi)種植2小行，平均株行距20 cm×15 cm，即33株·m-2。

1.2.3 密度試驗(yàn) 移植時(shí)設(shè)置3個(gè)密度處理，A：33株·m-2(平均株行距15 cm×20 cm)、B：50株·m-2(平均株行距10 cm×20 cm)、C：67株·m-2(平均株行距10 cm×15 cm)，3個(gè)重復(fù)，每個(gè)處理每個(gè)重復(fù)各移植1 m2，在苗床的兩端設(shè)保護(hù)行。

1.2.4 施肥試驗(yàn) 在密度33株·m-2條件下進(jìn)行施肥試驗(yàn)，設(shè)置9個(gè)施肥處理，分別為1：N1P1K1(26.7 g·m-2)、2：N1P1K1(33.3 g·m-2)、3：N1P1K1+B(NPK 26.7 g·m-2+B 6.7 g·m-2)、4：N1P1K1+B(NPK 33.3 g·m-2+B 6.7 g·m-2)、5：N1.5P1K1(26.7 g·m-2)、6：N1.5P1K1(33.3 g·m-2)、7：N1.5P1K1+B(NPK 26.7 g·m-2+B 6.7 g·m-2)、8：N1.5P1K1+B(NPK 33.3 g·m-2+B 6.7 g·m-2)和CK(對(duì)照)。其中，N為尿素、P為過磷酸鈣、K為硫酸鉀、B為硼砂。每個(gè)處理的每個(gè)重復(fù)移植3行，每行10株，每小區(qū)面積0.9 m2。施肥量以行控制。于6月15日、7月15日、8月15日各施肥1次。

1.2.5 喜樹堿含量測(cè)定 2013年9月30日采集樣品，將樣品放在干燥的室內(nèi)自然風(fēng)干，并送廣西柳州食品藥品檢驗(yàn)所檢測(cè)。喜樹葉用高速中藥粉碎機(jī)粉碎，過2號(hào)篩網(wǎng)，然后精密稱取過篩葉粉0.5 g置于10 mL容量瓶中，加61%乙醇溶液8 mL在50 ℃下超聲提取10 min，冷卻后加61%乙醇溶液至刻度，搖勻過濾得喜樹堿提取液。用Agilent 1100高效液相色譜儀測(cè)定提取液中喜樹堿含量，重復(fù)3次。色譜條件：色譜柱AgilentXDB-C18，柱溫25 ℃，流速10 mL·min-1，檢測(cè)波長(zhǎng)254 nm，進(jìn)樣量10 μL。

2 結(jié)果與分析

2.1 移植密度對(duì)喜樹堿含量的影響

由表1可知，栽植密度與喜樹堿含量關(guān)系密切，在同等栽培技術(shù)條件下，3種密度的喜樹堿含量從高到低排序?yàn)锽(50株·m-2)>A(33株·m-2)>C(67株·m-2)，B比A增加3.4%、比C增加6.2%，即3種密度以50株·m-2的喜樹堿含量最高。方差分析結(jié)果表明各處理間差異極顯著(P<0.01)；多重比較表明(表2)，B與A、C之間、A與C之間有極顯著差異。說明移植密度對(duì)喜樹堿含量的影響極顯著，適宜的移植密度有利于提高喜樹堿含量；而移植密度太大，喜樹堿含量極顯著下降。

2.2 NPK比例對(duì)喜樹堿含量的影響

由表3可知，NPK的比例與喜樹堿含量關(guān)系密切，在施肥量相同的條件下，N1P1K1的喜樹堿含量是N1.5P1K1的106.0%，表明高氮比例的肥料使喜樹堿含量降低。這與邢軍會(huì)[5]、孫世芹[6]的研究結(jié)論是一致的。方差分析表明，N1P1K1與N1.5P1K1間的喜樹堿含量存在極顯著差異(P<0.01)。

表1 不同密度對(duì)喜樹堿含量的影響

表2 不同密度喜樹堿含量多重比較

*：LSD(0.01)=15.3；LSD(0.05)=10.1。

表3 NPK比例對(duì)喜樹堿含量的影響

2.3 NPK總量對(duì)喜樹堿含量的影響

由表4可知，NPK的總量與喜樹堿含量關(guān)系密切，施肥量26.7 g·m-2的喜樹堿含量是施肥量33.3 g·m-2的106.7%。施肥量大的喜樹堿含量降低，這可能與氮總量偏高有關(guān)。方差分析表明，施肥量26.7 g·m-2與施肥量33.3 g·m-2間喜樹堿含量有極顯著差異(P<0.01)。

2.4 B對(duì)喜樹堿含量的影響

由表5可知，在其它條件相同下，在肥料中加入硼砂6.7 g·m-2的施肥處理喜樹堿含量比不添加硼砂的施肥處理降低1.4%。方差分析表明，施B與不施B間的喜樹堿含量存在極顯著差異(P<0.01)。

2.5 施肥處理對(duì)喜樹堿含量的影響

由表6可知，施肥處理與喜樹堿含量關(guān)系密切，在同等栽培技術(shù)條件下，不同施肥處理喜樹堿含量從高到低排序?yàn)樘幚?>處理3>處理8>CK>處理5>處理2>處理7>處理6>處理4，排名前3名的處理1、處理3、處理8喜樹堿含量分別是對(duì)照的111.6%、107.4%、101.9%，分別是最低處理4的120.4%、115.7%、110.0%?？梢姡幚?(N1P1K126.7 g·m-2)和處理3(N1P1K126.7 g·m-2+B 6.7 g·m-2)能有效提高喜樹堿含量。表明低氮比例和適當(dāng)?shù)陀昧康氖┓侍幚硐矘鋲A含量高。方差分析結(jié)果表明：處理間差異極顯著(P<0.01)；多重比較表明(表7)，除處理6與處理4之間差異不顯著，處理7與處理6、處理4之間差異顯著外，其它處理間均存在極顯著差異。

表4 NPK總量對(duì)喜樹堿含量的影響

表5 B對(duì)喜樹堿含量的影響

表6 施肥處理對(duì)喜樹堿含量的影響

表7 不同施肥處理喜樹堿含量多重比較

*：LSD(0.01)=7.3；LSD(0.05)=5.3。

3 小結(jié)與討論

移栽密度試驗(yàn)結(jié)果表明，3種栽植密度A(33株·m-2)、B(50株·m-2)、C(67株·m-2)喜樹堿含量從高到低依次為B>A>C，且三者間差異極顯著，表明半年生喜樹播種苗移栽密度以50株·m-2左右為宜。這與魏煥勇[7]研究結(jié)果“25株·m-2的喜樹堿含量最高”略有不同。

施肥試驗(yàn)結(jié)果表明，在施肥量相同的條件下，N1P1K1的喜樹堿含量是N1.5P1K1的106.0%，且二者差異極顯著，表明高氮比例的肥料使喜樹堿含量降低。這與邢軍會(huì)[5]、孫世芹[6]的研究結(jié)論“隨氮素水平的增加，喜樹幼苗葉片中喜樹堿含量表現(xiàn)出先升高后降低的變化趨勢(shì)”相類似。施肥量26.7 g·m-2的喜樹堿含量是33.3 g·m-2的106.7%，且二者間差異極顯著。施肥量大的喜樹堿含量降低，這可能與氮總量偏高有關(guān)。在其它條件相同下，在肥料中加入硼砂6.7 g·m-2的施肥處理喜樹堿含量降低1.4%，表明栽培喜樹苗木不宜加硼砂。在同等栽培技術(shù)條件下，9種施肥處理對(duì)提高喜樹堿含量最為有效的是N1P1K1(26.7 g·m-2)、其次是N1P1K1( 26.7 g·m-2+B 6.7 g·m-2)，且二者間存在極顯著差異，表明不加硼砂比加硼砂的喜樹堿含量高，說明施用等比例NPK肥26.7 g·m-2能有效提高喜樹堿含量。

綜上所述，喜樹半年生播種苗以移植密度50株·m-2，施用等比例NPK 26.7 g·m-2的喜樹堿含量最高。

[1]王博文，王洋，閻秀峰.光強(qiáng)對(duì)喜樹幼苗喜樹堿含量及分配的影響[J].黑龍江大學(xué)自然科學(xué)學(xué)報(bào)，2006，23(2)：260-264.

[2]吳子龍，趙昕.混合接種菌根真菌對(duì)喜樹幼苗生長(zhǎng)及喜樹堿含量的影響[J].北方園藝，2009(10)：52-54.

[3]于洋，于濤，王洋，等.接種時(shí)期對(duì)叢枝菌根喜樹幼苗喜樹堿含量的影響[J].植物生態(tài)學(xué)報(bào)，2010，34(6)：687-694.

[4]牧文，劉文哲.傷害及誘導(dǎo)子對(duì)喜樹幼苗中喜樹堿含量的影響[J].西北植物學(xué)報(bào)，2007，27(5)：977-982.

[5]邢軍會(huì).氮素營養(yǎng)對(duì)喜樹幼苗生長(zhǎng)及其葉片喜樹堿含量的影響[C].哈爾濱：東北林業(yè)大學(xué)，2003.

[6]孫世芹.氮素水平對(duì)喜樹幼苗喜樹堿含量的影響[J].中國中藥雜志，2008，33(4)：356-359.

[7]魏煥勇.種群密度對(duì)喜樹幼苗生物量及喜樹堿含量的影響[C].哈爾濱：東北林業(yè)大學(xué)，2005.

Density and Fertilization Influence on the Leaves Camptothecin Content ofC.acuminatahalf year old Seedling

FENG Li-xin，SU Fu-bao，LI Jian-xing，WEN Zhong-lin，QIN Feng-mei，YANG Yan-hong

(GuangxiEco-engineeringVocationalandTechnicalCollege；Guangxiimprovedmaterialofpreciousindigenoustreespeciesselectivebreedingcenter，Liuzhou545004，Guangxi，China)

C.acuminata′shalf year old seedlings were used as test subjects.We studied the effects of planting density and fertilizer ratio on the leaves camptothecin content.Camptothecin content in the leaf was reduced by application B，high nitrogen fertilizer and high amount of fertilizer.The highest Camptothecin content in the leaves ofC.acuminatawas got from half year old seedlings with the treatment of NPK 26.7 g·m-2.

CamptothecaacuminataDecne；camptothecin content；planting density；fertilization ratio

10.13428/j.cnki.fjlk.2014.03.009

2013-11-08；

2014-01-04

2008年度廣西教育廳科研項(xiàng)目(廣西喜樹堿優(yōu)質(zhì)種質(zhì)資源圃建設(shè)研究，200809MS127)

馮立新(1979—)，男，吉林大安人，廣西生態(tài)工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院生態(tài)工程系講師，從事森林培育、職業(yè)教育研究。E-mail：66103359@qq.com。

蘇付保(1963—)，男，廣西靈川人，廣西生態(tài)工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院教授，高級(jí)工程師，從事森林培育、職業(yè)教育研究。E-mail：sufubao@163.com。

S792.99

A

1002-7351(2014)03-0040-04