IL-17F、IL-17A在大腸癌組織中的表達(dá)

熊偉民 李明峰 席素娟

大腸癌是一種比較常見的惡性腫瘤，且近年來的發(fā)病率呈上升趨勢(shì)，并逐漸集中于老年人群中，而該類患者的致病因素復(fù)雜，目前臨床上認(rèn)為與患者的飲食方式及遺傳因素等密切相關(guān)[1]。而據(jù)相關(guān)研究表明，IL-17F、IL-17A在前列腺癌及胃癌等腫瘤中，高水平表達(dá)，但臨床上關(guān)于大腸癌的病情程度與IL-17F、IL-17A的相關(guān)性研究較少。本文針對(duì)此問題，對(duì)我院所收治的72例大腸癌患者癌組織中的IL-17F、IL-17A的表達(dá)情況進(jìn)行分析，報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料

選取2011年6月-2013年6月我院收治的大腸癌患者共72例，均經(jīng)病理學(xué)診斷后確診，且術(shù)前均未進(jìn)行化療及放療。72例中男性38例、女性34例，年齡24～84歲，平均年齡為(63.6±2.5)歲。根據(jù)組織學(xué)分型：黏液癌10例，管狀及乳頭狀腺癌58例，印絨細(xì)胞癌4例；根據(jù)TNM臨床分期：Ⅰ期30例、Ⅱ期22例、Ⅲ期13例、Ⅳ期7例；根據(jù)分化程度：高分化35例、中分化30例，低分化及未分化共7例。淋巴結(jié)發(fā)生轉(zhuǎn)移者37例。

1.2 試劑與方法

本次研究所用試劑為：兔抗人IL-17F、IL-17A單克隆抗體(工作濃度1∶100)、BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒、WIP組織細(xì)胞裂解液、DAB顯示劑、辣根酶標(biāo)記山羊抗兔TgG以及SP免疫免疫組化試劑盒。采用免疫組化法，按照SP免疫組化試劑盒說明進(jìn)行操作，對(duì)大腸癌手術(shù)切除石蠟標(biāo)本的切片進(jìn)行檢測(cè)。以已知IL-17F、IL-17A陽性表達(dá)的大腸癌標(biāo)本作為本實(shí)驗(yàn)的陽性對(duì)照，并以代替一抗的磷酸鹽緩沖液，作為陰性對(duì)照。陽性表達(dá)的判定標(biāo)準(zhǔn)為：在細(xì)胞核或細(xì)胞質(zhì)中發(fā)現(xiàn)黃色顆粒沉淀，并記錄陽性細(xì)胞的比例，取平均值。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

對(duì)本次研究所記錄的相關(guān)指標(biāo)數(shù)據(jù)使用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 17.0進(jìn)行分析，組間計(jì)量資料與計(jì)數(shù)資料對(duì)比，分別采用t檢驗(yàn)與χ2檢驗(yàn)法，不同病理因素的IL-17F、IL-17A表達(dá)情況采用單因素分析法，并以P<0.05的因素納入多因素Logistic回歸模型進(jìn)行分析。

2 結(jié)果

2.1 癌組織與癌旁組織的IL-17F、IL-17A表達(dá)對(duì)比

癌組織的IL-17F表達(dá)率為(15.03±5.98)%，癌旁組織為(2.71±1.44)%，2組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；癌組織的IL-17A表達(dá)率為(17.04±5.88)%，癌旁組織為(2.34±1.27)%，2組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

2.2 大腸癌患者IL-17F、IL-17A表達(dá)與臨床病理參數(shù)的單因素分析

經(jīng)單因素分析后發(fā)現(xiàn)，患者的性別、年齡、組織學(xué)分型對(duì)IL-17F、IL-17A的表達(dá)影響不顯著(P>0.05)，而患者的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、分化程度以及TNM分期對(duì)其影響顯著(P<0.05)，見表1。

表1 大腸癌患者IL-17F、IL-17A表達(dá)與臨床病理參數(shù)的單因素分析

2.3 IL-17A、IL-17F陽性表達(dá)的多因素回歸分析

多元回歸分析結(jié)果顯示，IL-17A、IL-17F的表達(dá)水平與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、分化程度以及TNM分期有關(guān)(P<0.05)，見表2。

表2 IL-17A、IL-17F陽性表達(dá)的多因素回歸分析結(jié)果

3 討論

近年來，臨床上關(guān)于大腸癌的案例報(bào)道頻頻發(fā)生，是一種病發(fā)率較高的惡性腫瘤[2]，致癌原因主要是由于結(jié)腸黏膜上皮在環(huán)境或遺傳因素等的共同作用下，而引起惡性病變，最終誘導(dǎo)大腸癌的發(fā)生。有研究指出大多數(shù)大腸癌老年患者容易產(chǎn)生諸多并發(fā)癥狀，例如腸梗阻[3-4]，這將會(huì)使得患者發(fā)生慢性貧血、腹痛、腹脹等臨床癥狀，嚴(yán)重影響了患者的健康質(zhì)量[5-6]，因此對(duì)該類患者的病情進(jìn)行有效的評(píng)估，對(duì)提高患者的生活質(zhì)量，具有十分重要的意義。而IL-17F、IL-17A均是TH17細(xì)胞的產(chǎn)物，且二者具有高度的同源性[7]，在最近的研究結(jié)果中表明，大腸癌的預(yù)后情況與TH17細(xì)胞存在密切相關(guān)，但目前臨床上對(duì)大腸癌組織中IL-17F、IL-17A的表達(dá)情況的相關(guān)報(bào)道，尚不多見，因此探究IL-17F、IL-17A與大腸癌的發(fā)生發(fā)展的關(guān)系，對(duì)提高患者生活質(zhì)量、改善預(yù)后等均有積極的意義。

在本次研究中，通過對(duì)72例大腸癌患者手術(shù)切除石蠟標(biāo)本的切片進(jìn)行檢測(cè)后發(fā)現(xiàn)，癌組織中的IL-17F、IL-17A的表達(dá)水平均顯著高于癌旁組織，且經(jīng)單因素分析結(jié)果顯示，患者的性別、年齡、組織學(xué)分型對(duì)IL-17F、IL-17A的表達(dá)影響不顯著，但淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、分化程度以及TNM分期及等因素對(duì)其影響較顯著，且經(jīng)過多因素回歸分析后，結(jié)果亦顯示，IL-17F、IL-17A的表達(dá)水平，均與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、分化程度以及TNM分期等顯著相關(guān)，這與彭波等[8]的報(bào)道結(jié)果相符合。此外，有研究[9]指出，IL-17A通過誘導(dǎo)趨化因子、促炎因子及金屬蛋白酶的表達(dá)，從而起到破壞及浸潤(rùn)組織細(xì)胞的作用，且IL-17A還能在一定程度上促進(jìn)腫瘤的進(jìn)一步生長(zhǎng)，并上調(diào)部分的血管源性因子的產(chǎn)生[10]，例如CSXL5、CSXL6及IL-8等，這些血管源性因子將會(huì)促進(jìn)患者心血管的生長(zhǎng)，并使得血管數(shù)量不斷增加，最終有利于腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)、浸潤(rùn)或者轉(zhuǎn)移等。而目前臨床上關(guān)于IL-17F功能機(jī)制的研究，尚存在諸多的爭(zhēng)議。有研究[11-12]指出，IL-17F能夠?qū)δ[瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)起到抑制性作用，但亦有研究[13-15]指出，IL-17F會(huì)促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)與轉(zhuǎn)移等，且IL-17F基因多態(tài)性往往與胃癌的發(fā)生發(fā)展有關(guān)，因此，臨床上雖然可以通過檢測(cè)大腸癌患者癌組織中的IL-17F、IL-17A的陽性表達(dá)情況，以進(jìn)一步評(píng)估患者的病情發(fā)生發(fā)展情況，但I(xiàn)L-17F、IL-17A在腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)、浸潤(rùn)或者轉(zhuǎn)移等過程中的作用機(jī)制，仍然需要進(jìn)一步研究。

綜上所述，大腸癌患者癌組織中的IL-17F、IL-17A的陽性表達(dá)率高，二者的表達(dá)均與患者的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、分化程度以及TNM分期有關(guān)，值得臨床進(jìn)一步探究。

[1] 鄧尚新,蔡全才,李兆申,等.大腸鏡腸道準(zhǔn)備質(zhì)量的影響因素分析與進(jìn)展〔J〕.中華消化內(nèi)鏡雜志,2011,28(2):118-120.

[2] Davie SA，Maglione JE，Manner CK，et al.Effects of FVB/NJ and C57BI/6J strain Backgrounds on mammary tumor phenotype in induciblenitric oxide synthase deficient mice〔J〕.Transgenic Res,2007,16(2):193-201.

[3] 肖義成.大腸癌并急性腸梗阻發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)及預(yù)后的關(guān)聯(lián)分析〔J〕.海南醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2012,18(11):1617-1619.

[4] 瞿榮鋒,孫念緒.老年性結(jié)腸癌伴腸梗阻74例臨床分析〔J〕.山東醫(yī)藥,2009,49(9):100-101.

[5] Mal M,Koh PK,Cheah PY,et al.Metabotyping of human colorectal cancer using two-dimensional gas chromatography mass spectrometry〔J〕.Anal Bioanal Chem,2012,403(2):483-493.

[6] Ying M,Zhuo S,Chen G,et al.Real-time noninvasive optical diagnosis for colorectal cancer using multiphoton microscopy〔J〕.Scanning,2012,34(3):181-185.

[7] Fujie H,Niu K,Ohba M,et al.A distinct regulatory role of Th17 cytokines IL-17A and IL-17F in chemokine secretion from lung microvascular endothelial cells〔J〕.Inflammation,2012,35(3):1119-1131.

[8] 彭 波,李 華,王育斌,等.結(jié)直腸癌患者癌組織中IL-17A和IL-17F的表達(dá)及意義〔J〕.武漢大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版),2013,34(3):388-390,406.

[9] Eustace A,Smyth LJ,Mitchell L,et al.Identification of cells expressing IL-17A and IL-17F in the lungs of patients with COPD〔J〕.Chest,2011,139(5):1089-1100.

[10] Iyoda M,Shibata T,Kawaguchi M,et al.IL-17A and IL-17F stimulate chemokines via MAPK pathways (ERK1/2 and p38 but not JNK) in mouse cultured mesangial cells:synergy with TNF-alpha and IL-1beta〔J〕.Am J Physiol Renal Physiol,2010,298(3):F779-787.

[11] Contie M,Leger O,Fouque N,et al.IL-17F co-expression improves cell growth characteristics and enhances recombinant protein production during CHO cell line engineering〔J〕.Biotechnol Bioeng,2013,110(4):1153-1163.

[12] Wu X,Zeng Z,Chen B,et al.Association between polymorphisms in interleukin-17A and interleukin-17F genes and risks of gastric cancer〔J〕.Int J Cancer,2010,127(1):86-92.

[13] 曾志榮,吳小琴,許麗霞,等.白細(xì)胞介素-17F A7488G多態(tài)性與廣東地區(qū)胃癌的關(guān)系〔J〕.中華消化雜志,2010,30(8):507-511.

[14] Tahara T,Shibata T,Nakamura M,et al.Association betwe-

en IL-17A,-17F and MIF polymorphisms predispose to CpG island hyper-methylation in gastric cancer〔J〕.Int J Mol Med,2010,25(3):471-477.

[15] 陳 成,陶 林,趙 瑾,等.胃癌組織中IL-17A和IL-17F的表達(dá)及意義〔J〕.臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志,2013,29(1):14-17.