吳慶和 羅仕娟 李玉玲
(廣州中醫(yī)藥大學(xué)第二臨床醫(yī)學(xué)院,廣東 廣州 510405)
慢性萎縮性胃炎(CAG)是臨床常見病,并且與胃癌關(guān)系密切?,F(xiàn)代醫(yī)學(xué)已對本病發(fā)病進(jìn)程有清晰的認(rèn)識〔1〕,但對逆轉(zhuǎn)進(jìn)程無良策。筆者通過中醫(yī)內(nèi)外治法合用方式,探討對脾虛型CAG的影響。
1.1材料 健康成年SPF級Wistar大鼠66只,體重160~200 g,雌雄各半,由廣東省醫(yī)學(xué)動物實驗中心提供。N-甲基-N′-硝基-N-亞硝基胍(MNNG)5 g,日本東京化成工業(yè)株式會社生產(chǎn);去氧膽酸鈉(DOC),由北京鼎國昌盛生物技術(shù)有限責(zé)任公司生產(chǎn)。胃復(fù)春片,60片/瓶,杭州胡慶余堂藥業(yè)有限公司,批號12066171。香砂六君湯合補中益氣湯,處方:木香10 g(后),砂仁5 g(后),黨參10 g,白術(shù)10 g,甘草5 g,陳皮5 g,法半夏10 g,黃芪10 g,升麻5 g,柴胡5 g,中藥飲片產(chǎn)自康美藥業(yè)公司,由廣東省中醫(yī)藥科學(xué)院藥理室采用現(xiàn)代工藝制備,每次抓取10帖藥,加水2 000 ml煎取濃縮至1 000 ml,置于4℃冰箱保存?zhèn)溆?,用時加溫以灌胃。大鼠胃泌素(Gas)Elisa試劑盒,由上海西唐生物科技有限公司生產(chǎn)提供。
1.2方法 (1)造模:將大鼠分為兩組,正常喂養(yǎng)組(n=3,2雄1雌),造模組(n=63)。采用架式籠養(yǎng),室溫18℃~24℃,相對濕度65%,12 h交替照明。喂養(yǎng)組予正常喂食;造模組予以160 μg/L 的MNNG溶液自由飲用;20 mmol/L DOC溶液,以劑量6 ml/kg,逢周二、五空腹灌胃;同時配合饑飽失常法〔2,3〕改進(jìn),從實驗伊始,每周一、三、五、日不喂食,每周二、四、六足量喂食。共造模60 d,處死喂養(yǎng)組、造模組各3只大鼠,病理切片證實造模成功。 (2)將60只造模大鼠分成四組,空白對照組、中藥組、中藥+胃復(fù)春組、中藥+艾箱灸組。空白對照組予以正常飲水及喂食。中藥組在正常喂食基礎(chǔ)上,每日上午按照雌雄大鼠2.5 ml/d、雄性大鼠3.5 ml/d灌服中藥。中藥+胃復(fù)春組,每日灌服中藥湯劑1 h后,再予以0.78 g/kg劑量加服胃復(fù)春片。中藥+艾箱灸組,每日灌服中藥,并配合艾灸治療。艾灸方法采用郁潔等〔4〕改良法:①首先抓取大鼠進(jìn)入大鼠固定器,使大鼠的四肢、腹部暴露,接著將大鼠固定器置于支架上。②分別在大鼠的胃脘、雙足三里處下方放置點燃的無煙艾條,首次艾灸時配合溫度計調(diào)整高度,使艾條燃燒點距離穴位3~5 cm,維持大鼠的艾灸穴位溫度維持波動在45℃~55℃間,共灸20 min;其后艾灸控制支架的高度,維持艾灸的溫度。同時觀察大鼠活動情況,如出現(xiàn)大鼠煩躁不安,則增加支架的高度,以降低體表艾灸溫度,避免出現(xiàn)燙傷情況。以上各組療程共30 d。
1.3血清標(biāo)本制備 各組大鼠治療前予水合氯醛腹腔麻醉后,眼底靜脈采血,離心留取血清標(biāo)本,標(biāo)記后置于冰箱冷藏備檢。療程結(jié)束后,續(xù)以水合氯醛腹腔麻醉,從腹主動脈采血離心、留取血清標(biāo)本,并標(biāo)記。
1.4Gas檢測方法 運用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法檢測,嚴(yán)格按說明書操作,首先求出各標(biāo)準(zhǔn)OD值,再通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線得出標(biāo)本中Gas的濃度值。
2.1一般狀況 造模后全部大鼠均出現(xiàn)較嚴(yán)重的精神萎靡,食欲下降,進(jìn)食量與進(jìn)食次數(shù)均減少,活動減少喜扎堆,毛發(fā)疏松、干枯且易脫落,大便偏爛等癥狀。經(jīng)過30 d療程后,藥物干預(yù)的三組大鼠精神狀況明顯改善,活動度顯著增加,毛發(fā)改善、有光澤,食欲、糞質(zhì)亦好轉(zhuǎn)。中藥+胃復(fù)春組及中藥+艾箱灸組各死亡1只大鼠,解剖見2只大鼠腹腔均有淡黃、清亮積液及積氣,腸道見較長硬糞條,梗阻處上段腸腔擴張,考慮為腹腔麻醉后并發(fā)腸梗阻所致。
2.2血清Gas水平 見表1。在組內(nèi)治療前后Gas水平對比顯示,除中藥組外,余3組均具有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05);治療組與空白對照組治療前后Gas水平變化差值比較具有統(tǒng)計學(xué)差異(均P<0.05)。
表1 各組治療前后胃泌素水平比較±s,pg/ml)
香砂六君子湯出自羅美之·《古今名醫(yī)方論》卷一引柯韻伯方,曰 “四君子氣分之總方也,人參致沖和之氣,白術(shù)培中宮,茯苓清治節(jié),甘草調(diào)五藏,胃氣既治,病安從來,然撥亂反正又不能無為而治,必舉大行氣之品以輔之。則補者不至泥而不行,故加陳皮以利肺金之逆氣,半夏以疏脾土之濕氣,而痰飲可除也,加木香以行三焦之滯氣,縮砂以通脾腎之元氣…”。補中益氣湯出自李東垣·《脾胃論》,原文“當(dāng)歸身(三分,酒焙干,或日干,以和血脈)橘皮(不去白,二分或三分,以導(dǎo)氣,又能益元氣,得諸甘藥乃可,若獨用瀉脾胃)升麻(二分或三分,引胃氣上騰而復(fù)其本位,便是行春升之令)柴胡(二分或三分,引清氣,行少陽之氣上升)白術(shù)(三分,降胃中熱,利腰臍間血)”。兩方均為健脾益氣之要方,用之甚廣,本研究著重從CAG證型以脾虛失運之病機定方,補中益氣湯以健脾益氣,香砂六君湯同佐健脾益氣之效,又使“補者不至泥而不行”。 胃復(fù)春片主要功效是健脾益氣、活血解毒,臨床醫(yī)家運用于治療CAG,總體療效令人滿意。艾灸是在祖國醫(yī)學(xué)外治法中占據(jù)非常重要的位置,研究證實其靠燃燒艾條產(chǎn)生紅外線,其中近紅外線又是其主要成分,近紅外線刺激穴位生物分子的氫鍵,產(chǎn)生受刺激后相干諧振吸收效應(yīng),進(jìn)而通過神經(jīng)體液系統(tǒng)作用于全身,其次艾條產(chǎn)生的紅外輻射能量,為生物體細(xì)胞的新陳代謝活動、免疫提供能量,達(dá)到起效的目的〔5〕。
Gas是一種重要的胃腸激素,其主要作用是促進(jìn)胃腸道黏膜細(xì)胞分裂增殖,從而促進(jìn)消化道黏膜生長以及營養(yǎng)胃腸道黏膜等生理作用。Gas對胃黏膜的這種營養(yǎng)作用對維持其正常組織結(jié)構(gòu)和功能起著十分重要的作用〔6〕。
本組治療措施對脾虛型CAG具有積極意義,但未能與余2個治療組等效,考慮可能原因是治療時間不足,今后可延長治療措施;其次,艾灸畢竟有熱能產(chǎn)生,大鼠出于動物本能對明火具有恐懼感,從而影響療效,今后可進(jìn)一步改良艾灸方式。
4 參考文獻(xiàn)
1Dinis-Ribeiro M,Areia M,Vries AC,etal.Management of precancerous conditions and lesions in the stomach (MAPS):guideline from the European Society of Gras trointestinal Endl scopy(ESGE).European Helicobacter Study Group(EHSG).European Society of Pathology(Esp),and the SSociedade Portuguesa de EndoScopia Digestiva(SpED)〔J〕.Endo Scopy,2012;44(1):74-94.
2陸為民,單兆偉,吳 靜,等.大鼠慢性萎縮性胃炎癌前病變氣虛血瘀證動物模型的研制〔J〕.南京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版),2000;1(3):156-8.
3徐 珊,王常松,周嘉鶴,等.慢性萎縮性胃炎不同證型與胃腸激素關(guān)系的實驗研究〔J〕.中華中醫(yī)藥雜志,2007;22(7):448-50.
4郁 潔,彭 宏,林亞平,等.艾灸足三里等穴誘導(dǎo)HSP60對急性胃黏膜損傷大鼠Smac表達(dá)的影響〔J〕.湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報,2012;32(8):14-5.
5李 漾,鄭德采.針刺配合艾箱灸治療脾胃虛寒型功能性消化不良的療效觀察〔J〕.中醫(yī)藥導(dǎo)報,2010;16(6):86-7.
6Samloff IM.Cellular localization of group 1 pepsinogens in human gastric mucosa by immunofluorescence〔J〕.Gastroenterology,1971;61(2):185-8.