Survivin、Livin、CD44v6在宮頸癌以及癌前病變中的表達(dá)及其臨床意義

吳曉梅 袁 濤

(云南省第一人民醫(yī)院婦科，云南 昆明 650032)

宮頸癌是女性生殖道常見腫瘤，好發(fā)于絕經(jīng)后婦女，宮頸上皮內(nèi)瘤變(CIN)是宮頸癌的癌前病變〔1〕。人乳頭瘤病毒(HPV)感染、細(xì)胞癌基因的激活、抑癌基因的失活和細(xì)胞凋亡的抑制等與CIN及宮頸癌的發(fā)生與發(fā)展有很大聯(lián)系〔2～4〕。近年來有研究發(fā)現(xiàn)細(xì)胞凋亡抑制蛋白在細(xì)胞凋亡的調(diào)控中發(fā)揮重要的作用，已發(fā)現(xiàn)的抑制蛋白有神經(jīng)元凋亡抑制蛋白(NAIP)、X連鎖凋亡抑制蛋白(XIAP)、細(xì)胞凋亡抑制蛋白(cIAP)、cIAP-2、生存素(Survivin)、Apollon、伊利諾斯低蛋白(ILP-2)和活素(Livin)，其中Survivin、Livin由于發(fā)現(xiàn)得晚、作用強(qiáng)而成為近年臨床上對癌癥治療的關(guān)注熱點(diǎn)。而腫瘤細(xì)胞的浸潤及轉(zhuǎn)移過程又涉及細(xì)胞黏附、細(xì)胞外基質(zhì)降解及細(xì)胞運(yùn)動(dòng)等很多因素，細(xì)胞黏附分子CD44v6是作用于腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移過程的細(xì)胞黏附方面〔5〕。本次研究旨在探討老年宮頸癌及CIN中Survivin、Livin及CD44v6的表達(dá)情況，為臨床上宮頸癌及CIN的診療提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料 按知情同意原則選取2012年1月至2013年5月于我院就診的60例宮頸癌患者的宮頸標(biāo)本，年齡60～78歲，其中原位癌32例，浸潤癌28例；65例CIN患者的宮頸標(biāo)本，年齡61～77歲，Ⅰ級(jí)24例，Ⅱ級(jí)28例，Ⅲ級(jí)13例；同期正常體檢者的正常宮頸組織標(biāo)本80例，年齡65～80歲。三組患者年齡無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2方法

1.2.1鏈酶菌生物素蛋白(SP)免疫組化法 取下標(biāo)本后石蠟包埋備用，蘇木素-伊紅(HE)染色。石蠟標(biāo)本連續(xù)性切片(每份標(biāo)本取3份切片)，切片厚4 μm，常規(guī)脫蠟、水化。行微波抗原修復(fù)處理，分別加入一抗后4℃過夜，加入二抗后常溫孵育30 min，加入二氨基聯(lián)苯胺(DBA)顯色液進(jìn)行顯色再用蘇木精進(jìn)行復(fù)染。

1.2.2觀察指標(biāo) 在400倍光鏡下觀察記錄結(jié)果，每份切片取10個(gè)高倍鏡視野采取雙人雙盲計(jì)數(shù)〔6〕，記錄切片中陽性細(xì)胞占同類觀察細(xì)胞總數(shù)的百分比及其著色強(qiáng)度。Suvivin及Livin定位于胞質(zhì)，CD44v6定位于細(xì)胞膜或細(xì)胞質(zhì)中，分為4種等級(jí)：陽性細(xì)胞數(shù)少于觀察細(xì)胞總數(shù)的10%計(jì)為陰性(-)；著色為淺黃色，且染色細(xì)胞數(shù)占觀察細(xì)胞數(shù)10%～30%計(jì)為陽性(+)；著色為黃色，染色細(xì)胞數(shù)占觀察細(xì)胞數(shù)30%～60%計(jì)為中度陽性()；細(xì)胞著色為棕黃色，染色細(xì)胞數(shù)占觀察細(xì)胞數(shù)60%以上計(jì)為強(qiáng)陽性()。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS18.0軟件進(jìn)行分析，采用秩和檢驗(yàn)、t檢驗(yàn)及方差分析。

2 結(jié) 果

2.1Survivin、Livin及CD44v6在不同病理組織中的表達(dá)情況 Survivin、Livin及CD44v6的表達(dá)陽性率均在宮頸癌患者中最高，CIN患者次之，正常組織最低，差別均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)。見表1。

2.2Survivin、Livin及CD44v6的表達(dá)與宮頸癌患者臨床病理指標(biāo)的關(guān)系 宮頸癌Ⅰ、Ⅱ期患者Survivin、Livin及CD44v6的表達(dá)陽性率均低于Ⅲ、Ⅳ期(P<0.05)；病理分級(jí)低分化患者Survivin、Livin及CD44v6的表達(dá)陽性率均高于高分化及中分化(P<0.05)；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者Survivin、Livin及CD44v6的表達(dá)陽性率均高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者(P<0.05)；鱗癌患者Survivin、Livin及CD44v6的表達(dá)陽性率均高于腺癌患者(P<0.05)。見表2。

表1 Survivin、Livin及CD44v6在不同病理組織中的表達(dá)情況(n)

表2 Survivin、Livin及CD44v6的表達(dá)與宮頸癌患者臨床病理指標(biāo)的關(guān)系(n)

3 討 論

宮頸癌的形成、浸潤和轉(zhuǎn)移是非常復(fù)雜的病變過程，與很多抑癌基因和癌基因的表達(dá)、調(diào)控及細(xì)胞凋亡有關(guān)〔7〕。宮頸上皮內(nèi)不典型增生致CIN至宮頸原位癌再發(fā)展為宮頸浸潤癌是宮頸癌變的基本過程，臨床上有研究發(fā)現(xiàn)，有凋亡抑制蛋白家族及細(xì)胞黏附分子等在其中發(fā)揮了重要作用〔8〕。Survivin是近幾年發(fā)現(xiàn)的一種特異性的凋亡抑制基因，在多種癌變組織中呈特異性高表達(dá)，而在正常組織中幾乎不表達(dá)，具有抑制細(xì)胞凋亡、調(diào)節(jié)細(xì)胞分化及參與血管形成的作用。因此，Survivin 的表達(dá)與癌變的關(guān)系密切，可在臨床上作為腫瘤診斷與治療的一個(gè)靶點(diǎn)〔9〕。Livin基因是2000年發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞凋亡抑制蛋白家族的一個(gè)新成員〔10〕。CD44 基因是位于 11 號(hào)染色體的短臂上的一種生成跨膜糖蛋白的基因，主要有細(xì)胞黏附作用，增強(qiáng)細(xì)胞轉(zhuǎn)移能力，參與淋巴細(xì)胞激活等重要作用。CD44v6 是CD44 的一種拼接變異體，是一種細(xì)胞基質(zhì)透明質(zhì)酸受體，可以改變腫瘤細(xì)胞表面黏附分子的功能和構(gòu)成，其特異性高表達(dá)與多種惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展及侵襲轉(zhuǎn)移有密切關(guān)系〔11,12〕。

本研究與施錚錚及蔡旺等〔13,14〕研究成果相近，提示這三種生物學(xué)指標(biāo)在宮頸癌及其癌前病變的發(fā)生及發(fā)展過程中有重要的作用，可在臨床上用于診斷宮頸癌及其癌前病變，且根據(jù)其具體水平來預(yù)測宮頸癌及其癌前病變的預(yù)后。宮頸癌患者病理等級(jí)越高其Survivin、Livin及CD44v6的陽性程度也越高，說明可通過檢測患者Survivin、Livin及CD44v6的水平來確定患者的腫瘤惡化程度。

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