黨參不同提取物對小鼠記憶功能的改善作用

郭軍鵬 葛 斌

(長春中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，吉林 長春 130117)

黨參是臨床常用的補益類中藥，性味甘平、無毒，具有補中益氣、生津止渴、健脾益肺之功效。其含多種糖類、酚類、甾醇、揮發(fā)油、黃芩素葡萄糖甙、皂甙及微量生物堿等，臨床常用于增強(qiáng)免疫力、擴(kuò)張血管、降壓、改善微循環(huán)、增強(qiáng)造血功能等〔1〕。近些年研究發(fā)現(xiàn)黨參還具有改善記憶的功能〔2〕。本實驗研究比較黨參不同提取物改善記憶的功能，為進(jìn)一步將黨參開發(fā)成輔助改善記憶的保健食品奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1實驗動物 C57BL純系清潔級雄性小鼠，體重(20±2)g，由吉林大學(xué)實驗動物中心提供，合格證號SCXK(吉) 2006-2008。

1.2藥品與試劑 黨參醇提物、水提物的制備：分別取10倍體積70%酒精或清水浸泡30 min，大火煮沸后小火繼續(xù)煎煮30 min，過濾；藥渣再加入8 倍體積70%酒精或清水煎煮1次，合并前后2次濾液并濃縮，含生藥0.25 g/ml，置冰箱備用；谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒購自南京建成生物工程研究所。

1.3儀器 Morris水迷宮，小鼠跳臺儀，小鼠避暗儀，BIO-410酶標(biāo)儀。

1.4動物分組及給藥 將小鼠隨機(jī)分為三組，每組12只，分別為空白對照組、黨參醇提組、黨參水提組。空白對照組灌胃給予生理鹽水0.2 ml/d；黨參醇提組、水提組分別灌胃給予黨參醇提物和水提物2.5 g·kg-1·d-1(相當(dāng)于人用量的10倍)，持續(xù)給藥15 d。

1.5小鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力的檢測 采用Morris水迷宮評價小鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力。末次給藥后1 h開始訓(xùn)練。訓(xùn)練前10 min，空白對照組小鼠腹腔注射生理鹽水10 ml/kg；給藥組小鼠腹腔注射氫溴酸東莨菪堿(5 mg/kg) 1 次，建立記憶障礙小鼠模型。訓(xùn)練4次/d，歷時5 d。訓(xùn)練時將小鼠依次從4個不同的象限將小鼠面向池壁放入水中，觀察并記錄小鼠尋找隱藏在水面下平臺的時間記為逃避潛伏期。如果小鼠在90 s內(nèi)未找到平臺，將其引至平臺，并在平臺上停留30 s后取下，此時潛伏期記為90 s，訓(xùn)練間隔60 s/次。前4 d為訓(xùn)練適應(yīng)期，第5天記錄，計算各組動物逃避潛伏期。學(xué)習(xí)記憶能力強(qiáng)的動物其逃避潛伏期縮短。第6天將隱藏在水面下平臺撤除，進(jìn)行小鼠空間探索實驗，檢測單位時間內(nèi)(60 s)小鼠經(jīng)過平臺次數(shù)和平臺停留時間(s)〔3〕。

1.6小鼠被動回避記憶能力的檢測 采用跳臺和避暗實驗評價小鼠被動回避記憶能力。末次給藥后1 h開始訓(xùn)練。記憶障礙小鼠模型建立方法同上。將動物放入反應(yīng)箱內(nèi)(臺上、臺下)適應(yīng)環(huán)境3 min，然后將動物放置反應(yīng)箱內(nèi)的銅柵上，立即通以36 v的交流電。動物受到電擊，正常反應(yīng)是跳上平臺(絕緣體)或返回明室，以躲避傷害性刺激。24 h后進(jìn)行重測驗，記錄小鼠的逃避潛伏期，以此作為測試成績，用于評價小鼠被動回避記憶能力〔3〕。

1.7小鼠血清GSH-PX、MDA和SOD水平的檢測 行為學(xué)實驗結(jié)束后摘眼球取血，室溫靜止30 min，3 000 r/min離心15 min，取上清液，按照試劑盒要求分別測定血清GSH-PX、MDA和SOD的水平。

2 結(jié) 果

2.1黨參提取物對小鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力的影響 與空白對照組比較，黨參醇提物組小鼠在定位航行實驗表現(xiàn)較好，潛伏期比較短；黨參水提物組表現(xiàn)較差，潛伏期延長。黨參醇提物組小鼠在空間搜索實驗中經(jīng)過平臺次數(shù)和平臺停留時間有增多趨勢；黨參水提物組經(jīng)過平臺次數(shù)和平臺停留時間明顯增加(P<0.01)。見表1。

表1 黨參提取物對小鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力的影響

2.2黨參不同提取物對小鼠被動回避記憶能力的影響 與空白對照組比較，黨參醇提物組小鼠跳臺潛伏期和避暗潛伏期沒有明顯變化。黨參水提物組小鼠表現(xiàn)較差，潛伏期縮短(P<0.01)。見表2。

2.3黨參不同提取物對小鼠血清GSH-PX、MDA和SOD水平的影響 與空白對照組比較，黨參醇提物組小鼠血清GSH-PX和SOD水平增加(P<0.05)，MDA變化不明顯。黨參水提物組小鼠血清SOD水平明顯增加(P<0.01)，而GSH-PX和MDA變化不明顯。見表3。

表2 黨參不同提取物對記憶獲得障礙模型小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響

表3 黨參不同提取物對小鼠血清GSH-PX、MDA和SOD水平的影響

3 討 論

人口老齡化已成為當(dāng)今世界人們越來越關(guān)注的重要問題，隨著年齡的增加，學(xué)習(xí)和記憶等人類中樞神經(jīng)系統(tǒng)的高級功能呈現(xiàn)逐漸退化的趨勢。它們不僅影響了生活質(zhì)量，而且也增加患者的家庭和社會負(fù)擔(dān)。近些年有關(guān)中藥及其提取物改善學(xué)習(xí)記憶功能的研究日益受到重視。中醫(yī)認(rèn)為，記憶和認(rèn)知屬“神”的范疇，與腦髓關(guān)系密切。氣血生化不足，清竅失養(yǎng)，髓海失充，神機(jī)失用，則記憶和認(rèn)知功能減退〔4〕。黨參具有補中益氣、健脾益肺的功效。臨床常用于脾肺虛弱、氣短心悸、食少便溏、虛喘咳嗽、內(nèi)熱消渴等。

本文根據(jù)《保健食品檢驗與評價技術(shù)規(guī)范》〔5〕比較了黨參醇提物和水提物對小鼠記憶能力的影響。結(jié)果顯示黨參醇提物和水提物均能通過不同途徑改善小鼠記憶功能，因此將黨參開發(fā)為益智保健食品時應(yīng)通過兩種提取方式且合并提取物，以保留黨參改善記憶的有效成分。

4 參考文獻(xiàn)

1賀 慶，朱恩圓，王崢濤，等.黨參化學(xué)成分的研究〔J〕.中國藥學(xué)雜志，2006；41(1)：10-2.

2張 立，李 丹，劉積平，等.黨參多糖對鉛中毒小鼠記憶障礙的影響及其作用機(jī)制〔J〕.武警醫(yī)學(xué)，2013；24(5)：410-3.

3魏 偉，吳希美，李元建.藥理實驗方法學(xué)〔M〕.北京：人民衛(wèi)生出版社：2010:33-5.

4吳 浩，曹秀榮，黃志軍，等.參葉益智膠囊改善記憶功能的作用機(jī)理研究〔J〕.時珍國醫(yī)國藥，2003；14(11)：656-7.

5中華人民共和國衛(wèi)生部.保健食品檢驗與評價技術(shù)規(guī)范〔S〕.2003：6-7.