玉米專用菌肥研制及其部分替代化肥施用對(duì)玉米生長(zhǎng)的影響

王國基，張玉霞，姚 拓，柴 強(qiáng)，馬文彬，馬文文

(1.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 草業(yè)學(xué)院/草業(yè)生態(tài)系統(tǒng)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/甘肅省草業(yè)工程實(shí)驗(yàn)室/中-美草地畜牧業(yè)可持續(xù)發(fā)展研究中心，甘肅 蘭州 730070； 2.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 農(nóng)學(xué)院，甘肅 蘭州 730070)

玉米(Zeamays)作為人類口糧、牲畜飼料和工業(yè)生產(chǎn)原料發(fā)揮著舉足輕重的作用，種植面積僅次于小麥和水稻，全世界對(duì)玉米的需求量逐年呈現(xiàn)增長(zhǎng)趨勢(shì)。近年來，我國玉米生產(chǎn)發(fā)展勢(shì)頭良好，玉米增產(chǎn)對(duì)糧食產(chǎn)量增加的貢獻(xiàn)率達(dá)49.4%[1]，為滿足其生存和高產(chǎn)所需的氮、磷等營(yíng)養(yǎng)元素,施用工業(yè)化肥一直被認(rèn)為是實(shí)現(xiàn)這一目的的主要途徑。中國占世界10%的耕地卻消費(fèi)了世界1/3的化肥，單位面積施肥量是世界平均水平的3倍[2]。大量施用化肥帶來的負(fù)面效應(yīng)正在突顯，如成本高、對(duì)非再生能源消耗大、污染空氣、土壤及水質(zhì)、威脅食品安全、破壞土壤結(jié)構(gòu)及微生物區(qū)系及多樣性等[3]?，F(xiàn)代農(nóng)業(yè)在追求糧食高產(chǎn)的同時(shí)工作重心已經(jīng)向糧食安全問題轉(zhuǎn)移，其中，尋求化肥替代品已成為一條解決途徑。玉米要達(dá)到高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)，除外界影響因素，內(nèi)在因素也起著重要作用，如玉米干物質(zhì)積累絕大部分來自葉片[4]?？梢哉J(rèn)為作物經(jīng)濟(jì)產(chǎn)量的高低是由生物產(chǎn)量即干物質(zhì)積累量所決定，因此,掌握玉米的干物質(zhì)積累對(duì)提高產(chǎn)量具有重要意義[5]。

近年來，國內(nèi)外研究表明，植物根際存在著大量的有益菌，最早為人們所熟知的是固氮菌(Azotobacterspp.)[6]。其菌有從空氣中直接固定氮?dú)獾哪芰?，部分兼有解磷、分泌植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)、促進(jìn)植物生長(zhǎng)等功能[7]。利用這類菌的優(yōu)良特性研制生物菌肥，不僅可以發(fā)揮肥效作用，同時(shí)能活化土壤、改善土壤結(jié)構(gòu)，還可以減少化肥購入成本以及對(duì)非再生資源的消耗。經(jīng)國內(nèi)外學(xué)者研究，從重要作物如水稻(Oryzasativa)、小麥(Triticumaestivum)、甘蔗(Saccharumofficinarum)和棉花(Anemonevitifolia)等作物根際篩選出大量?jī)?yōu)良促生菌株(PGPR)，部分菌株已用于商業(yè)化菌肥生產(chǎn)，在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中發(fā)揮著重要作用。榮良燕等[11]利用分離篩選出的優(yōu)良PGPR 菌株制作成菌肥，測(cè)定菌肥替代20%～30%化肥施用對(duì)玉米生長(zhǎng)的影響，結(jié)果表明，施用菌肥替代部分化肥對(duì)玉米的株高、地上植物量、穗長(zhǎng)和經(jīng)濟(jì)產(chǎn)量均有提高，且化肥減量和促進(jìn)增產(chǎn)的直接經(jīng)濟(jì)效益分別為620.1元/hm2，2 291.4元/hm2。段秀梅等[12]測(cè)定了兩株解磷菌對(duì)玉米苗生長(zhǎng)的影響，結(jié)果表明，混接解磷菌在玉米株高和干重方面較對(duì)照分別增加了35.5%和28.9%。張堃等[13]報(bào)道了在高寒地區(qū)利用聯(lián)合固氮菌肥+半量氮肥處理與全量氮肥對(duì)比，試驗(yàn)表明青稞苗期的株高、地上生物量、主根長(zhǎng)、根體積、粗蛋白等并無顯著差異，說明菌肥配施半量氮肥表現(xiàn)出與全量化肥相似的促生效果，可以節(jié)省一半氮肥，降低化肥投入成本。但促生菌肥在田間的應(yīng)用效果存在著很大差異，其主要原因是試驗(yàn)區(qū)氣候特點(diǎn)、宿主植物、促生菌種類和土壤狀況等綜合因素導(dǎo)致菌肥在田間的效果。因此，如何能使菌肥的田間混接促生效果達(dá)到最佳，還需要進(jìn)一步的深入研究。對(duì)前期從玉米根際分離的促生菌株進(jìn)行篩選，獲得優(yōu)良菌株并研制玉米專用菌肥，測(cè)定其部分替代化肥對(duì)玉米葉面積與干物質(zhì)積累的影響，在保證玉米不減產(chǎn)的條件下，減少化肥投入，尋求玉米專用菌肥與化肥之間的最佳配比，為循環(huán)農(nóng)業(yè)中減少化肥施用提供理論依據(jù)和技術(shù)支撐。

1 材料和方法

培養(yǎng)基為L(zhǎng)B[14]；NFM[14]；Pikovaskaia’s[14](PKO)；CCM[14]。

1.1 供試菌株

分離自白銀、定西及武威等玉米種植區(qū)玉米根際的38株菌株。

1.2 優(yōu)良菌株特性測(cè)定

測(cè)定供試菌株培養(yǎng)特性、固氮酶活性、溶磷量及分泌植物生長(zhǎng)素等指標(biāo)，篩選優(yōu)良菌株，為研制玉米專用菌肥提供菌種資源。

1.2.1 優(yōu)良菌株固氮酶活性測(cè)定 利用NFM培養(yǎng)基將供試菌株分別接種于盛有5 mL 半固體NFM 培養(yǎng)基的血清瓶中( 每菌株6個(gè)重復(fù))，按文獻(xiàn)[15]的方法，結(jié)合氣相色譜儀，利用乙炔還原法確定菌株是否有固氮酶活性，并計(jì)算固氮酶活性。

式中：hx為樣品峰面積(cm2)；hs為標(biāo)準(zhǔn)C2H4峰面積(cm2)；C為標(biāo)準(zhǔn)C2H4濃度(nmol/mL)；V為培養(yǎng)容器體積(mL)；t為樣品培養(yǎng)時(shí)間(h) ；N為產(chǎn)生的C2H4濃度( nmol/mL·h) 。

1.2.2 優(yōu)良菌株溶磷特性測(cè)定 利用PKO培養(yǎng)基，先將供試菌株點(diǎn)接種于盛有PKO 固體培養(yǎng)基上，每皿點(diǎn)接4 個(gè)重復(fù)，每菌株3 皿，28 ℃ 條件下培養(yǎng)10 d。觀察接種菌株周圍有無透明圈形成，以判斷該菌株有無溶磷能力[16]。制備上述能夠形成透明圈菌株的懸浮液(1×108個(gè)/mL)。取1 mL菌株懸浮液接種于50 mL液體培養(yǎng)基中(每一菌株6個(gè)重復(fù))，置于恒溫?fù)u床(28 ℃,160 r/min) 培養(yǎng)10 d 之后在4 ℃下離心(10000 r/min)15 min，取上清液用鉬酸銨比色法測(cè)定有效磷(H2PO4-)含量[16]。以不接種菌株為對(duì)照。

1.2.3 優(yōu)良菌株分泌IAA 性能測(cè)定 利用CCM液體培養(yǎng)基。將1 mL菌株懸浮液(1×108個(gè)/mL) 接種于盛有50 mL CCM 液體培養(yǎng)基的三角瓶中(每一菌株4個(gè)重復(fù))，置于恒溫?fù)u床(28 ℃,125 r/min)培養(yǎng)12 d。

比色液的組成及配方：0.5 mol/L FeC131 mL，濃H2SO430 mL ，蒸餾水50 mL。取上述在CCM液體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)12 d 的菌株懸浮液1 滴置于白瓷板上，加1滴比色液。對(duì)照只在比色液中加1 滴50 μg/mL的生長(zhǎng)素(IAA)，不加菌株懸浮液。將白瓷板置室溫下15 min 后觀察其顏色變化，顏色變粉紅者為陽性，否則為陰性，以確定該菌株有無產(chǎn)生生長(zhǎng)素的能力。菌株培養(yǎng)液經(jīng)低溫離心后，取其上清液置于冷凍干燥儀中濃縮，并用1 mol/L HCl 調(diào)pH至2.8。用乙酸乙酯提取IAA(菌株培養(yǎng)液∶乙酸乙酯= 1∶3)，提取液在低溫下蒸發(fā)至干燥，再用2 mL 100% 乙醇溶解后盛在Eppendorf 小試管中。同時(shí)配制50 μg/mL的IAA 標(biāo)準(zhǔn)液。利用高效液相色譜儀( HPLC) 按文獻(xiàn)[16]的方法和步驟測(cè)定IAA含量。

1.3 玉米專用菌肥制作及其質(zhì)量檢測(cè)

1.3.1 玉米專用菌肥制作 將上述1.2所得7株優(yōu)良促生菌株分別接種于LB 液體培養(yǎng)基中，于28 ℃，150 r/min培養(yǎng)48 h。待菌株充分生長(zhǎng)后，利用分光光度計(jì)測(cè)定各菌株懸浮液D660nm值，用無菌水調(diào)其D660nm=0.5(即菌株懸浮液109cell/mL)，并將調(diào)好的各菌株懸浮液按特定體積比(正在申報(bào)專利)混合后備用；稱取已優(yōu)化載體配方[17](泥炭∶木炭∶花土=2∶2∶1) 350 g，置于滅菌鍋121 ℃，25 min連續(xù)滅菌2次。將滅菌后的載體置于無菌操作臺(tái)上冷卻后，倒入食品專用袋中；在無菌條件下，將無菌水與載體材料充分混勻，使得載體材料濕潤(rùn)、松散而不粘結(jié)，混合均勻后補(bǔ)加上述備用的混合菌液80～100 mL，繼續(xù)混合攪拌均勻，用自動(dòng)封口機(jī)封口。將制作好的菌肥置于28 ℃的培養(yǎng)箱培養(yǎng)7～10 d，備用。并定期對(duì)菌肥有效活菌數(shù)、是否污染和菌種特性變化等進(jìn)行檢測(cè)。

1.3.2 玉米專用菌肥質(zhì)量檢測(cè) 采用稀釋平板法，將保存在室溫的菌肥分別在30、60、90、120、150、180和210 d各測(cè)定1次活菌數(shù)；采用肉眼直接觀察法和顯微鏡觀察法，檢查制作的菌肥保存一段時(shí)間后是否有霉變(如青霉、曲霉污染)、是否有異味產(chǎn)生、是否出現(xiàn)色變等。

1.4 玉米專用菌肥對(duì)葉面積及干物質(zhì)積累的影響

2013年，以玉米作為研究對(duì)象，以試驗(yàn)區(qū)常規(guī)施肥量為基準(zhǔn)，在此基礎(chǔ)上以此次研究制作的菌肥替代15%，30%和100%化肥用量，測(cè)定其替代部分化肥對(duì)玉米生長(zhǎng)和產(chǎn)量的影響。

1.4.1 試驗(yàn)區(qū)自然概況 試驗(yàn)地為甘肅省武威市涼州區(qū)黃羊鎮(zhèn)農(nóng)墾農(nóng)場(chǎng)甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)試驗(yàn)站，地理位置N 37°52′20″,E 102°50′50″。地處甘肅河西走廊東端，屬典型內(nèi)陸荒漠氣候區(qū)， 海拔1 581 m；全年平均無霜期156 d，年降水量164.4 mm，蒸發(fā)量1 919 mm，平均氣溫7.8 ℃，日照時(shí)數(shù)2 968.2 h，≥10 ℃年積溫2 985.4 ℃；年太陽輻射總量504～630 kJ/cm2，麥?zhǔn)蘸蟆?0 ℃有效積溫1 350 ℃，屬于典型兩季不足，一季有余農(nóng)業(yè)生產(chǎn)區(qū)。供試土壤為灌漠土，試驗(yàn)地0～10、10～20、20～30 和30 cm 以下土壤容重分別為1.29、1.34、1.41和1.39 g/cm3， 地下水埋深25～30 m。耕層有機(jī)質(zhì)15.71 g/kg、全氮0.87 g/kg、全磷1.02 g/kg、速效磷13.38 mg/kg、速效鉀248.63 mg/kg，pH為8.2。

1.4.2 試驗(yàn)材料 玉米品種：金穗4號(hào)(白銀金穗種業(yè)有限公司提供)；

化肥(試驗(yàn)區(qū)市售化肥)：磷二銨(云南三環(huán)中化化肥有限公司)，總養(yǎng)分≧64%(N∶P2O5∶K2O=18∶46∶0)；尿素(劉家峽)，總氮含量≧46.4%；

灌溉：采用滴灌;滴灌帶規(guī)格:滴頭間距0.30 m，每卷長(zhǎng)度為2 200 m，流量為1.4 L/h；地膜寬1.4 m。

菌肥：自制菌肥含量為全氮5.59 g/kg，全磷0.87 g/kg，有效磷43.73 mg/kg，全鉀20.21 g/kg，有效鉀5.61 g/kg。

1.4.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 試驗(yàn)設(shè)5個(gè)處理，即A全量化肥，當(dāng)?shù)馗弋a(chǎn)栽培方式最佳施肥量為純氮450 kg/hm2，磷素(P2O5)225 kg/hm2，當(dāng)?shù)赝寥朗歉烩浲寥?，故不施鉀肥；B 85%化肥+菌肥；C 70%化肥+菌肥；D 菌肥(不施化肥)；E 不施肥；每處理3個(gè)重復(fù)，共15個(gè)小區(qū)，采用隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)，每個(gè)小區(qū)面積45 m2。行株距為40 cm×30 cm，密度為75 000株/hm2；采用覆膜帶狀種植，玉米4月中旬播種。

1.4.4 專用菌肥及化肥使用方法 播種前先將種子(宜用未包衣玉米種子)用菌肥拌種，置于陰涼、避光處0.5 h (使促生菌充分粘附在種子表面)播種。菌肥用量7.5 kg/hm2。對(duì)照與不施肥處理的種子用無菌水拌種?；适┓柿浚簩?duì)照(全量化肥)用量為尿素890 kg/hm2和磷二銨489 kg/hm2，其余各處理分別按比例減少化肥施用量以菌肥代之。其中，尿素基肥∶追肥(大喇叭口期和開花期)量比為3∶7，分別為基肥∶大喇叭口期追肥∶開花期追肥=3∶4∶3。田間灌水按苗期900 m3/hm2、拔節(jié)期1 100 m3/hm2、大喇叭口期1 100 m3/hm2、開花期1 250 m3/hm2、灌漿期750 m3/hm2灌溉。

1.4.5 測(cè)定指標(biāo) 分別在苗期、拔節(jié)期、大喇叭口期、開花期、灌漿期、乳熟期、成熟期每次每小區(qū)取樣10 株，先稱鮮重，量取葉面積(葉面積=長(zhǎng)×寬×0.75)，然后將植株烘干至恒重，再稱干重，供分析測(cè)定。分析計(jì)算各生育期葉面積，干物質(zhì)積累量，成熟期經(jīng)濟(jì)產(chǎn)量與干草產(chǎn)量。

1.5 數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)整理與作圖用Excel 2007，數(shù)據(jù)分析用Spss 17.0。

2 結(jié)果與分析

2.1 優(yōu)良促生菌株篩選

篩選出7株具有良好促生特性的菌株(表1)，菌株P(guān)2-1、P4-4、4N4 具有固氮、溶磷、分泌IAA 特性，其他4 種菌株則不完全具有這3 種特性。這7 種菌株生長(zhǎng)速度均較快，且各菌株間的拮抗反應(yīng)測(cè)定，7 株優(yōu)良菌株間不發(fā)生拮抗反應(yīng)。

表1 優(yōu)良促生菌株主要特性

注：*表示待鑒定，“-”表示無，“+++”表示生長(zhǎng)速度較快

2.2 菌肥質(zhì)量檢測(cè)

將7種優(yōu)良促生菌株按照特定比例混合，再與優(yōu)化的載體配方攪拌均勻制成玉米專用復(fù)合菌肥，其部分質(zhì)量檢測(cè)結(jié)果見表2。

表2 玉米專用菌肥質(zhì)量檢測(cè)

注：“+” 表示污染，“-” 表示無污染。

有效活菌數(shù)及雜菌污染是菌肥質(zhì)量的重要指標(biāo)。制作的菌肥經(jīng)恒溫培養(yǎng)7～10 d，貯存于避光、室溫條件下，在質(zhì)量檢測(cè)期間其有效活菌數(shù)呈逐漸下降趨勢(shì)，但在180 d內(nèi)有效活菌數(shù)均達(dá)到65.7×108cfu/g，且無雜菌污染，符合《微生物肥料》NY227-94標(biāo)準(zhǔn)[18]，其中，30 d后的活菌數(shù)最多，菌種特性穩(wěn)定。180 d后，其活菌數(shù)迅速下降至9.1×108cfu/g，且伴有雜菌污染和霉變現(xiàn)象。因此，建議菌肥成品后，最好在6個(gè)月內(nèi)使用，確保其肥效的充分發(fā)揮。

2.2 菌肥對(duì)玉米生長(zhǎng)的影響

2.2.1 對(duì)玉米葉面積的影響 在玉米各個(gè)生育期測(cè)定玉米葉面積發(fā)展動(dòng)態(tài)，結(jié)果表明(圖1)，各處理間玉米葉面積在拔節(jié)期前增長(zhǎng)比較緩慢，拔節(jié)期之后玉米葉片增大增多，葉面積迅速增加，至開花期達(dá)到最大值，此后灌漿期、乳熟期、成熟期增長(zhǎng)速度減慢，且總?cè)~面積呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，但配施菌肥處理的葉面積下降量較全量化肥處理幅度較小。其中100% 菌肥(D)處理和不施肥(E)處理總?cè)~面積整體低于其他3 個(gè)處理，但D 處理葉面積高于不施肥處理。全量化肥(A)處理、85% 化肥+菌肥處理(B)和70% 化肥+菌肥(C)處理三者之間葉面積發(fā)展變化動(dòng)態(tài)表現(xiàn)為處理B>A 和C，A 與C 總?cè)~面積基本相同?？傊魈幚韺?duì)玉米葉面積的發(fā)展動(dòng)態(tài)變化影響各異，但整體發(fā)展規(guī)律基本一致。

圖1 玉米各生育期葉面積變化

2.2.2 對(duì)玉米地上干物質(zhì)積累的影響 對(duì)玉米不同生育期干物質(zhì)積累測(cè)定結(jié)果表明(圖2)，不同處理的玉米地上干物質(zhì)積累速率在拔節(jié)期之前相同，拔節(jié)期后地上干物質(zhì)增長(zhǎng)速率各不相同，但均在開花期到乳熟期干物質(zhì)積累速率達(dá)到最大，乳熟期之后干物質(zhì)積累速率減緩；在開花期之后表現(xiàn)出85%化肥+菌肥(B)>全量化肥(A)處理>70%化肥+菌肥(C)>100%菌肥(D)>不施肥(E)。拔節(jié)期后，玉米干物質(zhì)的積累速率與積累量都出現(xiàn)了較大變化，但均符合“慢、快、慢”的“S”型生長(zhǎng)規(guī)律，且干物質(zhì)最終的積累量表現(xiàn)為B>A>C>D>E。

圖2 玉米各生育期干物質(zhì)積累量

2.2.3 對(duì)玉米產(chǎn)量的影響 不同施肥處理玉米經(jīng)濟(jì)產(chǎn)量表現(xiàn)為B>A>C>D>E，處理B 顯著高于其他施肥處理，處理A與C，D與E 間差異不顯著，處理B 較E (不施肥對(duì)照)增產(chǎn)27.9%，比全量化肥處理A 增產(chǎn)2.7%(表3)；不同施肥處理玉米干草產(chǎn)量均表現(xiàn)為處理A、B、C之間差異不顯著，均顯著高于處理D和E，而且表現(xiàn)為處理B>A>C>D>E，處理B 較E 干草產(chǎn)量增加26.4%，比全量化肥處理A 增產(chǎn)2.1%。表明施用菌肥時(shí)，減少15%化肥用量不但不會(huì)降低玉米經(jīng)濟(jì)產(chǎn)量和干草產(chǎn)量，還略有提高；減少30% 化肥用量對(duì)玉米的經(jīng)濟(jì)產(chǎn)量及干草產(chǎn)量均有所下降，但差異不顯著，在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中可根據(jù)玉米的不同用途采取不同菌肥配施化肥減量梯度。

3 討論與結(jié)論

從玉米根際分離出28株菌株，經(jīng)固氮、溶磷、分泌IAA 特性測(cè)定篩選出7 株優(yōu)良促生菌株，將其制作成玉米固體生物菌肥，以替代15%～30%化肥，測(cè)定其對(duì)玉米葉面積與干物質(zhì)積累的影響，結(jié)果表明，菌肥替代15%化肥與全量化肥相比，對(duì)玉米葉面積與干物質(zhì)積累有不同程度的提高；菌肥替代30%化肥與全量化肥相比，對(duì)玉米葉面積與干物質(zhì)積累影響不大，與全量化肥基本一致。因此，在菌肥替代化肥15%～30%可能存在一個(gè)最佳物替代量，既可以減少化肥投入，又不對(duì)玉米造成影響，這個(gè)最佳物替代量還需進(jìn)一步試驗(yàn)。

表3 不同施肥處理玉米經(jīng)濟(jì)產(chǎn)量及干草產(chǎn)量

注：表中同列不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)

玉米菌肥替代部分化肥對(duì)玉米地上干物質(zhì)積累的影響，雖然各處理變化有差異，但干物質(zhì)積累符合“慢、快、慢”的S 型生長(zhǎng)曲線，這與黃智鴻等[19]玉米干物質(zhì)積累與分配的研究結(jié)果一致。苗期到大喇叭口期，由于生長(zhǎng)中心以地下為主，同時(shí)葉片偏小，光合產(chǎn)生的有機(jī)物質(zhì)主要供給根系生長(zhǎng)，地上干物質(zhì)積累速率較慢。從大喇叭口期到乳熟期，生長(zhǎng)中心從地下轉(zhuǎn)移到地上營(yíng)養(yǎng)器官，再逐步從莖葉轉(zhuǎn)到穗子、籽粒上，此時(shí)氣溫高，光照強(qiáng)，葉面積大，光合作用較強(qiáng)，地上物質(zhì)積累呈現(xiàn)較快增長(zhǎng)。從乳熟期到成熟期，有效葉面積減小，光合作用減弱，干物質(zhì)積累均呈現(xiàn)平緩增長(zhǎng)。干物質(zhì)積累量最終表現(xiàn)出85%化肥+菌肥>全量化肥>70%化肥+菌肥>100% 菌肥>不施肥處理，在開花期之后的干物質(zhì)積累量表現(xiàn)為85%化肥+菌肥處理>全量化肥處理≥70%化肥+菌肥，這與微生物的作用較化肥滯后但長(zhǎng)效有關(guān)，在植物生長(zhǎng)后期的促生效果比較明顯，其作用優(yōu)于全量化肥處理。

玉米葉片作為玉米有機(jī)物質(zhì)生產(chǎn)的主要器官，其葉面積大小及光合作用的強(qiáng)弱對(duì)玉米的生長(zhǎng)發(fā)育有著重要影響。結(jié)果表明，各處理間玉米葉面積在整個(gè)生育期的發(fā)展動(dòng)態(tài)一致，均表現(xiàn)出各處理間玉米葉面積在拔節(jié)期前增長(zhǎng)比較緩慢，拔節(jié)期之后玉米葉片增大增多，葉面積迅速增加，至開花期達(dá)到最大值，此后在灌漿期、乳熟期、成熟期增長(zhǎng)速度減慢，總?cè)~面積呈下降的趨勢(shì)。這與楊國虎等[20]、黃智鴻等[19]研究結(jié)果一致。全量化肥(A)處理、85%化肥+菌肥處理(B)和70%化肥+菌肥(C)處理，三者之間葉面積變化動(dòng)態(tài)表現(xiàn)為處理B>A 和C，A 與C 總?cè)~面積基本一致。而玉米經(jīng)濟(jì)產(chǎn)量與干草產(chǎn)量變化顯著，處理B相比全量化肥增產(chǎn)均在2.1%～3.6% ，這與席琳喬等[21]利用分離自禾本科牧草根際的聯(lián)合固氮菌對(duì)燕麥株高及產(chǎn)量的顯著促進(jìn)作用及姚拓等[22]報(bào)道的聯(lián)合固氮菌對(duì)燕麥株高的明顯促進(jìn)作用研究結(jié)果一致。研究分析，不同施肥處理以處理B 對(duì)玉米生長(zhǎng)的促進(jìn)效果最佳，處理C 次之，可能由于菌肥配施化肥的原因，菌肥中的PGPR 在玉米根際生長(zhǎng)繁殖過程中直接給玉米提供某些營(yíng)養(yǎng)元素或者溶解土壤中難溶性營(yíng)養(yǎng)元素供植物吸收，而且產(chǎn)生對(duì)植物有益的代謝產(chǎn)物，如CTK、IAA、GA、ABA 等，都不同程度地對(duì)玉米生長(zhǎng)進(jìn)行調(diào)節(jié)，促進(jìn)其健康生長(zhǎng)，營(yíng)養(yǎng)狀況得到改善，從而提高玉米的經(jīng)濟(jì)產(chǎn)量及干草產(chǎn)量。同小娟等[23]利用EM 微生物堆肥在夏玉米和冬小麥的試驗(yàn)結(jié)果表明，年均總產(chǎn)量比傳統(tǒng)堆肥增產(chǎn)8.3%～8.9%，其中，夏玉米增幅最大為9.4%，而冬小麥增產(chǎn)8.3%。試驗(yàn)證明微生物肥料在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)過程中，對(duì)作物促生及減少化肥投入方面發(fā)揮著不可替代的作用，綜上所述，玉米專用菌肥在玉米生產(chǎn)中具有很高的應(yīng)用潛力，同時(shí)減少化肥投入也在一定程度上減輕了對(duì)生態(tài)環(huán)境的破壞。

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