ICP-MS法測(cè)定復(fù)方龍血竭膠囊中5種有害元素的殘留量

云南省食品藥品檢驗(yàn)所，云南 昆明 650011

ICP-MS法測(cè)定復(fù)方龍血竭膠囊中5種有害元素的殘留量

郭毅新張?jiān)軄?lái)國(guó)防

云南省食品藥品檢驗(yàn)所，云南 昆明 650011

目的建立復(fù)方龍血竭膠囊中鉛、鎘、砷、汞、銅5種重金屬及有害元素含量的測(cè)定方法。方法采用電感耦合等離子體質(zhì)譜法(ICP-MS)，樣品經(jīng)微波消解后測(cè)定，在線引入內(nèi)標(biāo)以校正基體效應(yīng)。結(jié)果各元素在一定濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(r≥0.9990)；檢測(cè)限為0.389 ng·g-1～3.548ng·g-1；加樣回收率為87.5% ～109.4%，RSD(n=9)均小于9.1%。結(jié)論該方法較簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確，可用于復(fù)方龍血竭膠囊中有害元素的測(cè)定。

電感耦合等離子體質(zhì)譜法；復(fù)方龍血竭膠囊；重金屬及有害元素；微波消解

復(fù)方龍血竭膠囊是由三七、龍血竭、冰片3味中藥組成的復(fù)方制劑，具有活血化瘀、通竅止痛之功效，臨床試驗(yàn)表明其緩解心絞痛等癥狀的效果明顯優(yōu)于復(fù)方丹參膠囊，可用于冠心病、穩(wěn)定型心絞痛等心血管疾病的治療[1]。心血管疾病多需要長(zhǎng)期用藥的特點(diǎn)，對(duì)重金屬及有害元素等影響藥物安全性的關(guān)鍵因素提出了更高的要求。

近年來(lái)，主產(chǎn)地土壤砷污染以及對(duì)土壤中鎘等有害元素的富集作用使得對(duì)重金屬有害元素的測(cè)定成為三七及其成方制劑如三七通舒膠囊、三七葛根膠囊等質(zhì)量控制的重要指標(biāo)[2-5]。因此，在復(fù)方龍血竭膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制定及質(zhì)量控制過(guò)程中，有害元素的測(cè)定有充分的必要性。本實(shí)驗(yàn)運(yùn)用電感耦合等離子體質(zhì)譜建立了同時(shí)測(cè)定復(fù)方龍血竭膠囊中鉛、鎘、砷、汞、銅5種重金屬及有害元素的方法，該方法簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確，可用于復(fù)方龍血竭膠囊的質(zhì)量控制。

1 儀器與試劑

1.1 儀器 Agilent 7700x電感耦合等離子體質(zhì)譜儀(美國(guó)Agilent)；ETHOS One高效微波消解儀(意大利Mlistone)；TB-215D電子天平(美國(guó) Denver)；UP ulupure超純水制造系統(tǒng)(成都超純)。

1.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液 鉛單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液GBW08619 (1000μg/ml，中國(guó)計(jì)量科學(xué)研究院)；鎘單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液GBW08612 (1000μg·ml-1，中國(guó)計(jì)量科學(xué)研究院)；砷單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液GBW08611 (1000μg·ml-1，中國(guó)計(jì)量科學(xué)研究院)；汞單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液GBW08617 (1000μg·ml-1，中國(guó)計(jì)量科學(xué)研究院)；銅單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液GBW08615 (1000μg·ml-1，中國(guó)計(jì)量科學(xué)研究院)；多元素內(nèi)標(biāo)混合標(biāo)準(zhǔn)溶液5188-6525(美國(guó)Agilent)；楊樹葉成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)GBW07604 (國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心)；

1.3 試劑 A.C.S級(jí)硝酸(美國(guó)J.T.Baker)；全部實(shí)驗(yàn)用水均為超純水制造系統(tǒng)制備的電阻率大于18.25MΩ·cm的超純水。

2 方法與結(jié)果

2.1 測(cè)定條件 正向功率：1.55kW；采樣深度：9.0mm；He碰撞氣流量：4.2L·min-1；載 氣 流 速：0. 90L·min-1；進(jìn) 樣 速 度：0.1rps；測(cè)量點(diǎn)數(shù)/峰：3；重復(fù)次數(shù)：3；各元素采集質(zhì)量數(shù)與采集時(shí)間見(jiàn)表1。

表1 各元素采集質(zhì)量數(shù)與時(shí)間

2.2 供試品溶液制備 將本品內(nèi)容物適量，研磨混合均勻。取約0.5g，精密稱定，置微波消解罐中，加硝酸10ml，密閉并按表 2所列參數(shù)進(jìn)行消解。消解完全后，消解液冷卻至60℃以下，取出消解罐，放冷，將消解液轉(zhuǎn)入50ml樣品管中，用少量水洗滌3次，洗滌液合并于樣品管中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.3 標(biāo)準(zhǔn)品溶液制備 精密量取鉛、鎘、砷、銅元素標(biāo)準(zhǔn)溶液適量2%硝酸溶液稀釋制成每1ml含鉛、砷0ng、1ng、5ng、10ng、20ng，含鎘0ng、0.5ng、2.5ng、5ng、10ng，含銅0ng、50ng、100ng、200ng、500ng的系列濃度混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。另精密量取汞元素標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，用2%硝酸溶液稀釋制成每1ml分別含汞0ng、0.2ng、0.5ng、1ng、2ng、5ng的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液(臨用現(xiàn)配)即得。

表2 微波消解儀工作參數(shù)

2.4 內(nèi)標(biāo)溶液制備 精密量取多元素內(nèi)標(biāo)混合標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，用水稀釋制成每1ml分別含鍺(Ge)、銦(In)、鉍(Bi)1μg的混合溶液，即得。

2.5 方法學(xué)考察

2.5.1 線性關(guān)系 依次將儀器的樣品管插入各個(gè)濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液中，按“2.1”項(xiàng)下條件進(jìn)行測(cè)定，以3次測(cè)量值的平均值為縱坐標(biāo) Y，相應(yīng)濃度(ng·ml-1)為橫坐標(biāo) X，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。5種元素的標(biāo)準(zhǔn)曲線線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)均在 0. 9990以上(見(jiàn)表3)

表3 標(biāo)準(zhǔn)曲線及線性范圍

2.5.2 儀器檢出限 以 2%硝酸溶液連續(xù)測(cè)定10次，以測(cè)定結(jié)果的3倍標(biāo)準(zhǔn)偏差所對(duì)應(yīng)的濃度值作為各元素的檢出限。鉛、鎘、砷、汞、銅的檢出限分別為：2.917ng·g-1，0.389ng·g-1，0.516ng·g-1， 0.821ng·g-1，3.548 ng·g-1。

2.5.3 重復(fù)性 取本品內(nèi)容物約 0. 5 g，共6份，分別按供試品溶液的制備方法操作，按“2.1”項(xiàng)下條件進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算各元素含量。結(jié)果鉛、鎘、砷、汞、銅含量RSD(n=6)分別為6.3%，4.9%，6.2%，5.1%，4.4%。

2.5.4 精密度 取前述重復(fù)性試驗(yàn)所用樣品約0.5g，按供試品溶液的制備方法操作，按“2.1”項(xiàng)下條件連續(xù)測(cè)定6次，計(jì)算鉛、鎘、砷、汞、銅6次測(cè)定結(jié)果的RSD(n=6)分別為0.9%，1.6%，2.5%，5.3%，3.7%。

2.5.5 加樣回收率 取前述重復(fù)性試驗(yàn)所用樣品內(nèi)容物共9份，每份約0.5g，精密稱定，置消解罐中，分低、中、高3水平，分別加入各元素的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液(含銅10000 ng·g-1，砷500 ng·g-1的，鎘1000 ng·g-1，鉛1000 ng·g-1)和汞100ng·g-1的標(biāo)準(zhǔn)溶液，每水平3份，按供試品溶液制備項(xiàng)下步驟進(jìn)行消解處理，并按“2.1”項(xiàng)下條件進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算加樣回收率及RSD。測(cè)得5種元素的平均回收率見(jiàn)表4。結(jié)果表明，各元素的回收率均在87.5%～109.4%之間，符合痕量分析要求。

表4 各元素的加樣回收率

2.5.6 質(zhì)控物質(zhì)驗(yàn)證 取楊樹葉成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)約0.5g，共3份，按供試品溶液的制備方法操作，按“2.1”項(xiàng)下條件測(cè)定，測(cè)定值與參考值吻合，結(jié)果見(jiàn)表5。

表5 楊樹葉成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)測(cè)定結(jié)果

2.6 樣品測(cè)定結(jié)果 取復(fù)方龍血竭膠囊10批，按前述方法分別測(cè)定各元素含量，結(jié)果見(jiàn)表6。

表6 樣品測(cè)定結(jié)果(μg·g-1)

a：ND為未檢出

3 討論

相對(duì)于原子吸收法(AAS)和原子熒光法(AFS)等傳統(tǒng)方法，ICP-MS具有低檢出限、寬線性范圍、可同時(shí)進(jìn)行多元素測(cè)定等特點(diǎn)，已成為重金屬及有害元素測(cè)定的首選方法。

研究顯示，鉛、鎘、砷、汞等重金屬聚積可促發(fā)動(dòng)脈粥樣硬化、冠心病、心律失常、高血壓等心血管疾病[5]。因此，對(duì)于需長(zhǎng)期服用的心血管疾病藥物，重金屬及有害元素安全性指標(biāo)的控制須引起充分的重視。參照《中國(guó)藥典》2010年版一部對(duì)于甘草等中藥材中鉛不得過(guò)百萬(wàn)分之五，鎘不得過(guò)千萬(wàn)分之三，砷不得過(guò)百萬(wàn)分之二，汞不得過(guò)千萬(wàn)分之二，銅不得過(guò)百萬(wàn)分之二十的限度標(biāo)準(zhǔn)，復(fù)方龍血竭膠囊中各元素含量均低于規(guī)定值。一定程度上說(shuō)明生產(chǎn)過(guò)程中的重金屬及有害元素污染得到了較好的控制，且滲漉提取工藝使用的70%乙醇對(duì)于三七中有害元素的可能溶出率相對(duì)較小。

[1]慶慧，范軍銘，王守富，等. 復(fù)方龍血竭膠囊治療穩(wěn)定型心絞痛隨機(jī)對(duì)照多中心臨床研究[J]. 中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志，2009，16(2)：10～12.

[2]閻秀蘭，廖曉勇，于冰冰，等. 藥用植物三七對(duì)土壤中砷的累積特征及其健康風(fēng)險(xiǎn)[J].環(huán)境科學(xué)，2011，32(3)：880～885.

[3]林龍勇，于冰冰，閻秀蘭，等. 三七對(duì)土壤中鎘、鉻、銅、鉛的累積特征及健康風(fēng)險(xiǎn)[J/OL].生態(tài)學(xué)報(bào)，2014(11). http://www.cnki.net/kcms/detail/10.5846/stxb201307261958.html

[4]劉洋，楊華蓉，林大勝，等. 符合歐盟技術(shù)要求的三七通舒膠囊原料及制劑重金屬測(cè)定方法研究[C].2010年中國(guó)藥學(xué)大會(huì)暨第十屆中國(guó)藥師周論文集. 2010.

[5]崔蘊(yùn)慧，利奕成. ICP-AES法測(cè)定三七葛根膠囊中重金屬的含量[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2012，22(11)：2560～2561，2565.

[6]楊菊賢，杜勤. 環(huán)境污染是促發(fā)心血管疾病的重要危險(xiǎn)因素[J].心血管病學(xué)進(jìn)展，2008，29(2)：214～217.

Determinationof5heavymetalsinFufanglongxuejiecapsulesbyICP-MS

GUO Yi-xin，ZHANG Yuan-jie，LAI Guo-fang*

Yunnan Institute for Food and Drug Control，Kunming 650011，China

ObjectiveTo establish a method for determination of Pb，Cd，As，Hg and Cu in Fufanglongxuejie capsules.MethodsThe samples were determined by inductively coupled plasma-mass spectrometry (ICP-MS) after microwave digestion. The internal standard solution was used to eliminate the matrix effect.ResultEach element showed good linearity in certain concentration range(r≥0.9990).The detection limits ranged from 0.389 ng·g-1～3.548ng·g-1. The average recoveries were from 87.5% to 109.4% with RSD no more than 9.1%.ConclusionThe method is simple，efficient and accurate for determination of heavy metals in Fufanglongxuejie capsules.

ICP-MS; Fufanglongxuejie capsules; Heavy metals; Microwave digestion

郭顏新(1955-)，云南食品藥品檢驗(yàn)所儀器室主任，E-mail:gyxxk@sina.com

R917

A

1007-8517(2014)14-0011-03

2014.05.26)