進(jìn)展期不同部位胃癌HER-2蛋白的表達(dá)

苗蘭芳 雷瑞雪 郭 梅

河南省安陽市腫瘤醫(yī)院病理科(455000)

胃癌是最常見的惡性腫瘤之一，高居全世界癌癥病死率的第二位[1]。在我國(guó)，由于早期診斷率低，大多數(shù)胃癌患者在確診時(shí)已處于中晚期，以致手術(shù)切除率低，死亡率高，5年生存率低，嚴(yán)重危害人們的健康和生命安全。人表皮生長(zhǎng)因子受體2(human epidermal growth factor receptor 2, HER-2)屬于表皮生長(zhǎng)因子受體(epidermal growth factor receptor, EGFR)家族成員，在多種腫瘤組織中高表達(dá)。宋巖等[2]的研究發(fā)現(xiàn)HER-2蛋白在胃癌組織中的過表達(dá)與預(yù)后不良相關(guān)。ToGA試驗(yàn)[3]證實(shí)，對(duì)HER-2蛋白陽性表達(dá)的進(jìn)展期胃癌患者，化療聯(lián)合曲妥珠單抗的靶向治療有效率達(dá)47.3%，中位生存期達(dá)13.8個(gè)月，顯著提高了進(jìn)展期胃癌患者的生存質(zhì)量，明顯延長(zhǎng)了生存期，為HER-2蛋白表達(dá)陽性的胃癌患者的治療帶來了曙光。但目前對(duì)進(jìn)展期不同部位胃癌的HER-2蛋白陽性表達(dá)率是否存在差異尚未明確。Tanner等[4]認(rèn)為，食管胃交界部腺癌的HER-2蛋白表達(dá)陽性率高于胃遠(yuǎn)端腺癌，而陳娟等[5]發(fā)現(xiàn)，食管胃交界部腺癌的HER-2蛋白表達(dá)陽性率與胃遠(yuǎn)端腺癌無明顯差異。本研究通過應(yīng)用免疫組化染色，旨在研究進(jìn)展期不同部位胃癌HER-2蛋白的表達(dá)情況。

對(duì)象與方法

一、研究對(duì)象

收集2012年2月-2013年8月安陽市腫瘤醫(yī)院上消化道癌手術(shù)切除標(biāo)本共2 764例，其中食管癌患者1 920例，胃癌患者844例(食管胃交界部腺癌659例、遠(yuǎn)端胃腺癌185例)。進(jìn)展期胃癌指癌組織浸潤(rùn)超過黏膜下層或浸潤(rùn)胃壁全層的胃癌，共納入783例進(jìn)展期胃癌患者，其中食管胃交界部腺癌622例，胃體腺癌89例，胃竇/幽門部腺癌72例；男621例，女162例；年齡23～82歲，平均62歲。

二、研究方法

采用免疫組化SP法檢測(cè)HER-2蛋白表達(dá)。將組織切片于65 ℃烤箱固定2 h，二甲苯脫蠟40 min，梯度乙醇洗片；水洗組織切片；3% H2O2去除過氧化物酶；檸檬酸高溫高壓修復(fù)1 min，蒸餾水沖洗冷卻；PBS緩沖液3 min×3次；滴加多克隆兔抗人C-erbB-2癌蛋白抗體[基因科技(上海)有限公司]，37 ℃溫箱孵育1 h；PBS緩沖液3 min×3次；滴加HRP標(biāo)記的鼠抗兔二抗(Dako REALTM，EnVisonTM)；PBS緩沖液3 min×3 次；DAB顯色5～10 min；蘇木素染色；乙醇梯度脫水，二甲苯透明；中性樹脂封片。每張切片均設(shè)有陽性對(duì)照。

結(jié)果判斷[6]：HER-2蛋白結(jié)果判定以腫瘤細(xì)胞膜表達(dá)為主要判斷標(biāo)志。(0)：無染色或<10%的腫瘤細(xì)胞膜染色；(1+)：≥10%的腫瘤細(xì)胞微弱或隱約可見膜染色；(2+)：≥10%的腫瘤細(xì)胞可見弱到中度的基底側(cè)膜、側(cè)膜或完全性膜染色；(3+)：≥10%的腫瘤細(xì)胞基底側(cè)膜、側(cè)膜或完全性膜強(qiáng)染色。(0)和(1+)判斷為陰性表達(dá)，(2+)為不確定，(3+)為陽性表達(dá)。病理診斷結(jié)果均經(jīng)兩名高年資病理醫(yī)師確認(rèn)。

三、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

應(yīng)用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件，組間比較采用χ2檢驗(yàn)以及秩和檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

HER-2蛋白陽性表現(xiàn)為細(xì)胞膜棕黃色著色，不同程度的HER-2蛋白表達(dá)見圖1。622例食管胃交界部腺癌患者中，463例HER-2蛋白表達(dá)陰性，80例表達(dá)不確定，79例陽性表達(dá)，陽性表達(dá)率為12.7%；在89例胃體腺癌中，77例HER-2蛋白表達(dá)陰性，6例表達(dá)不確定，6例陽性表達(dá)，陽性表達(dá)率為6.7%；在72例胃竇/幽門部腺癌中，58例HER-2蛋白表達(dá)陰性，8例表達(dá)不確定，6例陽性表達(dá)，陽性表達(dá)率為8.3%。食管胃交界部腺癌的HER-2蛋白陽性表達(dá)率顯著高于其余兩個(gè)部位胃癌(P<0.05)，而胃體腺癌與胃竇/幽門部腺癌之間HER-2蛋白陽性表達(dá)率無明顯差異(P>0.05)。

討 論

食管胃交界部腺癌的定義歷來存在爭(zhēng)議，2000年世界衛(wèi)生組織明確將發(fā)生于遠(yuǎn)端食管鱗狀上皮和賁門腺上皮移行區(qū)的癌命名為食管胃交界部腺癌，并提出應(yīng)區(qū)別于下段食管癌和近端胃癌；且不主張沿用有誤導(dǎo)含義的術(shù)語“賁門癌”[7]。2010年，世界衛(wèi)生組織重申了上述定義，并提出食管胃交界部腺癌的TNM分期標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)腫瘤主體位置分別沿用食管腺癌和胃腺癌的標(biāo)準(zhǔn)[8]。因此，無論在治療還是預(yù)后上，兩者不能同等對(duì)待。

A：腫瘤細(xì)胞胞膜完全不顯色(0)；B：腫瘤細(xì)胞胞膜隱約染色(1+)；C：超過10%的腫瘤細(xì)胞胞膜呈弱到中度染色(2+)；D：超過10%的腫瘤細(xì)胞胞膜呈強(qiáng)染色(3+)

近年來，我國(guó)流行病學(xué)資料顯示遠(yuǎn)端胃癌的發(fā)生率呈明顯下降的趨勢(shì)，而食管胃交界部腺癌發(fā)生率維持在較高水平，在食管癌高發(fā)區(qū)甚至呈現(xiàn)上升的趨勢(shì)[9]。本研究共納入食管癌高發(fā)區(qū)河南安陽地區(qū)的2 764例上消化道腫瘤標(biāo)本，其中食管胃交界部腺癌、遠(yuǎn)端胃腺癌分別占23.8%、6.7%，說明在食管癌高發(fā)區(qū)食管胃交界部腺癌發(fā)病率較高，與其他兩項(xiàng)食管癌高發(fā)區(qū)的研究[10-11]結(jié)果相符。該現(xiàn)象提示食管癌和食管胃交界部腺癌可能有相同或相似的發(fā)病基礎(chǔ)，具體發(fā)病機(jī)制仍需進(jìn)一步研究證實(shí)。

本研究顯示，進(jìn)展期食管胃交界部腺癌HER-2蛋白陽性表達(dá)率為12.7%，與多項(xiàng)研究[4，12-14]報(bào)道的HER-2蛋白在胃癌中的陽性表達(dá)率為9.8%～33%相符，然而較ToGA試驗(yàn)[3]中HER-2蛋白陽性表達(dá)率(33.2%)偏低。本研究統(tǒng)計(jì)HER-2蛋白陽性表達(dá)率時(shí)，僅將免疫組化(3+)的結(jié)果計(jì)算在內(nèi)。實(shí)際上有研究[4]發(fā)現(xiàn)HER-2蛋白免疫組化(2+)的病例中約50% FISH檢測(cè)為陽性，因此可能導(dǎo)致本研究HER-2蛋白陽性表達(dá)率偏低。

本研究表明食管胃交界部腺癌HER-2蛋白陽性表達(dá)率顯著高于胃遠(yuǎn)端腺癌，與Tanner等[4]的研究結(jié)果一致。而國(guó)內(nèi)有研究[15]則認(rèn)為HER-2陽性表達(dá)率與腫瘤位置無關(guān)，這可能與該研究統(tǒng)計(jì)陽性率時(shí)將免疫組化(2+)和(3+)均歸為陽性，導(dǎo)致結(jié)果不準(zhǔn)確有關(guān)。

綜上所述，HER-2蛋白陽性表達(dá)率可能與胃癌發(fā)生部位有關(guān)，食管胃交界部腺癌的陽性率較高。HER-2的靶向治療對(duì)胃癌患者具有重要意義，而對(duì)食管胃交界部腺癌的效果有待進(jìn)一步臨床研究去證實(shí)。

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