飼糧半胱氨酸水平對(duì)獺兔生產(chǎn)性能和SLC1A4基因表達(dá)的影響

曾 潔，張恩平，陳玉林，周英昊

(西北農(nóng)林科技大學(xué) 動(dòng)物科技學(xué)院，陜西 楊凌 712100)

飼糧半胱氨酸水平對(duì)獺兔生產(chǎn)性能和SLC1A4基因表達(dá)的影響

曾 潔，張恩平*，陳玉林，周英昊

(西北農(nóng)林科技大學(xué) 動(dòng)物科技學(xué)院，陜西 楊凌 712100)

試驗(yàn)旨在研究飼糧中半胱氨酸含量對(duì)獺兔生長(zhǎng)性能、毛皮品質(zhì)和SLC1A4基因表達(dá)的影響。選取90日齡健康獺兔144只，隨機(jī)分為4組(每組36個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)1只)。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧(半胱氨酸含量為0.25%)，試驗(yàn)組飼喂半胱氨酸含量分別為0.60%、0.70%和0.80%的試驗(yàn)飼糧(在基礎(chǔ)飼糧中分別添加0.35%、0.45%和0.55%半胱氨酸)。預(yù)飼期7 d，正飼期40 d。試驗(yàn)期間每隔10 d，每組隨機(jī)屠宰4只獺兔，取樣測(cè)定皮毛品質(zhì)和SLC1A4基因表達(dá)。結(jié)果表明：(1)飼糧半胱氨酸水平為0.70%的試驗(yàn)組末重和平均日增重顯著提高(P<0.05)；料重比顯著降低(P<0.05)；四個(gè)組間平均日采食量差異不顯著(P>0.05)。(2)飼糧半胱氨酸水平為0.60%和0.70%的試驗(yàn)組飼喂到130日齡時(shí)皮張面積顯著增大(P<0.05)；三個(gè)試驗(yàn)組獺兔在100日齡時(shí)被毛密度均顯著大于對(duì)照組(P<0.05)；半胱氨酸水平為0.70%的試驗(yàn)組被毛密度在130日齡時(shí)顯著大于其他三個(gè)組(P<0.05)；半胱氨酸對(duì)獺兔皮張厚度無顯著性影響(P>0.05)。(3)飼糧半胱氨酸含量對(duì)獺兔皮膚、肝臟和十二指腸組織中SLC1A4基因的表達(dá)量影響極顯著(P<0.01)。SLC1A4基因的表達(dá)量均呈現(xiàn)先增高后降低的趨勢(shì)，飼糧中半胱氨酸水平為0.70%的試驗(yàn)組達(dá)到最高值。這一趨勢(shì)在皮膚組織中、肝臟和十二指腸組織中分別于110日齡和100日齡時(shí)表現(xiàn)得較為顯著。由此可見，獺兔飼糧中半胱氨酸的最優(yōu)水平為0.70%，且在110日齡前使用效果最佳。

半胱氨酸；獺兔；生長(zhǎng)性能；毛皮品質(zhì)；SLC1A4基因

獺兔主要的產(chǎn)品是獺兔皮，它是毛皮工業(yè)中的優(yōu)質(zhì)制裘原料。含硫氨基酸對(duì)獺兔皮的生長(zhǎng)是至關(guān)重要的。有報(bào)道表明，在飼糧中添加半胱氨酸，對(duì)獺兔的生產(chǎn)性能和毛皮品質(zhì)有顯著的影響[1-2]，同時(shí)能促進(jìn)毛囊角蛋白的合成[2]。但半胱氨酸在動(dòng)物體中的轉(zhuǎn)運(yùn)、吸收機(jī)理仍有待進(jìn)一步從分子水平進(jìn)行闡明。

SLC1A4基因是一種氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)載體基因，它編碼Na+依賴性中性氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)載體蛋白ASCT1(Sodium-dependent neutral amino acid transporter type 1)。ASCT1和ASCT2(Sodium-dependent neutral amino acid transporter type 2)共同組成ASC型中性氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)載體家族(alanine-serine-cysteine)。它對(duì)pH不敏感，且在電中性條件下發(fā)揮作用，說明它與鈉離子反向協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)氨基酸[3]。ASC家族在機(jī)體內(nèi)分布廣泛，對(duì)小分子氨基酸親和力高，其特異性底物為丙氨酸(Ala)、絲氨酸(Ser)和半胱氨酸(Cys)。其中SLC1A4基因被發(fā)現(xiàn)在人體的所有組織中均有表達(dá)[4]。我們的前期研究表明，SLC1A4基因在獺兔的多個(gè)組織中表達(dá)，但半胱氨酸作為底物之一其水平是否影響SLC1A4基因表達(dá)量及其在各組織表達(dá)分布規(guī)律尚需進(jìn)一步探討。

本研究以飼糧半胱氨含量作為處理因素旨在探討半胱氨酸對(duì)獺兔生產(chǎn)性能和毛皮品質(zhì)的影響，并通過對(duì)氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)載體SLC1A4基因表達(dá)的研究從分子水平探究半胱氨酸在動(dòng)物體內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)與利用的作用機(jī)理。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

L-半胱氨酸：純度≥99.9%(武漢市好來利科技有限公司)。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物與試驗(yàn)設(shè)計(jì)

選取83日齡體質(zhì)量基本一致的健康法系白色獺兔144只，公母各占1/2。按性別配對(duì)隨機(jī)分為4組，每組36個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)1只，單籠飼養(yǎng)。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧(半胱氨酸含量為0.25%)，基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。三個(gè)試驗(yàn)組飼喂半胱氨酸含量分別為0.60%、0.70%和0.80%的試驗(yàn)飼糧(在基礎(chǔ)飼糧中分別添加0.35%、0.45%和0.55%半胱氨酸)。預(yù)飼期7 d，全部獺兔飼喂基礎(chǔ)飼糧。于90日齡開始試驗(yàn)，各組獺兔分別飼喂相應(yīng)的試驗(yàn)飼糧，試驗(yàn)期40 d，每天于7∶00和19∶00飼喂2次。于試驗(yàn)結(jié)束前6 d做代謝實(shí)驗(yàn)，測(cè)定基礎(chǔ)飼糧的代謝能。獺兔自由采食，自由飲水，采用常規(guī)飼養(yǎng)管理和免疫程序。每天觀察兔群精神狀況和糞便變化，發(fā)現(xiàn)異常及時(shí)記錄和處理。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of basal diets(air-dry basis)

注：①預(yù)混料為每千克飼糧提供：銅50 mg，鐵100 mg，鋅50 mg，錳30 mg,Se 0.05 mg，維生素A 12 000 IU，維生素D31 000 IU，維生素E 50 mg，維生素K 2 mg。②營(yíng)養(yǎng)水平為實(shí)測(cè)值。

Notes：①Premix provides the following per kg of diet: Cu 50 mg,Fe 100 mg,Zn 50 mg,Mn 30 mg,Se 0.05 mg,vitamin A 12 000 IU,vitamin D31 000 IU,vitamin E 50 mg,vitamin K 2 mg.②Nutritive levels are measured values.

1.3 樣品的采集與制備

于試驗(yàn)期的第0、10、20、30、40天(即90、100、110、120、130日齡)隨機(jī)選取對(duì)照組(0天只選對(duì)照組)和三個(gè)試驗(yàn)組各4只試驗(yàn)兔(公母各2只)屠宰。剝皮，留待后續(xù)測(cè)量。剝下毛皮后立即解剖，采集皮膚、肝臟和十二指腸相對(duì)固定位置的組織，液氮澆凍后于-80 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.4 檢測(cè)指標(biāo)

1.4.1 生長(zhǎng)性能 飼養(yǎng)試驗(yàn)開始和結(jié)束時(shí)，分別稱量每只試驗(yàn)兔的體重，并統(tǒng)計(jì)試驗(yàn)期的飼喂量。計(jì)算每個(gè)組的末重、平均日增重、平均日采食量和料重比。

1.4.2 毛皮品質(zhì) 分別對(duì)第0、10、20、30、40天屠宰試驗(yàn)兔的毛皮進(jìn)行測(cè)量，包括以下幾項(xiàng)指標(biāo)[5]：皮張剝下后展開，量取頸中到尾根垂直長(zhǎng)度、背中線至皮板兩側(cè)邊緣各二分之一長(zhǎng)度，多次測(cè)量取平均值為皮長(zhǎng)；測(cè)量肩下、腰、臀部寬度，多次測(cè)量取平均值為皮寬；以皮長(zhǎng)×皮寬計(jì)算皮張面積。在肩、背、臀部取樣用游標(biāo)卡尺多次測(cè)量皮膚厚度，取平均值為皮張厚度。被毛密度用稱重法測(cè)量，取背部中點(diǎn)1 cm2的毛樣，用十萬分度的分析天平稱重，再準(zhǔn)確數(shù)出1 000根稱重，用代數(shù)方法求出總根數(shù)，計(jì)算被毛密度。

1.4.3 獺兔皮膚、肝臟和十二指腸組織中SLC1A4基因表達(dá)的測(cè)定

1.4.3.1 主要試劑和儀器 超純RNA提取試劑盒(康為世紀(jì)公司)、 2×Taq MasterMix(康為世紀(jì)公司)、DL2,000 DNA Marker(TaKaRa公司)、瓊脂糖、PrimeScriptTMRT reagent Kit(TaKaRa公司)和SYBR?Premix Ex TaqTMⅡ熒光染料(TaKaRa 公司)。

高通量組織研磨儀(寧波新芝公司SCIENTZ-48)、PCR儀(Bio-Rad C1000)、熒光定量PCR儀(Bio-Rad IQ5)。

1.4.3.2 引物設(shè)計(jì) 選用持家基因甘油醛-3-磷酸脫氫酶(glycereldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)作為內(nèi)參。分別在GenBank和Ensembl中檢索得到家兔GAPDH 和SLC1A4的相關(guān)序列。用Primier5.0軟件設(shè)計(jì)引物，由金斯瑞生物科技有限公司合成(表2)。

表2 SLC1A4和GAPDH實(shí)時(shí)定量引物序列Table 2 SLC1A4 and GAPDH primer sequences for real-time PCR

1.4.3.3 RNA抽提和熒光實(shí)時(shí)定量PCR 將試驗(yàn)期第0、10、20、30、40天采集的各組皮膚、肝臟和十二指腸組織研磨粉碎，按康為世紀(jì)公司超純RNA提取試劑盒的說明提取總RNA。檢測(cè)可用后，取500 ng總RNA用PrimeScriptTMRT reagent Kit(TaKaRa公司)進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄，得到相應(yīng)的cDNA。采用TaKaRa公司的SYBR?Premix Ex TaqTMⅡ熒光染料進(jìn)行熒光實(shí)時(shí)定量檢測(cè)。反應(yīng)體系為20 μL：上下游引物(5 mmol/μL)各0.8 μL、反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物2 μL、2×SYBR?Premix Ex TaqTMⅡ10 μL、滅菌水6.4 μL。充分混勻，短暫離心后，用Bio-Rad 公司的IQ5實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)。反應(yīng)條件為：50 ℃，120 s；預(yù)變性95 ℃，10 min；變性95 ℃，15 s；退火60 ℃，60 s；延伸60 ℃，60 s；40個(gè)循環(huán)。利用相對(duì)定量的方法分析，即以內(nèi)參GAPDH基因的表達(dá)量對(duì)各檢測(cè)基因的表達(dá)作修正，并用對(duì)照組的樣本作為參照樣本。根據(jù)公式2-ΔΔCt進(jìn)行計(jì)算，制作出相對(duì)定量的圖表。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

試驗(yàn)數(shù)據(jù)用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(mean±SD)表示。經(jīng)Excel初步處理后用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件分析數(shù)據(jù)。用單因子方差分析(one-way ANOVA)進(jìn)行顯著性差異的檢測(cè)，P<0.05表示差異顯著，P<0.01表示差異極顯著。采用最小顯著差數(shù)法(LSD)進(jìn)行多重比較檢驗(yàn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼糧半胱氨酸水平對(duì)獺兔生長(zhǎng)性能的影響

由表3可知，飼喂不同半胱氨酸水平的飼糧，對(duì)獺兔生長(zhǎng)性能有影響。0.70%半胱氨酸組末重最大，且顯著高于0.60%組、0.80%組和對(duì)照組(P<0.05)。其他三組間均無顯著性差異(P>0.05)；0.70%組的平均日增重達(dá)到最高值(18.25±2.95)g，顯著高于對(duì)照組和0.60%組(P<0.05)，與0.80%組相比無顯著性差異(P>0.05)。在料重比指標(biāo)上，0.70%組顯著低于對(duì)照組和0.60%組(P<0.05)，與0.80%組差異不顯著(P>0.05)。半胱氨酸水平對(duì)平均日采食量無顯著影響(P>0.05)。

表3 飼糧半胱氨酸水平對(duì)獺兔生長(zhǎng)性能的影響Table 3 Effect of dietary cysteine level on growth performance of Rex Rabbit(n=16)

注：同行數(shù)據(jù)無字母或肩標(biāo)相同字母表示差異不顯著(P>0.05)，不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)。下表同。

Notes：In the same row,values without superscnipts or with the same letter superscripts mean insignificant difference(P>0.05),while those with different lowercase superscripts mean significant difference(P<0.05).The same as below.

2.2 飼糧半胱氨酸水平對(duì)獺兔毛皮品質(zhì)的影響

飼糧半胱氨酸水平對(duì)獺兔皮張面積、皮張厚度和皮毛厚度的影響分別見表4、5、6。由表4、5、6可知，飼糧半胱氨酸水平對(duì)100日齡、110日齡和120日齡獺兔皮張面積無顯著影響(P>0.05)，但在130日齡時(shí)，0.60%和0.70%組的皮張面積顯著大于對(duì)照組(P<0.05)，和0.80 %組差異不顯著(P>0.05)，且0.70%組皮張面積最大。半胱氨酸水平對(duì)100日齡、110日齡、120日齡和130日齡獺兔的皮張厚度均無顯著性影響(P>0.05)。飼糧半胱氨酸水平對(duì)100日齡和130日齡獺兔被毛密度有影響。在100日齡時(shí)，0.70%組被毛密度最大，對(duì)照組獺兔被毛密度最小，對(duì)照組與三個(gè)試驗(yàn)組相比差異顯著(P<0.05)。在130日齡時(shí)，0.60%和0.70%組的被毛密度顯著大于其他兩個(gè)組(P<0.05)，同樣0.70%組被毛密度最大。

表4 飼糧半胱氨酸水平對(duì)獺兔皮張面積的影響Table 4 Effect of dietary cysteine level on area of fresh pelt of Rex Rabbit(n=4)

注：-表示未檢測(cè)。下同。

Notes：- means undetected.The same as below.

表5 飼糧半胱氨酸水平對(duì)獺兔皮張厚度的影響Table 5 Effect of dietary cysteine level on thickness of fresh pelt of Rex Rabbit(n=4)

表6 飼糧半胱氨酸水平對(duì)獺兔被毛密度的影響Table 6 Effect of dietary cysteine level on hair density of Rex Rabbit(n=4)

2.3 飼糧半胱氨酸水平對(duì)獺兔SLC1A4基因表達(dá)的影響

由圖3-1可知，飼糧半胱氨酸水平對(duì)100日齡、110日齡、120日齡和130日齡獺兔皮膚、十二指腸和肝臟組織中SLC1A4基因的表達(dá)影響極顯著(P<0.01)。皮膚組織中SLC1A4基因的表達(dá)量在0.70%組110日齡時(shí)達(dá)到最高值。在肝臟和十二指腸組織中，隨著飼糧半胱氨酸水平的增高SLC1A4基因的表達(dá)量呈現(xiàn)先增高后降低的趨勢(shì)，0.70%組達(dá)到最高值，并且這一趨勢(shì)在100日齡時(shí)表現(xiàn)得較為顯著。

3 討 論

3.1 飼糧半胱氨酸水平對(duì)獺兔生長(zhǎng)性能的影響

有研究表明，飼糧中蛋氨酸添加水平為0.4%時(shí)能極大地提高獺兔的生長(zhǎng)性能[6]，蛋氨酸也能促進(jìn)新西蘭肉兔幼兔階段的生長(zhǎng)發(fā)育[7]。而等量的半胱氨酸能完全替代蛋氨酸的作用，添加到飼糧中促進(jìn)獺兔的生長(zhǎng)[8]，且在維持基礎(chǔ)營(yíng)養(yǎng)的前提下，其添加水平以0.25%為最佳。曹寶紅等[1]的報(bào)道也表明添加0.20%的半胱氨酸能顯著地促進(jìn)獺兔的生長(zhǎng)發(fā)育。在本試驗(yàn)中，隨著飼糧中半胱氨酸水平的增加，各組試驗(yàn)兔的平均日增重和末重呈現(xiàn)先增高后降低的趨勢(shì)，在半胱氨酸為0.70%時(shí)達(dá)到了最高值；料重比先降低后升高，在0.70%時(shí)為最低值；均表明了飼糧半胱氨酸含量0.70%為最佳水平。這與之前的研究結(jié)果有所不同，但與常馨月等[2]的研究結(jié)果相同，這可能與獺兔的日齡以及基礎(chǔ)飼糧中半胱氨酸及其他相關(guān)氨基酸含量不同等因素有關(guān)。

圖1 飼糧半胱氨酸水平及處理時(shí)間對(duì)獺兔皮膚、肝臟和十二指腸中SLC1A4基因相對(duì)表達(dá)的影響Fig.1 Effect of dietary cysteine level and days of age on SLC1A4 gene relative expression in skin，liver and duodenum of Rex Rabbit

注：數(shù)據(jù)柱形標(biāo)注不同大寫字母表示差異極顯著(P<0.01)。

Nots：Different capital letters above the columns mean extreme difference(P<0.01).

3.2 飼糧半胱氨酸水平對(duì)獺兔毛皮品質(zhì)的影響

毛纖維是由20多種氨基酸形成的復(fù)雜角化蛋白，其中含硫氨基酸約占了總氨基酸含量的15%～17%。半胱氨酸是一種重要的含硫氨基酸，有研究表明，在基礎(chǔ)飼糧中添加半胱氨酸對(duì)獺兔被毛發(fā)育具有促進(jìn)作用，并且生長(zhǎng)獺兔的日增重與被毛密度的增加呈正相關(guān)關(guān)系[1]。白云峰等[9]也證明獺兔體重增長(zhǎng)和被毛密度增加的趨勢(shì)相似。常馨月等[2]的試驗(yàn)中，在添加0.45%半胱氨酸的處理下，不僅使獺兔皮張面積、被毛密度和體質(zhì)量顯著增加，而且在處理的第20天極大地促進(jìn)了毛囊角蛋白的合成。這與本試驗(yàn)的研究相一致。但皮張厚度沒有顯著差異，皮張面積和被毛密度也沒有在各組間得到顯著的差異性，這也許是因?yàn)閮H提高半胱氨酸水平還不能使獺兔毛皮的表觀品質(zhì)得到顯著的提高[8]。

3.3 飼糧半胱氨酸水平對(duì)獺兔SLC1A4基因表達(dá)的影響

皮膚是氨基酸被吸收轉(zhuǎn)化后沉積的組織。毛纖維是皮膚組織的一種衍生物，而角蛋白相關(guān)蛋白(KAP)是組成毛纖維角蛋白的一類蛋白，其中半胱氨酸的含量為12%～41%[10]。Powell和Rogers假設(shè)KAP4家族是對(duì)綿羊半胱氨酸系統(tǒng)性變化有反應(yīng)的唯一角蛋白家族[10]，并由Fratini等[11]證明了毛囊皮質(zhì)層KAP4和KAP5超高硫角蛋白的合成會(huì)因飼糧中添加低水平半胱氨酸而增加，同時(shí)不減少其他角蛋白的合成。常馨月等[2]的研究中也證明，飼糧中添加0.45%的半胱氨酸能極顯著地促進(jìn)KAP6.1基因的表達(dá)。在綿羊毛囊細(xì)胞中，攝取氨基酸相對(duì)速率的先后順序是半胱氨酸、亮氨酸、丙氨酸和賴氨酸[12]。因此這可能是因?yàn)榘腚装彼崮芸焖俚剡M(jìn)入毛囊細(xì)胞并極大地促進(jìn)毛纖維的合成。大部分半胱氨酸(約70%)吸收進(jìn)入毛囊是通過非Na+依賴性系統(tǒng)轉(zhuǎn)運(yùn)的，它不通過常規(guī)的半胱氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)A、ASC或L轉(zhuǎn)運(yùn)[12]。但本試驗(yàn)研究結(jié)果表明，SLC1A4基因編碼的ASC型中性氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)載體ASCT1-mRNA的表達(dá)量在飼喂0.70%半胱氨酸飼糧的試驗(yàn)兔皮膚組織中顯著增高。因此，添加半胱氨酸可提高獺兔皮膚組織中SLC1A4基因表達(dá)量的機(jī)理仍需進(jìn)一步探討。

ASCT1作為一種電中性轉(zhuǎn)運(yùn)載體，可以介導(dǎo)小流量的氨基酸，它能夠平衡不同的中性氨基酸池，并提供一種連接氨基酸濃度梯度的機(jī)制[13]。研究表明，在半胱氨酸缺乏的培養(yǎng)條件下，人體肝癌細(xì)胞通過激活真核起始因子2α激酶，調(diào)停整合應(yīng)激反應(yīng)，抑制蛋白的合成，其中表達(dá)量隨之增加的就有SLC1A4基因[14]。肝臟是動(dòng)物體合成蛋白質(zhì)的主要場(chǎng)所，十二指腸是吸收蛋白質(zhì)和氨基酸的主要部位。而本試驗(yàn)中，在滿足獺兔基本營(yíng)養(yǎng)需求的前提下增加飼糧半胱氨酸含量，同樣能使十二指腸和肝臟組織中SLC1A4基因的表達(dá)量顯著增加，甚至在十二指腸中高表達(dá)。這說明半胱氨酸能促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收與合成。也在一定程度上證明了SLC1A4基因?qū)Π腚装彼崦舾?，無論缺失還是富足都能改變其表達(dá)量。

研究證明，飼糧中添加0.45%的半胱氨酸能極顯著地提高110日齡獺兔皮膚組織中KAP6.1基因的表達(dá)量[2]。這與本試驗(yàn)中的結(jié)果有一定的相似之處，說明基因的表達(dá)在動(dòng)物體生長(zhǎng)發(fā)育的某一時(shí)期會(huì)對(duì)日齡和飼糧等因素敏感從而發(fā)生變化。

4 結(jié) 論

本試驗(yàn)中，飼糧半胱氨酸含量為0.70%能有效促進(jìn)90～130日齡獺兔的生長(zhǎng)發(fā)育，提高毛皮的品質(zhì)，且顯著提高SLC1A4基因在獺兔皮膚、肝臟和十二指腸組織中的表達(dá)量，110日齡和100日齡時(shí)表現(xiàn)得更為明顯。因此，獺兔飼糧中半胱氨酸的最佳水平為0.70%，以110日齡前使用為宜。

[1]曹寶紅,常馨月,張恩平,等.日糧中添加半胱氨酸對(duì)2～4月齡獺兔生長(zhǎng)性能、氮代謝和血清生化指標(biāo)的影響[J].家畜生態(tài)學(xué)報(bào),2012,33(4):33-37.

[2]常馨月,張恩平,陳玉林,等.飼糧半胱氨酸水平對(duì)獺兔生產(chǎn)性能、氮代謝、毛皮品質(zhì)及KAP6.1基因時(shí)序表達(dá)的影響[J].中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào),2013,33(5):764-769.

[3]Christensen H N,Liang M,Archer E G.A distinct Na+-requiring transport system for alanine,serine,cysteine,and similar amino acids[J].Journal of Biological Chemistry,1967,242(22): 5 237-5 246.

[4]Arriza J L,Kavanaugh M P,Fairman W A,et al.Cloning and expression of a human neutral amino acid transporter with structural similarity to the glutamate transporter gene family[J].Journal of Biological Chemistry,1993,268(21): 15 329-15 332.

[5]谷子林.現(xiàn)代獺兔生產(chǎn)[M].石家莊：河北科學(xué)技術(shù)出版社,2002.

[6]秦應(yīng)和,李福昌,麻明文.蛋氨酸對(duì)生長(zhǎng)獺兔生產(chǎn)性能及生化指標(biāo)的影響[J].飼料研究,2010(12):44-46.

[7]周勤飛,肖文川,王永才.飼糧蛋氨酸水平對(duì)新西蘭肉兔生長(zhǎng)性能和毛皮品質(zhì)的影響[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),2011,23(1):73-77.

[8]傅祥超,文 斌,汪 平,等.含硫氨基酸對(duì)獺兔生產(chǎn)及被毛發(fā)育的影響[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),2013,25(4):761-767.

[9]白云峰,谷子林,霍貴成.日糧蛋白水平對(duì)獺兔泌乳、增重及被毛密度的影響[J].中國(guó)畜牧雜志,2004,40(5):23-25.

[10]Powell B C,Rogers G E.The role of keratin proteins and their genes in the growth,structure and properties of hair[M]∥Jolles p,Zahn z.Formation and structure of human hair.Springer Basel,2011.

[11]Fratine A,Powell B B,Hynd P,et al.Dietary Cysteine Regulates the Levels of mRNAs Encoding a Family of Cysteine-Rich Proteins of Wool[J].The Journal of Investigative Dermatology,1994,102(2):178-185.

[12]Fratini A,Powell B C,Hynd P I,et al.Dietary cysteine regulates the levels of mRNAs encoding a family of cysteine-rich proteins of wool[J].Journal of Investigative Dermatology,1994,102(2).

[13]Zerangue N,Kavanaugh M P.ASCT-1 is a neutral amino acid exchanger with chloride channel activity[J].Journal of Biological Chemistry,1996,271(45): 27 991-27 994.

[14]Lee J I,Dominy J E,Sikalidis A K,et al.HepG2/C3A cells respond to cysteine deprivation by induction of the amino acid deprivation/integrated stress response pathway[J].Physiological Genomics,2008,33(2): 218-229.

《家畜生態(tài)學(xué)報(bào)》連續(xù)入選RCCSE中國(guó)核心學(xué)術(shù)期刊(A)

武漢大學(xué)中國(guó)科學(xué)評(píng)價(jià)研究中心(Research Center for Chinese Science Evaluation，RCCSE)2014年中國(guó)學(xué)術(shù)期刊評(píng)價(jià)報(bào)告業(yè)已公布，《家畜生態(tài)學(xué)報(bào)》繼續(xù)入選RCCSE中國(guó)核心學(xué)術(shù)期刊(A)。

武漢大學(xué)中國(guó)科學(xué)評(píng)價(jià)研究中心是一個(gè)文理交叉的跨學(xué)科的學(xué)術(shù)機(jī)構(gòu)，是我國(guó)高等院校中第一個(gè)綜合性的科學(xué)評(píng)價(jià)研究中心，是集科學(xué)研究、人才培養(yǎng)和評(píng)價(jià)咨詢服務(wù)為一體的多功能的中介性實(shí)體機(jī)構(gòu)。中心學(xué)術(shù)期刊評(píng)價(jià)主要采用定性與定量相結(jié)合的綜合集成方法，通過信息計(jì)量(包括文獻(xiàn)計(jì)量、科學(xué)計(jì)量等)等多種途徑進(jìn)行綜合性的定量研究和評(píng)價(jià)，并用層次分析法確定權(quán)重，建立指數(shù)模型，由此而得到的期刊綜合指數(shù)及其排序。

由中國(guó)科教評(píng)價(jià)網(wǎng)和中國(guó)科學(xué)評(píng)價(jià)研究中心共同推出的第三屆中國(guó)學(xué)術(shù)期刊評(píng)價(jià)排行榜中，共評(píng)選出權(quán)威期刊(A+)312種，核心期刊(A)961種，擴(kuò)展核心期刊(A-)653種，準(zhǔn)核心期刊(B+)1291種，一般期刊(B)1903種，較差期刊(C)1280種。評(píng)價(jià)期刊總數(shù)達(dá)到6400種?！都倚笊鷳B(tài)學(xué)報(bào)》在2013～2014年畜牧、獸醫(yī)科學(xué)學(xué)術(shù)期刊中位列第16位。

EffectofDietaryCysteineSupplementLevelsonProductionPerformanceandtheExpressionofSLC1A4GenemRNAofRexRabbit

ZENG Jie,ZHANG En-ping*,CHEN Yu-lin*,ZHOU Ying-hao

(CollegeofAnimalScienceandTechnology,NorthwestA&FUniversity,Yangling,Shaanxi712100,China)

To investigate the effect of dietary cysteine supplement levels on growth performance,fur quality and the expression ofSLC1A4 gene mRNA of Rex Rabbit，144 healthy 90-day-old Rex Rabbits were divided randomly into four groups with 36 replicates in each group.And each replicate contained one rabbit.The control group was fed with basal diet of 0.25% cysteine and the three experimental groups with the diets of 0.60%,0.70% and 0.80% cysteine(the diets adding 0.35%,0.45% and 0.55% cysteine to basal diet),respectively.The experiment included a pretrial period of 7 days and an experimental period of 40 days.The results showed that:(1) The final weight and average daily gain increased significantly in the group with the diet of 0.70% cysteine(P<0.05).Feed conversion ratio in this group decreased significantly(P<0.05).Average daily feed intake had no significant difference in all groups(P>0.05).(2) At the age of 130-day-old,the skin area of rabbits in the groups with the diets of 0.60% and 0.70% cysteine were significantly larger than that in other groups(P<0.05).Cysteine increased the hair density of at 100-year-old within the three experiment groups.And the hair density of Rex Rabbits with diet of 0.70% cysteine at 130-year-old was much greater than that inother groups(P<0.05).There were no significant differences in the skin thickness between four groups(P>0.05).(3) The contents of cysteine in diets resulted in the extraordinarily significant changes of the expression ofSLC1A4 gene in the skin,liver and duodenum tissues(P<0.01).The expression increased to the highest values in the groups with diet of 0.70% cysteine initially and decreased afterwards.This status in the skin tissue appeared in 110-day-old rabbits and became significant in the liver and duodenum tissues of Rex Rabbit at the age of 100 days.These results indicate that the most appropriate cysteine level in diet is 0.70%,and feeding with diet adding cysteine gets the optimum efficiency before 110 days old.

Cysteine;Rex Rabbit;growth performance;fur quality;SLC1A4 gene

2014-05-04，

2014-05-15

現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(xiàng)資金資助(CARS-40-13)；陜西省科技攻關(guān)項(xiàng)目(2007K01-02-03)

曾 潔(1989-)，女，貴州黔西人，碩士研究生，研究方向：動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)原理與調(diào)控。E-mail: qxzjkk@163.com

*[通訊作者]張恩平(1966-)，男，陜西武功人，博士，副教授，碩士生導(dǎo)師，研究方向：動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)原理與方法。E-mail: zep126@126.com

S811.6

A

1005-5228(2014)10-0023-07