小刺猴頭菌子實體多糖對不同糖尿病模型動物血糖的影響

唐煒 王英軍 孫英蓮

·實驗研究·

小刺猴頭菌子實體多糖對不同糖尿病模型動物血糖的影響

唐煒 王英軍 孫英蓮

目的 研究小刺猴頭菌多糖對不同實驗性高血糖模型小鼠的影響。方法 降血糖實驗采用四氧嘧啶、腎上腺素及鏈脲佐菌素等糖尿病模型, 灌胃給予小刺猴頭菌多糖, 觀察不同給藥時間動物的血糖、胰島素等指標(biāo)。結(jié)果 小刺猴頭菌子實體多糖可降低四氧嘧啶模型小鼠的高血糖, 能夠?qū)鼓I上腺素的升血糖作用。結(jié)論 小刺猴頭菌子實體多糖具有降血糖作用。

小刺猴頭菌多糖；四氧嘧啶；腎上腺素；鏈脲佐菌素；降血糖作用

猴頭菌(hericium erinaceus)是一種名貴的食用和藥用真菌, 具有利五臟、助消化、滋補(bǔ)和抗癌功效, 主要用于治療消化不良、胃潰瘍、胃癌、十二指腸癌、賁門癌等消化系統(tǒng)的疾病和腫瘤。其子實體和菌絲體均含有活性多糖。文獻(xiàn)報道, 猴頭菌多糖具有增強(qiáng)免疫功能、抑制腫瘤、降血糖、延緩衰老等作用［1］。為了系統(tǒng)地研究猴頭菌多糖的生物活性, 作者對猴頭菌子實體多糖進(jìn)行了降糖藥理活性研究, 為猴頭菌多糖的合理應(yīng)用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實驗動物 Wistar大鼠, 體重180~200 g, 吉林大學(xué)實驗動物中心提供, 合格證號：SCXK-(吉)2008-0005；KM小鼠, 體重18~22 g, 長春生物制品研究所有限責(zé)任公司, 合格證號：SCXK-(吉)2011-0003。

1.1.2 藥品與試劑 鏈脲佐菌素(美國Sigma公司,批號：S0130)；四氧嘧啶(美國Sigma公司, 批號：87H6738)；胰島素試劑盒(RD公司,批號：20120701A)；鹽酸腎上腺素注射液(天津天耀氨基酸有限公司, 批號：1201311)。

1.1.3 儀器 Ⅱ型GLUCOTREND血糖儀(ROCHE公司)。

1.2 方法

1.2.1 對四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖水平的影響 60只小鼠禁食不禁水16 h, 腹腔注射四氧嘧啶200 mg/kg, 造模5 d后小鼠尾尖采血, 于Ⅱ型GLUCOTREND血糖儀上測量血糖值,選血糖值在11.1~25.0 mmol/L范圍的小鼠隨機(jī)分組, 各組間血糖值差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05), 其中一組為對照組, 二、三、四組為小刺猴頭菌多糖500、250、125 mg/kg組,連續(xù)給藥10 d, 對照組給予同體積蒸餾水, 末次藥前禁食12 h后取血測空腹血糖值。

1.2.2 腎上腺素誘導(dǎo)高血糖小鼠血糖水平的影響 取40只小鼠隨機(jī)分為對照組, 小刺猴頭菌多糖500、250、125 mg/ kg組, 連續(xù)給藥10 d, 對照組給予同體積蒸餾水, 末次給藥前禁食12 h, 給藥后2 h于Ⅱ型GLUCOTREND血糖儀上測血糖, 隨即腹腔注射腎上腺素0.5 mg/kg, 30 min后測血糖。

1.2.3 對鏈脲佐菌素誘導(dǎo)高血糖大鼠胰島素的影響［2］60只大鼠, 禁食12 h, 眼球眶靜脈取血測空腹血糖, 以3.6~5.4 mmol/L為血糖正常大鼠, 禁食24 h后, 靜脈注射新鮮配制的STZ 10 g/L, 50 mg/kg,對照組注射同劑量的0.1 mmol/ L檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液, 72 h后測空腹血糖, 以血糖＞11.1 mmol/L為成模標(biāo)準(zhǔn), 選擇模型成功大鼠40只, 隨機(jī)分為模型組、小刺猴頭菌多糖500、250、125 mg/kg組,各組按10 L/kg灌胃給藥, 另選未造模大鼠10只作為正常對照組, 對照組和模型組給予同體積蒸餾水, 連續(xù)20 d,實驗前禁食12 h, 末次藥后1 h, 麻醉動物, 腹主動脈取血, 按照試劑盒說明測定血清中胰島素(INS)含量。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS18.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析。計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示, 采用t檢驗。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 對四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖水平的影響 四氧嘧啶是胰島B細(xì)胞毒劑, 通過產(chǎn)生超氧自由基破壞胰島B細(xì)胞,使B細(xì)胞合成前胰島素減少, 導(dǎo)致胰島素缺乏。小刺猴頭菌多糖明顯降低四氧嘧啶模型小鼠的高血糖, 差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)果見表1。

表1 對四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖水平的影響( x-±s)

2.2 腎上腺素誘導(dǎo)高血糖小鼠血糖水平的影響 腎上腺素是升血糖激素, 其作用機(jī)制是與肝和肌細(xì)胞膜的β受體結(jié)合, 通過G蛋白激活腺苷酸環(huán)化酶-Camp-蛋白激酶系統(tǒng),激活磷酸化酶, 抑制糖原和酶, 從而加速糖原分解, 抑制糖原合成。小刺猴頭菌多糖能夠降低腎上腺素模型小鼠的高血糖, 提示小刺猴頭菌多糖能夠?qū)鼓I上腺素的升血糖作用。結(jié)果見表2。

表2 對腎上腺素誘導(dǎo)糖尿病小鼠血糖水平的影響( x-±s)

2.3 對鏈脲佐菌素誘導(dǎo)高血糖大鼠胰島素的影響 與對照組比較, 模型組血清INS水平顯著降低, 與模型組比較,小刺猴頭菌多糖組血清INS水平有一定的升高。結(jié)果見表3。

表3 對鏈脲佐菌素誘導(dǎo)高血糖大鼠胰島素的影響

表3 對鏈脲佐菌素誘導(dǎo)高血糖大鼠胰島素的影響

注：模型組與對照組比較,aP＜0.05

對照組1020.13±2.75模型組1016.26±3.59a小刺猴頭菌多糖5001018.25±2.41 2501018.62±3.33 1251017.03±1.96

3 討論

糖尿病是由于INS的分泌絕對不足或是由于某些抗INS作用的因素影響其生理作用而導(dǎo)致的一種內(nèi)分泌代謝性疾病。本試驗中從胰島B細(xì)胞毒劑、升血糖激素等途徑探討小刺猴頭菌多糖降血糖的作用［3］。研究結(jié)果顯示小刺猴頭菌多糖能夠改善INS水平, 降低四氧嘧啶小鼠高血糖, 對抗腎上腺素引起的高血糖, 提示小刺猴頭菌多糖具有改善糖代謝, 改善胰島B細(xì)胞功能的作用, 關(guān)于小刺猴頭菌多糖降糖作用具體是通過何種途徑發(fā)生的, 有待今后進(jìn)一步研究。

［1］ 杜志強(qiáng).猴頭菌絲多糖降血糖作用的研究.生物技術(shù), 2006, 16(6):40-41.

［2］ 朱紅艷.南瓜多糖對鏈脲菌素誘導(dǎo)的大鼠胰島損傷的保護(hù)作用.中國醫(yī)院藥學(xué)雜志, 2007, 27(12):1647-1649.

［3］ Kstsumata K, Katsumata Y, Qzawa T, et al.Potentiating effect of combined usage of three sulfonylurea drugs

吉林省衛(wèi)生廳課題(項目編號：2011Ec004)

130021 吉林省中醫(yī)藥科學(xué)院

王英軍